全 文 ：书第 31 卷第 4 期
2012 年 12 月
武 汉 工 业 学 院 学 报
Journal of Wuhan Polytechnic University
Vol． 31No． 4
Dec． 2012
收稿日期:2012-10-09．
作者简介:杨桃(1985 －) ，女，硕士研究生，E － mail:2004． yangtao@ 163． com．
通讯作者:陈新(1978 －) ，男，副教授，E － mail:chenxin_0001@ 126． com．
文章编号:1009-4881(2012)04-0001-03
DOI:10． 3969 / j． issn． 1009-4881． 2012． 04． 001
鄂产竹节参的 HPLC － DAD特征图谱研究
杨 桃，陈 新，李 龙，许 旭，胡 海，吴江磊，何 舟
(武汉工业学院 生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023)
摘 要: 通过结合 TLC、UV及三维图谱法，对从竹节参中提取出的总皂苷类化合物进行定性
分析。在波长为 203 nm的检测条件下，以流动相水( 0． 5‰磷酸) 和乙腈在流速为 1． 0 mL 下
梯度洗脱。利用该法，可鉴别竹节参总皂苷，方法简便、快捷。同时为竹节参总皂苷指纹图谱
的建立提供充分依据。
关键词:竹节参; 皂苷; HPLC － DAD
中图分类号:R 284． 2 文献标识码:A
Studies on the characteristic figure of panax japonicus
in Hubei by HPLC － DAD
YANG Tao，CHEN Xin，LI Long，XU Xu，Hu Hai，Wu Jiang － lei，HE Zhou
(School of Biology and Pharmaceutical Engineering，Wuhan Polytechnic University，Wuhan 430023，China)
Abstract:TLC、UV and was applied to qualitative analysis of total saponin of Panax japonicus． By using acetonitrile
－ water (0． 5‰H3PO4)as the mobile phase，with a flow rate of 1． 0 mL· min
－1
，deterred at 203 nm，washed by
gradient elution，the mian saponin can be separated in HPLC． The figure was applied to qualitative analysis，and to
provide basis for its HPLC fingerprints．
Key words:panax japonicu;saponin;HPLC － DAD
竹节参 Panax japonicus C． A． Mey． 为五加科人
参属多年生草本植物的干燥根茎 Rhizoma Panacis
Japonici［1］，是我国名贵中药材中常用药材之一［2］，
在心血管系统、神经系统、消化系统、免疫系统方面
均具有药理活性
［3］
;竹节参中含有多种化学成分如
糖类、皂苷类、黄酮类、挥发油类、含氮化合物、无机
盐等，现代药理及多种文献报道表明其主要活性成
分为皂苷类化合物，竹节参皂苷具有抑制肿瘤，镇痛
抗炎，镇静，免疫调节等多种药理活性
［4 － 7］
，因此对
竹节参进行系统的研究与开发具有一定的现实
意义。
目前，HPLC 指纹图谱在中药材制剂质量控制
方面的运用逐渐受到多方重视，但指纹图谱的建立
通常是以 1 种或几种指标成分作为对照为基础的，
并没有对复杂多样的中药化学成分之间可能存在的
协同作用进行考虑。因此，全息图谱逐渐被引入中
药材的质量控制之中
［8 － 9］。本文根据竹节参中总皂
苷类化合物的化学性质，确定该类化合物的提取方
法，并结合 TLC、UV及 HPLC全息图谱，对竹节参总
皂苷定性分析，对该化合物进行指认，并为竹节参指
武 汉 工 业 学 院 学 报 2012 年
纹图谱的建立提供一个很好的补充。
1 材料与方法
1． 1 材料与试剂
1． 1． 1 材料
竹节参(购于亳州药材市场)。
1． 1． 2 试剂试药
无水乙醇(分析纯)、超纯水、乙腈(色谱纯)、甲
醇(色谱纯) ;竹节参皂苷Ⅳa、楤木皂苷 A、竹节参
皂苷Ⅰb、竹节参皂苷ⅴ(前期试验中制得，纯度 ＞
98%，经核磁检测并鉴定其结构)
1． 2 仪器与设备
Agilent 1260 分析型单元液相色谱仪(美国安捷
伦公司) ，DAD 检测器(G1315D 1260 DAD VL) ，柱
温箱(G1316A 1260 TCC) ;Molresearch1010A超纯水
器 －摩尔分析型超纯水器(重庆摩尔水处理有限公
司) ;Ar2140 型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司;
