全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(6)∶690 ～ 692
的影响，结果显示:采用甲醇 － 0． 1%磷酸溶液(10∶
90)作为流动相时，两种成分的分离度较好。对原儿
茶酸和绿原酸对照品溶液在 200 nm ～800 nm进行紫
外扫描，两者分别在 258、280 nm处有较大的吸收，但
原儿茶酸在 258 nm处灵敏度较低，故确定检测波长
为 280 nm。文中同一厂家不同批次醋五味子配方颗
粒中原儿茶酸和绿原酸的含量存在差异，这可能与五
味子的来源，采收及加工过程有关。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社社． 2010:61 － 62．
［2］ 杨放，袁军，付平． 五味子的研究概况［J］． 华西药学杂志，
2003，18(6):438 － 440．
［3］ 吴卫华，康桢，欧阳冬生，等． 绿原酸的药理学研究进展［J］．
天然产物研究与开发，2006，18(4) :691 － 694．
［4］ 仰榴青，吴向阳，徐佐旗，等． 五味子及其制剂中木脂素类成
分含量测定的研究进展［J］． 中国中药杂志，2005，30(9) :
650 － 652．
［5］ 赵玥，王冰． HPLC测定不同生长期五味子中的 5 种木脂素成
分［J］．华西药学杂志，2011，26(2) :172 － 174．
收稿日期:2012 － 09 － 24
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (批准号:81073036)
作者简介:乔媛媛(1989—) ，女，河北高阳，正攻读药物学专业的硕士学位。Email:qiaoyuanyzxy@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:weiyiyxy@ 126． com
峨参石油醚部位的指纹图谱研究
乔媛媛，李 静，魏 屹* ，马超英，龙桢桢
(西南交通大学生命科学与工程学院，四川 成都 610031)
摘要:目的 采用 HPLC法对 8 批峨参药材的石油醚部位的指纹图谱进行研究。方法 采用 Shimadzu VP － ODS C18色谱柱
(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，以乙腈 － 0． 15%氨水为流动相梯度洗脱，柱温为 30 ℃，检测波长 230 nm。结果 以 13 个共有峰
为评价指标，8 批样品中各共有峰的相对保留时间均小于 3%，相似度均大于 0． 95。结论 所用方法操作简便，精密度、稳定
性和重复性良好，可为峨参药材的质量控制提供依据。
关键词:峨参;高效液相色谱法;指纹图谱
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)06 － 0690 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 06． 030
Study on the fingerprint of petroleum ether part form Anthriscus sylvestris by HPLC
QIAO Yuan － yuan，LI Jing，WEI Yi* ，MA Chao － ying ，LONG Zhen － zhen
(School of Life Science and Engineering，Southwest Jiaotong University，Chengdu，Sichuan，610031 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish the fingerprint chromatograms of petroleum ether part form 8 batches of Anthriscus sylvestris by
HLPC．METHODS The analysis was performed on a Shimadzu VP － ODS C18 column(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)with acetonitrile －
0． 15% NH3·H2O as mobile phase at a column temperature of 30 ℃，and the detection wavelength was 230 nm． ＲESULTS 13 peaks
were selected as the common fingerprint peaks． The relative retention times of 8 batches of samples were less than 3% and the similarity
was more than 0． 95． CONCLUSION The method is easy to operate． The precision，stability and repeatability were qualified． It can
be used for the quality control of Anthriscus sylvestris．
Key words:Anthriscus sylvestris;HPLC;Fingerprint
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)06 － 0690 － 03
伞形科峨参属植物峨参 Anthriscus sylvestris
(Linn)Hoffm是四川峨眉山三大特产之一，具有杀
虫、抗癌、抗病毒、增强机体免疫、抗氧化、抗衰老、健
脾益气等功效［1 － 3］，主要活性成分有峨参内酯、去氧
鬼臼苦素等。峨参提取物的活性成分主要集中于醇
提萃取后的石油醚部位，其对肺癌 A549 和 H460 细
