全 文 :2015 年 6 月 1 日 第 6 期
No. 6 1 June 2015
中 医 学 报
CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 30 卷 总第 205 期
Vol. 30 Serial No. 205
[10]赵秀.小茴生理活性成分的研究进展[J].食品工业科技,2013,
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味品,2012,10(37):15 - 17.
收稿日期:2015 - 01 - 04
作者简介:王婷(1990 -),女,河南郑州人,硕士研究生,研究
方向:药理学。
通信作者:苗艳艳(1978 -),女,医学博士,副研究员,研究方
向:中药药理与新药研究。Email:13823276201@ 139. com
编辑:纪彬
水蔓菁总黄酮的含量测定*
吴宿慧,王琳琳,李瑞琴,曹珊,左艇,史晶晶,苗明三
河南中医学院,河南 郑州 450046
摘要:目的:采用比色法建立水蔓菁有效部位中总黄酮含量测定的方法。方法:以芦丁为对照品,采用氢氧化钠、亚硝酸钠和
硝酸铝为显色剂,采用紫外分光光度法在 510 nm 波长下测定水蔓菁有效部位中总黄酮的含量。结果:芦丁的线性范围为
0. 012 ~ 0. 072 g·L -1,r = 0. 999 6。水蔓菁提取物中总黄酮的含量为 91. 07%,RSD = 0. 98%,n = 6。结论:该含量测定方法简
便、快速,稳定性和重复性良好,适用于测定水蔓菁有效部位中总黄酮的含量,且提取率较高。
文献引用:吴宿慧,王琳琳,李瑞琴,等.水蔓菁总黄酮的含量测定[J].中医学报,2015,30(6):858 - 860.
关键词:水蔓菁总黄酮;紫外分光光度法;含量测定
DOI:10. 16368 / j. issn. 1674 - 8999. 2015. 06. 296
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1674 - 8999(2015)06 - 0858 - 03
Assaying of Total Flavonoid in Veronica Linariifolia
WU Suhui,WANG Linlin,LI Ruiqin,CAO Shan,ZUO Ting,SHI Jingjing,MIAO Mingsan
Henan University of Traditional Chinese Medicine,Zhengzhou Hennan China 450046
Abstract:Objective:To establish the method for the content determination of total flavonoids in the effective fraction of Veronica linari-
ifolia. Methods:Ultraviolet spectrophotometry was applied using aluminum nitrat、sodium nitrite and NaOH as colour-display reagent,ru-
tin as reference substance. The detection wavelength was set at 510nm. Results:The linear range of rutin was 0. 012 - 0. 072 g·L -1
(r = 0. 999 6),and the average content of total flavonoid in Veronica linariifolia was 91. 07%,RSD = 0. 98%(n = 6). Conclusion:the
method was accuracy,simple and rapid,the reproducibility was good,and so the method was suitable for the content determination of to-
tal flavonoids in the effective fraction of Veronica linariifolia.
Reference citation:WU Suhui,WANG Linlin,LI Ruiqin,et al. Assaying of Total Flavonoid in Veronica Linariifolia[J]. China Journal
of Chinese Medicine,2015,30(6):858 - 860.
Key words:total flavonoids of veronica linariifolia;ultraviolet spectrophotometry;assaying
水蔓菁为民间草药,最早用于解饥,《救荒本草》《植物
名实图考》[1]云:“叶味甜。采苗叶炸熟,油盐调食。”随着民
* 基金项目:河南省高校科技创新团队(2012IRTSTHN011);
郑州市科技创新团队(131PCXTD612);河南中医学院中药新
药创制与道地药材深加工协同创新中心{〔2012〕188 - 2}
间对水蔓菁的逐步认识,发现了水蔓菁具有一定的治疗作用,
《中华人民共和国药典》[2]载:“性味:苦,性微寒。功能与主
治:清热解毒、利尿、止咳化痰。在民间有“中药抗生素”之
称[3]。目前以水蔓菁为主要原料制成的制剂有勒马回片(在
应用中发现其对泌尿系统感染、慢性前列腺炎、前列腺增生及
