全 文 ：高效液相色谱法测定
天山花楸叶中槲皮素和山奈素含量*
李乐1，吕顺忠2，唐辉1
(1．石河子大学药学院，石河子 832000;2．新疆医科大学第一附属医院药剂科，乌鲁木齐 830000)
摘 要 目的 建立同时测定天山花楸叶中槲皮素和山奈素含量的方法。方法 色谱柱: Diamonsil C18( 250 mm×
4． 6 mm，5 μm，) ;流动相为甲醇-乙腈( 50∶ 50) ;流速 0． 9 mL·min－1 ;检测波长: 360 nm;柱温: 40 ℃。结果 天山花楸中
槲皮素的含量为 48． 22 mg·g－1 ;山奈素含量为 20． 57 mg·g－1 ;平均回收率分别为 99． 72%，98． 58%。结论 该方法准
确，简便，可作为天山花楸叶中槲皮素和山奈素的含量测定方法。
关键词 天山花楸; 槲皮素;山奈素;含量测定
中图分类号 R284． 1 文献标识码 A 文章编号 1004－0781( 2013) 07－0926－02
Determination of Quercetin and Kaempferol in the Leaves of Sorbus tianschanica Ruper
by HPLC
LI Le1，LV Shun-zhong2，TANG Hui1( 1． College of Pharmacy，Shihezi University，Shihezi832000; 2． Department
of Pharmacy，the First Hospital Affialited with Xinjiang Medical University，Urmuqi 830000)
ABSTRACT Objective To establish an HPLC assay for quercetin and kaempferol in the leaves of Sorbus tianschanica
Ruper． Methods An HPLC-method was developed using Diamonsil C18 column ( 250 mm×4． 6 mm，5 μm) and the mobile
phase cotaining methanol-acetonitrile( 50∶ 50) ，and the UV detection was performed at 360 nm． The flow rate was 0． 9 mL·
min－1 and temperature was set at 40 ℃ ． Results The quercetin and kaempferol content was 48． 22 mg· g－1 and
20． 57 mg·g－1，respectively． The average recovery ( n = 5 ) of the method was 99． 72% and 98． 58% for quercetin and
kaempferol，respectively． Conclusion The method is accurate，simple and can be used for detecting quercetin and kaempferol
in the leaves of Sorbus tianschanica Ruper．
KEY WORDS Sorbus tianschanica Ruper; Quercetin; Kaempferol; Content determination
天山花楸为蔷薇科(Roseceae)花楸属(Sorbus)植
物，主要产自新疆各地，如伊犁、博乐、阜康、乌鲁木齐
南山等，为维吾尔民间用药，1980 年载入新疆药品标
准［1］。天山花楸叶、果具有平喘镇咳祛痰，依赖性地
抑制心肌收缩和保护心肌缺血等作用。本课题组成员
在前期工作中，对天山花楸的枝叶及果实进行化学成
分研究和药效学筛选，药理学研究表明黄酮类化合物
为天山花楸活性成分，槲皮素和山奈素为其中两种成
分。本实验通过高效液相色谱法，同时测定了天山花
楸中的两种黄酮类化合物槲皮素和山奈素的含量，为
收稿日期 2012－11－12 修回日期 2013－01－11
基金项目 * 国家自然科学基金资助项目(81260627) ;石
河子大学 2012 教育教学改革立项项目(JG-2012－081) ;石河子
大学 3152 青年骨干教师培养计划;石河子大学药学院中青年
教师科研基金(YXYZQJJ2011B05)
作者简介 李乐(1981－) ，男，新疆石河子人，讲师，硕士，
主要从事药物分析，药品检验工作。电话:(0)13399931088，E-
mail:lile1109@ sohu． com。
通讯作者 唐辉(1967－) ，女，重庆人，教授，博士，主要从
事新疆特种植物药的开发与利用研究工作。电话: (0)
13909938508，E-mail:th_pha@ shzu． edu． cn。
天山花楸的进一步研究提供一定的理论基础。
1 仪器与试剂
日本岛津 SPD-10A 高效液相色谱仪。槲皮素对
照品(中国食品药品检定研究院，批号:100081-
200406) ，山奈素对照品(中国食品药品检定研究院，
批号:110861-200405)。甲醇，乙腈均为色谱纯，其他
试剂为分析纯。天山花楸采自玛纳斯林场，经石河子
大学药学院高级实验师陈玉怀鉴定为 Sorbus
tianschanica Ruper。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18(250 mm
×4． 6 mm，5 μm) ;流动相为甲醇-乙腈(50∶50) ;流速
0． 9 mL·min－1;检测波长:360 nm;柱温为 40 ℃，进样
