全 文 ：6 年生为好。 衰5 不周牟生巴段天盆株的比较
( 高要县活道区观音岌 )
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比公)一卜,欠替一J伪了奋李ó !橱(c一0,...1…l…` l.we.小 结巴戟天植地生态环境条件的选择和配置 ,直接影响巴戟天前期的成活率和生长速度 , 要
根据各不同生长阶段提供所需要的生态条件 。
1
. 前期应配置 5 0一 0G % 荫蔽度 , 中期在
3 0~ 一 4 0% , 后期20 %左右较为适合巴戟天的生
长要求 , 利于提高巴戟天的光合作用 , 促进根
系生长 , 前荫后阳的种植方法已为药农普遍采
用 。 可种植木薯 、 大叶油茶 、 玉桂 、 搞树等作
荫蔽物 , 或间种山毛豆 、 日本著等绿肥 , 也可
采取开天窗小块种植 。
2
. 配置荫蔽物可降低植地的地表温度 3一
{8 ℃ , 空气相对湿度提高 3%左右 , 形成良好的
{田伺小气候 。
3
. 有荫蔽物 的 巴 戟 天 土 城含 水 量 达
i’2 2 . 6一 2 4 . 2 % , 而旷地种植 巴戟天的土壤含水
量只有 1 7~ 2 0% 。
广东巴戟天大部分种植地的土撰多属酸性
生长
年限
根鲜
(克 /
重
株
根 数
条 /株 )
根长
( Cm )
但直
气C n】
八`Jqt厂.,土11,1nO从工」
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J任Oé月OJ哑丹了n。,`,d咋`介6.一几勺
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月土,曰八OJ任眨口几O
注 . 根长是最长根平均值 , 根直径是最粗根直 径 平均 数
土 , 其 p H范围为 4 . 3~ 5 . 5 ,且种植年限越长 ,
p H 值 越低 , 不同土层土壤的 p H值变化是 自下
而上降低 , 越近表土 p H值越低 , 加施石灰 、 草
木灰提高土壤 p H值 , 有减轻和防止巴戟天茎基
腐病蔓延的作用 。
选择巴戟天植地时 , 以砂质粘壤土较砂质
粘土好 , 前者土壤疏松 , 有机质含量较高 , 生
长快 , 根系发达 , 产量高 , 后者土 质粘性 , 易
板结 , 瘦清 , 巴戟天生长不好 。
滇紫草愈伤组织的诱导培养及
优 良无 性 系 的选 择
中国医科院药物研 究所 朱蔚华 类红 霞 胡 秋 未惠钦
摘 要 从滇紫草的根和幼嫩茎叶部分 , 诱导发生愈伤组织 , 经继代培养和试验比较 , 选择 出 优
良无性系。
紫草为常用中药 , 因其根呈紫色故名。 一 根
作药用 。 紫草素为紫草植物的主要成分 , 用以
治疗烧伤 、 皮炎 、 静脉炎 , 并具抗某些微生物
和抗肿瘤等作用。 此外 , 紫草素还可以作贵重
的染料和化妆品 。 中药紫草的原植物主要有硬
紫草 、 软紫草 ,而滇紫草和蒙紫草亦作药用『’ 1。
1 9 8 5年 以来 , 我们搜集了上述四种紫草植物材
料 , 开展了它们的愈伤组织诱导与培养的试验
研究 。 现将滇紫草愈伤组织的诱导培养及优良
无性系的选择工作 , 报道如下 。
, 6
·
材 料 和 方 法
滇紫草 ( On o s m a , n i c u场 t a B u r . e t F r . )
采自昆明市郊西山 。 选健壮无病虫害的幼芽 、
嫩叶和根部 , 洗刷干净 , 根部在洗 前 刮 去 外
皮 , 粗根可将韧皮部与木质部剥 离 , 分 别 洗
净 。 洗净的材料用 。 . 1%升汞浸溃消毒 10 ~ 12
分钟 , 截成 0 . 5~ 1 . oc m 的小段 , 用灭菌水 漂
洗 3 ~ 4 次 , 接种到含 2 , 4一 或 I A A ( 均为
l m g l/ )的 w hi et 培养基上 , 于 23 土 1 ℃下暗培
币药材第 13看第 1孤飞马 。 。 年 l 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1990. 01. 002
