全 文 ：A Study on the Rapid Propagation Technique in Sorbus Folgneri
AN J ie , L IU J un
(College o f Forestry and Ho rticulture , Sichuan Agricultural University , Yaan 625014 , Sichuan , China)
Abstract:By using stems w ith buds of Sorbus folgneri(Schneid.)Rehd as materials , the experiment
w as made to find out the best culture process and the proper culture medium.The technical system of
tissue culture for rapid propagation w as established.The results are as follows.The optimal initiation
medium is MS+2.0 mg/ L 6-BA+0.5 mg/L NAA , and when the stem is isolated in spring , the rate
of initiation is over 90%.The optimal subculture medium is 1/2 MS +1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/ L
NAA , the multiplication rate of shoot clumps can surpass 4.00.The proper rooting medium is 1/2 MS
+1.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L Ac+10 g/L sugar and the rooting rate can be up to
75%.
Key words:Sorbus folgneri(Schneid.)Rehd;tissue culture
石灰花楸的快繁技术研究
安　洁 , 刘　军
(四川农业大学 林学园艺学院 , 四川 雅安　625014)
摘要:以石灰花楸带芽茎段为试验材料 , 研究了石灰花楸组织培养和快速繁殖的适宜条件。 试验表明 , 芽启动培养
基为改良 MS+2.0 mg/ L 6-BA+0.5 mg/ L NAA 、在春季取材时 , 启动率达 90%以上;最佳继代培养基为 1/2 MS+
1.5 mg/ L 6-BA+1.0 mg/ L NAA ,增殖系数大于 4;生根培养基用添加 1.0 mg/ L IBA+0.1 mg/ L NAA+0.5 mg/ L
活性炭+10 g/ L蔗糖的 1/2 MS 时为宜 ,生根率达 75%以上。
关键词:石灰花楸;组织培养
中图分类号:S792.25;S687;Q943.1　　文献标识码:A　　文章编号:1000-2650(2004)03-0222-03
　　园林树木的作用主要包含两个方面 ,一方面是
改善环境 ,另一方面是具有观赏价值 ,而叶的观赏性
是园林树木观赏价值中的重要组成部分 。本试验所
研究的石灰花楸[ Sorbus folgneri (Schneid.)Re-
hd] ,就是一种以观叶为主的园林树木 ,它的叶片腹
面为绿色 ,背面有白色绒毛 ,呈石灰色 ,两面颜色差
异十分明显 ,具有较强的观赏性 ,属于种类不多的双
色叶类树木。石灰花楸为蔷薇科苹果亚科花楸属的
落叶乔木 ,又名石灰树 、石灰条子 、反白树 、华盖木
等[ 1 ,2] ,广泛分布于西南 、华南 、中原 、西北等地区海
拔800 ～ 2000m的范围内[ 3] ,它红色的果实也有较强的
观赏价值 ,是一种很有发展前景的园林绿化植物。
在自然条件下散落的石灰花楸种子大部分不能
正常发芽[ 4] ,而且利用花楸种子进行育苗存在耗时
长 、成型慢 、采种母树不足及种子收集困难等缺
点[ 5] 。由于组织培养技术的飞速发展 ,利用组织培
养技术快速繁殖苗木 ,不受季节 、时间的影响 ,可大
大提高繁殖系数和工作效率 ,进行规模化和商业化
生产[ 6 ,7] ,本试验以石灰花楸茎段为材料进行组织
培养的研究 ,以建立石灰花楸的无性快繁体系 ,从而
弥补传统育苗的不足。
1　材料与方法
1.1　试验材料
以取自四川省雅安市雨城区海拔 900 m 左右的
野生石灰花楸树木的带芽茎段为供试材料 。
第 22 卷　第 3 期
2004年 09 月 　　　　　　　　 　
四川农业大学学报
