全 文 ：中国药物与临床 2015 年 8 月第 15 卷第 8 期 Chinese Remedies & Clinics，August 2015,Vol.15,No.8
水蔓菁属于玄参科（Scrophulariaceae）婆婆纳属（Veroni-
ca）带花穗全草，7～9 月茎叶繁茂时采收，除去杂质，晒干。 用
于治疗支气管炎，肺脓疡，急性肾炎尿路感染，疖肿，收载于
《山西省中药材标准》1987 年版及《山东省中药材标准》。 近
年研究发现，婆婆纳属植物中酚性成分具有明显的抗菌消炎
活性［1，2］。 其中黄酮类成分具有明显的镇咳，体外促凝血和清
除自由基活性［3］。 有机酸类成分有保肝抗肿瘤的药理作用［4］。
目前，现有的水蔓菁的质量标准未收载有效成分的含量及水
蔓菁的定性鉴别，本文拟采用高效液相色谱法，对主产区运
城生产的水蔓菁中的原儿茶酸进行含量测定和指纹图谱鉴
定，并进行比较，以期为控制水蔓菁的质量和运城水蔓菁的
深度开发及利用提供重要理论基础。
1 仪器与材料
1．1 仪器：Waters e2695 高效液相色谱仪 （二级管阵列检测
器、自动进样器）；DZKW-S-4 型电热恒温水浴锅；梅特勒-托
利多 AB135-S 电子分析天平。
1．2 材料：10 批水蔓菁药材来源见表 1， 各批药材均由陕西
中医学院雷国莲教授鉴定为玄参科植物水蔓菁 Veronica
linariifolia Pall．ex Link subsp．Dilatata（Nakai et Kitag．）Hong 带
花穗全草，其中把 S4 作为对照药材。 原儿茶酸由中国药品生
物制品检定所提供，批号 110809-200604。 甲醇为色谱纯，水
为超纯水，其他试剂为分析纯。
2 结 果
2．1 色谱条件
色谱柱 ：岛津 VP-ODS（250 mm × 4．6 mm，5 μm），Serial
No．0062450，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-
0．1％磷酸溶液（13∶87）；检测波长为 260 nm；流速：1．0 ml/min；
柱温：30 ℃；进样量：对照品溶液、供试品溶液各进样 5 μl。在
此色谱条件下，供试品中的原儿茶酸与其他杂质峰能达到基
线分离。
2．2 水蔓菁的指纹图谱
2．2．1 参照物溶液的制备：取原儿茶酸对照品适量，精密称
定，加水制成每 1 ml 含 0．1 mg 的溶液，即得。 取水蔓菁对照
药材约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 15％甲醇
20 ml，称定质量，摇匀，密塞，浸渍 24 h，加热回流提取 3 h，
放冷，再称定质量，用 15％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，
取续滤液，即得。
2．2．2 供试品溶液的制备：取 9 批供试品粉末（过三号筛）各
约 1 g，精密称定 ，置具塞锥形瓶中 ，精密加入 15％甲醇 20
ml，称定重量，摇匀，密塞，浸渍 24 h，加热回流提取 3 h，放
冷，再称定质量，用 15％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取
续滤液，即得。
2．2．3 指纹图谱的建立：取参照物溶液（108．7 μg/ml），对照
药材溶液及供试品溶液进样量 5 μl，按“2．1”色谱条件，测定，
10 批样品的指纹图谱。
10批水蔓菁药材（S4 为对照药材）的指纹图谱中。 具有 5
个特征峰。S 号峰为指标成分峰（原儿茶酸）。相对保留时间及
可变范围见表 2。
2．2．4 高效液相色谱特征图谱鉴定方法验证：分离度、理论
塔板数及拖尾因子良好，见表 3。
峰面积及保留时间重现性良好：见表 4。
2．3 水蔓菁中原儿茶酸的含量测定
2．3．1 供试品溶液的制备： 取本品粉末（过三号筛）约 1 g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 15％甲醇 20 ml，称定质
量，摇匀，密塞，浸渍 24 h，加热回流提取 3 h，放冷，再称定质
量，用 15％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即
得。
2．3．2 对照品溶液的制备：取原儿茶酸对照品适量，精密称
定，加水制成每 1 ml 含 0．1 mg 的溶液，即得。
2．3．3 线性关系考察： 精密量取原儿茶酸对照品溶液（108．7
μg/ml） 分别进样 1，2，3，4，5，6，7，8，10， 16 μl 注入液相色谱
仪，测定峰面积 Y，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐
标，作标准曲线，得回归方程：Y＝3926．6X－38753，r＝1．0000，结
果显示进样量在 108．7~1739．2 μg/ml 范围内有良好的线性关
系。
·药物研究·
水蔓菁的指纹图谱和质量控制研究
樊巧串
DOI：10.11655/zgywylc2015.08.063
作者单位：044000 山西省运城市食品药品检验所中药室
表 1 水蔓菁药材来源
序号 采集地 时间 序号 采集地 时间
S1 山西稷山县 1 2014年 9 月 S6 山西河津市 1 2014年 8 月
S2 山西稷山县 2 2014年 9 月 S7 山西河津市 2 2014年 9 月
