全 文 ：收稿日期:2010-03-04
1)本项研究由黑龙江省科技攻关项目(GB07B303-02)资金支持
西伯利亚花楸组织培养关键技术的研究1)
崔崧 ,张文达 ,李晶＊
(黑龙江省林业科学研究所 ,哈尔滨 150081)
摘　要:通过不同消毒试剂及培养基的选择 ,对西伯利亚花楸组织培养过程中的关键技术进行了研究 ,
得到以下结论:①用 70%～ 75%乙醇和漂白粉饱和溶液相结合的方法可以在保持低杀伤率的基础上有
效地降低污染率;②分化效果最明显的培养基是 MS+BA(1.0 ～ 2.0)+NAA(0.1 ～ 0.5)+2%蔗糖 ,加
入 BA 效果要明显好于 KT ;③继代增殖最好的培养基为MS +BA0.5+NAA0.05+2%蔗糖 ,月增殖系
数为 3.0;④H+NAA(0.5 ～ 1)+2%蔗糖和 1/2MS+IBA(0.5 ～ 1)+2%蔗糖培养基均可以有效地促进
生根率(分别为 80.7%和 82.2%)和幼苗生长(平均苗高分别为 4.5和 3.8mm)。
关键词:西伯利亚花楸;组织培养;关键技术
Study on Key Technical Points of Tissue Culture of Sorbus sibirica
Cui Song ,ZhangWenda ,Li Jing＊
(Heilongjiang Forestry Research Institute ,Harbin , 150081)
Abstract:Key technical points of tissue culture of Sorbus sibirica with dif ferent kinds of disinfect ant and
medium are studied in this paper.Conclusion:①Using of 70%-75% Ethanol and Chlorinated Lime satu-
rated solution can decrease the infection rate with lower killing rate effectively;②The best diff erentiation
medium in our s tudy is MS + BA(1.0-2.0)+NAA(0.1-0.5)+2%sucrose , using BA can improve the
eff ect better than KT;③The best subculture multiplication medium in our study is MS + BA 0.5 +
NAA 0.05 +2%sucrose ,monthly proliferation coefficient is 3.0;④Mediums with H +NAA(0.5-1)+
2%sucrose and 1/2MS + IBA(0.5-1)+ 2% sucrose can both increase the rooting rate(80.7% and
82.2%)and the growth of seedlings(4.5 and 3.8mm).
Key words:Sorbus sibirica ;Tissue Culture;Key T echnical Points
　　西伯利亚花楸(Sorbus sibirica)蔷薇科 、花楸属 ,
原产欧洲及亚洲西部 ,落叶灌木或小乔木 ,干形端直伟
岸。春夏季叶片为深绿色 ,花为白色 ,秋季叶变为紫红
色 ,有光泽。8 月下旬到 9 月结出橘红色浆果 ,果实悬
垂在小枝上可存留至冬季。喜好凉爽湿润的气候 ,耐
寒性 、抗风性强 ,耐荫性较好 ,适应多种土壤类型(酸性
或微酸性土壤最好)。寿命极长 ,生长速度为每年 50
～ 70cm ,是适宜我国北方地区栽种的名贵观叶 、观花 、
观果型园林树种 ,也是很好的遮荫树种。[ 1]
由于西伯利亚花楸原产于高寒地区 ,在我国其他
地区引种栽植时都存在由于气温高于原产地 ,层积处
理时条件不足 ,出苗率及幼苗质量偏低等问题。因此 ,
如何快速大量地得到幼苗就成为西伯利亚花楸作为园
林树种能否成功栽植推广的关键问题 ,组织培养是可
行性最高的解决方法之一[ 2] 。本文通过西伯利亚花楸
的组织培养实验 ,针对组织培养中常见的问题[ 3] ,对比
