全 文 ：收稿日期:2011-01-09; 修订日期:2011-07-12
基金项目:国家自然科学基金(No． 30873367)
作者简介:李 肃(1986-) ，女(汉族) ，山西吕梁人，现为山西省中医药研
究院方剂研究所在读硕士研究生，学士学位，主要从事中药药代及中药的
药效物质基础研究工作．
* 通讯作者简介:倪 艳(1965-) ，女(汉族) ，山西五寨人，现任山西省中
医药研究院主任药师，学士学位，主要从事中药的药效物质基础及制剂的
现代化研究工作．
还阳参药材最佳采收期研究
李 肃1，贺石麟1，孙进华2，倪 艳1*
(1．山西省中医药研究院方剂研究所，山西 太原 030012; 2．东南大学附属中大医院，江苏 南京 210009)
摘要:目的 确定还阳参药材的最佳采收月份。方法 从绿原酸含量，多糖含量以及浸出物含量等方面比较不同时间采集
的还阳参药材的差异。结果 不同采收期绿原酸含量、多糖含量、浸出物含量存在差异。结论 确定 6 月份为还阳参药材
的最佳采收季节。
关键词:还阳参; 采收期; 绿原酸; 多糖; 浸出物
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 12． 075
中图分类号:R282． 710． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)12-2995-02
The Optimal Harvesting Time of Crepis turczaniowii C． A． Mey．
LI Su1，HE Shi-lin1，SUN Jin-hua2，NI Yan1*
(1． Shanxi Academy of TCM，Taiyuan 030012，China;2． Zhongda Hospital，Southeast University ，Nanjing
210009，China)
Abstract:Objective To determine the optimal harvesting time of Crepis turczaniowii C． A． Mey． ． Methods Based on the con-
tents of chlorogenic acid，polysaccharide and the extract was compared． Results The contents of chlorogenic acid，polysaccharide
and the extract in different picking periods were different． Conclusion June is the best harvest time of Crepis turczaniowii C． A．
Mey． ．
Key words:Crepis turczaniowii C． A． Mey．; Harvest time; Chlorogenic acid; Polysaccharide; Extract
还阳参为菊科植物屠还阳参 Crepis turczaniowii C． A． Mey 的
全草，别名屠还阳参，驴打滚儿草，主要分布在山西、内蒙古一带，
《中药大辞典》［1］中记载还阳参夏、秋季均可采收，为当地民间习
用草药材。本品味苦，性微寒，具有止咳平喘、清热解毒、益气等
功效，民间常用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管和无
名肿毒等疾病。课题组在前期研究中发现还阳参含有绿原酸及
多糖［2］等成分。为了对还阳参药用植物进一步研究和开发利
用，建立一套行之有效的质量评价方法，本研究主要从绿原酸含
量、多糖含量以及浸出物含量等方面比较不同时间采集的还阳参
药材的差异，并最终确定了还阳参的最佳采收时间，完善了药材
标准内容。
1 仪器与材料
1． 1 仪器 Agilent1100 高效液相色谱仪(Agilent) ;CX － 150 型超
声反应机(北京市天海双龙医疗设备有限公司) ;BP211D 分析天
平(德国赛多利斯) ;电热恒温三用水箱(北京市永光明医疗仪器
厂)。
1． 2 材料与试剂 于 2009 － 5 ～ 10 月课题组成员亲自于山西省
山阴县玉井镇进行药材采集，经山西省药品检验所高天爱教授鉴
定为菊科植物屠还阳参 Crepis turczaniowii C． A． Mey．全草。绿原
酸为对照品(中国生物制品检定所，批号 110753 － 200413) ，葡萄
糖(北京化工厂，批号 641214) ，乙腈为色谱纯(天津市四友精细
化学品有限公司) ，其他试剂均为分析纯。
2 方法
2． 1 绿原酸 HPLC法测定［3］
2． 1． 1 色谱条件 色谱柱为依利特 Sino Chrom DDS － BP;流动相
为乙腈 － 0． 4 %磷酸水溶液(13∶ 87) ;流速 1． 0 ml·min －1;检测
波长 327 nm;进样量 10 μl;柱温为室温。
2． 1． 2 对照品溶液的制备 取绿原酸对照品 1． 07 mg，精密称定，
置于 25 ml棕色量瓶中，加入 50 %甲醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，制得每毫升含 42． 8 μg的对照品溶液。
2． 1． 3 供试品溶液的制备 取还阳参药材粗粉 0． 5 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 50 ml，称定重量，超声提取
(功率 150W，频率 40 kHz)30 min，补足减失的重量，滤过，取续滤
液，即得。
2． 1． 4 线性关系考察 分别精密吸取绿原酸对照品溶液 1． 0，
2． 5，5． 0，10，15，20 μl，按上述色谱条件进行测定。以对照品的进
样体积为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:
Y = 120． 45X － 14． 235，r = 0． 999 9，表明绿原酸在 0． 042 8 ～ 0． 856
0 μg·ml －1有良好线性关系。
2． 1． 5 精密度实验 精密吸取绿原酸对照品溶液，连续进样 5
次，10 μl /次，按上述色谱条件进行测定，RSD = 1． 08%，表明仪器
