全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(3)∶336 ～ 338
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:81202908) ;四川省教育厅科研项目(No． 14ZB0082)
作者简介:杜蕾蕾，正攻读中药学专业的博士学位。Email:leileid@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:wxy1226@ 126． com
卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量测定
杜蕾蕾1，陈 雏2，李亚真3，王雪彦4*
(1．成都中医药大学民族医药学院，四川 成都 611137;2．四川省中医药科学院，四川 成都 610041;3．四川大学华西药学院，四
川 成都 610041;4．四川大学华西医院药剂科，四川 成都 610041)
摘要:目的 测定卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量。方法 采用比色法测定总酚和总黄酮的含量;采用 UPLC法测定槲皮
素、山柰酚和异鼠李素的含量。结果 5 批沙棘果实中总酚、总黄酮、槲皮素、山柰酚、异鼠李素的含量分别为 29． 80 ～ 38． 80、
17. 60 ～ 27． 40、0． 38 ～ 2． 01、0． 17 ～ 2． 00、0． 49 ～ 4． 53 mg·g －1。结论 卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量较高，值得进一步研
究与开发。
关键词:卧龙沙棘;果实;多酚;黄酮;比色法;超高效液相色谱法;含量;测定
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)03 － 0336 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 03． 026
Determination of the polyphenols in berries of Hippophae rhamnoides subsp． wolongensis
DU Lei － lei1，CHEN Chu2，LI Ya － zhen3，WANG Xue － yan4*
(1． College of Ethnomedicine，Chengdu University of TCM，Chengdu，Sichuan，611137 P． Ｒ． China;2． Sichuan Academy of Chinese
Medicine Sciences，Chengdu，Sichuan，610041 P． Ｒ． China;3． West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，
610041 P． Ｒ． China;4． Dept． of Pharmacy，West China Hospital，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，610041 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To determine the polyphenols contents in berries of Hippophae rhamnoides subsp． wolongensis．METHODS
The contents of total polyphenols and total flavonoids were measured by Colorimetry． Quercetin，kaempferol and isorhamnetin were
quantified by UPLC． ＲESULTS The contents were found to be 29． 80 － 38． 80 mg·g －1 of total polyphenols，17． 60 － 27． 40 mg·g －1 of
total flavonoids，0． 38 － 2． 01 mg·g －1 of quercetin，0． 17 － 2． 00 mg·g －1 of kaempferol and 0． 49 － 4． 53 mg·g －1 of isorhamnetin．
CONCLUSION H． rhamnoides subsp． wolongensis，which the polyphenols are rich in the berries，has potential health value meriting
further investigations．
Key words:Hippophae rhamnoides subsp． wolongensis;Berries;Polyphenols;Flavonoids;Colorimetr;UPLC;Content;Determination
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)03 － 0336 － 03
沙棘为蒙古族、藏族常用药材，为胡颓子科沙棘
Hippophae rhamnoides L． 的干燥成熟果实［1］。目前
研究较多的为中国沙棘 H． rhamnoides subsp．
sinensis Ｒousi、蒙古沙棘 H． rhamnoides subsp． mon-
golicaica Ｒousi 等亚种。卧龙沙棘 H． rhamnoides
subsp． wolongensis Lian，K． Sun et X． L． Chen 为新
近发现的一个亚种，与中国沙棘的亲缘关系较近，分
布于青藏高原东缘与四川盆地的过渡地带［2］。实
地考察时发现:卧龙沙棘在四川的汶川、茂县、宝兴、
九寨沟等地都有分布，生于海拔1． 8 ～ 2． 4 km 的河
岸边或山坡上。由于黄酮类、酚酸类、原花青素类等
天然多酚成分与沙棘的抗氧化、抗炎、抗菌和保护心
血管等活性密切相关［3］，因此，建立了卧龙沙棘果
实中多酚类成分的含量测定方法，可为卧龙沙棘的
开发提供了依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
Acquity UPLC色谱仪(美国 Waters) ;TU － 1810