了不同消毒试剂的消毒效果 ,并从诱导分化 、继代增
殖 、幼苗生长及生根情况等方面对不同的培养基配方
进行了比较 ,为西伯利亚花楸组织培养中的关键步骤
提供了数据支持。
1　研究方法
1.1　外植体的选取
材料取于 5月份 ,选取对象为生命力最旺盛的多
年生西伯利亚花楸植株的腋芽。
1.2　消毒试剂的选取
在组培的过程中 ,从生命力旺盛的植株上选取材
料 ,杀死材料表面的细菌及微生物 ,减少芽污染的影
响 ,但同时又不能对材料造成伤害[ 4] 。因此选用适当
的消毒剂 、选用适当的浓度和处理时间是组织培养成
功的关键之一[ 5-6] 。
因此本文采用以下组培常用消毒剂对材料进行了
不同浓度 ,不同时间长度的处理 , 乙醇溶液、70%～
75%氯化汞+乙醇溶液 、漂白粉溶液 ,并对材料的杀伤
率及污染率进行了观测。
1.3　培养基的选择
组培成功与否的另一个关键因素是培养基的选
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第 4期(总第 107) 中 国 林 副 特 产 No.4(GSNO.107)
2010年 8月 Fo rest By-Product and Speciali ty in China Aug.2010
DOI :10.13268/j.cnki.fbsic.2010.04.046
择 ,本文分别从诱导分化 、继代增殖 、植株生根等 3 个
方面 ,以文献中的花楸组培培养基为基础[ 7-8] ,对西伯
利亚花楸进行了不同培养基比较的实验 ,并根据实验
数据进行了比较分析。
1.3.1　诱导分化培养基。在诱导分化过程中 ,本文分
别采取了以下 5种培养基进行了比较研究(表 1)。
表 1　诱导分化培养基
名称 组成成分
1号 White+BA(1.0～ 2.0)+NAA(0.1～ 0.5)+2%蔗糖
2号 White+K T(1.0～ 2.0)+NAA(0.1～ 0.5)+2%蔗糖
3号 H +BA(1.0～ 2.0)+NAA(0.1～ 0.5)+2%蔗糖
4号 H +KT(1.0～ 2.0)+NAA(0.1～ 0.5)+2%蔗糖
5号 MS+BA(1.0～ 2.0)+NAA(0.1～ 0.5)+2%蔗糖
　　下文中简称为诱 1号 、诱 2号等 ,以此类推
1.3.2　继代增殖培养基。在继代增殖过程中 ,本文分
别采取了以下两种培养基进行了比较研究(表 2)。
表 2　继代增殖培养基
名称 组成成分
1号 H +BA0.5+NAA0.05+2%蔗糖
2号 MS+BA0.5+NAA0.05+2%蔗糖
　　下文中简称为继 1号 、继 2号
1.3.3　植株生根培养基。在植株生根过程中 ,本文分
别采取了以下两种培养基进行了比较研究(表 3)。
表 3　植株生根培养基
名称 组成成分
1号 H +NAA(0.5～ 1)+2%蔗糖
2号 1/ 2MS+IBA(0.5～ 1)+2%蔗糖
3号 MS+BA0.1+IBA0.02
4号 MS+BA1.0+NAA0.02
5号 M S+NAA0.02
　　下文中简称为生 1号 、生 2号等 ,以此类推
2　结果与分析
2.1　不同消毒试剂比较
对不同消毒试剂的作用效果进行比较(表 4),可
以看到杀伤率最低的是 70%～ 75%乙醇 ,其次是漂白
粉溶液 ,二者相差不大 ,而氯化汞作为一种重金属 ,虽
然可以在一定程度上降低污染率 ,但对材料产生的毒
害作用很大(杀伤率可达 46%),因此不宜选用。
表 4　不同消毒试剂作用效果
消毒剂种类 浓度/ % 作用时间 杀伤率/ % 污染率/ %
乙醇 70～ 75 30s 3 23.9
20s 1 28.0
10s 0 32.6
5s 0 41.8
氯化汞+乙醇 0.1 30 min 24 15
70%～ 75% 20 min 18 21
10 min 10 28
0.3 30 min 25 12
20 min 17 19
10 min 10 20
0.5 30 min 46 8
20 min 32 11
10 min 20 14
漂白粉 饱和溶液 30 min 8 20.2
20 min 5 28.4
10 min 0 37.5
　　由于乙醇及漂白粉溶液抑菌作用的局限性 ,本文
进行了将两者结合使用的实验(表 5),结果表明用
70%～ 75%乙醇先对接种材料表面消毒 20s ,然后用漂
