免费文献传递   相关文献

西伯利亚花楸枝条提取物抑菌作用的测定



全 文 :185※基础研究 食品科学 2006, Vol. 27, No. 11
西伯利亚花楸枝条提取物抑菌作用的测定
帕提古丽·马合木提,祖丽皮亚·玉努斯*
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:为了研究西伯利亚花楸枝条乙醇提取物的体外抑菌特性,测定了提取物对一系列供试细菌和真菌的最低
抑菌浓度、最低杀菌浓度,以金黄色葡萄球菌及大肠杆菌为例研究了提取物的热稳定性、紫外光稳定性,以金黄
色葡萄球菌为例研究了提取物抑菌时间及抑菌率的关系,同时还进行了实物防腐实验。结果表明提取物对所有供试
细菌及真菌都有明显的抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)较低;121℃湿热处理30min后,抑菌效应下降不大,具
有良好的热稳定性及紫外光稳定性,其抑菌作用随抑菌时间的延长而增强,实物防腐实验效果良好。
关键词:西伯利亚花楸枝条乙醇提取物;最低抑菌浓度;最低杀菌浓度;稳定性
Antibacterial Effect of the Extract from Sorbus sibiricaBranch
PATIGUL Mahmut,ZULFIYA Yunus*
(College of Life Sciences and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract :The antimicrobial effect of ethanol extract from Sorbus sibirica Br ch for a series of bacterium and fungi were studied.
The extract was also studied for its stability to temperature and ultraviolet radiation . The results indicated that the extract with
a certain concentration could effectively inhibit the growth of bacteria and fungi. The MIC was lower and not reduced much when
heated at under 121℃ for 30 min,it still shows a strong antiseptic power after a treatment of ultraviolet radiation. The extract
has obvious antimicrobial effect on animal tests.
Key words:exrtract of Sorbus sibirica branch(ESSB);minimal inhibitory concentration;minimal bactericidal
concentration;stability
中图分类号:Q935 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)11-0185-04
收稿日期:2006-08-30 *通讯作者
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30550001)
作者简介:帕提古丽·马合木提(1959-),女,副教授,研究方向为植物有效成分的分离提取。
西伯利亚花楸(Sorbus sibirica)为蔷薇科(Rosaceae)花
楸,属小乔木。原产于俄罗斯新西伯利亚地区,在我
国分布于布尔津河上游,新疆地区有少量野生分布。树
高8~12m,树冠呈椭圆形,小枝具软毛呈红褐色,奇
数羽状复叶、对生,叶片深绿色,果实为梨果。果
实富含多种维生素可以食用,有抗坏血酸(达200mg/
100g),胡萝卜素(达18mg/100g)、VP、山梨糖醇、有
机酸、VC等,其鲜果黄酮含量达0.25%~0.35%。对
治疗高血压等心脑血管疾病有特效。西伯利亚花楸是一
种具有多项用途和开发潜力的珍贵资源。由于它重要的
经济和生态价值,已被列入新疆维吾尔自治区Ⅲ级重点
保护植物名录[1~3]。
有关西伯利亚花楸的抑菌作用尚未见报道,因此,
本实验对西伯利亚花楸枝条提取物抑菌作用进行初步研
究,旨在寻找新的有效而安全的食品天然防腐添加剂,
并进一步深度开发西伯利亚花楸资源,填补国内空白,
振兴边疆经济,充实祖国中草药宝库。
1 材料与方法
1.1植物材料
实验所用植物材料2005年8月采于新疆哈纳斯,经
本院植物教研室鉴定为西伯利亚花楸。
1.2仪器与设备
RE-52A 型旋转蒸发器、电子恒温水浴锅、722光
栅分光光度计、回流提取装置、电热套、捣碎器、电
子天平、压力蒸汽灭菌锅、西门子冰箱、电热恒温培
养箱。
1.3供试菌种
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌
(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、
