全 文 ：可能是钠离子影响了CAT活性，同时植物体启动了自
身的CAT酶修复系统，POD活性下降是盐胁迫的影响
超出了自身的修复能力而导致。POD活性上升表明鱼
腥草正在极力抵抗逆境反应，保持较高酶活性清除体
内过多的自由基[5]。植物的抗盐机理是一个多基因控制
的数量性状，这也决定了抗盐机理的复杂性。本试验仅
研究了盐胁迫对POD活性的影响。
（收稿：2016-02-20）
参考文献：
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作者简介：吕金海(1968-),男,本科,教授,主要从事资源植物开发与利
用研究。
南美叉柱花的离体培养与快速繁殖
徐世强 1，李宇峰 1，王继华 1，2*
（1广西大学农学院，广西南宁 530004；2广东省农作物遗传改良重点实验室，广东广州 510640）
摘 要：以叉柱花幼嫩枝条为外植体，建立了快速无性繁殖体系。结果显示：采用0.1%的升汞溶液消毒处理10min最为合适；诱导
不定芽最佳增殖培养基配方为改良MS培养基+6-BA2.0mg/L+KT0.5mg/L+IBA0.1mg/L；生根培养基配方为改良的MS培养基
+NAA1mg/L+IBA0.1mg/L。该离体培养方法能提高叉柱花的繁殖系数，有效缓解当前种苗不足和缩短上市时间，满足市场需求。
关键词：叉柱花；组织培养；快速繁殖
1.2 培养基与培养条件
改良MS培养基（MX）：改良MS培养基的配方为：
用Ca（NO3）2·4H2O代替原MS培养基中的CaCl2·2H2O
并添加抗坏血酸，其他组分均无变化；其中Ca（NO3）2·
4H2O的浓度为95mg/L，抗坏血酸的浓度为5mg/L；丛
芽增殖培养基：在MX培养基中添加适量的 6-BA、
KT、NAA；生根培养基：在MX培养基中添加适量的I-
BA及NAA。所有培养基附加蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，
pH值调至5.8±0.2，经121℃高压灭菌20min。培养条
件：温度25±3℃，湿度为65%~80%，光照度800Lx，光
照时间10h/d。
1.3 外植体消毒处理
选取叉柱花幼嫩的枝条作为外植体，去除叶片，用
自来水冲洗30min，然后用吸水纸吸干枝条表面水分。
在超净工作台上，将洗净的枝条切成带有1~2个芽的
茎段，先用70%酒精清洗30s，再用无菌水冲洗3次，
每次3min，立即转入含有吐温的0.1%的升汞溶液中
分别浸泡7、9、11、13min，晃动烧杯，让材料充分接触
消毒剂，最后将材料用无菌水洗涤3次，每次5min，得
到消毒外植体备用。
消毒好的茎段切除与消毒剂有接触的两端，接种
于诱导培养基MX+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L中，每
个消毒处理30个芽。于15d后统计污染率和萌芽率。
1.4 丛芽的增殖
取诱导得到的初代材料，接种于丛芽增殖培养基，
培养基中激素的组合和浓度如表1所示，进行继代培
观赏水草在水族箱中有着重要的地位，随着人们
对水草的喜爱，已经发展成为以水草为主的观赏水族
箱[1]。南美叉柱花（Staurogynerepens），也称叉柱花，是
一种双子叶植物，属于爵床科叉柱花属，分布于巴西、
委内瑞拉等地,虽然近年来才刚刚引入我国，但是得到
市场的认可，市场上往往供不应求。南美叉柱花的繁殖
主要依靠对成年的匍匐茎进行分株，繁殖系数较低,同
时成本较高。其属于短日照植物，在每年11月以后常
常开花，引起植物早衰，叶片变黄，失去欣赏价值，不仅
导致经济价值下降，而且在秋冬季节市场上产品缺乏。
随着生物技术的发展，特别是植物组织培养技术的日
趋成熟，利用植物工厂生产花卉，果树等的种苗已经广
泛应用，比如香蕉[2]、番木瓜[3]、蝴蝶兰[4]、杨树[5]、铁皮石
斛[6]等。近年来一些观赏水草如水榕[7,8]、红椒[9]、绿椒[10]、
皇冠[11，12]、红波[13]等也已经成功建立了组织培养技术体
系，有些品种开展了工厂化育苗，但是还没有工厂化生