白粉饱和溶液消毒 20min ,再用无菌水冲洗 3 ～ 4 次 ,
可以在保证低杀伤率(5%)的基础上成功的降低污染
率(15%)。
表 5　乙醇和漂白粉溶液作用效果
漂白粉作用时间 杀伤率/ % 污染率/ %
30 min 12 11
20 min 5 15
10 min 3 23
2.2　不同培养基的比较
2.2.1　不同诱导分化培养基比较。由图 1可知 ,在利
用上述 5种培养基进行诱导分化培养 1 个月后 ,不同
培养基对分化的影响差异明显 ,其中以诱 3 号和诱 5
号组合较好 , 诱导分化率分别可达到 35.6%和
38.1%,诱 2号和诱 4 号培诱导分化率较低。此外可
以看出 ,加入 BA 的组合(诱 1 、3 、5 号)诱导分化率明
显高于加入 KT 的组合(诱 2 、4 号),可见 BA 对西伯利
亚花楸的诱导分化可以起到有效地促进作用。
图 1　不同培养基对诱导分化的影响
2.2.2　不同继代增殖培养基比较
选取的 2种培养基效果明显 ,继 1 号和继 2 号的
月增殖系数分别可达 2.5 和 3.0 ,均具有实际应用价
值。
2.2.3 不同植株生根培养基比较
表 6　不同培养基对幼苗生长的影响
种类 平均株高/mm 生根率/ %
生 1号 4.5 80.7
生 2号 3.8 82.2
生 3号 0.6 10
生 4号 0.5 8
生 5号 2.9 79.5
　　在生根培养基上培养 30天左右 ,调查生根情况及
生根率 ,在上述 5 种培养基中 ,生 1 号 、生 2 号和生 5
号培养基生根率较高 ,生 3 号和生 4 号培养基生根率
较低 ,其中生 2号培养基生根率最高(82.2%),生 1 号
培养基幼苗高生长最好(4.5mm)。
3　结论
3.1　先用 70%～ 75%乙醇对接种材料表面消毒 20s ,
再用漂白粉饱和溶液消毒 20min ,最后用无菌水冲洗 3
～ 4次 , 可以在保持低杀伤率的基础上有效地降低西
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2010年 崔崧等:西伯利亚花楸组织培养关键技术的研究 第 4期
梅山地区野山楂理化指标测定研究
陈富昌
(隆回县金石桥镇中心学校 , 湖南 邵阳 422208)
摘　要:梅山地区野山楂(Crataegus cuneata Sieb .et Zucc)的理化指标测定提取采用对角线法取样测定
楂果直径 ,鲜果重量 ,并求平均值 ,再求出核肉比 ,用烘干法烘干至恒重 ,测定楂果水份 ,反复灼烧楂果至
恒重 ,测定楂果的灰分 ,采用 2 , 6-二氯酸靛酚滴定法 ,测定其维生素 C的含量 ,采用凯氏定氮法 ,测定楂
果粗蛋白 ,采用斐林氏法 ,测定楂果的还原糖 ,采用火焰法测定楂果的微量元素 ,理化性质结果表明山楂
果 VC含量为 75.35mg/100g ,粗蛋白 3.1%,还原糖含量为 12.24%,Pb 的含量为 0.05mg/kg ,Zn 的含量
为 0.26mg/kg等微量元素都符合国家标准。具有很好的开发价值。
关键词:野山楂;理化指标测定
On How to Measure Nutrient Composition of Crataegu scuneata
Chen Fuchang
(Longhui County Jinshiqiao Centred School ,Shaoyang ,Hunan , 4222081)
Abstract:By measuring and studying nut rient composition of Crataegus cuneata Siebet Zucc in the middle
and low er reaches of Chang jiang River.We find all the t race element s in Crataeguscuneata Siebet Zucc a-
g ree with the national standard , including VC (75.35mg/100g), crude protein (3.1%), sugar
(12.24%), Pb (0.05mg/kg), Zn (0.26mg/kg),which are measured by various ways-chemical and physical.
