全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2013 年
收稿日期：2012－06－01
作者简介：李艳丽（1972－），女，吉林长春人，实验师，硕士，主要从事中药药理学研究，（电话）13578542259（电子信箱）liyl＿l＠163．com；
通讯作者，胡彦武（1980－），男，吉林梨树人，讲师，硕士，主要从事生药有效成分的分离鉴定及生物活性研究，（电话）13844545298
（电子信箱）hywcz＠163．com。
第 52卷第 2期
2013年 1月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 52 No.2
Jan．，2013
紫 花 地 丁 是 堇 菜 科 植 物 紫 花 地 丁 （Viola
philippica）的干燥全草，性寒味微苦，具有清热解
毒、凉血消肿、消痈散结之功效，临床适用于疔疮肿
毒、红肿热痛、毒蛇咬伤、痈疽恶疮、喉痹肿痛等病
症的治疗［1］。 目前对紫花地丁的研究主要集中在化
学成分方面，而对其与功效主治相关的药理作用方
面的研究报道较少。 该研究以紫花地丁水提物为研
究对象，运用现代药理学方法对紫花地丁水提物急
性毒性及抗炎镇痛作用进行了研究，以期为紫花地
丁的临床应用提供一定依据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 试剂 紫花地丁（长春中医药大学附属医院
中药房）；布洛芬缓释胶囊（中美天津史克制药有限
公司 ，批号 ：11090665）；二甲苯 （汕头市光华化学
厂，批号：20100615）；冰醋酸（沈阳市华东试剂厂，
批号：20100908）。
1．1．2 动物 ICR小鼠由长春高新医学动物实验中
心提供。
紫花地丁水提物急性毒性试验及其抗炎镇痛作用研究
李艳丽 1，胡彦武 2
（1．长春中医药大学针灸推拿学院，长春 130117；2．通化师范学院制药与食品科学系，吉林 通化 134000）
摘要：采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和鸡蛋清致小鼠足肿胀法研究紫花地丁（Viola philippica）水提物高、
中、低剂量（9．0、6．0、3．0 g ／ kg）抗炎作用，采用热板致痛法和醋酸致扭体反应法研究其镇痛作用，并测定紫
花地丁水提物的小鼠最大耐受量（MTD）。结果表明，紫花地丁水提物对小鼠灌胃给药 MTD为 480 g ／ （kg·d）。
与空白组比较， 紫花地丁水提物各剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀及鸡蛋清致小鼠足肿胀均有显著的抑
制作用（P＜0．05～P＜0．01），并能显著减少醋酸致小鼠扭体反应次数（P＜0．05～P＜0．01），显著提高热板致痛小
鼠痛阈值（P＜0．05）。 表明紫花地丁水提物毒性较低，具有较强的抗炎镇痛作用。
关键词：紫花地丁（Viola philippica）；水提物；急性毒性；抗炎；镇痛
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2013）02－0390-03
Study on Acute Toxicity and Anti－inflammatory and Analgesia Effects of Water
Extracts of Viola philippica
LI Yan－li1，HU Yan－wu2
（1．College of Acupuncture and Tuina，Changchun University of Chinese Medicine， Changchun 130117， China；
2．Department of Pharmaceutics and Food Science， Tonghua Normal University， Tonghua 134000， Jilin，China）
Abstract：The models of ear edema induced by xylene and paw edema induced by fresh egg in mice were used to evaluate
the anti－inflammation effect of Viola philippica water extracts with different dose （9．0， 6．0， 3．0 g ／ kg）， and the models pro-
duced by injecting acetic acid and hotplate in mice were used to evaluate the antalgic effect， and the maximum tolerance
dose （MTD） of mice to V. philippica water extracts was measured. The result showed that the MTD of V. philippica water
extracts in mice was 480 g ／ （kg·d）． Compared with the blank control group， all dose groups could significantly inhibit the in-