泌尿系结石有很好的疗效[4]、但其中化学成分尚不清楚[5])、
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勒马回胶囊、勒马回注射液、复方勒马回颗粒(水蔓菁 500 g,
板蓝根 300 g,北沙参 100 g,桑白皮 300 g,桔梗 300 g,百部 300
g,麻黄 100 g,甘草 100 g)。水蔓菁也用于外用药中,如消肿止
痛贴(沙蒿子、水蔓菁、薄荷脑),具有清热消肿、止痛的功效。
用于疖疮初起,关节肿痛的辅助治疗。为了阐明水蔓菁临床
应用的物质基础,本研究对其活性成分黄酮类物质进行了提
取、纯化与含量测定,以期为水蔓菁总黄酮的药理研究提供依据。
1 实验材料
1. 1 仪器 岛津 UV-2201 型紫外可见分光光度计;UV-2000
紫外可见分光光度计,由尤尼柯(上海)仪器有限公司生产;
FA(N)/ JA(N)系列电子天平,由上海民桥精密仪器有限公
司生产了;旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂生产。
1. 2 试剂 芦丁对照品(供 UV 法含量测定用),中国药品
生物制品检定所生产;甲醇,天津市科密欧化学试剂开发中
心;亚硝酸钠,武汉市楚江化工有限责任公司;硝酸铝,天津
市天河化学试剂厂;氢氧化钠,郑州派尼化学试剂厂;聚酰胺
(柱层析用,60 ~ 90 目),上海斯凰生物科技有限公司。
1. 3 药材 水蔓菁为玄参科婆婆纳属植物水蔓菁 Veronica
linariifolia Pall. ex Link subsp. Dilatata (Nakai et Kitag)Hong
的干燥全草,曾收载于《中华人民共和国药典》1977 年版一
部中。本课题所用药材采集于郑州市中牟县,经河南中医学
院曹继华教授鉴定为玄参科植物水蔓菁。
2 方法与结果
2. 1 水蔓菁总黄酮的提取工艺 取药材,切碎,置圆底烧瓶
中,加 10 倍量乙醇(体积分数 95%)浸泡 30 min 后,回流提
取 1 h,滤过,药渣加 8 倍量乙醇(体积分数 95%)再回流提
取 2 次,每次 1 h,滤过,合并 3 次滤液,减压回收乙醇。浸膏
加适量水溶解,用石油醚萃取 3 次,取水层浓缩后加入已处
理好的聚酰胺柱中,用蒸馏水洗脱至洗脱液无色,然后用体
积分数 95%乙醇洗脱,收集洗脱液,至洗脱液中不含黄酮类
成分为止,回收乙醇,水浴挥干即得水蔓菁提取物。水蔓菁
药材中总黄酮的得率为 1. 144%。
2. 2 对照品溶液的制备[6] 精密称取干燥至恒质量的芦丁
对照品 15 mg,置于 5 mL容量瓶中,加甲醇超声使其溶解,定
容至刻度,摇匀,精密量取 2. 5 mL,置 25 mL 容量瓶中,加水
至刻度,摇匀,即得质量浓度 0. 3 g·L -1的对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 精密称取干燥至恒质量的水蔓菁
总黄酮 15 mg,置于 5 mL容量瓶中,加甲醇超声使其溶解,定
容至刻度,摇匀,精密量取 2. 5 mL,置 25 mL 容量瓶中,加水
至刻度,摇匀,即得。
2. 4 测定波长的选择 精密量取对照品溶液、供试品溶液
3. 0 mL,分别置 25 mL容量瓶中,各加水至 6 mL,摇匀,加体
积分数 5%亚硝酸钠溶液 1 mL,摇匀,放置 6 min,加体积分
数 10%硝酸铝溶液 1 mL,摇匀,放置 6 min,加氢氧化钠试液
10 mL,再加水至刻度,摇匀,放置 15 min。再精密量取对照
品溶液、供试品溶液 3. 0 mL,分别置 25 mL容量瓶中,各加水
至刻度,摇匀,分别作为对照品溶液、供试品溶液的空白对照
溶液。参照紫外分光光度法[7],用紫外可见分光光度计在
200 ~ 900 nm范围扫描,得紫外可见吸收光谱图,结果在 510
nm处有最大吸收峰,见图 1、图 2。
2. 5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液 1. 0 mL,2. 0
mL,3. 0 mL,4. 0 mL,5. 0 mL,6. 0 mL,分别置 25 mL 容量瓶
中,各加水至 6 mL,摇匀,加体积分数 5%亚硝酸钠溶液 1
mL,摇匀,放置 6 min,加体积分数 10%硝酸铝溶液 1 mL,摇
匀,放置 6 min,加氢氧化钠试液 10 mL,再加水至刻度,摇匀,
放置 15 min。精密吸取蒸馏水 6 mL,置 25 mL 容量瓶中,得
空白对照溶液。在 510 nm 波长处测定吸收度,以吸收度为
纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。回归方程为 Y =
0. 024 5 + 10. 078 6X,r = 0. 999 6。线性范围为:0. 012 ~
0. 072 g·L -1。见表 1。
图 1 芦丁对照品吸收光谱图
图 2 水蔓菁总黄酮吸收光谱图
表 1 水蔓菁总黄酮含量测定标准曲线数据
序号 对照品溶液体积(v /mL) 对照品溶液浓度(ρ / g·L - 1) 吸收度
1 1. 0 0. 012 0. 143
2 2. 0 0. 024 0. 266
3 3. 0 0. 036 0. 390
4 4. 0 0. 048 0. 515
5 5. 0 0. 060 0. 622
6 6. 0 0. 072 0. 751
2. 6 含量测定 精密称取干燥至恒质量的水蔓菁提取物 15
mg,置于 5 mL容量瓶中,加甲醇超声使其溶解,定容至刻度,
摇匀,精密吸取 2. 5 mL,置 25 mL 容量瓶中,加水至刻度,摇