Journal of Sichuan Ag ricultural University
　　　　　　　　 　Vol.22 No.3
Sep.2004
收稿日期:2004-03-15
DOI :10.16036/j.issn.1000-2650.2004.03.006
1.2　材料的预处理
材料取回后用流水冲洗 2 h ,用 70%的乙醇浸
泡 15 s ,再用 0.1%的升汞分别处理 6 min 、8 min 、10
min ,无菌水冲洗 4 ～ 5次 ,然后再用无菌纱布吸干水
分 ,将带芽茎段切成 1.5 cm 左右备用 。
1.3　带芽茎段芽诱导培养
培养基为 MS +(1.0 , 2.0 , 3.0)mg/L 6-BA +
(0.01 ,0.1 , 0.5)mg/L NAA 的不同组合 , 分别在
春 、夏 、秋季取材 ,采用了三因素三水平 L9(34)正交
试验设计方案 ,每个处理接种 7 瓶 ,每瓶接 1 个芽 ,
做 3次重复。
1.4　芽增殖培养
培养基为(1/4 , 1/2 , 1)MS +(0.5 , 1.0 , 1.5)
mg/L 6-BA+(0.5 , 1.0 ,1.5)mg/L NAA的不同组
合 ,采用了三因素三水平 L9(34)正交试验设计方
案 ,每个处理接种 7瓶 ,做 3次重复 。
1.5　生根培养
培养基为 1/2 M S+(0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0)mg/L
IBA+(0 , 0.01 , 0.1 , 0.5)mg/L NAA +(0 , 0.5 ,
1.0 , 1.5)g/L 活性炭+(0 ,10 ,15 ,20)g/L 蔗糖 ,采
用了四因素四水平 L16(45)正交试验设计方案 ,每个
处理接种 12瓶 。
1.6　培养条件
无特别说明时培养条件为:培养温度(25±2)
℃,湿度 70%,光照强度 1500 ～ 1800 lx ,光照 10 h/
d ,蔗糖 20 g/ L ,琼脂 8 g/L。
1.7　炼苗与移栽
先将生根的试管苗打开瓶口 ,在培养箱里驯化
5 d ,然后把苗移植到基质(蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1
∶1)中并用多菌灵 100倍液喷雾保苗 ,待其生长健壮
时移栽至大田。
2　结果与分析
2.1　不同消毒时间对外植体的影响
消毒处理接种 1周后进行观察 ,用升汞处理 6
min的材料污染严重 ,处理 8 min的材料表现较好 ,
而处理 10 min的材料大部分茎段的组织有坏死的
现象 。这说明了材料在升汞中的处理时间以 8 min
为宜(见表 1)。
2.2　生长调节物质和季节对芽诱导的影响
石灰花楸带芽茎段在添加了 1.0 ～ 3.0mg/L 6-
BA+0.01 ～ 0.5 mg/L NAA 的 MS培养基上培养 ,
都能诱导芽的生长 。实验观测结果见表 2。利
用DPS软件对芽的萌动率进行反正弦处理后进行
表 1　不同消毒时间材料的表现
Table 1　Representation of materials by dif ferent disinfected t ime
消毒时间
Disinfected
time
接种数
Inoculation
numbers
污染数
Infected
numbers
污染率
Infected
rate(%)
材料的表现
Representat ion
of materials
6 21 11 52.4 大部分污染
8 21 3 14.3 表现良好 ,少量污染
10 21 0 0 大部分材料组织坏死
方差分析 ,结果表明 ,各重复间差异不显著 ,说明试
验结果具有较好的重复性 。由 F 检验可得出 ,细胞
分裂素 6-BA 、生长素 NAA 、季节等因素都达到了极
显著差异 ,这说明试验所用的 3个因素芽萌动都有
较大影响 ,进一步对各因素各水平间进行新复极差
检验 ,多重比较结果表明 BA 1.0 、BA 2.0浓度间差
异不显著 ,而 BA 2.0与 BA 3.0两个浓度间差异达
到了极显著 , NAA 0.1 、NAA 0.5两浓度间差异不
显著 ,NAA 0.01与前两个水平间差异达到极显著 ,
季节因素各水平间差异都达到了极显著 ,且最适宜
的取材季节在春季 。统计结果表明 ,芽的萌动以添
加了 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA 的 MS培养
基上效果最好 ,取材的最佳季节在春季。
表 2　不同处理对芽萌动率(%)的影响
Table 2　Effect of dif ferent treatments on initiation rate of shoots clumps