flammatory reaction of mice ear edema induced by xylene and paw edema induced by fresh egg （P＜0．05～P＜0．01）， and inhib-
it the pain produced by injecting acetic acid and hotplate （P＜0．05～P＜0．01）． It was indicated that V. philippica water extracts
had low toxicity while had obvious anti－inflammatory and analgesia effects．
Key words： Viola philippica； water extracts； acute toxicity； anti－inflammatory； analgesia
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.02.034
第 2 期
1．1．3 仪器 MP21001 型电子天平 （梅特勒－托利
多仪器有限公司）；RB－200 型智能热板仪及 PV－
200型足趾容积测量仪（成都泰盟科技有限公司）。
1．2 方法
1．2．1 紫花地丁水提物的制备 将紫花地丁粉碎
成粗粉，取粗粉 100 g 使用纱布包裹，用蒸馏水浸泡
1 h 后，武火煮沸继以文火煎煮 1 h，过滤后同法再
煎煮一次，合并两次滤液，并浓缩至 100 mL，即 1
mL提取液含有 1 g生药，置于 4 ℃保存。
1．2．2 急性毒性试验 预试验中无法测出 0％及
100％动物死亡剂量来测定紫花地丁水提物的半数
致死量（LD50），故而测定小鼠的最大耐受量（MTD）。
取小鼠 40 只，雌雄各半，随机分为空白对照组和紫
花地丁水提物组，每组 20 只。 各鼠均禁食 16 h，期
间自由饮水，紫花地丁水提物组 24 h 内以最大浓度
（以生药量计浓度为 6 g ／ mL）， 最大给药体积（0．4
mL ／ 10g）灌胃给药 2 次，两次给药间隔期间禁食，但
自由饮水；对照组给予同体积蒸馏水。连续观察 7 d，
详细记录两组动物体征变化、体重及摄食量变化及
死亡情况［2］。
1．2．3 紫花地丁水提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的
影响 取小鼠 50 只，雌雄各半，随机分为 5 组，每
组 10 只，即空白对照（蒸馏水）组，布洛芬对照组
（布洛芬浓度为 0．08 g ／ kg），9．0、6．0、3．0 g ／ kg 的紫花
地丁水提物试验组， 灌胃给药连续 7 d。 末次给药
30 min 后， 于小鼠右耳均匀涂抹二甲苯 50 μL ／只，
左耳不涂作为对照， 致炎作用 30 min 后处死小鼠，
剪下双耳耳廓， 用直径 8 mm 的打孔器在双耳同一
位置打下耳片，并称其质量，计算肿胀度和肿胀抑
制率。 肿胀度＝右耳片质量－左耳片质量；肿胀抑制
率＝［（空白对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度）
／空白对照组平均肿胀度］×100％［3］。
1．2．4 紫花地丁水提物对鸡蛋清致小鼠足肿胀的
影响 分组及给药同“1．2．3”，末次给药前测量并记
录各鼠右后足容积，末次给药 30 min 后，于各鼠右
后足趾部皮下注射 10 ％鲜鸡蛋清溶液 0．1 mL，并于
致炎后的 0．5、1.0、1．5、2.0 h 分别测量并记录各鼠右
后足容积 1 次，并计算肿胀率。 肿胀率＝（致炎后足
容积－致炎前足容积） ／致炎前足容积×100％［4］。
1．2．5 紫花地丁水提物对醋酸致小鼠扭体反应的
影响 分组及给药同“1．2．3”，末次给药 30 min 后，
腹腔注射 0．6％醋酸溶液 0．2 mL ／只，观察并记录 20
min 内各鼠扭体反应 （伸展后肢、 腹部内凹和臀抬
高）次数，并计算扭体反应抑制率。 扭体反应抑制
率＝（空白对照组平均扭体次数－给药组平均扭体次
数） ／空白对照组平均扭体次数×100％［3］。
1．2．6 紫花地丁水提物对小鼠热板致痛反应的影
响 将雌性小鼠放于（55±0．5） ℃热板仪上，将其出
现舔后足反应所需时间记为痛阈值，挑选痛阈值在
5～30 s 内的小鼠 50 只， 随机分组， 分组及给药同
“1.2．3”，各鼠于用药前及末次给药 30 min 后分别测
定并记录各鼠的痛阈值［4，5］。 在测定中，痛阈值超过
60 s的记为 60 s。
1．2．7 统计学分析 采用 SPSS 17．0 统计学软件进
行统计分析，所有数据均用 x±s 表示，组间比较采用
t检验，P＜0．05 表示差异具有统计学意义。
2 结果与分析
2．1 紫花地丁水提物急性毒性试验结果
给药后部分小鼠出现倦缩或自主活动减少现
象，24 h 后活动恢复正常。 连续观察 7 d，无动物死
亡情况发生，所有动物呼吸、皮毛、摄食量、体重、大
小便等均未见异常。 7 d 后处死动物，进行解剖，肉
眼观察未发现心、肝、肺、肾、脾、子宫、睾丸等器官
异常变化。紫花地丁水提物对小鼠的灌胃给药 MTD
为 480 g ／ （kg·d）（以生药量计）。
2．2 紫花地丁水提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影
响
紫花地丁水提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影
响见表 1。 由表 1 可知，与空白对照组比较，不同剂
