全 文 ：2012 年总第 44 卷第 6 期
天山花楸（S.tianschanica Rupr.）属蔷薇科 Rosaceae 花楸
属植物，系新疆维吾尔族和哈萨克族民间常用药材 [1]。 在《新
疆维吾尔自治区药品标准》（第一册）中提到，天山花楸具有
清热利肺、补脾生津、止咳的功能，可用于哮喘、咳嗽、肺结核
等疾病的治疗[2]。 本研究采用系统溶剂提取方法，依次以石油
醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、水连续回流对天山
花楸药材进行提取，分为 7 个提取部分 [3]，然后分别观察 7 个
提取部分的止咳平喘作用，明确其药理作用，为今后合理应
用天山花楸奠定基础。
1 材料与方法
1.1 实验仪器 UV-2401（PC）紫外光谱仪，日本岛津公司生
产；LABOROTA-4001 型旋转蒸发仪，德国；血球计数板，上海
市求精生化试剂仪器有限公司。
1.2 受试药品 天山花楸采自玛纳斯林场 ， 海拔 2000～
2500m， 由石河子大学药学院李鹏副教授鉴定为蔷薇科
Rosaceae 花楸属植物天山花楸（S.tianschanica Rupr.）。 天山
花楸提取物，自制，1kg/L，本文中天山花楸各提取物组给药剂
量均相当于生药量。
1.3 实验试剂 卵白蛋白（ovalbumin，OVA），国药集团化学
试 剂 有 限 公 司 ， 批 号 ：F20090722； 氯 化 乙 酰 胆 碱
（Acetylcholine chloride，Ach）， 上海三爱思试剂有限公司，批
号 ：20100818；磷酸组胺 （Histamine phosphate，His），上海丽
珠东方生物技术有限公司，批号：100316；盐酸异丙肾上腺素
注射液 （Isoproterenol，ISO），上海禾丰制药有限公司 ，批号 ：
100104； 地塞米松片 ， 濮阳市汇元药业有限公司 ， 批号 ：
100205，其余试剂为分析纯。
1.4 实验动物 昆明种小鼠 ，体重 （20±2）g，雌雄兼半 ，由
石河子大学动物实验中心提供 ；荷兰种豚鼠 ，体重 （150±
20）g， 由乌鲁木齐动物实验中心提供 ；Balb/c 小鼠 ， 体重
（20.0±2.0）g，雌雄兼用 ，年龄 6～8 周 ，由乌鲁木齐动物实
验中心提供。
1.5 天山花楸供试品的制备 称取天山花楸干叶 （果 ）适
量 ，采用系统溶剂提取的方法 ，依次以石油醚 、氯仿 、乙酸
乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、水连续回流提取，提取液分别浓
缩蒸干，真空干燥得干膏。 各干膏分别取适量置于研钵中，
加少量乙醇润湿后加 0.5%羧甲基纤维素钠溶液 ， 边加边
研磨至溶液为均匀混悬液 ，分别得乙酸乙酯 、氯仿 、正丁
醇、丙酮、乙醇、水溶剂提取部分样品。 制得每毫升药液约
含 1g 生药备用，即得天山花楸叶与果各提取部位供试品。
1.6 小鼠氨水引咳实验 昆明种小鼠， 随机分组， 每组 15
只，分别为：阴性对照药组（0.9％氯化钠注射液，20mL/kg）、阳
性对照药组（联邦止咳露，20mL/kg）组和天山花楸石油醚Ⅰ、
氯仿Ⅱ、乙酸乙酯Ⅲ、正丁醇Ⅳ、丙酮Ⅴ、乙醇Ⅵ、水Ⅶ系统溶
剂提取物（25g/kg）组。
各组动物均每日灌胃给药 1 次，连续 14d。实验前禁食不
禁水 12h，末次给药 45min 后，将动物置于 1L 干燥器中，内置
棉球，用 1mL 注射器吸取氨水 1mL，注入棉球，迅速密闭干燥
器，记录小鼠 3min 内咳嗽次数。
1.7 豚鼠平喘法 按豚鼠平喘法挑选合格豚鼠随机分
组 [ 4 ]，每组 7 只 ，分别为阴性对照药组 （0.9％氯化钠注
射液 ，20mL/kg ） 、阳性对照药组 （ ISO ，1.5mg/kg ）和天山
花楸乙酸乙酯系统溶剂提取物组 （25g/kg ） 、丙酮系统溶
剂提取物组 （25g/kg ） 。
各组动物均每日给药 1 次 （阳性对照药组采用腹腔注
射，其余各组均为灌胃），连续 7d，末次给药后测引喘潜伏期。
