全 文 ：自由基 ,并介导了细胞膜中的多种不饱和脂肪酸的
过氧化反应 ,使 SOD消耗量增加和氧自由基酶性清
除系统遭到损伤 ,造成心肌损伤破坏。经冠心宁注
射液处理后 MDA 含量显著下降 ,SOD活性明显增
高 ,心肌梗死面积明显减少 。提示冠心宁注射液能
够清除氧自由基 ,抑制过氧化物产生 ,使氧自由基酶
性清除系统免遭破坏 ,增强心肌抗氧化能力对心肌
缺血再灌注损伤具有保护作用 。
研究证实热休克预处理实验动物恢复一定时间
后能明显减轻缺血再灌注所致心肌损伤 ,与热休克
诱导心肌合成的一组热休克蛋白(Heat shock pro-
teins , HSP)或应激蛋白(st ress pro teins , SP)有
关[ 4] 。其中 ,HSP70在正常细胞中表达较低 ,而在
应激状态下可显著地增高 ,因此成为热休克蛋白中
最为关注 ,研究最深入的一种 。目前 , HSP70 对心
肌保护作用机制还不十分清楚 , 但可以明确的是
HSP增强了心肌细胞抗氧化防御能力。同时 , HSP
作为一种“分子伴侣”[ 5] 可保持正常蛋白处于功能状
态 ,使遭受破坏的蛋白质解聚 ,重新折叠成具有生物
活性多肽或蛋白 。另外 , HSP 对心肌保护的作用机
制还与细胞内 Ca2+ 、三磷酸腺苷(ATP)等的改变有
关[ 6] 。本实验结果显示 , 缺血再灌注组心肌细胞
HSP表达无明显改变且 SOD 活性显著降低 ,而冠
心宁注射液心肌细胞 HSP 表达则明显增强且 SOD
活性较缺血再灌注组显著增加 , MDA 含量显著下
降。说明冠心宁可能通过增加细胞 HSP70 的表达
发挥抗心肌缺血再灌注损伤 ,对心肌具有保护作用 。
冠心宁注射液对心肌缺血再灌注过程具有促进心肌
细胞 HSP70的表达和较好的清除氧自由基作用 ,能
明显改善心肌的灌注 ,减少梗死面积 。临床使用也
已经证实冠心宁在治疗缺血性心脏病方面的优势和
特点 ,可以成为临床上抗缺血再灌注损伤药物。
综上所述 ,冠心宁注射液可减少大鼠缺血再灌
注心肌损伤的梗死面积 , 增强 SOD 活性和降低
MDA 含量 ,对心肌缺血再灌注损伤有显著保护作
用 ,其机制可能与增加 HSP70的表达增强心肌抗氧
化能力有关。
参考文献:
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[收稿日期] 2007-12-03
[ 作者简介] 许彬 , 男 , 硕士研究生 , 电话:13007101344 , E-mail:xupanshi @126.com 　[ 通讯作者] 程清洲 , 男 , 硕士 , 副教授 , 电话:
13027170668 , E-mail:chqz5758@sina.com
竹节参多糖抗衰老作用研究
许彬1 ,程清洲2 ,陈平1 ,肖晏婴1 ,陈顺钦1 　(1.武汉工业学院生物与制药工程系 ,湖北 武汉 430023;2.武汉工业学院健
康科学与护理系 ,湖北 武汉 430023)
[ 摘要] 　目的:研究竹节参多糖的抗衰老作用。方法:将昆明种小鼠按体质量随机分组 , 分别给予生理盐水 、D-半乳糖 、香菇
菌多糖 、竹节参多糖。测定胸腺和脾脏指数 , 取血 、肝 、脑测定丙二醛 、超氧化物歧化酶 、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶。
结果:竹节参多糖可以拮抗胸腺和脾脏萎缩 , 显著降低丙二醛含量并提高超氧化物歧化酶 、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢
酶活力。结论:竹节参多糖可通过小鼠调节机体免疫功能 、清除自由基等方面发挥其延缓衰老的作用。
[ 关键词] 　D-半乳糖;竹节参多糖;抗衰老作用
[中图分类号] R285.6　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2009)13-1082-04
Anti-aging effect of polysaccharides from Panax j aponicus
·1082· 中国医院药学杂志 2009年第 29卷第 13期 Chin H osp Pharm J , 2009 Ju l , Vol 29 , No.13
XU Bin1 , CHENG Qing-zhou2 ,CHEN Ping1 ,XIAO Yan-y ing 1 ,CHEN Shun-qin1(1.Biolog ical and Pharmaceu-