处　理
Treatments
MS
6-BA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
芽萌动率 Initi ation rate(%)
重复 1
Replicate 1
重复 2
Replicate 2
重复 3
Replicate 3
1 1/ 4 1.0 0.01 　 71.4 　 66.6 　 61.9
2 1/ 4 2.0 0.1 47.6 52.3 52.3
3 1/ 4 3.0 0.5 23.8 19.1 19.1
4 1/ 2 1.0 0.1 38.1 42.8 38.1
5 1/ 2 2.0 0.5 14.3 14.3 9.5
6 1/ 2 3.0 0.01 95.2 90.4 90.4
7 1 1.0 0.5 0 4.7 4.7
8 1 2.0 0.01 80.9 80.9 85.7
9 1 3.0 0.1 28.6 33.3 28.6
2.3　生长调节物质对增殖的影响
继代培养所使用的各种组合都能使芽增殖为丛
芽 ,不同激素处理对芽增殖系数的影响见表 3。利
用 DPS 软件对结果进行方差分析 ,结果表明重复间
差异不显著 ,说明试验结果具有较好的重复性 ,由 F
检验知基本培养基差异显著 , 6-BA 差异不显著 ,
NAA差异极显著 ,因此对基本培养基 、NAA 两因素
各水平间进行新复极差检验。根据统计结果 ,得出
最佳处理组合为 1/2 MS +1.5 mg/ L 6-BA +0.5
mg/L NAA 。
2.4　不同浓度的激素 、蔗糖及活性炭对诱导生根的
影响
生根试验中 ,添加了IBA和NAA两种激素 ,同
223第 3 期　　　　　　　　　　　　　　　安　洁(等):石灰花楸的快繁技术研究　　　　　　　　　　　　　　　
表 3　不同处理对芽增殖系数的影响
Table 3　Effect o f different treatments on propagating
coefficient o f shoots clumps
处　理
T reatm ents
MS
BA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
芽增殖系数 Propagating coefficient
重复 1
Replicate 1
重复 2
Replicate 2
重复 3
Replicate 3
10 1/ 4 0.5 0.5 2.3 2.4 2.3
11 1/ 4 1.0 1.0 3.8 3.9 3.8
12 1/ 4 1.5 1.5 2.6 2.5 2.3
13 1/ 2 0.5 1.0 4.8 4.3 4.6
14 1/ 2 1.0 1.5 2.0 2.1 1.9
15 1/ 2 1.5 0.5 3.0 2.9 2.8
16 1 0.5 1.5 1.6 1.8 1.6
17 1 1.0 0.5 2.8 2.6 2.7
18 1 1.5 1.0 3.6 3.3 3.2
时添加了不同浓度的活性炭和蔗糖 。接种 8 d后有
根长出 ,30 d 后统计生根试验结果 ,详见表 4 ,从表
中可以看出 16个处理的根长和根数表现相差不大 ,
所以只对生根率经反正旋处理后进行方差分析及新
复极差检验 ,经方差分析得知 , IBA 差异不显著 ,
NAA 差异不显著 ,活性炭差异极显著 ,蔗糖差异显
著 ,因此对活性炭 、蔗糖两因素各水平间进行新复极
差检验 。经统计分析知生根的最佳培养基为 1/2
M S+1.0mg/L IBA+0.1 mg/ L NAA+0.5 g/ L 活
性炭+10 g/L 蔗糖 。
表 4　生根培养试验结果
Table 4　Result of rooting culture
处理
T reatm ents
IBA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
Ac
(g/ L)
蔗糖
Sugar
(g/ L)
生根率
Rooting
rate
(%)
根长
Root
length
(cm)
根数
Root
number
(条)
19 0.5 0 　0 　　0 　29.2 3.0 3.0
20 0.5 0.01 0.5 10 67.0 6.0 5.0
21 0.5 0.1 1.0 15 55.3 4.9 4.5
22 0.5 0.5 1.5 20 4.8 1.8 1.6
23 1.0 0 0.5 15 76.0 5.6 6.2
24 1.0 0.01 0 20 33.3 3.3 3.2
25 1.0 0.1 1.5 0 9.5 2.6 2.5
26 1.0 0.5 1.0 10 50.4 4.2 3.8
27 1.5 0 1.0 20 36.0 3.2 3.0