产叉柱花的报道。组织培养技术能够在短期内大量提
供南美叉柱花的种苗，同时通过室内培养避免其受光
周期诱导开花[14,15]。本研究通过对影响叉柱花组织培养
及快速繁殖的因素进行了相关探索，以期为叉柱花的
工厂化组培育苗提供技术方案，保障周年供应市场。
1 材料与方法
1.1 材料
2014年春季在南宁花鸟市场购买生长健壮的叉
柱花成苗，培养在亚热带农业生物资源保护与利用国
家重点实验室玻璃温室。
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试验研究 现代园艺 2016年第6期
輥輶訛
DOI:10.14051/j.cnki.xdyy.2016.11.010
养21d，比较不同浓度的6-BA和KT对叉柱花丛芽增
值的效果，统计20个芽的增殖情况。
1.5 叉柱花生根诱导
将叉柱花丛芽切成带有1~2不定芽的茎段，然后
将生物学底端插入生根培养基中。培养基以MX为基
础，添加不同浓度的NAA和IBA，浓度见表2。进行生
根培养15~20d，统计20株再生植株根的数量和长度。
1.6 叉柱花的种植
当叉柱花幼苗生的根长至1~2cm、苗高3cm以上
后，将培养瓶瓶盖打开，室内炼苗培养7d，然后洗净根
部培养基，浸泡0.1%多菌灵溶液10min，将组培苗根部
用适量消毒后的岩棉包裹，固定在直径5cm，高6cm的
塑料镂空杯中，种植在遮光率为50%的塑料大棚的水
池中，保持叶面湿度。
2 结果与分析
2.1 外植体消毒
经过消毒处理后的外植体在诱导培养基上，7~10d
腋芽开始萌动，在21d已经有丛芽（图1）。按1.3方法
对叉柱花外植体进行消毒，70%的酒精处理20s后，再
以0.1%HgCl2作4种不同时间的处理，对其污染率、萌
芽率和死亡率进行统计，结果如表3。本研究中，叉柱
花外植体污染主要为细菌污染，没有出现真菌污染，可
能是采用酒精和氯化汞相结合的2次消毒的结果[14]。
外植体的污染率与0.1%HgCl2处理时间的长短负相
关，随着处理时间的
延长，0.1%H gCl2外
植体的伤害增加，污
染率逐渐下降，消毒
13min的污染率比消
毒 7min 的 降 低 了
60%，并且出现细菌
污染的时间也要滞
后，而外植体的萌芽率也逐渐降低，在消毒13min时，
萌芽率仅为10%，比处理7min的要低53.33%；外植体
的死亡率不断上升，处理 4 的死亡率最高，高达
66.67%，而处理1仅为10%。在本研究中处理1~4均
能得少量的无菌外植体，通过结合萌芽率和污染率等
综合因素分析，采用70%酒精20s和0.1%HgCl2处理
9~10min较为合适开展叉柱花外植体的消毒。
表1 不定芽诱导激素表
编号 6-BA(mg/L) KT(mg/L) NAA(mg/L)
1 1 0 0.1
2 2 0 0.1
3 3 0 0.1
4 2 0.5 0.1
5 2 1.0 0.1
6 3 0.5 0.1
7 3 1.0 0.1
表2根诱导激素表
编号 NAA(mg/L) IBA(mg/L)
1 0.5 0
2 0.5 0.1
3 1 0
4 1 0.1
图1 叉柱花的诱导培养
2.2 叉柱花丛芽的诱导与增殖
丛生芽通过不断继代增殖培养，在短期内可以得
到大量的无菌苗（图2）。从表4可以看出，6-BA浓度
在1~3mg/L内均能诱导不定芽的增殖，增殖效率和浓
度正相关。随着浓度的升高，不定芽的增殖效率递增，
在6-BA浓度3mg/L时增殖系数达到7左右。但是仅
用6-BA诱导芽过于密集，节间短，苗较弱，不便于进
行第2次增殖操作。在培养基中加入0.5~1mg/L的KT
均能促进苗的均匀，缓解6-BA浓度过高导致丛生芽
的矮小，并且增殖系数为6~7，和原来增殖系数相当，
但改善了苗的均匀性。从节约生产成本的角度考虑，
KT的浓度建议为0.5mg/L。
表3 不同方法对外植体消毒的效果
编号 接种数/个 污染率/% 萌芽率/% 死亡率/%
1 30 83.33 63.33 10.00
2 30 63.33 56.67 26.67
3 30 50.00 33.33 43.33
4 30 23.33 10.00 66.67