tical Engineering Department of Wuhan Poly technic Univ ersity , Hubei Wuhan 430023 , China;2.Health and Nursing Depa rt-
ment of Wuhan Po ly technic Unive rsity , H ubei Wuhan 430023 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the anti-ag ing effect o f po ly saccharides f rom Pana x japonicus in mice.METHODS　Ran-
dom g roups we re prepa red by body and were g iven with NaCl liquo r , D-galactose , le tinan and polysaccharide s fr om Pana x ja-
ponicus.The activity o f SOD and contents o f MDA in serum of the mice we re determined w ith UV.The activity of GS H-PX in
liv er and CAT in brain w ere mea sured to o.Meanwhile , mice we re w eighted and thymus and spleen w ere taken out to w eight
with e lectronic balance.Wet mass o f o rg ans was used to expr ess indexes of thymus and spleen so as to obse rve the effect on im-
munolo gical function.RESULTS　The polysaccharide s from Pana x japonicus could resist the atr ophy of thymus and spleen ,
MDA contents in serum we re decreased in mice , SOD , GSH-PX and CAT activ ity in blood 、liv er and brain w ere increased obvi-
ously.CONCLUSION　The poly saccharide s from Panax japonicus could delay caductiy postpone senility through immune-reg-
ula tion and eliminating f ree radicals.
KEY WORDS:D-galactose;Pana x japonicus polysaccharide s;anti-aging effect
　　竹节参(Panax japonicus C.A.Mey)为五加科
人参属植物 ,是湖北省特色药用植物资源之一 ,主要
分布于鄂西地区 ,具有滋补强壮 ,活血化淤 ,消肿止
痛 ,止血祛痰等功效[ 1] 。本课题组前期已报道竹节
参中的粗多糖成分具有抗疲劳作用和提高机体免疫
能力[ 2] ,本实验将进一步探讨竹节参多糖抗衰老的
活性 ,为竹节参延缓衰老的临床疗效提供理论依据 。
1　材料
WFZ-UV2000紫外可见分光光度计(尤尼科
上海仪器有限公司 , H0511012);竹节参多糖(本实
验室自制 ,药材采自湖北恩施自治州中药材研究所
竹节参种植基地 ,经武汉工业学院陈平教授鉴定为
五加科人参属植物竹节参 ,根据相似相溶原理 ,采用
乙醇脱脂 ,纤维素和果胶复合酶提取 ,分步醇沉 ,木
瓜蛋白酶去除蛋白质 ,用苯酚硫酸法测定其含量为
95.5%[ 2-3] 。以纯水为溶剂配制不同浓度样品 , 4 ℃
低温保存 ,备用);D-半乳糖(中国上海惠兴生化试
剂有限公司 ,批号 980927);丙二醛试剂盒(MDA)、
超氧化物歧化酶试剂盒(SOD)、过氧化氢酶试剂盒
(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒(GSH-PX)(南
京建成生物工程研究所 ,批号 20080801 , 20080829 ,
20071129 ,20080801);香菇菌多糖片(武汉迪奥药业
有限公司 ,批号 20070801)。昆明种系实验小白鼠 ,
♀♂各半 ,共 60只 ,体质量 27 ～ 30 g(华中科技大
