全 文 :2011年 1月
第 24卷第 1期
黑龙江生态工程职业学院学报
JournalofHeilongjiangVocationalInstituteofEcologicalEngineering
Jan.2011
Vol.24 No.1
欧洲花楸组织培养育苗技术的研究
周 鑫 张树宝 宋洪文
(黑龙江林业职业技术学院 生态工程系 ,黑龙江 牡丹江 157011)
摘 要:欧洲花楸(Sorbusaucuparia)是世界园林重要的彩叶树种 , 近年来我国开始应用。 该树种种子深度休
眠 , 播种育苗发芽率很低 ,园林生产用苗木短缺 , 组织培养育苗可以短期内为生产提供大量优质苗木 , 解决生产需
要。通过研究 , 筛选出欧洲花楸组织培养育苗诱导培养基为:MS+6—BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L, 增值培养基:MS
+6—BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,生根培养基:1/2MS+NAA0.5mg/L。
关键词:欧洲花楸;组织培养;育苗;培养基
中图分类号:S792.25 文献标志码:A 文章编号:1674-6341(2011)01-0026-03
收稿日期:2011-01-03
作者简介:周鑫(1969-),男 ,黑龙江伊春人 ,副教授 ,硕
士。研究方向:植物学。
欧洲花楸(Sorbusaucuparia):蔷薇科 , 花楸属。原产欧
洲和亚洲西部 , 我国北方部分地区生长。春季花为白色 , 花
朵密集 , 繁花似锦 , 叶初春为红色 ,夏季为深绿色 ,秋季红色 ,
果橘红色 , 整个冬季至翌年 2月橘红色的果实宿存于枝头 ,
与瑞雪互映 , 是重要的观叶 、观花 、观果树种 , 用于庭院 、公
园 、广场 、小区绿化。但是欧洲花楸种子深度休眠 , 发芽率
低 , 催芽处理难度大 , 费用高 , 生产用苗奇缺 , 价格高 , 采用组
织培养技术可以在短期内获得大量优质苗木 , 解决生产需
求 , 同时为园林植物工厂化育苗提供理论依据。
1 实验材料及方法
1.1 材料选取
选取欧洲花楸一年生枝条作为实验材料。
1.2 材料处理
选取健壮的当年生枝条 ,用饱满而未萌发的侧芽作为外
植体。侧芽以枝条中段的为好。枝条去叶 , 剥去附在茎上的
叶柄及皮刺 , 然后切成小段 , 每段长 2 ~ 3cm。每段至少带有
一个侧芽 , 用水洗净 , 用滤纸吸干。在无菌条件下用 75%的
酒精消毒 30s,再用 0.1%的升汞消毒 10min,最后用无菌水冲
洗 5 ~ 7遍 ,在超净工作台上接种到培养基上。
1.3 培养基
1.3.1 诱导芽分化培养基
以 MS为基本培养基 , 蔗糖 3%, 琼脂 1%, pH为 5.8, 细
胞分裂素采用以 6—BA,生长素采用 NAA、IBA, 激素组合见
表 1,培养条件温度 25℃,光照 2000lx。
1.3.2 增值培养基
以 MS为基本培养基 , 蔗糖 3%, 琼脂 1%, pH为 5.8, 细
胞分裂素采用以 6—BA、KT。根据诱导生长情况 , 生长素采
用 NAA, 激素组合见表 2, 培养条件温度 25℃,光照 2000lx。
1.3.3 生根培养基
以 1/2MS为基本培养基 ,蔗糖 3%,琼脂 1%, pH为 5.8,
生长素采用 NAA和 IBA, 细胞分裂素采用 6—BA, 激素组合
见表 3,培养条件温度 25℃,光照 2000lx。
表 1 诱导芽分化培养基的激素组合 单位:mg/L
激素 6—BA1.0 6—BA2.0 6—BA3.0
NAA0.1 1 2 3
NAA0.5 4 5 6
NAA1.0 7 8 9
IBA0.1 — 10 11