紫外 －可见分光光度计(北京普析通用)。芦丁对
照品(中国药品生物制品检验检定所) ;儿茶素、槲
皮素、山柰酚、异鼠李素对照品(成都曼斯特生物科
技有限公司) ;乙腈为色谱纯;水为超纯水;其余试
剂为分析纯。样品采自四川茂县和宝兴，经四川大
学华西药学院张浩教授鉴定为卧龙沙棘 H． rham-
noides subsp． wolongensis的干燥成熟果实。
1． 2 总酚的测定［4］
1． 2． 1 溶液的制备 精密称取没食子酸对照品适
量，用纯水溶解，制得 223 μg·mL －1没食子酸对照品
溶液。精密称取卧龙沙棘果实粉末 1 g，加入 70%
乙醇 30 mL，回流提取 2 h;过滤，滤渣中加入 35%乙
醇 25 mL，回流提取(1 h × 2)。过滤提取液，用 35%
乙醇洗涤残渣;洗液和滤液合并，转至 100 mL 量瓶
中，用 35%乙醇定容，即得供试品溶液。
1． 2． 2 标准曲线的制备 分别吸取没食子酸对照
品溶液 0、50、100、200、300 μL 至 10 mL 刻度管中，
加纯水至 3 mL，加入 Folin － Ciocalteu 试剂 1 mL，6
min后加入 7． 5% Na2CO3 溶液 0． 8 mL，稀释至刻
度，置暗处反应 1 h，于 765 nm测定吸光度。以吸光
度对没食子酸浓度进行线性回归，得回归方程为:
Y = 0． 0747X － 1． 4 × 103(r2 = 0． 9965) ，没食子酸
1． 12 ～ 6． 69 μg·mL －1与吸光度具良好的线性。
1． 2． 3 总酚的含量测定 取供试品溶液 50 μL，以
纯水为空白对照，按“1． 2． 2”项下方法测定吸光度，
根据标准曲线计算样品中总酚的含量(表 1)。
1． 3 总黄酮的测定［1］
1． 3． 1 溶液的制备 精密称取芦丁对照品适量，用
70%乙醇溶解，得 426 μg·mL －1芦丁对照品溶液。
1． 3． 2 标准曲线的制备 分别吸取芦丁对照品溶
液 0、1、2、3、4、5、6 mL，置 25 mL 量瓶中，加 35%乙
醇补足至 6 mL，加入 5% NaNO2 1 mL，放置 6 min后
再加入 10% Al(NO3)3 1 mL，放置 6 min后加入 4%
NaOH 10 mL，用 35%乙醇定容，室温下反应 30 min
后，于 510 nm测定吸光度。以吸光度对芦丁浓度进
行线性回归，得回归方程为:Y = 10. 954X + 3． 6 ×
10 －3(r2 = 0． 9995) ，芦丁 8． 36 ～ 50． 16 μg·mL －1与
吸光度具良好的线性。
1． 3． 3 总黄酮的含量测定 取“1． 2． 1”项制备的
供试品溶液 6 mL，按“1． 3． 2”项方法测定吸光度;同
时取供试品溶液，除不加氢氧化钠试液外同法操作，
作为空白对照，按标准曲线法计算样品中总黄酮的
含量(表 1)。
表 1 样品中多酚类成分的含量测定结果(mg·g －1)
Table 1 Ｒesults of content determination of polyphenols in the berries of samples(mg·g －1)
No． Origin Total phenolics Total flavonoids
Flavonoid aglycones
quercetin kaempferol isorhamnetin total
1 四川宝兴 29． 80 18． 20 2． 01 1． 85 3． 57 7． 43
2 四川宝兴 36． 80 24． 70 1． 31 2． 00 4． 53 7． 84
3 四川宝兴 38． 80 27． 40 0． 76 0． 44 2． 48 3． 68
4 四川茂县 34． 20 17． 60 0． 82 0． 81 1． 78 3． 41
5 四川茂县 34． 40 26． 10 0． 38 0． 17 0． 49 1． 04
1． 4 主要黄酮苷元的测定［5］
1． 4． 1 色谱条件 色谱柱为 Waters BEH C18柱(50
mm ×2． 1 mm，1． 7 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 2%乙
酸水溶液(28∶72) ，流速 0． 4 mL·min －1，柱温
30 ℃，检测波长 370 nm。在上述色谱条件下，各待
测组分分离良好，槲皮素、山柰酚、异鼠李素的保留
时间分别为 1. 02、1． 78、1． 99 min(图 1)。
图 1 混合对照品(A)和供试品(B)溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of mixed control solution(A)and sam-
ple solution(B)
1． 4． 2 溶液的制备 精密称取槲皮素、山柰酚和异
鼠李素对照品适量，用甲醇溶解制得混合对照品贮
备液。精密称取样品粉末 0． 5 g，精密加入乙醇 50
mL，称定重量，回流提取 1 h，放冷后用乙醇补足重
量，摇匀后过滤;精密量取 25 mL 续滤液，置具塞锥
形瓶内，加盐酸 3 mL，于 75 ℃水浴中加热水解 1 h，
立即冷却并转移至 50 mL 量瓶中，以适量乙醇洗涤
锥形瓶，洗液并入同一量瓶内，用乙醇定容，过滤，取
续滤液，即得供试品溶液。
1． 4． 3 标准曲线的制备 取混合对照品贮备液，用
甲醇依次稀释得系列浓度对照品溶液。取上述溶液
分别进样，以相应组分的峰面积对进样量进行线性
回归，得回归方程分别为:Y槲皮素 = 7． 632 × 10
3X +
6. 503 × 103(r2 = 0． 9999)、Y山柰酚 = 8. 358 × 10
3X +
6. 043 × 103(r2 = 0． 9999)、Y异鼠李素 = 8． 805 × 10
3X +
7． 589 × 103(r2 = 0． 9999)。槲皮素 2． 72 ～ 20． 40
ng、山柰酚 2． 21 ～ 16． 56 ng、异鼠李素 2． 70 ～ 20． 24
ng与峰面积的线性关系良好。
1． 4． 4 样品的测定 取卧龙沙棘果实样品，按
“1. 4. 1”“1． 4． 2”项下方法制备供试品溶液，分别进
样，记录峰面积，计算样品中槲皮素、山柰酚和异鼠
李素的含量(表 1)。
2 讨论
文中 5 批卧龙沙棘果实样品中总酚的平均含量
733第 3 期 杜蕾蕾，等。卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量测定