量紫花地丁水提物组以及布洛芬组对二甲苯所致
小鼠耳肿胀均有显著的抑制作用， 具有显著性差
异。 紫花地丁水提物抗炎作用表现出剂量依赖性，
高剂量组抗炎作用强于中、低剂量组，且与布洛芬
组抗炎作用相当。
2．3 紫花地丁水提物对鸡蛋清致小鼠足肿胀的影
响
紫花地丁水提物对鸡蛋清致小鼠足肿胀的影
响见表 2。 由表 2 可知，与空白对照组比较，不同剂
量紫花地丁水提物组及布洛芬组对鸡蛋清致小鼠
足肿胀均有显著的抑制作用，且抗炎作用持续时间
较长，具有显著性差异。 紫花地丁水提物抗炎作用
呈剂量依赖性，高剂量组抗炎作用强于中、低剂量
表 1 紫花地丁水提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制效果
组别
蒸馏水（空白对照）
布洛芬
紫花地丁水提物
剂量//g/kg
0.08
3.0
6.0
9.0
耳肿胀度//mg
18.65±1.67
7.59±0.79**
12.03±1.08*
9.38±1.02*
7.67±0.82**
肿胀抑制率//%
59.30
35.50
49.70
58.87
注：与空白对照组比较：“*”表示差异显著（P＜0．05），“**”表示差
异极显著（P＜0．01），下同。
李艳丽等：紫花地丁水提物急性毒性试验及其抗炎镇痛作用研究 391
湖 北 农 业 科 学 2013 年
组，且与布洛芬组抗炎作用相当。
2．4 紫花地丁水提物对醋酸致小鼠扭体反应的影
响
紫花地丁水提物对醋酸致小鼠扭体反应的影
响见表 3。 由表 3 可知，与空白对照组比较，不同剂
量紫花地丁水提物组及布洛芬组均可显著减少醋
酸所致小鼠扭体反应和次数，差异均具有统计学意
义（P＜0．05～P＜0．01）。紫花地丁水提物镇痛作用呈剂
量依赖性，高剂量组镇痛作用强于中、低剂量组，且
与布洛芬组镇痛相当。
2．5 紫花地丁水提物对小鼠热板致痛反应的影响
紫花地丁水提物对小鼠热板致痛反应的影响
见表 4。 由表 4 可知，与空白对照组比较，不同剂量
紫花地丁水提物组及布洛芬组均可显著提高热板
致小鼠疼痛反应的痛阈值，差异均具有统计学意义
（P＜0．05）。紫花地丁水提物镇痛作用呈剂量依赖性，
高剂量组镇痛作用强于中、低剂量组，且与布洛芬
组镇痛作用相当。
3 小结
不同剂量紫花地丁水提物对二甲苯致小鼠耳
肿胀及鸡蛋清诱导小鼠足肿胀均有显著的抑制作
用，且抗炎作用呈剂量依赖性，高剂量组抗炎作用
强于中、低剂量组。 利用热板实验和扭体实验，是来
筛选镇痛药的经验实验方法。 不同剂量紫花地丁水
提物对热板致小鼠产生的疼痛及醋酸所致小鼠慢
性持续性疼痛均有显著的抑制作用，可显著提高痛
阈值，且镇痛作用呈剂量依赖性，高剂量组镇痛作
用强于中、低剂量组。 紫花地丁水提物具有显著的
抗炎镇痛作用， 研究结果与紫花地丁具有清热解
毒、凉血消肿止痛等功效有关，为紫花地丁的临床
应用及药用开发利用提供了药理学依据，但其抗炎
镇痛作用机制及具体药效成分尚有待进一步研究。
参考文献：
［1］ 中国药典编委会 ．中国药典：一部［Z］．北京：人民卫生出版社，
2000．
［2］ 沙爱龙，陈红玲，孟庆艳．维药芳香新塔花水提物的抗炎镇痛作
用及其急性毒性［J］． 中国实验方剂学杂志，2012，18（4）：202－
204．
［3］ 叶绿萍，黄志俭，刘小意，等．赶山鞭水提取物及醇提取物毒性及
抗炎镇痛作用［J］．中国实验方剂学杂志，2011，17（17）：204－205．
［4］ 张大方，金若敏，孟宪丽，等．药理与中药药理实验［M］．上海：上
海科学技术出版社，2006．
［5］ 吴龙火，刘昭文，许瑞安． 九里香叶的抗炎镇痛作用研究［J］．湖
北农业科学，2011，50（21）：4435－4436．
表 3 紫花地丁水提物对作用醋酸致小鼠扭体反应的抑制效果
组别
蒸馏水（空白对照）
布洛芬
紫花地丁水提物
剂量//g/kg
0.08
3.0
6.0
9.0
扭体反应次数
32.42±3.25
12.61±1.30**
19.43±2.08*
16.91±1.72*
13.25±1.35**
抑制率//%
61.10
40.07
47.84
59.13
表 4 紫花地丁水提物对小鼠热板致痛反应的镇痛作用
组别
蒸馏水（空白对照）
布洛芬
紫花地丁水提物
剂量
g/kg
0.08
3.0
6.0
9.0
给药前
15.63±1.60
15.58±1.57
15.46±1.59
15.83±1.55
15.23±1.62
给药后
17.21±1.83
31.04±3.07*
24.23±2.64*
27.23±2.64*
29.60±4.19*
痛阈值//s
表 2 紫花地丁水提物对鸡蛋清致小鼠足肿胀的抑制效果
组别
蒸馏水（空白对照）
布洛芬
紫花地丁水提物
剂量
g/kg
0.08
3.0
6.0
9.0
0.5 h
32.86±3.09
14.67±1.50**
20.01±1.98*
17.12±1.81*
15.04±1.49**
1.0 h
40.57±3.98
19.67±2.13**
30.21±2.96*
25.08±2.49*
19.02±2.11**
1.5 h
51.20±4.97
22.38±2.19**
33.06±3.10*
26.64±2.59*
23.06±2.29**
2.0 h
54.07±5.21
23.12±2.30**
34.53±3.52*
27.26±2.84*
23.49±2.41**
致炎后肿胀率//%
（责任编辑 屠 晶）
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