实验前禁食不禁水 12h， 阳性对照药组腹腔注射 ISO 5min
后，其余各组灌胃给药 0.5h 后，将豚鼠放入真空干燥器中，以
超声雾化器恒压喷入 2%Ach 和 0.1%His 等体积混合液30s，
观察 2min 内豚鼠出现喘息性抽搐的潜伏期（即引喘潜伏期）
并记录。 如果豚鼠出现跌倒、抽搐现象应立即取出，以免死
天山花楸不同提取部位止咳平喘作用的筛选
陈 欢 唐 辉 郑永刚 郁长治
（新疆特种植物药资源教育部重点实验室石河子大学药学院，新疆石河子 832002）
摘 要 目的：研究天山花楸不同提取部位的止咳平喘活性，并进一步筛选其有效提取部位。方法：采用小鼠氨水引
咳法、豚鼠引喘法和小鼠卵蛋白复制法筛选天山花楸止咳平喘的有效提取部位。 结果：天山花楸乙酸乙酯提取物对小鼠
氨水引咳具有明显的拮抗作用，对气雾吸入组胺和乙酰胆碱引起的豚鼠哮喘具有保护作用，能明显延长哮喘潜伏期，对
卵蛋白引起的小鼠哮喘，能明显减少支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）总数和嗜酸性粒细胞（Eos）数。 结论：天
山花楸止咳、平喘的有效提取部位主要为乙酸乙酯提取物。
关键词 天山花楸 平喘 有效提取部位
中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1672-397X（2012）06-0069-03
基金项目：新疆建设兵团科技攻关计划医药卫生专项资金资助项目（2006GG52）
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亡，并记录引喘潜伏期。 若 2min 内未发生喘息，则引喘潜伏
期记为 120s。
1.8 小鼠卵蛋白复制法[5-7] Balb/c 小鼠随机分组，每组 10 只，
分别为假模组（0.9％氯化钠注射液 20mL/kg）、模型组 （0.9％
氯化钠注射液 20mL/kg）、阳性对照药组（地塞米松 1.5mg/kg）
和天山花楸叶乙酸乙酯提取物组（25g/kg）、丙酮系统溶剂提
取物组（25g/kg）。
除假模组外， 其他 4 组小鼠分别于第 1、7、14 天腹腔注
射 0.1mL/只 OVA 致敏液 （内含 20μg OVA 及 4mg 氢氧化铝
凝胶）致敏。 从第 18 天开始，以 10g/L OVA 溶液通入雾化干
燥器雾化 5min 后， 再放入小鼠继续雾化 20min 激发， 持续
5d。 若小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌抽搐、两便失禁现
象， 即为阳性反应。 假模组小鼠以 0.9％氯化钠注射液代替
OVA 进行致敏和激发。
各组小鼠从第 18 天起灌胃给药和进行 OVA 激发 ，持
续 7d。 第 25 天灌胃给药后，立即进行 OVA 激发 25min，取
雾化 20min 小鼠，处死小鼠，剪开颈部皮肤 ，并于气管正中
处剪一小口 ， 插入气管套管 。 用 1mL 注射器取冷盐水
0.5mL 灌洗肺泡，回抽液体，如此反复 3 次，获得支气管肺
泡灌洗液 （bronchial veolar lavage fluid，BALE）， 冲洗共 3
次，确保回收率在 80％以上。离心（3000r/min）10min，弃去上
清液，沉淀细胞加 0.2mL 缓冲液混悬。 吸取 0.1mL 于血球计
数板上，显微镜下计白细胞（WBC）总数；吸取 0.01mL 涂片，
瑞氏染色后计嗜酸性粒细胞 （Eos）数 （至少计数 200 个细
胞）[8-9]。
1.9 统计学方法 所有实验数据均用统计软件 SPSS for
Windows 10.0 进行方差分析，组间均数差异用 t 检验。
2 实验结果
2.1 小鼠氨水引咳实验 结果见表 1。 采用小鼠氨水引喘的
实验方法初步筛选出：天山花楸叶的乙酸乙酯提取物、丙酮
提取物具有止咳作用，天山花楸果的乙酸乙酯提取物具有止
咳作用。 在天山花楸叶、果的系统溶剂提取物中，乙酸乙酯提
取物的止咳作用最好（P＜0.01），所以乙酸乙酯提取物为天山
花楸止咳的有效提取部位。
表 1 天山花楸叶与果不同部位止咳作用（x±s，n=15）