SB － 5200 双频超声清洗机(宁波新芝生物科技有限
公司) ;BUCHI旋转蒸发仪(瑞士 BUCHI公司)。
1． 3 样品溶液的配制及色谱条件
1． 3． 1 竹节参皂苷提取物的制备
取干燥的竹节参粗粉 1g，精密称定，置 250 mL
圆底烧瓶中，加入 70%乙醇溶液 100 mL，设定水浴
温度 80 ℃加热回流，回流提取 3h，共提取三次，合
并三次提取的滤液并浓缩，用 70%乙醇定容于 100
mL容量瓶中，得浓度为 10mg 原料 / mL 的供试品
液，用 0． 45μm的微孔滤膜过滤，作为竹节参总皂苷
提取物的供试品溶液，待测定。
1． 3． 2 液相色谱条件
色谱柱:Apollo C18(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ;
检测波长:203 nm;柱温:30 ℃;流速:1 mL· min －1;
进样量:20 μL;流动相:流动相 A(0． 05%磷酸水溶
液)与流动相 B(乙腈)进行梯度洗脱，洗脱比例如
表 1。
表 1 梯度洗脱流动相
时间 /min 流动相 A/% 流动相 B /%
0 90 10
10 80 20
20 55 45
30 35 65
1． 3． 3 TLC展开条件
取少量浓缩后的提取物于 EP 管中，加适量甲
醇稀释，点样于硅胶 G 板上，置于展开条件为氯仿
∶甲醇 ∶ 甲酸(2 ∶ 1 ∶ 5‰)的展开缸中，展开后喷以
10%硫酸乙醇溶液显色，观察硅胶板上的斑点情况。
2 结果与分析
2． 1 竹节参皂苷提取物的 TLC图谱
用硫酸试剂显色后的硅胶板如图 1 所示，板上
呈现清晰的红色斑点，根据皂苷类物质的显色特征，
可以初步判定为皂苷类化合物。
图 1 竹节参总皂苷提取物 TLC图
图 1 中原点为竹节参总皂苷提取液浓缩后样
品，1—4 分别为竹节参皂苷Ⅳa，楤木皂苷 A，竹节参
皂苷Ⅰb、竹节参皂苷ⅴ对照品，通过原液与对照品
的 Rf值大小的比对，及原液与对照品颜色的相似程
度可以初步判断原液中含有该四种竹节参皂苷成
分。该薄层色谱的展开条件是根据皂苷类化合物的
性质通过多次实验摸索筛选优化而来。在展开剂中
加入少量醋酸，是为了防止酸性皂苷产生拖尾现象。
本文所用方法制备总皂苷提取物，简便易行。所用
展开方式，快捷并且展开效果较好。
2． 2 总皂苷提取物的 HPLC—DAD图谱
根据《中国药典 2010 版一部》［10］，竹节参皂苷
的 HPLC检测波长为 203 nm，在此波长条件下按照
1． 3． 2 色谱条件进样，样品的 HPLC图谱见图 2。
图 2 竹节参皂苷提取物高效液相图谱
分析图 2 可以看出，有部分物质由于浓度较小，
在此图上呈现出小峰。根据文献报道［11］，四个峰面
积最大的峰即 1，2，3，4 号峰为竹节参皂苷的主要成
2
4 期 杨桃，陈新，李龙，等:鄂产竹节参的 HPLC － DAD特征图谱研究
分。图 3 为竹节参皂苷的全局三维图谱，它采用光
电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，
图 3 竹节参皂苷全局三维图谱
同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的
全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采
集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)
函数的三维色谱光谱图。由此可及时观察每一个竹
节参皂苷组分的色谱图相应的光谱数据，从而迅速
获得竹节参皂苷的紫外信息。
图 2 中标注的竹节参皂苷色谱峰对应的 UV 光
谱图如图 4 所示。紫外分光光度法测定的是总皂
苷，由于竹节参中皂苷大多为齐墩果烷型
［12］
，该类
型的皂苷在波长为 200 nm—400 nm 处紫外吸收不
明显，只有末端吸收，图 4 中 1—4 号峰的保留时间
与该类型皂苷的紫外光谱一致，所以在利用 UV 测
定时，在该波长范围内无明显紫外吸收的特征即可
作为鉴定竹节参皂苷的依据。
图 4 竹节参皂苷提取物的 UV光图
3 结论
竹节参总皂苷具有抗炎镇痛及抗疲劳等活性，
虽然竹节参皂苷种类繁多，除四种主要成分以外，其
它皂苷的含量并不高。HPLC － DAD 可对竹节参总
皂苷成分进行有效地分离，同时可对皂苷主要成分
色谱峰的紫外特征谱初步定性。目前，对皂苷类化
合物的全息三维图谱分析还鲜有文献报道，本论文
结合 TLC、UV及三维图谱法同时对竹节参药材进行
鉴定，方法简便、重现性好、专属性强，并且该法对竹
节参总皂苷指纹图谱的建立是一个很好的补充。在
中药化学成分的分析中，多波长指纹图谱适应复杂
性的科学要求，实质是从多维信息角度揭示指纹图
谱代表的整体化学指纹系统的全信息，它较单波长
指纹图谱更能全面地反映中药的化学物质信息。
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