IBA0.5 — 12 13
IBA1.0 — 14 15
IAA0.1 — — 16
IAA0.5 — — 17
IAA1.0 — — 18
表 2 增值培养基的激素组合 单位:mg/L
激素 NAA0.1 NAA0.5 NAA1.0
6—BA0.5 19 — —
6—BA1.0 20 27 —
6—BA2.0 21 28 33
6—BA3.0 22 29 34
KT0.5 23 — —
KT1.0 24 30 —
KT2.0 25 31 35
KT3.0 26 32 36
表 3 生根培养基的激素组合 单位:mg/L
激素 6—BA0.1 6—BA0.5 6—BA1.0
NAA0.5 37 — —
NAA1.0 38 39 —
NAA1.5 40 41 42
IBA0.5 43 — —
IBA1.0 44 45 —
IBA1.5 46 47 48
2 研究结果
2.1 诱导侧芽分化结果分析
将欧洲花楸的茎段接种在加入不同激素的诱导培养基
上 , 部分培养基 5d后侧芽开始膨大 , 10 ~ 22d分化芽逐渐形
成幼苗 ,统计生长情况 , 从表 4可见激素对欧洲花楸芽诱导
效果显著 , 细胞分裂素 6—BA低浓度促进芽生长 , 高浓度形
成愈伤组织 , 生长素对芽诱导效果 NAA>IBA>IAA, NAA效
—26—
果最好 , 综合诱导芽生长情况以 MS+6—BA2.0mg/L+ NAA0.5mg/L培养基上生长最好。
表 4 不同培养基诱导结果
培养基编号 培养基成分(mg/L) 接种茎段数 诱导分化数 诱导率(%) 苗质量
1 MS+6—BA1.0+NAA0.1 20 6 30 芽健壮 ,生长缓慢
4 MS+6—BA1.0+NAA0.5 20 9 45 芽健壮 ,生长缓慢
7 MS+6—BA1.0+NAA1.0 20 9 45 芽健壮 ,后期气孔处形成愈伤组织
2 MS+6—BA2.0+NAA0.1 20 12 60 芽健壮 ,生长正常
5 MS+6—BA2.0+NAA0.5 20 15 75 芽健壮 ,生长正常
8 MS+6—BA2.0+NAA1.0 20 14 70 芽健壮 ,基部形成愈伤组织
10 MS+6—BA2.0+IBA0.1 20 2 10 芽细弱 ,生长缓慢 ,后期黄尖
12 MS+6—BA2.0+IBA0.5 20 3 15 芽细弱 ,生长缓慢 ,后期黄尖
14 MS+6—BA2.0+IBA1.0 20 3 15 芽细弱 ,生长缓慢
3 MS+6—BA3.0+NAA0.1 20 8 40 芽丛生 ,芽基尖,基部形成愈伤组织
6 MS+6—BA3.0+NAA0.5 20 5 25 芽细 ,叶片卷曲,玻璃化较重
9 MS+6—BA3.0+NAA1.0 20 3 15 芽基部形成大量愈伤组织
11 MS+6—BA3.0+IBA0.1 20 2 10 形成大量丛生芽,芽细弱 ,生长缓慢
13 MS+6—BA3.0+IBA0.5 20 3 15 苗丛密集过度微型化
15 MS+6—BA3.0+IBA1.0 20 3 15 分化出苗较少 ,苗畸型
16 MS+6—BA3.0+IAA0.1 20 0 0 外植体基部形成愈伤组织
17 MS+6—BA3.0+IAA0.5 20 0 0 外植体基部 、气孔处形成愈伤组织
18 MS+6—BA3.0+IAA1.0 20 0 0 外植体基部 、气孔处形成愈伤组织
2.2 芽在茎段上的位置对生长的影响
将欧洲花楸 20个枝条分成含腋芽的 7段 , 放于含有不
同激素的培养基上 , 经过一段时间的培养 , 同一枝条不同位
置芽在相同培养基上表现不同 ,顶端和基部的芽萌发生长较
慢 , 需 11 ~ 13d, 而中部的芽萌发较快 ,需 5d(见图 1)。
2.3 增值培养结果分析
将欧洲花楸诱导的侧芽接种在含有不同激素的增值培