学同济医学院实验动物中心 ,鄂医动管证字:19-
052。所有试验动物均食用全价混合饲料 ,自由摄食
和取水)。
2　方法[ 4]
2.1　小鼠分组 、给药与造模　选用小鼠 60只 , ♀♂
各半 ,随机分为 6 组 ,分别是空白组 、模型组 、阳性
组 、低 、中 、高竹节参多糖剂量组 。空白组灌胃等体
积生理盐水;模型组颈背部皮下注射 D-半乳糖 120
mg·kg-1和灌胃等体积生理盐水;阳性组颈背部皮
下注射 D-半乳糖 120 mg·kg -1和灌胃等体积香菇
菌多糖 100 mg·kg -1[ 5] ;根椐预试验确定低 、中 、高
竹节参多糖剂量各组剂量小鼠的每日用量 ,分别灌
胃 50 ,100 ,200 mg·kg-1和同时颈背部皮下注射 D-
半乳糖 120 mg·kg-1 。按0.2 mL·(10 g)-1 ,灌胃 ,
qd ,连续给药 60 d。
2.2　小鼠胸腺和脾脏指数的测定　末次给药 24 h
后 ,称量所有小鼠体质量 ,解剖小鼠 ,取其胸腺和脾
脏 ,按“胸腺(mg)/体质量(g)、脾脏(mg)/体质量
(g)”计算胸腺指数和脾脏指数。
2.3　小鼠血丙二醛含量 、超氧化物歧化酶活力测定
　末次给药 24 h 后 ,眼眶取血 ,并立即离心取其血
清。按丙二醛试剂盒说明书操作 。于 532 nm 处测
定各管吸光度 ,计算血清中丙二醛含量[血清中丙二
醛含量(μmol·L-1)=(测定管吸光度-测定空白管
吸光度)/(标准管吸光度-标准空白管吸光度)×标
准品浓度(10 μmo l·L-1)×样本测试前稀释倍数] 。
按超氧化物歧化酶试剂盒说明书操作。于 550 nm
处测定各管吸光度 ,计算血清中超氧化物歧化酶活
力[血清中超氧化物歧化酶活力(U·mL-1)=(对照
管吸光度-测定管吸光度)/对照管吸光度 ÷50%×
反应体系的稀释倍数×样本测试前稀释倍数] 。
2.4　小鼠肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活力测定　
将小鼠颈椎脱臼位处死 ,迅速取其肝脏 ,剔去结缔组
织 、称量 、匀浆器研磨 、加预冷的生理盐水制备成
10%的组织匀浆。冷冻离心(2 ～ 4 ℃),取其上清
液 ,用谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒测定谷胱甘肽过
氧化物酶活力 。
2.5　小鼠脑组织过氧化氢酶活力测定　将小鼠处
·1083·中国医院药学杂志 2009年第 29卷第 13期 Chin H osp Pharm J , 2009 Ju l , Vol 29, No.13
死 ,取其脑组织 ,称量 ,加预冷的生理盐水进行匀浆制
备成 10%的组织匀浆。冷冻离心(2 ～ 4 ℃),取其上
清液 ,用过氧化氢酶试剂盒测定过氧化氢酶活力。
2.6　数据处理　采用 SPSS 13.0版统计分析软件 ,
多组间样本均数比较采用方差分析 。
3　结果
3.1　竹节参多糖对小鼠胸腺和脾脏指数的影响　
从表 1可知:空白组与竹节参多糖低剂量组和模型
组比较 ,胸腺指数和脾脏指数差异均有显著性(P <
0.05);竹节参多糖中剂量组与模型组比较 ,胸腺指
数和脾脏指数差异均有极显著性(P <0.01);竹节
参多糖高剂量组与模型组比较 ,胸腺指数有极显著
差异性(P<0.01),而脾脏指数有显著差异性(P <
0.05)。
3.2　竹节参多糖对小鼠丙二醛含量和超氧化物歧
化酶活力的影响　竹节参多糖低 、中 、高剂量组与模
型组相比 ,丙二醛含量差异均有显著性(P <0.01或
P <0.05)。衰老模型组血清超氧化物歧化酶活力
低于空白组(P <0.05),各给药组分别同模型组相
比 ,超氧化物歧化酶活力均有提高 ,中剂量组与模型
组相比差异有极显著性(P<0.01),低 、高剂量组差
异均无显著性 ,见表 1。
3.3　竹节参多糖对小鼠肝组织谷胱甘肽过氧化物
酶活力的影响　由表 1可知:衰老模型组肝组织谷
胱甘肽过氧化物酶活力明显低于空白组(P <
0.05)。各给药组分别同模型组相比 ,谷胱甘肽过氧
化物酶活力均有提高 ,竹节参多糖低 、中 、高剂量组
与模型组差异均有极显著性(P <0.01)。
3.4　竹节参多糖对小鼠脑组织过氧化氢酶活力的
影响　空白组与模型组比较过氧化氢酶活力差异有
显著性(P <0.05);中 、高剂量组与模型组比较 ,差
异均有极显著性(P <0.01),低剂量组则差异无显
著性 ,见表 1。
4　讨论
表 1　小鼠胸腺及脾脏指数 、血清丙二醛含量和超氧化物歧化酶 、肝组织的谷胱甘肽过氧化物酶 、脑组织过氧化氢酶活力( x±