S3 山西万荣县 1 2014年 9 月 S8 山西河津市 3 2014年 9 月
S4 山西万荣县 2 2014年 9 月 S9 山西万荣县 4 2014年 9 月
S5 山西万荣县 3 2014年 8 月 S10 山西万荣县 5 2014年 8 月
表 2 水蔓菁对照药材 5 个特征峰相对保留时间及可变范围
峰号 1号峰 2号峰 S峰（原儿茶酸） 3号峰 4号峰
相对保留时间 0．56 0．89 1．00 1．85 2．83
可变范围 ±0．05 ±0．05 ±0．05 ±0．05
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表 3 3 批水蔓菁药材中原儿茶酸分离度 理论塔板数及拖尾因子
样品 对照品 保留时间（min） 理论塔板数 分离度 拖尾因子
S2 原儿茶酸 13．617 14 068 3．283 0．92
S5 13．700 13 862 3．123 0．95
S7 13．630 13 919 3．199 0．91
2．3．4 精密度试验 ：取对照品溶液 （108．7 μg/ml），进样量 5
μl，按“2．1”色谱条件，重复进样 6 次，测定峰面积，结果 RSD
为 1．2％（n＝6），表明方法精密度良好。
2．3．5 稳定性试验：取供试品溶液（样品 S9），按“2．1”色谱条
件，每隔一定时间进样 1 针，测定峰面积，结果 RSD 为 1．6％，
显示供试品溶液至少在 24 h 内基本稳定。
2．3．6 重复性试验：精密称取样品（S6）6 份，按“2．3”项下方
法平行操作，制备 6 份供试品试液，按“2．1”项下方法测定，结
果原儿茶酸的平均含量为 4．8826 mg/g， 原儿茶酸峰面积的
RSD＝1．7％（n＝6）。
2．3．7 加样回收率试验：精密称定已知原儿茶酸含量的样品
（S9）的水蔓菁样品 6 份，每份约 0．5 g，每份加原儿茶酸对照
品溶液适量，按“2．3”项下方法制备供试品溶液，按“2．1”项下
色谱条件测定峰面积，由回归方程计算样品中原儿茶酸的含
量，结果平均回收率为 98．62％，RSD＝1．9％，表明加样回收率
良好。
2．3．8 含量测定： 分别精密称取 10 批水蔓菁粉末 （过三号
筛）各 1 g，以“2．5” 项下线性 5 μl 溶液作为对照品进样量，
按“2．3．1”项下制备供试品溶液，供试品溶液进样量 5 μl，按
“2．1”色谱条件进行测定，计算原儿茶酸的含量，结果见表 5。
3 讨 论
本实验建立了水蔓菁的指纹图谱，对水蔓菁的真伪鉴别
具有比较高的研究价值。 实验表明，水蔓菁药材应有与水蔓
菁对照药材指纹图谱相对保留时间范围内一致的 5 个特征
峰；目前国内资料还没有对水蔓菁的高效液相色谱建立比较
详细的指纹图谱，本实验对以后更深入的研究提供一定的参
考价值。
为了更好的控制水蔓菁的质量，本实验分别对甲醇－水、
乙腈－水、甲醇－0．1％磷酸溶液等不同溶剂系统的不同比例进
行了实验，以甲醇－ 0．1％磷酸溶液（13∶87）为流动相，检测波
长 260 nm 时，色谱峰响应值适中，分离度最好，峰形也好，并
且流动相用甲醇减少污染。
10 批水蔓菁药材含量差别不大， 从表 5 中发现水蔓菁
S2 和 S4 的药材中原儿茶酸含量均最低，经分析原因，主要为
该批药材叶子较少，花穗较少，大部分为梗，可能和采收时间
也有一定的关系，故含量较低。 笔者以后将进行进一步的研
究。
参 考 文 献
［1］ 洪俊丽，秦民坚，吴刚，等，水蔓菁中的酚性成分［J］．中国天然
药物，2008，6（2）：126-128．
［2］ Harput US，Saracogu I，Inoue M． Anti-inflammatory and cytotoxic
activit ies of five Veronica species［J］． Biol P Harm Bull，2002，
25（4）：4832-4836．
［3］ 都述虎，金继曙． 仙桃草主要化学成分体外促凝血作用［J］． 中
草药，1996，27（7）：4162-4171．
［4］ Tseng TH，Hsu JD，Lo MH． Inhibitory effect of Hibiscus proto-
catechuic acid on tumor promotion in mouse skin ［J］． Cancer
Lett，1998，126（2）：1992-2071．
（收稿日期：2014-12-23）
表 4 5 批水蔓菁药材中原儿茶酸峰面积及保留时间重现性
峰面积 保留时间（min）
1 1 393 202 13．624
2 1 381 920 13．239
3 1 411 615 13．353
4 1 375 363 13．396
5 1 440 657 14．009
平均数 1 400 551 13．524
相对标准偏差（％） 1．87 2．24
试验
表 5 样品含量（%）测定结果
批号 含量 1 含量 2 平均
S1 0．360 0．362 0．36
S2 0．237 0．232 0．23
S3 0．347 0．345 0．35
S4 0．199 0．197 0．20
S5 0．399 0．399 0．40
S6 0．375 0．379 0．38
S7 0．348 0．346 0．35
S8 0．385 0．386 0．39
S9 0．311 0．311 0．31
S10 0．366 0．356 0．36
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