养。 愈伤组织在含 IA A I吨 /l 的琼脂培 养基
上继代培养 , 每 3 0天左右转移一次 。 在绒代培
养过程中 , 进行无性系的选择比较 和实 验 观
察 。
培养物中紫草色素的测定 : 将干燥的培养
物碾碎 , 称量 , 加入培养物 体 积 3 ~ 4 倍 的
9 5% 乙醇 , 进行脱色至近于无色 。 随后浓缩并
回收乙醇 , 慢慢地加入浓缩 物 体 积 1 / 3~ 12/
衰1 不同激紊与外植体材料对愈伤
组叙发生的影晌
用使
量的 N a o H , 此时溶液 由原来的紫
蓝色 , 同时产生一些不溶于水的蜡
色转变成
物质 ,
一竺竺监翻蕊辫; 间 ( : )目:i.0…{…
布氏漏斗滤去 , 然后再加入过量的浓盐酸 ,
创气性,
溶液由蓝变深红 , 并产生大量沉淀 。 过滤得沉
淀物 , 并用蒸馏水清洗至 p H 接近中性为止 。
将沉淀物放置于 60 ℃左右的条件下干燥 , 即得
滇紫草总色素于样 , 备用 。 称 取 10 mg 于 sm l
试管中 ,加二氯甲烷至刻度 , 其浓度为 Zm g /m l 。
然后分 别 吸 取 0 . 1 0 , 0 . 1 2 , 0 . 1 4 , 0 . 2 6 和
。 . 18m g 的样品于 10 m l 容量瓶中 , 稀 释 至 刻
度 , 测定其 。 D 值 , 并计算出结果 。
结 果 与 讨 论
一 、 不伺外植体与激素对愈伤组织发生的
形晌
W五iet 培养基上诱导培养的愈伤组织发生
情况见表 1 。 在 2 , 4刁 培养基上愈伤组织的诱导家唬豆面手 _;人人曦荞基 , 根皮的愈伤组织
发生率高于木质部 。 其中以在 2 , 4刁 培养基上
根皮的愈伤组织发生率最高 , 达 8 1 . 5% 。 由此可
见 , 新鲜滇紫草根部诱导发生愈伤组织较易。
二 、 愈伤组组继代培养与优良无性系选择
(1 ) 愈伤组织 的生长速度 愈伤组织发生
后一个月左右 , 转移到新鲜培养基上进行继代
培养, 此后每 30 天转接 1 次 。 继代培养初期 ,
滇紫草愈伤组织生长缓慢 , 继代培养 6 个月的
愈伤组织增长情况列举于表 2 。
由表 2 可见 , 继代培养 6 个月 的 愈 伤 组
织 , 每月鲜重增长 仅 57 ~ 13 7% , 生长甚为缓
慢。 此外还可见到 , 不同无性系组织增重率不
一致 。
(2 ) 优 良无 性系的选择 从滇紫草根部材
料共诱导发生 35 个无性系愈伤组织 , 其中一 些
无性系组织 , 由于生长异常缓慢 , 且色素产生
很少 , 予以淘汰 。 对余下的生长较快 、 色素产
生较多的无性系组织 , 进行生长速度的观察和
比较试验 , 结果 ( 如表 3 ) 表明 , 在继代培养
7 个月 , 组织鲜重月增 1 倍以上的无性系共 6
个 , 其中以 D 一 3无性系组织生长最快 ,且 D 一 3 ,
D 一2 , I一6 等无性系组织的色素颜色较 深 。 因
此 , 进行优 良无性系的选择是必要和有益的 ,
(3 ) 不同培养基对组 织生长的影响 不同
培养基对植物组织培养物的生长具有不同的作
用已有很多报道 。 在滇紫草愈伤组织继代培养
半年后 , 观察了 I一 6和 D 一 2两个优 良无性泉组
织 , 在 w hi et 和 M v ( 改良M S ) 培养基上生
长的情况 , 结果 ( 见表 4 ) 表 明 , M V 比W h i t e
更适于滇紫草愈伤组织的生长 。
三 、 愈伤组纵中的色素产生
( 1) 激素对组织 中色素产生的影响 滇紫
裹 2 继代培养 6个月的愈伤组织生长倩况
无 性 系 接种组织鲜重( g /瓶 )
收获组织鲜重
( g /瓶 )
鲜组织增重率
( % )
说 明
:’ 飞 }
I一 1
D一 2
1
。
0
0
。
8 3
1
。
5 7
1
。
9 7
1 57
。
0
2 3 7
。
3
培养基为W h i et I A A
l m g八琼脂培养基
书袱丽潇落晒荻面丁了而耳了刀 . 7 .