2006, Vol. 27, No. 11 食品科学 ※基础研究186
产气杆菌(Enterobacter aerogenes)、酵母菌
(Saccharomyes cerevisiae)、黑曲霉(Aspergillus niger)、
青霉(Penicilllium sp.)、根霉(Rhizopus sp.)。
1.4培养基
牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3g,NaCl 5g,蛋
白胨10g,琼脂粉20g,pH7.2~7.4,水1000ml。
马铃薯培养基:
马铃薯200g,葡萄糖10g,琼脂粉20g,pH自然,
水1000ml。
1.5方 法
1.5.1制备西伯利亚花楸枝条乙醇提取物
称取800g西伯利亚花楸枝条(自然晾干)用组织捣碎
器粉碎,加1:4的95%乙醇置于室温下24h,次日电热
恒温水浴锅中回流提取90min,抽滤得滤液,药渣在加
3倍的95%乙醇提取60min ,滤得药液。将两次所得
滤液合并置于旋转蒸发仪中减压浓缩并分离出乙醇,最
后的浓缩液用干燥箱烘干(45~50℃)后贮藏备用。
1.5.2供试菌悬液的制备
供试菌的制备:在相对应的试管斜面培养基上,
细菌置35~37℃活化18h,真菌27~28℃活化44~48h。
菌悬液的制备:将细菌挑取一环,稀释,比浊,
根据已建立的Y-X曲线[4]求得相应菌悬液浓度,实验
中制备各供试菌液的浓度为1×104个/ml。真菌经斜面
接种,培养(28℃,44~48h)然后在平板培养24~48h形
成单个菌落,取单个菌落混悬于10ml磷酸缓冲液中,用
血球计数板计数,制成菌悬液(含菌量为1×103)。
1.5.3最低抑菌浓度(MIC)的测定[5]
含不同浓度的西伯利亚花楸枝条乙醇提取物培养基
的制备:以提取备用液作为100%原液,先用少量乙醇
溶解,再加蒸馏水稀释配成浓度为25%的西伯利亚花楸
枝条乙醇提取物溶液。准确量取该溶液加入到盛有液体
培养基的试管中,配成不同浓度的西伯利亚花楸枝条溶
液系列培养基。
细菌:每一系列接种一种菌种(0.2ml),每个浓度做
3个重复,另取1稀释系列,不接种任何菌做空白对照,
置适宜温度下培养36±1℃,24h;观察实验结果。以
能抑制细菌生长的最低添加量为该提取物的最低抑菌浓
度(MIC)。因含提取物的培养液肉眼不宜辨明菌体的生
长情况,可从各管取一环转接于固体平板上,经适宜
条件培养后观察有无菌落生长。无菌生长的最低浓度即
为提取物的最低抑菌浓度(MIC)。
真菌:将提取物与真菌培养基做不同比例的混合,
制成不同浓度的培养基。然后再接种实验菌,置于适
宜条件培养,观察生长情况。以能抑制真菌生长的最
低添加量为该提取物的最低抑菌浓度(MIC)。
1.5.4最低杀菌浓度(MBC)的测定[5]
将提取物的浓度高于MIC(包括MIC)的各管继续培
养24h,观察生长情况。以仍无菌生长的添加量为该提
取液的最低杀菌浓度(MBC)[5]。
1.5.5西伯利亚花楸枝条乙醇提取物热和压力稳定性的
测定(以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为例)
将稀释至一定浓度的西伯利亚花楸枝条乙醇提取物
分别置于30、50、80、100℃水浴和121℃湿热条件下
处理30min后,测定其抑菌活性[6,7]。
1.5.6紫外稳定性研究(以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌
为例)
将西伯利亚花楸枝条乙醇提取物分别在紫外灯下处理
10、20、30、40、50、60min后测定其抑菌活性[6,7]。
1.5.7提取液抑菌时间与抑菌率的关系
以金黄色葡萄球菌为例,测定不同浓度的醇提取液
对其作用时间与抑菌率之间的关系。取2.5、5、7.5、
10mg/ml浓度的醇提取液1ml分别与0.2ml金黄色葡萄球
菌悬液混合,充分搅匀,当作用l、3、6、12h时,
分别再用已熔化的牛肉膏蛋白胨培养基倒平皿。另取
0.2ml金黄色葡萄球菌与1ml无菌水混和后,也用已熔化
的牛肉膏蛋白胨培养基倾注平皿,以作对照。以上平
皿均在36℃下培养,采用血球计数板和平板计数法计
数,并分别数菌落数,按照下式计算抑菌率[8,9]。
对照皿菌落数-试验皿菌落数
抑菌率=———————————————×100%
对照皿菌落数
1.5.8食物防腐实验
将羊肉、茄子、草莓切成小块,分成若干份,分
别加入25%,10%提取液、无菌水,置35~37℃下保
温48、96h,肉眼观察食品变化[10]。
2 结果与分析
2.1西伯利亚花楸枝条乙醇提取物对供试菌的MIC
西伯利亚花楸枝条乙醇提取物对供试细菌的MIC为
7.5mg/ml、MBC为10mg/ml、对供试真菌的MIC为
22.5mg/ml、MBC为25mg/ml。
2.2热处理和压力对西伯利亚花楸枝条乙醇提取物抑菌
作用的影响
121℃湿热处理30min后,抑菌效应下降不大,具
有良好的热稳定性。
2.3紫外光稳定性研究
结果表明随紫外处理时间的变化,提取物的抑菌活
性基本保持不变,由此可见,该提取物对紫外光具有
极高的稳定性。
187※基础研究 食品科学 2006, Vol. 27, No. 11