s , n=10)
Tab 1　Thymus index and spleen index , the content of blo od M DA , the v itality o f blood SOD , GSH-PX in liv er tissue and GA T
in brain tissue( x±s , n=10)
组别 胸腺指数/mg·g -1
脾脏指数
/mg·g -1
血 MDA 含量
/μm ol·L -1
血 SOD 含量
/U·mL-1 肝GSH-PX/U
脑 CAT
/U·mgp rot -1
空白组 1.59±0.20 9.2±2.8 44.0±2.6 105.5±29.0 256.8±79.7 3.6±1.0
模型组 1.29±0.16 5.5±1.8 51.1±2.7 70.8±10.7 153.0±60.3 2.1±0.8
阳性组 2.0±0.4 10.7±3.1 43.5±2.7 96.2±19.5 344.3±66.2 3.5±1.0
低剂量组 1.7±0.4 9.6±4.1 44.3±3.2 79.4±22.5 305.3±40.5 2.5±0.5
中剂量组 2.1±0.4 10.3±2.6 43.7±3.5 99.2±21.4 361.0±57.2 4.2±0.5
高剂量组 2.0±0.5 10.3±4.1 45.0±4.2 92.2±40.9 309.9±38.0 4.0±0.2
　　D-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型因其衰老变
化明显 ,模型稳定 ,在抗衰老研究中被广泛应用。本
实验复制的 D-半乳糖致衰老小鼠行动迟缓 ,皮毛逐
渐无光泽和变灰色 ,体质量逐渐下降。实验结果表
明 ,竹节参多糖低 、中 、高剂量组与衰老模型组比较 ,
均能不同程度促进胸腺和脾脏质量的增加 ,降低血
清中丙二醛含量和提高血清超氧化物歧化酶活力 、
肝组织与脑组织中的谷胱甘肽过氧化物酶活力与过
氧化氢酶活力 ,说明竹节参多糖能通过提高小鼠机
体的免疫器官功能 ,降低脂质过氧化物和氧自由基 ,
阻断体内脂质过氧化并分解过氧化氢 ,从而提高机
体免疫器官功能和减轻脂质过氧化物与氧自由基对
机体的损伤以延缓衰老 。其中 ,中剂量组差异显著
性优于低剂量和高剂量组 。
近年来国内学者相继报道了六味地黄多糖 、仙
人掌茎粗多糖 、北五味子多糖 、肉苁蓉多糖 、南沙参
多糖 、滑菇多糖 、黄芪多糖和莲子多糖等中药多糖具
有抗衰老作用[ 6-13] ,但关于竹节参多糖延缓衰老作
用的研究 ,国内外尚未见报道。本实验首次研究竹
节参多糖延缓衰老的作用 ,为竹节参多糖延缓衰老
的临床疗效提供理论依据。
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[收稿日期] 2008-09-08
[ 作者简介] 刘巍 ,男 ,硕士 ,主管药师 ,电话:13006132756 , E-mai l:liuw ei9@medmail.com .cn
调脂方及其拆方的实验研究
刘巍　(武汉大学中南医院 ,湖北 武汉 430000)
[ 摘要] 　目的:研究调脂方对高脂血症大鼠的调脂作用。方法:取 SD大鼠 180 只 , 留取 20 只作为空白对照组喂基础饲料 ,其
余各组均采用高脂乳剂灌饲方式建立大鼠高脂血症模型 , 喂养 7 d 后 ,经大鼠眼球取血 , 测受试动物血清中总胆固醇(TC), TC
显著升高者 ,说明高脂血症模型复制成功。选取模型成功大鼠按 TC 水平均匀地分为 6 组 , 即模型对照组 、调脂方高 、中 、低
组 、绞股蓝总苷组 、洛伐他汀组。于给药的 15 , 30 d 禁食 12 h 后 , 检测各组高脂血症成年大鼠血清中 TC 、TG、LDL-C、高密度
脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量 ,并与西药洛伐他汀 、中成药绞股蓝总苷进行比较。结果:给药 30 d 后 , 与模型组相比 , 调脂方各
剂量可使 HDL-C 显著升高(P<0.001或 P<0.01),其高剂量可使 LDL-C 显著下降(P<0.05)。升高 HDL-C 作用优于绞股
蓝总苷(P<0.05)和洛伐他汀(P<0.01)。结论:调脂方具有一定调脂作用。
[ 关键词] 　调脂方;血清总胆固醇;血清甘油三酯;低密度脂蛋白;高密度脂蛋白
[中图分类号] R289.1　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2009)13-1085-03