表4 不同激素和浓度对不定芽增殖的效果
编号 增殖系数(倍) 生长情况
1 1.99±0.24 芽很少、粗壮
2 3.67±0.23 芽少、均匀
3 5.61±0.43 芽多、小
4 6.09±0.54 芽多、均匀
5 6.88±0.54 芽多、均匀
6 7.37±0.99 芽多、较小
7 9.09±1.38 芽多、小、较密
图1叉柱花的诱导培养 图2南美叉柱花增殖
2.3 生根培养
将带芽的茎段接入生根培养基，培养20d，统计苗
生根率、根的长度和质量。结果0.5mg/L和1mg/L的
NAA都能诱导叉柱花的生根，单独使用NAA，得到的
2016年第6期 现代园艺 试验研究
輥輷訛
根相对较细，在移栽过程中容易断。其中，在1mg/L处
理下根的数量在5条左右，要比0.5mg/L的处理多2~3
条，根直径上没有明显的差异。添加0.1mg/L的IBA能
显著提高根直径，得到较为粗壮的苗，完全能够满足后
期的移栽，保证成活率（图 3）。MX 培养基 +NAA
1g/L+IBA0.1mg/L是适合诱导叉柱花生根的培养基。
处理9~10min能获得无菌材料，在这个时间内达到一
个平衡，即杀死细菌和真菌但对植物本身没有伤害。在
激素方面由于植物组织培养快速繁殖技术非常成熟，
有较多文献可以参考。在生产上，研究者往往结合自己
的经验设置简单的梯度获得适合的体系[20]。本研究结
合以往的结果，通过设置6-BA和KT的协同作用，促
进丛芽的增殖，结合增殖系数和丛芽质量得到了适合
叉柱花的增殖体系。NAA和IBA是常用的生根诱导激
素，NAA的价格要比IBA便宜，为了节省生产成本，
NAA使用更为广泛，通过两者的配合使用得到叉柱花
的根在数量和质量完全能够满足生产上的需求[21,22]。组
织培养技术和栽培技术的结合，在短期内大量提供叉
柱花的种苗, 克服冬季开花的问题，保障冬季供应市
场，提高种植和销售者的收入，促进观赏水草产业的发
展。 （收稿：2016-02-15）
参考文献：
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作者简介：徐世强（1989-），男，博士生，河南信阳人，研究方向：植物
分子生物学。通讯作者：王继华，男，博士。
图3南美叉柱花生根诱导 图4南美叉柱花移栽
表5 不同激素对叉柱花根诱导的效果
编号 根数 根长(cm) 根质量
1 2.34±0.36 0.93±0.12 根较细，少
2 2.34±0.41 0.91±0.23 根较少
3 5.87±0.32 1.75±0.23 根较多，细
4 5.44±0.24 1.77±0.33 根较多，较粗
2.4 炼苗及移栽
生根诱导培养25d左右，叉柱花幼苗的根一般达
到长1cm，株高3cm左右。在开盖炼苗期间，生长变慢，
叶片变厚。在移栽5~7d后，植株叶片转绿，有新根长
出，成活率在95%以上（图4）。
3 讨论
观赏水草品种已经超过500多种，但是其中绝大
多数来源于美洲、非洲、东南亚等热带地区，广州已经
成为我国大陆最大的水草集散地[1,16]。观赏水草市场需
求量大，已经发展成为一种重要的经济植物，但是观赏
水草的繁殖系数较低，种苗问题严重制约水草产业的
发展。叉柱花造型优美、适应性强、容易管理，适合作为
前景草，市场上供不应求。但是，叉柱花在冬季的时候，
容易开花，市场上稀少。叉柱花的种苗缺乏和避免冬季
开花是目前急需解决的问题。植物组织培养技术能解
决短时间内大量扩繁种苗和通过室内培养避免冬季开
花，在叉柱花的生产上有着重要的意义。目前植物组织
培养快速繁殖在技术上非常成熟，只是生产成本的高
低关系到应用范围。在植物快繁技术中无菌外植体的
获得和增殖效率是关键。叉柱花是水生植物，长期生长
在水中，内生菌丰富，获得无菌材料尤为重要[17,18]。Hg-
Cl2消毒在植物组织培养研究中效果最好，在水草的组
培应用较多，均能成功得到无菌外植体，消毒时间的控
制最为关键[19]。消毒时间与材料的幼嫩、生理状态、表
面是否光滑等相关。叉柱花的幼嫩茎段在0.1%HgCl2
试验研究 现代园艺 2016年第6期
輦輮訛