胞的增殖均有明显的抑制作用［4 － 5］。现对峨参药材
的石油醚部位的指纹图谱进行了研究，可为其质量
的控制和化学成分的研究提供理论依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC －6AD高效液相色谱仪(日本岛津)。峨参
醇甲醚(91． 3%)、峨参内酯(91． 5%)、去氧鬼臼苦
素(87． 5%)、3 －甲氧基 － 4，5 －二氧亚甲基苯甲醛
(57． 8%)对照品(自制);甲醇、乙腈为色谱纯;水为
超纯水;峨参药材的来源见表 1，由西南交通大学生
命科学与工程学院宋良科副教授鉴定为伞形科植物
峨参 Anthriscus sylvestris;其余试剂为分析纯。
表 1 不同批次峨参药材的来源
Table l Source of the different bathes of Anthriscus sylvestris
No． 采集 /购买地 时间
1 峨眉山报国寺 2012 － 03
2 峨眉山九老洞 2012 － 03
3 乐山市峨边县 2012 － 03
4 成都荷花池中药材市场 2012 － 03
5 峨眉山市符溪镇 2012 － 03
6 峨眉山金顶 2012 － 04
7 眉山市洪雅县 2012 － 04
8 峨眉山市夹江县 2012 － 03
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 溶液的配制 取 1 ～ 8 号峨参药材粉末各
10． 0 g，精密称定，加甲醇 100 mL浸润 30 min，振摇
超声 60 min，过滤，滤液减压浓缩至干，残渣中加 20
mL水溶解，用适量石油醚萃取 3 ～ 4 次，至石油醚层
无色，合并萃取液，减压浓缩至干，加甲醇溶解并定
容至 10 mL，过滤，取续滤液作为供试品溶液 1 ～ 8。
分别取峨参醇甲醚、峨参内酯、去氧鬼臼苦素、3 －甲
氧基 － 4，5 －二氧亚甲基苯甲醛对照品适量，加甲醇
溶解得对照品溶液 1、2、3、4。
1． 2． 2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为
Shimadzu VP － ODS C18柱(250 mm × 4． 6 mm，5
μm)，流动相为乙腈(A)－ 0． 15%氨水(B) ，梯度洗
脱:0 ～ 3 min、10%A，3 ～ 8 min、10% ～ 20% A，8 ～ 20
min、20% ～40% A，20 ～ 50 min、40% ～ 70% A，50 ～
60 min、70%A，60 ～ 70 min、70% ～ 10% A。检测波
长为 230 nm，柱温为 30 ℃，流速 1 mL·min －1，进样
量 10 μL。理论板数以峨参内酯峰计应≥3 × 103。
1． 2． 3 测定的方法 精密吸取“1． 2． 1”项下 4 种
对照品溶液和 8 种供试品溶液各 10 μL，分别进样，
记录色谱图(图 1A、2)。以 8 号峰(峨参内酯)为参
照峰，计算各共有峰的相对保留时间，采用《中药色
谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版计算相似度。
1． 2． 4 精密度试验 精密吸取供试品溶液 1，连续
进样 6 次，记录指纹图谱。各主要色谱峰的相对保
留时间和峰面积无明显差异，全谱相似度大于
0. 98，符合指纹图谱要求。
1． 2． 5 重复性和稳定性试验 取 1 号峨参药材 6
份，分别按“1． 2． 1”项方法制备供试液，并按
“1. 2. 2”项下下色谱条件进样测定，记录色谱图。
各主要色谱峰的相对保留时间和峰面积无明显差
异，全谱相似度 ＞ 0． 95。取供试品溶液 1 分别于 0、
2、4、8、12、24 h时进样，记录色谱图。各主要色谱峰
的相对保留时间和峰面积无明显差异，全谱相似
度 ＞ 0． 97，表明供试液在 24 h 内稳定。
1． 2． 6 指纹图谱的建立 导出 8 批峨参药材石油醚
部位色谱图的“AIA”格式图谱，输入《中药色谱指纹
图谱评价系统》2004A版软件，进行匹配，以中位数法
建立峨参药材石油醚部位的对照指纹图谱(图 1B)。
1、2、3、4、5、8、9、10、11、12、13、14、15 号峰在 8 批样品
的色谱图中均出现，因此，标定此 13 个峰为共有峰。
将对照品溶液色谱图与对照指纹图谱进行比对，确定
5号峰为峨参醇甲醚、8 号峰为峨参内酯、9 号峰为去
氧鬼臼苦素、14 号峰为 3 －甲氧基 － 4，5 －二氧亚甲
基苯甲醛。以 8号峰的保留时间为 1，计算各峰的相
对保留时间，ＲSD ＜3%(表 2)。将液相图谱数据导入
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版中，通
过相似度计算软件得出峨参药材指纹图谱的共有模
式，并以此共有模式为标准，对每批样品进行相似度
评价。8批样品的相似度分别为 0. 995、0． 978、0． 995、
0． 950、0． 998、0． 969、0. 985、0. 995，表明不同来源的峨
参石油醚部位的相似度较高。
A B
0 10 20 30 40 50 60 70 0 10 20 30 40 50 60 70
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
t/min
123 4
5
6
7
8
9
10 11 12 13 15
14
123
4
5
8
9
10 1112 13
14
15
R
图 1 8 批峨参药材的石油醚部位(A)和对照(B)指纹图谱
Figure 1 Fingerprint(A)and reference fingerprint(B)of the petroleum ether part from 8 batches of Anthriscus sylvestris
196第 6 期 乔媛媛，等。峨参石油醚部位的指纹图谱研究
0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50 60 70