养基上 , 15 ~ 22d后部分培养基上形成丛生芽。从表 5可以
看出 , 对丛生芽形成 6—BA比 KT作用明显。 6—BA浓度在
0.5mg/L时 , 无丛生芽形成 , 6—BA浓度在 1.0 ~ 3.0mg/L时
形成丛生芽;低浓度NAA促进生长 , 高浓度NAA促进愈伤
组织 , 综合芽分化率 、丛生芽数量 、生长情况 , 增值以 MS+
6—BA2.0+NAA0.1生长最好 。
表 5 侧芽增值生长情况统计表
培养基编号 培养基成分(mg/L) 接种茎段数 丛生芽分化数 分化率(%) 平均分化芽数 形成丛生芽生长情况
19 MS+6—BA0.5+NAA0.1 20 0 0 0 无丛生芽 ,苗生长健壮
20 MS+6—BA1.0+NAA0.1 20 5 25 2.2 芽健壮 ,生长缓慢 ,分化时间长
27 MS+6—BA1.0+NAA0.5 20 11 55 2.27 芽健壮 ,生长缓慢 ,基部生根
21 MS+6—BA2.0+NAA0.1 20 16 80 3.62 芽健壮 ,生长正常
28 MS+6—BA2.0+NAA0.5 20 12 60 3.25 芽健壮 ,生长正常
33 MS+6—BA2.0+NAA1.0 20 9 45 2.55 芽健壮 ,基部形成愈伤组织
22 MS+6—BA3.0+NAA0.1 20 12 60 3.91 芽细弱 ,基部产生愈伤组织
29 MS+6—BA3.0+NAA0.5 20 14 70 3.50 芽细弱 ,形成大量愈伤组织
34 MS+6—BA3.0+NAA1.0 20 6 30 3.00 芽细弱 ,玻璃化
23 MS+KT0.5+NAA0.1 20 0 0 0 无丛生芽
24 MS+KT1.0+NAA0.1 20 0 0 0 无丛生芽
30 MS+KT1.0+NAA0.5 20 0 0 0 无丛生芽
25 MS+KT2.0+NAA0.1 20 0 0 0 无丛生芽
31 MS+KT2.0+NAA0.5 20 0 0 0 无丛生芽
35 MS+KT2.0+NAA1.0 20 0 0 0 无丛生芽
26 MS+KT3.0+NAA0.1 20 3 15 2.00 幼苗生长无力,陆续发黄落叶
32 MS+KT3.0+NAA0.5 20 4 20 2.25 幼苗生长无力,发黄落叶
36 MS+KT3.0+NAA1.0 20 0 0 0 初期形成丛生芽 ,丛生芽又愈伤组织化
注:平均分化芽数指形成丛生芽总数 /分化丛生芽外植体数
2.4 生根培养
欧洲花楸嫩芽长到 2 ~ 3cm长度时 , 接种到生根培养基
上 , 经 20d培养后 , 统计生长情况 , 结果表明 (表 6):IBA、
NAA对生根有显著影响 ,低浓度的生长素有利根的形成 , 浓
度过高会抑制根的形成 , 0.1~ 1.5mg/L的生长素浓度才能有
效地促进根的形成。从图 2可以看出 , NAA促进生根效果好
—27—
2011年 1月
第 24卷第 1期
黑龙江生态工程职业学院学报
JournalofHeilongjiangVocationalInstituteofEcologicalEngineering
Jan.2011
Vol.24 No.1
落叶松速生丰产的几项技术措施
黄 成1 孟凡利 1 山长城 2 滑 莎 3
(1.带岭林业局 , 黑龙江 伊春 153106;2.黑龙江生态工程职业学院 ,哈尔滨 150025;
3.黑龙江省森林保护经营所 , 哈尔滨 150040)
摘 要:以数据说明落叶松的基本生物学特性 , 造林技术 ,成林经营技术 , 以此促进提高黑龙江省落叶松速生丰
产林的经营水平。
关键词:落叶松;特性;造林技术;经营技术
中图分类号:S791.22 文献标志码:A 文章编号:1674-6341(2011)01-0028-02