衰3 无性系姐组生长速皮的比较
色素产生情 况 .
+ +
. +
子 +
+ + +
ù公几J九Ijù.ó月了Oō,占n仙IU口勺内O17320654
收获组织鲜 重
( g /瓶 )
3
一
5 0
3
。
3 3
4
。
0 0
2
。
7 0
4
一
0 0
4
。
00
4
。
8 8
7
。
5 0
5
。
00
4
。
80
3
一
40
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代d八”ù几甘曰ó血0QU介bnot才
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草根皮和木质部外植体在含 2 , 4一 琼脂 培 养
基上 , 均产生 白色愈伤组织 , 在此种培养基上
继代培养 3 个月后的愈伤组织 , 仍未见有紫红
色的紫草色素产生 。 但 在 含 I A A 琼脂培养基
上 , 根皮和木质部外植体多数先发生细根或同
时发生细根和愈伤组织 , 初时均为白色 , 不具
色素 。 但这些细根或带细根的愈 伤 组 织 , 在
I A A 琼脂培养基上继代培养不久 , 则小 根 的
先端首先产生紫红色色素 , 以后逐 渐 增 多 加
深 , 培养 2 一 3 代 以后 , 也在组织块上局 部 产
生一些带紫红色色素细胞 , 呈斑块镶嵌分布 ,
在接触培养基的部位较多 , 色素较深 。 随着培
养时间的延长 , 色素纽胞块增大 , 如将色素组
织部分分开转接到新鲜含 I A A 培养基上 , . 即
可长成全部为色素细胞培养物 。 在 2 , 4一D 琼脂
培养基上诱导发生的白色愈伤组 织 , 转 接 到
I一 2
I一 4
I一 5
I一 6
I一 8
I一 2 5
D 一 2
D 一 3
D 一 4
D 一 g
. + 表示少数色素细胞产生 , + + 表示多处成小块色素细 可
胞产生 , + + 表示多处大块色素细胞产生或色素细胞连片
表4 不同培养共对愈伤组织生长的影晌
无 性 系 培 养 基 接种组织干重( g /瓶 )
收获组织干重卜
、 ` ( g /瓶 )
千重增加
( g /瓶 )
相对增重
( % )
说 明
W h i t e
M V
W h主t e
。一 1
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I A A 琼脂培养基上 , 则厂J样会产生色 素 。 相
反 , 如将生长在 I A A 培养基上的 色 素 组 织
块 , . 转接到 2 , 4一 培养基上培养 , 则色素 组
织块上的色素颜色逐渐变浅乃至全部消褪 。 由
此可见 , 2 , 4一D 具有抑制色素产生 的 作 用 。
这种 结 果 与 T ab at a 等 ( 1 9 7 4 ) 的 报 道一
致 汇2 ’ 3 】。
(2 ) 不同无 性系色素产生能力 . 将生长较
快的 5 个无性系在 含 I ^ A l m g l/ 琼脂培养基
上继代培养 6 代帅培养物 , 进行紫草色素含量
测定的结果 ( 见表 5 ) 表明 , 不 同无性系产生
色素的能力有较明显的差 异 。 其 中 以 I一 6、
D月和 D 一 3三个无性系组织培养物中色素含量
较高 , 比原植物根中色素含量 ( 1 . 0%左右 ) .1t
高 5 ~ 6 倍 。 结合它们生长较快的特性 , 可以
裹 5 不同无性系培养物中魏草色欢含 t
无 性 系 培养物中色素含量 (干重% )
6
。
10
3
。
12
内七00r几了
I ~ 2 5 2
。
36
D 一 2 4。 86
D 一 3
初步认为 , 它们是滇紫草愈伤组织优良的无性
系 。
上述初步研究结果表明 , 滇紫草愈伤组织
培养物具有较好的色素产生能力 , 存在着 良好
的发展和应用前景 。 它为进一步深入研究 , 奠
中药材第 13 卷第 1期 1 9 9 。 年 l 月
定子良好的基础 。