组别
3min 内咳嗽次数
阳性对照药组 65.00±7.37**
天山花楸石油醚提取物Ⅰ 92.17±3.87 96.50±4.17
天山花楸氯仿提取物Ⅱ 81.38±7.65 89.11±4.42
天山花楸乙酸乙酯提取物Ⅲ 76.92±3.92** 77.57±4.16**
天山花楸正丁醇提取物Ⅳ 88.86±6.28 89.33±3.32
天山花楸丙酮提取物Ⅴ 79.18±6.05* 85.75±3.36
天山花楸乙醇提取物Ⅵ 87.88±6.66 88.62±7.54
叶 果
阴性对照药组 97.91±10.75
注：与阴性对照药组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
2.2 豚鼠平喘法 结果见表 2。 采用豚鼠平喘的实验方法初
步筛选出： 天山花楸叶与果的乙酸乙酯提取物具有平喘作
用，为天山花楸平喘的有效提取部位。
表 2 天山花楸叶与果不同部位平喘作用（x±s，n=7）
组别
引喘潜伏期（s）
阳性对照药组 114.0±9.6**
天山花楸乙酸乙酯提取物组 89.5±9.4* 93.3±25.6*
天山花楸丙酮提取物组 77.8±8.0 81.3±14.4
叶 果
阴性对照药组 3.0
注：与阴性对照药组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
2.3 小鼠卵蛋白复制法 模型组小鼠白细胞总数与嗜酸
性粒细胞数明显高于假模组 ， 两者相比具有显著性差异
（P＜0.01），说明造模成功 。 阳性对照药组 、天山花楸叶乙
酸乙酯提取物组中的白细胞总数和嗜酸性粒细胞数均明
显少于哮喘模型组（P＜0.05）。 结果见表 3。 采用小鼠卵蛋
白复制法建立的哮喘模型初步筛选出：天山花楸叶乙酸乙
酯提取物为天山花楸平喘的有效提取部位。
表 3 各组哮喘小鼠 BALF中白细胞总数和嗜酸粒细胞计数（x±s，n=10）
假模组
组别
0.045±0.015
白细胞总数（×109）
6.12±2.03
嗜酸粒细胞计数（%）
模型组 0.16±0.021** 10.80±2.49**
阳性对照药组 0.11±0.018▲ 7.86±1.35▲
天山花楸叶乙酸乙酯提取物组 0.12±0.045▲ 8.43±1.72▲
天山花楸叶丙酮提取物组 0.14±0.042 9.43±2.82
注：与假模组比较，**P＜0.01；与模型组比较，▲P＜0.05，
▲▲P＜0.01。
3 讨论
咳嗽是一种重要的防御机制， 主要有两方面的作用：阻
止异物进入下呼吸道；清除下呼吸道的异物和痰液，从而消
除刺激因子的存在，减轻支气管哮喘、支气管炎等疾病的症
状。在临床上，平喘药也常常与止咳药一同使用。所以本实验
在筛选天山花楸平喘作用的有效部位的时候，是以具有止咳
作用为基础，再进行平喘有效部位的筛选。 小鼠氨水引咳实
验结果显示：天山花楸叶的乙酸乙酯和丙酮提取物均具有止
咳作用，所以在研究天山花楸平喘作用的相关实验中（即豚
鼠引喘实验和小鼠卵蛋白复制实验）， 选取天山花楸叶的乙
酸乙酯和丙酮提取物作为研究对象。
豚鼠引喘实验是呼吸药理学的一个标准方法 ，引喘实
验用致痉剂造成动物支气管收缩可以模拟哮喘急性发作
期的呼吸道阻塞症状，这种模型可用于观察药物的平滑肌
松弛作用 。 本研究采用组胺 、乙酰胆碱作为致痉剂 ，实验
结果显示 ，天山花楸叶的乙酸乙酯提取物对于由 0.1%His
和 2%Ach 等体积混合液喷雾所致豚鼠哮喘发作有抑制作
用。
支气管哮喘是Ⅰ型变态反应临床炎性综合征，主要发病
机制是再次进入的抗原诱发肥大细胞脱颗粒反应，导致后期
嗜酸性粒细胞浸润，诱发呼吸道高阻力。 吸入激素并不能从
根本上逆转哮喘的自然病程， 不能纠正潜在的免疫失调，长
期使用还会减弱机体的保护性免疫力， 引起全身性的副作
用。 中药治疗哮喘具有较好的远期疗效，以复制哮喘动物模
型筛选中药及其有效部位，并在此基础上进行干预成为该研
究领域的重要方法。 本研究结果表明：天山花楸叶的乙酸乙