28 1.5 0.01 1.5 15 8.6 2.4 2.3
29 1.5 0.1 0 10 62.1 5.2 4.3
30 1.5 0.5 0.5 0 50.2 4.1 3.8
31 2.0 0 1.5 10 7.6 2.3 2.1
32 2.0 0.01 1.0 0 47.1 3.9 3.5
33 2.0 0.1 0.5 20 52.0 4.6 4.1
34 2.0 0.5 0 15 41.2 3.5 3.2
2.5　炼苗与移栽
试验表明 ,基质(蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1)适
合石灰花楸幼苗的生长 ,移植成活率可达到 80%以
上。但需要注意的是花楸幼苗喜凉爽 、忌高温 ,一般
情况下 ,在气温较高的 6 、7月份 ,幼苗死亡率较高 ,
移植的季节最好在凉爽的春季。
3　讨　论
石灰花楸茎段对升汞消毒时间的要求比较严
格 ,时间不能过短 ,否则污染率过高 ,消毒效果不好 ,
而处理时间太长则会伤害植物组织 ,造成组织坏死 ,
在最初的试验中曾采用过 5 min 、8 min 、11 min 、14
min ,结果处理了 5 min的材料污染严重 ,而处理了
14 min 的材料几乎全部变黑 , 后来选用 6 min 、8
min 、10 min进行试验 ,最终得出适宜的处理时间为
8 min。
通过对芽诱导试验结果的方差分析得知 , 6-
BA 、NAA 及季节 3个因素对结果的影响都是极显
著的 ,其中以季节的影响最为明显 ,所以取材的季节
最好在春季 ,其他季节所取的材料萌发率极低 ,可能
是由于春季刚萌发的芽较幼嫩 ,所带病菌较少 ,生长
势强 ,而秋季和冬季所取的芽污染率高 ,萌发率低。
在生根试验中 ,活性炭浓度对结果的影响是极
显著的 ,添加了 0.5 g/L 活性炭时效果较好 ,而随着
浓度的增大 ,生根效果不好甚至没有根长出 ,这可能
是由于低浓度的活性炭起到了暗培养的作用 ,同时
吸附了培养基中的少量有毒物质从而有利于生根 ,
但当浓度增大后则会把培养基中的营养物质也吸附
了 ,以致无法正常生根 。
参考文献:
[ 1] 　郑万均.中国树木志(第二卷)[ M] .北京:中国林业出版社 ,
1985.
[ 2] 　俞德浚.中国植物志(第三十六卷)[ M ] .北京:科学出版社 ,
1974.
[ 3] 　杨钦周.四川树木分布[ M] .贵州:科技出版社 , 1997.
[ 4] 　于春江 , 于长廷 , 李金用 , 等.绿化树木花楸及其栽培技术
[ J] .中国林副特产 , 1998 , 2:21.
　　Yu C J , Yu C T , Li J Y , et al.Plant ing technique of g reening
tree Sorbus pohuoashanensis[ J] .Quar terly o f Forest By-product
and Speciali ty in Ch ina , 1998 , 2:21.
[ 5] 　高　慧 , 刘培义.花楸的扦插繁殖试验初报告[ J] .吉林林业
科技 , 1997 , 3:29-30.
　　Gao H , Liu P Y.Report on cut tage of Sorbus pohuoashanensis
[ J] .Ji lin Forest ry S cience a nd Tech nology , 1997 , 3:29-30.
[ 6] 　梁　华 , 李玉石.花楸播种育苗技术[ J] .山东林业科技 ,
1999 , 4:23-25.
　　Liang H , Li Y S.Technique of raise seedling on S orbus po-
huoashanensis[ J] .Shandong Forestry Science and Technology .
1999 , 4:23-25.
[ 7] 　翟应昌 , 周志坚 , 龚　峥 , 等.林木组培工厂化育苗技术的研
究[ J] .广东林业科技 , 1996 , 12(4):1-8.
　　Zhai Y C , Zhou Z J , Gong Z , et al.Propagation technique of
t rees by t issue culture[ J] .Guangdong Forestr y S cience a nd
Technology , 1996, 12(4):1-8.
(本文审稿:王永清)
224　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　四川农业大学学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 22 卷