A B C D
t/min
an
th
ris
ci
no
lm
et
hy
le
th
er
de
ox
yp
od
op
hy
llo
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图 2 峨参醇甲醚(A)、峨参内酯(B)、去氧鬼臼苦素(C)、3 －甲氧基 －4，5 －二氧亚甲基苯甲醛(D)的色谱图
Figure 2 Chromatograms of anthriscinol methyl ether(A)，deoxypodophyllotoxin(B)，deoxypicropodophyllotoxin(C)and 3 － methoxy － 4，
5 － methylenedioxybenzaldehyde(D)
表 2 8 批峨参药材石油醚部位共有指纹峰的相对保留时间
Table 2 Ｒelative retention time of the common peaks of petroleum ether part of 8 batches of Anthriscus sylvestris
No． S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 ＲSD /%
1 0． 5403 0． 5409 0． 5407 0． 5365 0． 5407 0． 5401 0． 5407 0． 5417 0． 29
2 0． 5507 0． 5487 0． 5485 0． 5480 0． 5485 0． 5482 0． 5485 0． 5495 0． 16
3 0． 5609 0． 5613 0． 5608 0． 5603 0． 5608 0． 5605 0． 5608 0． 5622 0． 10
4 0． 6033 0． 6057 0． 6037 0． 6037 0． 6037 0． 6037 0． 6038 0． 6059 0． 17
5 0． 6766 0． 6773 0． 6771 0． 6776 0． 6771 0． 6776 0． 6771 0． 6770 0． 05
8 1． 0000 1． 0000 1． 0000 1． 0000 1． 0000 1． 0000 1． 0000 1． 0000 0． 00
9 1． 0535 1． 0544 1． 0541 1． 0543 1． 0540 1． 0544 1． 0541 1． 0541 0． 03
10 1． 0311 1． 0314 1． 0314 1． 0308 1． 0315 1． 0314 1． 0314 1． 0314 0． 02
11 1． 1549 1． 1589 1． 1586 1． 1589 1． 1585 1． 1591 1． 1586 1． 1589 0． 12
12 1． 2174 1． 2185 1． 2184 1． 2187 1． 2184 1． 2186 1． 2184 1． 2185 0． 03
13 1． 3847 1． 3871 1． 3859 1． 3853 1． 3858 1． 3854 1． 3859 1． 3857 0． 05
14 1． 4825 1． 4833 1． 4837 1． 4831 1． 4837 1． 4830 1． 4837 1． 4833 0． 03
15 1． 6113 1． 6120 1． 6126 1． 6124 1． 6126 1． 6123 1． 6127 1． 6114 0． 03
2 讨论
8 批峨参药材石油醚部位的指纹图谱在整体上
非常相似，确定了 13 个共有峰，但各成分在不同产
地的峨参药材中占有比例和量差异较大。如 5 号峰
(峨参甲醇醚)的含量相差较大，采自峨眉山九老洞
的药材中含量最高，采自符溪镇的含量最低;6 号峰
在眉山洪雅采集的药材中明显高于其他批药材;7
号峰在峨眉山金顶与峨眉山九老洞的药材中含量较
高，而在成都荷花池中药市场所购药材中则基本无，
可能是由于生长环境或种植习惯等因素所导致。文
中结果可为峨参质量控制及其活性成分的研究提供
依据，如 8、9 号峰是具有较高活性的木脂素类化学
成分，而在植物中同类化合物多聚集存在，由此可推
测 7、10 号峰所代表的化合物可能也是峨参药理作
用的活性成分，有待鉴定。
参考文献:
［1］ Chang HW，Lee SH． Compositions for prevention and treatnent of
an inflanmatory or allengic disease containing an anthricin com-
pound isolated from Anthriscus sylvestris hoffrt China［P］．
KＲ2005084724 － A，2005 － 08 － 29．
［2］ 栗原藤三郎，菊地正雄． シャクAnthriscus sylvestris HoFFM． の
成分研究(第 2 報 1) )花および枼の成分について［J］． 药学
杂志(日)，1979，99(6) :602．
［3］ Lin CX，Lee E，Jin MH，et al． Deoxypodophyllotoxin (DPT)
inhibitseosi － nophil recruitment into the airway and the cytokine
expression in an OVA － induced lung inflammation［J］． Planta
Medica，2006，72(9) :786 － 791．
［4］ 王淑丽．峨参活性成分的提取、分离与筛选［D］． 成都:西南
交通大学硕士学位论文，2009:28．
［5］ 马超英，涂显琴，牛顺子，等． 峨参石油醚提取物对肺癌细胞
A549 和 H460 增殖的抑制作用观察［J］． 河北医药，2011，33
(13) :1925 － 1927．
收稿日期:2013 － 09 － 10
296 华 西 药 学 杂 志 第 29 卷