参 考 文 献
以〕 巾如医学科学院药物研究所等 : 中药志 , 第
一册 , 5 6牙页 , 人民卫生出版社 , 1 9 7 9
〔 2〕 M . T a b a t a ,
19 74
【3〕 樊红霞等 :
以 } 付善林等 :
e t a l: P h y t o e h e m i s t r y
,
1 3
:
9 27
中草药 , 1 9 ( 1 0 ) : 38 , 19 8 8
药学学报 , 1 9 ( 1 2 , ) : 92 1 , 1 984
儿种化学物质对伊贝母鳞茎
休眠解除的效应
西北大学生物系 玉兔杰 张套科
伊贝母 F r i t i l l a r i a p a l l id i f l o r a S c h r e n k ·是
多年生药用植物 。 在自然条件下 , 由播种到采
收长达五年之久 。 但在一年之中 , 其地上生长
期却很短 , 一般不超过三个月川 。 6 月下旬倒
苗后 , 年内不再出苗 , 新生鳞茎宿存地下 。 由
于更新芽具有较长的休眠期 , 发育极为缓慢 ,
长达半年之久 ,直至次年春才再次出苗生长。如
果能改变贝母生长发育的固有周期性 , 加快休
眠的解除和更新芽的发育 , 使其在后半年二次
出苗生长 , 延长营养生长的时间 , 便可达到贝
母的高产和速生 。 据报道 〔 2 , 3 」, G A 、 B A 、 氯
乙醇和硫脉等化学物质对多种植物休眠的解除
有促进效应 , 但在贝母鳞茎方面甚少报道 。 为
此特进行此实验 , 以观察其对贝母鳞茎休眠的
效应 。
察其出芽和生长情况 。
2
. 将 G A 处理的鳞茎 , 分别 置 于 低 温
( 2一 s cC ) 、 中温 ( 1 0一 1 5 ℃ ) 和变温 ( 1 5一
5 ℃ ) 中进行萌发试验 , 每隔 10 天检查一次萌
发率 。
3
. 氯乙醇和硫脉浸处后 , 各分成 5 组 ,分
别置于 5 ℃ 、 10 ℃ 、 15 ℃ 、 脚 ℃和 25 ℃的恒温
中培养 60 天后 , 再置于 15 ℃温度中进行萌发试
验 , 观察其对解除休眠的复合效应 。
选 . 鳞茎浸处和叶而 喷 洒 ( 倒苗前 15 一20
天进行 ) 的对比试验 。 萌发试验的温度为 15 一
2 0 ℃ 。
上述的培养和萌发试验均在放有湿海绵的
培养皿中进行 。
.
材 料 和 方 法
试验用伊贝母鳞茎为一年生子鳞茎 。 1 9 8 6
年 6月下旬采自太白县贝母试验田 。 精选后分
别用不同浓度的 G A 、 B A 、 氯 乙醇和硫脉 进
行浸处 , 以水作对照 。 处理如下 :
G A : 2 0 0
、
5 0 0和 10 0 0 P pm , 浸处 2 4小时 。
B A : 2 0 0
、
4 0 0 和 8 0 0 PP m , 浸处 2 4小时。
氯乙醇 : 5 0 0 0和 10 0 0 0 P Pm , 分别浸处 0 . 5
和 1 . 0小时 。
硫脉 : 5 0 0和 z 0 0 0 p p m , 分别浸处 1 . 0和 2 . 0
小时。
浸处后 , 分别作如下试验 :
1
。 置室温下 ( 15 一 20 ℃ ) 培养50 天 , 观
试 验 结 果
一 、 各药荆对解除休眠的效应
不同浓度的 G A 、 B A 、 氯 乙醇和硫 脉 对
贝母鳞茎休眠的解除均有促进效应 。 而且随着
浓度的增高而增强 ( 表 1 ) 。
二 、 药荆处理后 , 不同温度培养的效应
同一浓度浸处后 , 分别给以不 同温度的培
养 , 解除休眠的效应有 明显的不同 , 处理后 20
天检查萌发率 , 结果表明 , 以中温 ( 10 一 15 ℃ )的
效果为最好 , 不仅萌发比例高 , 而且萌发进程
也快 。 变温次之 ( 表 2 图 1 ) 。
三 、 处理方式对解除休眼的效应
用硫脉和氯 乙醇的水溶液分别作鳞茎浸处
和叶面喷洒对比试验 , 其解除效应 , 后者均较
工期 1 9 9 0 年 1 月