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酯提取物能明显减少 BALF 中白细胞总数和 Eos 数， 具有平
喘作用。
实验结果表明， 天山花楸具有显著的止咳平喘作用，其
止咳平喘作用的有效提取部位主要为乙酸乙酯提取物，这为
进一步研究天山花楸药理作用提供一定的理论依据。
4 参考文献
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丁和金丝桃苷含量.中药材，2009，32（2）：232
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复制法.时珍国医国药，2010，21（1）：86
[9] 张媛媛.沙漠嘎种子平喘活性成分筛选及其质量研究 .北京：北
京中医药大学，2006
第一作者：陈欢（1986-），硕士研究生，研究方向为天然
药物分析及药效学研究。
通讯作者：唐辉，Th_pha@shzu.edu.cn
收稿日期：2011-12-16
编辑：吴 宁
狼毒为大戟科植物月腺大戟 （Euphorbia ebracteolata
Hayata）的干燥根，味辛，性平，有大毒。狼毒功擅逐水祛痰，破
积杀虫，主治水肿腹胀，痰、食、虫积，心腹疼痛，慢性气管炎，
咳嗽，气喘，淋巴结、皮肤、骨等结核，疥癣等 [1]。 本品药性峻
猛，毒副作用较大，中毒者主要表现为胃肠道反应，如恶心呕
吐、腹痛腹泻，严重者可出现胃肠道糜烂、溃疡以及出血，呈
现呕血、便血等。 狼毒生品多外用，醋炙后方可内服，旨在减
低其毒性，但其炮制机理研究鲜有报道。 本研究通过对给药
后小鼠胃组织重量、PGE2含量分析， 观察狼毒对动物胃黏膜
的刺激性作用以及醋炙前后刺激性作用的变化，为进一步阐
明狼毒炮制机理提供实验基础。
1 实验材料
1.1 实验仪器 Nikon E600 型生物显微镜 （上海泽仕光电
科技有限公司），r-911 全自动放免计数仪 （中国科技大学实
业总公司）， 日本日立 7160 全自动生化仪，AG285 电子天平
（瑞士 METTLER 公司），80-2B 离心机 （上海安亨科学仪器
厂），高速匀浆机（厂商：SCIENTZ，由上海京工实业有限公司
提供），高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。
1.2 试药 狼毒由安徽省亳州市安国以岭中药饮片有限公
司提供，经南京中药大学中药鉴定教研室刘训红教授鉴定为
大戟科植物月腺大戟的干燥块根。 生理盐水（南京小营药业
集团有限公司）， 甲醛 （分析纯， 上海久亿化学试剂有限公
司）。 醋狼毒：按照 2010 版《中国药典》“狼毒”项下制得，取净
狼毒，加入适量的醋拌匀，闷润至醋被吸尽，文火炒干，取出，
晾凉，每 100kg 狼毒，用醋 30kg。 吲哚美辛肠溶片（山西云鹏
制药有限公司，批号：A100901），生理盐水（南京小营药业集
团有限公司，批号 20110045304），总蛋白试剂盒（中生北控股
有限公司），前列腺素 E2 放免分析试剂盒（北京华英生物技
狼毒醋炙前后毒性比较研究
汪兰云 庄 果 李俊松 蔡宝昌
（南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心，江苏南京 210029）
摘 要 目的：比较狼毒醋炙前后对动物胃黏膜的刺激性变化情况。 方法：比较狼毒醋炙前后单次大剂量给药后小
鼠脏器病理切片，观察其对小鼠消化系统脏器的重量与 PGE2含量的影响。 结果：病理切片显示狼毒对小鼠胃黏膜有明显
刺激性。狼毒经炮制后对小鼠胃体重量、PGE2含量的影响较生狼毒明显减轻。结论：经过醋炙后狼毒对动物胃黏膜的刺激
性比生品时显著减弱。
关键词 狼毒 醋炙 毒性 实验研究
中图分类号 R282.710.2 文献标识码 A 文章编号 1672-397X（2012）06-0071-02
基金项目：国家公益性行业专项基金项目（200807039）；南京中医药大学中药学一级学科开放课题（2011ZYX2-011）
实 验 研 究
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