华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(3)∶338 ～ 340
为 3． 48% ±0． 34%，总黄酮的平均含量为 2． 28% ±
0． 46%，表明黄酮类是卧龙沙棘果实中天然多酚类
的主要成分。所测样品的总黄酮含量均符合《中国
药典》2010 年版中沙棘项下总黄酮含量不得少于
1. 5%的规定。槲皮素、山柰酚和异鼠李素是卧龙沙
棘果实中的主要黄酮苷元，且异鼠李素的含量最高，
这与中国沙棘果实中的黄酮苷元特征相似。1 ～ 4
号样品中异鼠李素的含量为 0． 18% ～ 0． 45%，符合
《中国药典》中沙棘项下异鼠李素含量不得少于
0. 10%的规定。但 5 号样品中异鼠李素的含量异常
偏低，仅为 0． 05%，而且其槲皮素和山柰酚的含量
也最低，但该样品的总酚和总黄酮的含量并不低，分
别为 3． 44%和 2． 61%，其原因有待研究。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社，2010:171 － 172．
［2］ 廉永善，孙坤，陈学林．卧龙沙棘———沙棘属一新亚种［J］．沙
棘，2004，11(2) :1 － 3．
［3］ 杨洋，张艺，赖先荣，等．沙棘膏质量控制的研究进展［J］． 华
西药学杂志，2014，29(3) :345 － 347．
［4］ 刘峰群，曹江，靳守东，等． 比色法测定消癌平注射液中总酚
酸的含量［J］．华西药学杂志，2003，18(3) :220 － 222．
［5］ 李亚真，杜蕾蕾，陈雏，等． 沙棘膏制备过程中黄酮类成分及
抗氧化活性的变化研究［J］． 华西药学杂志，2014，29(4) :
407 － 409．
收稿日期:2014 － 11 － 17
作者简介:王裴珮(1989—) ，女，四川成都，正攻读药物分析专业的硕士学位。
* 通信作者(Correspondent auothor) ，Email:qgs@ scu． edu． cn
高效毛细管电泳法测定甲磺酸伊马替尼胶囊中的伊马替尼
王裴珮1，王 竞2，赵志玲1，付春梅1，钱广生1*
(1．四川大学华西药学院，四川 成都 610041;2．四川海思科制药有限公司，四川 成都 611130)
摘要:目的 采用高效毛细管电泳法测定甲磺酸伊马替尼胶囊中的伊马替尼。方法 采用熔融石英毛细管(60 cm × 75 μm，
有效长度 10 cm) ，以 100 mmol·L －1磷酸水溶液(三乙醇胺调 pH2． 5)为背景电解质，分离电压 － 25 kV，分离温度 25 ℃，检测波
长 267 nm，进样时间 10 s × 0． 5 psi。结果 伊马替尼的线性范围为 0． 01 ～ 1． 0 mg·mL －1(r2 = 0． 9971) ，回收率为 101. 1%(ＲSD
= 2． 69%)。结论 所用方法快速、简便，可用于甲磺酸伊马替尼胶囊的质量控制。
关键词:甲磺酸伊马替尼;伊马替尼;胶囊;高效毛细管电泳法;含量;测定;质量控制
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)03 － 0338 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 03． 027
Determination of Imatinib in Imatinib mesylate capsules by HPCE
WANG Pei － pei1，WANG Jing2，ZHAO Zhi － ling1，FU Chun － mei1，QIAN Guang － sheng1*
(1． West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，610041 P． Ｒ． China;2． Sichuan Haisco Pharmaceutical
Group，Chengdu，Sichuan，611130 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish an HPCE method for the determination of Imatinib in Imatinib mesylate capsules．METHODS
The HPCE analyses were performed on a fused － silica capillary(60 cm × 75 μm，10 cm effective length)with an hydrodynamic injec-
tion time of 10 s(0． 5 psi) ，a capillary temperature of 25 ℃，100 mmol·L －1 phosphoric acid adjusted to pH2． 5 with triethanolamine as
background electrolyte，and a voltage of － 25 kV，and the detective wavelength was 267 nm． ＲESULTS The calibration curve showed
good linearity in the range of 0． 01 － 1． 0 mg·mL －1(r2 = 0． 9971)． The average recovery was 101． 1%，and the ＲSD was 2． 69% ．
CONCLUSION The method is rapid，and efficient，and can be used for the quality control of Imatinib mesylate capsules．
Key words:Imatinib mesylate;Imatinib;Capsules;HPCE;Content;Determination;Quality control
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)03 － 0338 － 03
甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesylate，IM) ，商品
名为格列卫，是一种酪氨酸激酶抑制剂，2001 年被
美国 FDA 批准用于慢性粒细胞性白血病(CML)的
治疗，可用于治疗 CML 急变期、加速期或 α －干扰
素治疗失败后的慢性期患者［1］。2002 年，格列卫又
被批准用于治疗胃肠道间质肿瘤(GIST)。目前 IM