落叶松是黑龙江省主要的速生丰产树种 ,也是重要的更
新造林树种。目前黑龙江省落叶松人工林面积 、蓄积均占各
造林树种之首 , 很多林分已开始间伐或皆伐 , 有的已成为个
别林业局的主要商品材树种 , 成为林业局的主财源。因此如
何营造好 、经营好落叶松人工林对林区的发展十分重要。
收稿日期:2010-12-12
作者简介:黄成(1969 -), 男 , 黑龙江望奎人 , 助理工程
师。研究方向:营林。
1 落叶松人工林的生长特点
黑龙江省落叶松主要有兴安落叶松(larixgmelini)和长
白落叶松(larixolgensis), 这两种落叶松在黑龙江省均能良
好生长 , 但长白落叶松生长略快一些。 15年生落叶松 , 树高
可达 8 ~ 10m, 胸径 9 ~ 10cm,公顷蓄积 60 ~ 90m3;25年生树
高可达 14 ~ 17m,胸径 15 ~ 18cm,公顷蓄积 160 ~ 200m3。连
年生长量的最大值 ,一般树高出现在 4 ~ 12年 ,胸径出现在 6
~ 16年 , 材积连年生长量在 25年之前一直处于迅速上升期 ,
35年时尚未见到与平均生长量曲线相交现象 。这些都说明
于 IBA, 1/2MS+NAA0.5培养基生根率达 83.33%, 效果最 佳 , 根系生长良好。
表 6 不同培养基对生根的影响
培养基编号 培养基成分(mg/L) 接种芽数(个)生根芽数(个)根诱导率(%) 生 长 情 况
37 1/2MS+NAA0.1 30 24 80.00 18d开始生根
38 1/2MS+NAA0.5 30 25 83.33 12d开始生根 , 3~ 4条根 ,根系粗壮
39 1/2MS+NAA1.0 30 23 76.67 13d开始基部愈伤组织生根 , 2~ 3条根
40 1/2MS+NAA1.5 30 19 63.33 14d开始生根 , 2~ 3条根 ,基部 、根上形成愈伤组织
41 1/2MS+NAA2.0 30 0 0 无根系形成 ,基部形成愈伤组织
42 1/2MS+NAA3.0 30 0 0 基部形成愈伤组织
43 1/2MS+IBA0.1 30 14 46.67 12d开始生根 , 3~ 4条根 ,根系粗壮
44 1/2MS+IBA0.5 30 17 56.67 16d开始生根 , 3~ 4条根 ,根系粗壮
45 1/2MS+IBA1.0 30 13 43.33 根系基部膨大 , 10d膨大处开始生根 , 3~ 4条根
46 1/2MS+IBA1.5 30 11 36.67 基部形成愈伤组织 ,愈伤组织上生根
47 1/2MS+IBA2.0 30 0 0 无根系形成 ,基部形成愈伤组织
48 1/2MS+IBA3.0 30 0 0 无根系形成 ,基部形成愈伤组织
3 结论
欧洲花楸组培育苗 ,外植体采用一年生枝条中部的芽萌
发较快 , 诱导侧芽分化最佳培养基为:MS+6—BA2.0mg/L+
NAA0.5mg/L, 增值最佳培养基:MS+6—BA2.0mg/L+
NAA0.1mg/L, 生根最佳培养基:1/2MS+NAA0.5mg/L。
参考文献:
[ 1]周以良 , 等.黑龙江树木志 [ M] .哈尔滨:黑龙江科技出版
社 , 1986.
[ 2]卓丽环 , 等.城市园林绿化植物应用指南(北方本)[ M] .
北京:中国林业出版社 , 2003.
[ 3]曹孜义 , 等.实用植物组织培养技术教程(修订本)[ M] .
兰州:甘肃科学技术出版社 , 2002.
[ 4]颜昌敬.植物组织培养手册 [ M] .上海:上海科学技术出
版社 , 1990.
[ 5] [美 ] J.M.Bonga, D.J.Durzan.树木组织培养 [ M] .阙国
宁 , 等 ,译.北京:中国林业出版社 , 1988.
特约编辑:林 荫
—28—