量为 20 μL。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照
品 15 mg和山奈素对照品 30 mg，加甲醇溶解并定容
至 100 mL量瓶，即得混合对照品母液。
2． 3 供试品溶液的制备 取烘干至恒重的天山花楸
叶，粉碎后过孔径(355±13)μm(三号)筛，根据课题组
前阶段正交设计优选方案［2］，取粉末约0． 5 g，采用 50%
乙醇回流提取，提取时间 150 min，提取次数 3 次，料液
·829· Herald of Medicine Vol. 32 No. 7 July 2013
比为 1∶8，经孔径 0． 45 μm微孔滤膜滤过，即得［3］。
2． 4 线性关系考察 精密量取对照品溶液 1． 0，2． 0，
3． 0，4． 0，5． 0 mL 置 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，吸取 20 μL 注入液相色谱仪，记录相应的峰面积
值，以峰面积(Y)和进样量(X)做回归方程，得槲皮素
回归方程:Y =29 630X－1 594(r = 0． 999 6)。山奈素
回归方程为:Y = 30 445X－8 768(r = 0． 999 4)。表明
槲皮素在 0． 15 ～ 0． 75 μg，山奈素在 0． 3 ～ 1． 5 μg 的
范围内线性关系良好。
2． 5 精密度实验 精密吸取同一供试品溶液，连续进
样 6 次，槲皮素和山奈素的峰面积 RSD分别为 0． 92%
与 1． 25%(n=6)。
2． 6 重复性实验 精密称取天山花楸叶粉末 0． 5 g，
按照“2． 3”项制备 6 份供试品溶液，测定，计算槲皮素
及山奈素含量，RSD分别为 1． 17%及 1． 83%(n=6)。
2． 7 稳定性实验 取同一份供试品溶液分别在 0，2，
4，6，8，12 h测定，峰面积 RSD为 0． 58%与 1． 37%(n=
6) ，结果表明槲皮素与山奈素在 12 h内稳定性良好。
2． 8 回收率实验 精密称取已知含量的天山花楸粉末 5
份，精密加入槲皮素和山奈素对照品溶液，按照供试液制
备项下的方法制得供试溶液，精密量取供试品溶
液 20 μL，在“2． 1”项色谱条件下进行测定，计算加样回收
率，结果槲皮素的平均回收率为 99． 72%，RSD为 1． 39%;
山奈素的平均回收率为 98． 58%，RSD为 1． 17%。
2． 9 样品测定 取样品 0． 5 g，制备供试品溶液，进样
测定样品中的槲皮素与山奈素含量，按照外标法计算，
结果 3 批样品测定槲皮素含量分别为 48． 32，47． 38，
48． 76 mg·g－1，平均含量 48． 22 mg·g－1。山奈素含量
分别为 20． 37，20． 63，20． 71 mg · g－1，平均含
量 20． 57 mg·g－1。
3 讨论
花楸属植物对于糖尿病具有一定的治疗效果［4］，
天山花楸植物中总黄酮成分对糖尿病患者治疗的活性
成分尚未明确，药理活性还需进一步验证。
笔者在本研究中所测定的槲皮素、山奈素均为黄
酮类化合物。该类成分为天山花楸的药效成分之
一［5-7］。该方法建立在多次调整流动相比例的基础上，
分离效果理想，精密度与重复性较好，测定结果稳定，
准确，能够对天山花楸叶的质量评价提供分析方法，为
该种新疆特种植物的开发提供了黄酮类含量依据，对
于民族医药的继承和发扬具有重要意义。
参考文献
［1］ 新疆自治区卫生厅，新疆中草药编写组． 新疆中草药
［M］．乌鲁木齐:新疆人民出版社，1975:92．
［2］ 张芹，李鹏，唐辉，等．高效液相法测定天山花楸中的绿原
酸含量［J］．时珍国医国药，2008，19(1) :59．
［3］ 张芹，李鹏，唐辉，等． 天山花楸中总黄酮和槲皮素测定
［J］．石河子大学学报，2006，24(6) :709．
［4］ 刘婷，库文波，王婷，等．水蒸气蒸馏和超临界萃取薰衣草
精油抗氧化作用研究［J］．时珍国医国药，2009，20(12) :
3035－3037．
［5］ 李迪民 陈坚．天山花楸醇提取物药理作用的研究［J］．西
北药学杂志，1999，14(1) :14．
［6］ 付伟，刘婷，杨彩玉，等． 天山花楸叶总黄酮对大鼠心肌
缺血-再灌注损伤的保护作用［J］． 中国药理学通报，
2010，26(2) :251－253．
［7］ 张芹，李根，唐辉，等．天山花楸不同提取部分对心肌缺血
保护作用的筛选［J］． 中国药理学通报，2009，25
(2) :277－278．
DOI 10． 3870 /yydb． 2013． 07． 028
星点设计-效应面法优化健脾益气汤的提取工艺*
谷丽艳，张立德，张昊，张旭
(辽宁中医药大学，沈阳 110032)
摘 要 目的 采用星点设计-效应面法优化健脾益气汤的提取工艺。方法 以水煎法提取健脾益气汤中的有效
部位，以黄芪甲苷和黄芪多糖的含量为指标，采用星点设计-效应面法考察提取次数、溶媒用量、提取时间 3 个因素对黄
芪甲苷和黄芪多糖的含量影响，优选最佳提取工艺条件。结果 最佳提取工艺为加水提取 2 次，每次 1． 5 h，溶媒量为 8
倍。按优化后处方提取的黄芪甲苷和黄芪多糖的含量较高。结论 星点设计-效应面法所建立的健脾益气汤提取工艺
的数学模型预测性良好。
关键词 健脾益气汤;黄芪甲苷;黄芪多糖;星点设计-效应面法
中图分类号 R289． 5; R284． 2 文献标识码 A 文章编号 1004－0781( 2013) 07－0929－05
Optimizing Extraction of Jianpi Yiqi Decoction by Central Composite Design-Response
·929·医药导报 2013 年 7 月第 32 卷第 7 期