精密度良好。
2． 1． 6 重复性实验 取同一批还阳参样品，按照供试品溶液的制
备方法制备 5 份供试品溶液，依上述色谱条件进行测定，RSD =
1． 05%，表明本方法重复性好。
2． 1． 7 稳定性实验 取同一份供试品溶液，分别在配制后 0，2，
4，6，8 h按上述色谱条件进行测定，RSD = 0． 90 %，表明样品在 8
h内基本稳定。
2． 1． 8 加样回收率实验 取同一批已知含量的还阳参样品 5 份，
每份 0． 25 g，精密称定，分别精密加入绿原酸对照品适量，按照供
试品溶液的制备方法制备，依上述色谱条件进行测定，平均回收
率为 99． 92%，RSD = 1． 03%，表明该方法准确度好。
2． 2 UV法测定还阳参多糖［4］ 以葡萄糖为标准品，采用苯酚 －
硫酸法测定还阳参的多糖含量。
2． 2． 1 供试品溶液的制备 取还阳参药材粗粉 0． 2 g，精密称定，
加水 4 ml，超声处理(功率 150W，频率 40 kHz)3 次，20 min /次，
提取液滤过，滤液定容至 50 ml量瓶中，即得。
2． 2． 2 对照品溶液的制备 精密称取 105℃干燥至恒重的无水
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 12 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 12 期
葡萄糖对照品 27． 23 mg，置 250 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻
度，摇匀，即得(每毫升中含无水葡萄糖 0． 108 9 mg)。
2． 2． 3 苯酚试液的配制 取苯酚 100 g，加铝片 0． 1 g和碳酸氢钠
0． 05 g，蒸馏，收集沸腾时馏分。称取 5 g，加水 100 ml使溶解，置
棕色瓶内放冰箱中备用。
2． 2． 4 标准曲线的绘制 精密量取葡萄糖对照品溶液 0，0． 2，
0． 4，0． 6，0． 8，1． 0 ml，分别置于 10 ml具塞试管中，依次加蒸馏水
补至 2． 0 ml，各精密加入 5%苯酚溶液 1． 0 ml，摇匀，迅速精密加
入 5． 0 ml的浓硫酸，摇匀，静置 10 min，置 40 ℃水浴保温 15 min，
取出，迅速冷却至室温，以相应的试剂为空白，于 490 nm 处测定
吸光度，以多糖的含量(C，10 －3 mg·ml －1)为横坐标，以吸光度
(A)为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程如下式:A = 61． 392C －
0． 003 4，r = 0． 999，表明多糖在 0． 002 722 ～ 0． 013 61 mg·ml －1范
围内具有良好线性关系。
2． 3 还阳参浸出物的测定方法［4］
2． 3． 1 还阳参浸出不同溶剂的选择 根据还阳参所含成分的性
质，选择水及不同浓度的乙醇作溶剂，按照浸出物含量测定中冷
浸法［4］测定。结果见表 1。
表 1 冷浸法考察结果 %
溶剂 浸出物含量
水 30． 50
50%乙醇 30． 86
70%乙醇 27． 89
95%乙醇 10． 77
结果表明，水及低浓度的乙醇作为溶剂可达到较好的浸出效
果，而高浓度的乙醇浸出效果较差。
2． 3． 2 还阳参浸出方法的选择 根据还阳参有效成分的溶解性
质，结合前面的试验结果，按照浸出物含量测定中热浸法［4］测
定，与冷浸法比较。结果见表 2。
表 2 热浸法测定结果 %
溶剂 浸出物含量
水 36． 09
50%乙醇 34． 90
70%乙醇 32． 01
95%乙醇 20． 25
结果表明，采用热浸法其浸出物含量明显高于冷浸法。
综合考虑药材的有效成分的溶解性及浸出效果，选定以水以
及 50%乙醇作为溶剂，用热浸法进行浸出物的测定。
2． 4 样品含量测定
2． 4． 1 样品中绿原酸含量测定 取 2009 年 5 ～ 10 月 6 个月采集
的还阳参药材，按“2． 1． 3”项下方法处理药材，依“2． 1． 1”项下色
谱条件进行测定。结果见表 3 及图 1。
2． 4． 2 样品中多糖含量测定 取 2009 年 5 ～ 10 月 6 个月采集的
还阳参药材，按“2． 2． 1”项下方法处理药材，精密吸取各供试品
溶
液 1 ml，按“2． 2． 4”项下方法，自“依次加蒸馏水使最终体积为
2． 0 ml”，依法测定吸光度，计算样品溶液中还阳参多糖含量。结
果见表 3。
a －绿原酸对照品 b －还阳参药材样品
图 1 绿原酸含量测定 HPLC图谱
2． 4． 3 样品中浸出物含量测定 取 2009 年 5 ～ 10 月 6 个月采集
的还阳参药材，按照中醇溶性浸出物测定法［4］项下的热浸法操
作。结果见表 3。
表 3 不同月份采集药材的测定结果 %
采收期 绿原酸含量
浸出物测定
水浸 醇浸(50%)
多糖含量
2009-05 0． 184 27． 77 24． 63 12． 75
2009-06 0． 233 36． 09 32． 68 20． 78
2009-07 0． 212 31． 65 28． 61 16． 38
2009-08 0． 097 27． 82 24． 74 11． 67
2009-09 0． 129 27． 68 24． 31 14． 67
2009-10 0． 116 27． 30 25． 22 14． 10
3 结论
对不同时间采集的还阳参药材，分别通过测定和比较绿原
酸、浸出物、多糖等三者的含量，结果表明 6 月份所采集的还阳参
药材三者含量均最高，故确定 6 月份为还阳参药材的最佳采收
期。
参考文献:
［1］ 江苏新医学院．中药大辞典［M］．上海:科学技术出版社，1976．
［2］ 李德华，董梅娟，倪 艳．还阳参多糖提取工艺的研究［J］． 中国中
医药科技，2008，15(5) :370．
［3］ 王丽楠，李 伟，杨美华，等． 不同采收期杜仲不同部位主要有效
成分的动态研究［J］．中国药业，2009，18(18) :29．
［4］ 国家药典委员会．中国药典，Ⅰ部［S］．北京:中国医药科技出版社，
2010:232．
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 12