匀,即得供试品溶液。精密量取供试品溶液 3 mL,置 25 mL
容量瓶中,加水至 6 mL,摇匀,加体积分数 5%亚硝酸钠溶液
1 mL,摇匀,放置 6 min,加体积分数 10%硝酸铝溶液 1 mL,
摇匀,放置 6 min,加氢氧化钠试液 10 mL,再加水至刻度,摇
匀,放置 15 min。再精密量取供试品溶液 3 mL,置 25 mL 容
量瓶中,加水至刻度,摇匀,作为空白对照溶液。照分光光度
法,在 510 nm波长处测定吸收度,由线性回归方程计算水蔓
菁总黄酮以芦丁(C27H30O16)为对照品对照其总黄酮含量。
按照上述方法测定提取的水蔓菁提取物中的总黄酮含
量,测定 6 次,水蔓菁提取物中总黄酮的含量为 91. 07%。见
表 2。
表 2 水蔓菁总黄酮含量测定结果
序号
吸收度
(A)
总黄酮
含量(/%)
平均含
量(/%)
RSD
(/%)
1 0. 358 91. 8 91. 07 0. 98
2 0. 352 90. 3
3 0. 356 91. 3
4 0. 360 92. 3
5 0. 351 90. 0
6 0. 354 90. 8
3 讨论
水蔓菁全草含甘露醇和黄酮苷[8]。本文采用紫外分光
光度法[9]对水蔓菁有效部位总黄酮进行测定,以芦丁标准品
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为对照,经全波长扫描确定最大吸收波长分别为 510 nm。本
实验提取的水蔓菁总黄酮回收率为 1. 144%,水蔓菁提取物
中总黄酮的含量为 91. 07%,符合要求,且乙醇提取法优于水
提取法[7]。紫外分光光度法测定水蔓菁中总黄酮,与其它方
法比较简便快捷,对仪器设备要求不高,重现性好,能满足实
验室对总黄酮含量的测定要求[10]。该测定方法合理、准确、
方便可行,可以为该药制定质量标准提供参考,并为该药的
进一步应用奠定基础。
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收稿日期:2015 - 01 - 20
作者简介:吴宿慧(1980 -),女,河南南阳人,理学博士,讲
师,研究方向:中药药理学。
通信作者:苗明三,男,教授,博士研究生导师,研究方向:中
药药理及中药临床。Email:miaomingsan@ 163. com
编辑:纪彬
石膏清热作用的物质基础及作用机制
周灏
安徽中医药大学,安徽 合肥 230038
摘要:石膏主要成分为硫酸钙,此外还含有铝、铜、锌、镍、鎂、铁、铅、钴等 20 多种微量元素。石膏退热作用的物质基础应该主
要与其所含钙盐和微量元素锌、镉、钴、铅等有直接联系。此外与铁、铜、硒等对免疫系统的调节作用从而控制感染起到间接
退热作用也有很大关系。总之石膏的退热作用应该是其所含的多种微量元素共同作用的结果。
文献引用:周灏.中石膏清热作用的物质基础及作用机制[J].中医学报,2015,30(6):860 - 862.
关键词:石膏;退热;物质基础;作用机制
DOI:10. 16368 / j. issn. 1674 - 8999. 2015. 06. 297
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1674 - 8999(2015)06 - 0860 - 03
Material Basis and Mechanism of Action About Clearing Heat of Plaster
ZHOU Hao
Anhui University of Traditional Chinese Medicine,Anhui Hefei China 230038
Abstract:Plasters main content is calcium sulfate,in addition,has more than 20 microelements,such as aluminum,copper,zinc,nick-
el,cobalt,magnesium,iron,lead,etc. Theres a direct relation about material basis with clearing heat of Shigao(Plaster)and calcium
salt,zinc,cadmium,cobalt,lead. In addition,iron,copper,selenium for the regulating effect of immune system to control infection and
indirect antifebrile effect also has a lot to do. In a word,the antifebrile effect which combined with many kinds of trace elements.
Reference citation:ZHOU Hao. Material Basis and Mechanism of Action About Clearing Heat of Plaster[J]. China Journal of Chinese
Medicine,2015,30(6):860 - 862.
Key words:shigao(plaster);antifebrile;material basis;mechanism of action
中药石膏首载于《神农本草经》谓其“气味辛,微寒,无 毒,主治中风寒热,心下逆气,口干舌焦,不能息,腹中坚痛,
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