Key words:Crataegu scuneata Siebet Zucc;Measuring nut rient composition
1　研究目的及意义
梅山地区位于雪峰山麓 ,即湖南的邵阳 、娄底 、怀
化三个地市。这里自然条件优越 ,野生果树蕴藏量丰
富。该地区有一种多年生落叶灌木 ,名叫野山楂 ,蔷薇
科 ,山楂属 ,树高 1.5 ～ 2.5m ,刺长 6 ～ 8mm ,叶片卵形
或卵状长圆形 ,长 3 ～ 6cm , 宽 2 ～ 5cm 。先端尖 ,叶基
楔形 ,下延连于叶柄 ,顶端常有 3 ～ 6 浅裂片 ,裂片分裂
处无侧脉 ,叶柄长 3 ～ 5cm ,无毛。总在梗及花梗均无
毛 ,楂果近球形 ,直径约 1.0cm 左右 ,深红色 ,有斑点 ,
生于海拔 400 ～ 2000m的山坡灌丛 ,或山坡砂地 , 杂木
伯利亚花楸的感染率。
3.2　效果最明显的分化培养基是 MS +BA(1.0 ～
2.0)+NAA(0.1 ～ 0.5)+2%蔗糖 ,诱导分化率可达
38.1%,加入 BA 的分化效果要明显好于 KT 。
3.3　在继代培养中 ,MS +BA0.5 +NAA0.05+2%蔗
糖培养基效果最为明显 ,月增殖系数为 3.0倍。
3.4　H+NAA(0.5 ～ 1)+2%蔗糖和 1/2MS +IBA
(0.5 ～ 1)+2%蔗糖培养基均可以有效地促进生根率
(分别为 80.7和 82.2%)和幼苗生长(平均苗高分别为
4.5 和 3.8mm)。
组培得到的西伯利亚花楸生根苗应先从培养瓶中
取出 ,洗去琼脂 ,移至蛭石中生长(保持高温 、高湿 ,然
后逐渐降温),待长出新叶和新根后再移至大田生长。
参 考 文 献
[ 1] 　姚莉莉 ,赵海泓 ,申立营 , 等.西伯利亚花楸组培快繁技
术体系的研究[ J] .辽宁农业科学 , 2005(6):19-21.
[ 2] 　W.Barz , E.Reinhard , M.H.Zenk.植物组织培养及其在
生物技术上的应用[ M] .北京:科学出版社 , 1983:262.
[ 3] 　潘娟 , 李先源 ,李名杨.植物组织培养过程中常见问题
及解决方法[ J] .安徽农业科学 , 2009 , 37(6):2392-
2394.
[ 4] 　曹孜义 , 刘国民.实用植物组织培养技术教程[ M] .兰
州:甘肃科学技术出版社 , 1996:39.
[ 5] 　应明 , 袁艺 ,何斌.鱼腥草组织培养中材料灭菌的研究
[ J] .安徽农学通报 , 2009 , 15(4):27-29.
[ 6] 　刘雪红 , 刘俊华 , 张孝霖.冬枣组织培养的消毒方法
[ J] .北方园艺 , 2009(2):97-98.
[ 7] 　韩文忠 , 马兴华.欧洲花楸组织培养与快速繁殖试验研
究[ J] .中国林副特产 , 2006(3):21-22.
[ 8] 　白卉 , 王秋玉 ,曹焱 , 等.花楸组织培养技术的研究[ J] .
林业科技 , 2007 , 32(3):53-55.
作者简介:崔崧(1981-), 男 , 辽宁省沈阳市人 , 研究实
习员 ,植物学 , 共在国内外期刊发表文章 7 篇 , 其中 SCI1 篇 ,
国内核心 A 类 2 篇 , E-mail:liv er4th@yahoo.com.cn。
＊李晶为通讯作者。
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第 4期(总第 107) 中 国 林 副 特 产 No.4(GSNO.107)
2010年 8月 Fo rest By-Product and Speciali ty in China Aug.2010