Study on Tiaozhi Fang decoction
LIU Wei(Zhongnan H ospital o f Wuhan Univ ersity , H ubei Wuhan 430061 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study lipid-regulating action of T iaozhi Fang on hyperlipidemic rats.METHODS　160 SD rats
(180-200)g we re douched with fa t emulsion continuously , for 7 day s , blood serum total choleste rol(TC)incr eased significantly ,
which meaned that the model wa s made successfully.then they w ere divided into six g roups on their TC:mode l contro l g roup ,
T iao zhi Fang g roup(tree g roup), To tal saponins of gynostemma g roup and lo vastatin capsule g roup.as the contro l g roup , 20
SD rats w as fed with no rmal food , the effect of Tiaozhi Fang on serum trig ly cer ide s(TG), serum total cho lestero l(TC), se rum
LDL-C and serum HDL-C in adult rats with chronic hype rlipidemwe re w as observ ed after 15 , 30.RESULTS　Compa red with
model g roup , Tiaozhi Fang has raised the concents of blo od HDL-C after 30 , its function was significantly diffe rent compared
with the to tal saponins o f gynostemma and lo vastatin capsules(P<0.05 o r P<0.01).CONCLUSION　T iao zhi Fang has the
function o f requtating lipid.
KEY WORDS:T iao zhi Fang;cho lestero l;trig ly ceride;LDL-C;HDL-C
　　血脂异常是心血管疾病的重要危险因子之一 ,
降脂作用明确的是西药他汀类降脂药 ,但对肝脏和
横纹肌具不良反应 。中药降脂药因其具有降脂护
肝 ,不良反应小等特点而成为新的研究热点 。本实
验中调脂方由紫苏子油 、红花 、茯苓 、泽泻 、车前子 、
荷叶按 4∶2∶3∶2∶2∶2组成 ,为湖北省中医院名老中
医多年总结处方 ,方中紫苏子油的α-亚麻酸具有调
脂作用 ,能使高脂血症所致的脂肪颗粒沉淀 ,动脉粥
样硬化危险因子减少 ,最终达到有效避免和延缓动
脉硬化发生的目的 , 该方疗效已经多年临床验证 。
为研究其临床价值 ,将复方有效部位提取后 ,与临床
主要降脂药物绞股蓝总苷 、洛伐他汀比较 ,考察调脂
方降脂作用与特点 ,为调脂方的开发应用提供实验
依据 。
1　材料
胆固醇(北京奥博星生物技术责任有限公司 ,批
号 20060701);胆盐(广东环凯微生物科技公司 ,批
号 20006460);聚山梨醇酯(上海申隆药业有限公司
生产 ,批号 20060302);丙二醇(天津市化学试剂六
厂 ,批号 2002-06-02);丙赛优(上海复兴朝晖药业有
限公司 ,批号 050204);总胆固醇(TC)试剂盒(上海
名典生物工程有限公司 ,批号 011M087);总三酰甘
油(TG)试剂盒(上海名典生物工程有限公司 ,批号
010M082);低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒
·1085·中国医院药学杂志 2009年第 29卷第 13期 Chin H osp Pharm J , 2009 Ju l , Vol 29, No.13