菌种 MIC (mg/ml) MBC (mg/ml)
枯草芽孢杆菌 2.5 10
金黄色葡萄球菌 2.5 7.5
大肠杆菌 7.5 10
产气杆菌 5.0 10
酵母菌 22.5 25
黑曲霉 17.5 17.5
青霉 15 17.5
根霉 17.5 20
表1 提取物对受试菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度
Table 1 MIC and MBC of ESTL against some bacterials
2.4提取液抑菌时间与抑菌率的关系
由图3可知,在相同的时间内,提取液的浓度越
高,抑菌率越高;相同浓度的提取液,作用时间越长,
抑菌率也就越高。
2.5西伯利亚花楸枝条乙醇提取物食物防腐实验结果
实验结果见表2中,对照系列明显变质,而加入
25%,10%西伯利亚花楸枝条乙醇提取物的煮熟系列和
未煮熟系列未变质。可见提取物中有抑菌成分存在。
食物 时间(h) 处理 质地 色泽 气味 长菌 悬液透明度
25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
48 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑浊
对照 腐烂变质 白色 恶息味 长满菌 黄色浑浊
羊肉 25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
96 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑浊
对照 腐烂变质 白色 恶息味 长满菌 淡黄色浑浊
25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
48 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑浊
对照 表面变粘滑 白色 微馊味 少量霉菌 淡黄色透明
茄子 25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
96 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑浊
对照 腐烂变质 白色 重馊味 少量霉菌 淡黄色透明
25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
48 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑
对照 腐烂变质 淡粉色 微馊味 长满霉菌 微红浑浊
草莓 25%提取液 无变化 棕色 无异味 未长菌 棕色浑浊
96 10%提取液 无变化 橘红色 无异味 未长菌 橘红浑
对照 腐烂变质 淡粉色 重馊味 长满霉菌 微红色浑浊
表2 食物防腐实验结果
Table 2 Antimicrobial effect on animal tests
3 结 论
3.1在制备西伯利亚花楸枝条乙醇提取物时考虑到提取
物的稳定性,整个提取浓缩的过程始终控制较低温度下
2006, Vol. 27, No. 11 食品科学 ※基础研究188
进行。该提取物对供试菌的抑制效果明显,对革兰阳
性和革兰阴性球菌或杆菌、酵母及霉菌均有良好的抑菌
效果。
3.2提取物对高温和紫外线都有良好的稳定性,而对
压力不稳定。枝条乙醇提取物具有良好的食物防腐效果,
可用于食物防腐、保鲜等领域,可作为天然食品防腐
剂进行开发和利用。
3.3相同浓度的西伯利亚花楸枝条乙醇提取液,作用
时间越长,抑菌率越高;在相同的时间内,提取液的
浓度越高,抑菌率也就越高。
参考文献:
[1] 新疆植物志编辑委员会. 新疆植物志(第二卷, 第二分册)[M]. 乌鲁
木齐: 新疆人民出版社, 1973. 6.
[2] 姚莉莉, 赵海泓, 申立营, 等. 西伯利亚花楸组培快繁技术体系的研
究[J]. 辽宁农业科学, 2005, (6): 19-21.
[3] 宋晓凯. 天然药物化学[M]. 北京: 化学工业出版社, 2004. 74-
77.
[4] 叶竹秋, 林跃鑫. 巴西蘑菇抑菌作用的初步研究[J]. 食品科学, 2001,
22(4): 82-84.
[5] 珧淑敏. 芦荟提取物抑菌作用的研究[J]. 食品科学, 2002, 23(4): 137-
139.
[6] 郝淑贤, 刘欣, 赵力超, 等. 荸荠英提取物抑菌成分稳定性的探讨[J].
食品科学, 2005, 26(2): 71-74.
[7] 李云雁, 宋光森. 板票壳提取物抑菌作用研究[J]. 林产化学与工业,
2004, 24(3): 62-64.
[8] 谢主兰, 吴文龙. 榕树叶抑菌作用的试验研究[J]. 食品研究与开发,
2002, 23(2): 7-9.
[9] 赵良忠, 王放银, 段林东, 等. 大青叶抗菌物质提取及抗菌效果研究
[J]. 食品科学, 2004, 25(11): 138-140.
[10]高学敏, 王秀玲, 汪镜邦, 等. 山梨酸的抑菌及防腐应用实验[J]. 食
品科学, 2005, 23(12): 41-44.
收稿日期:2006-08-20 *通讯作者
作者简介:张彧(1969-),女,副教授,博士研究生,研究方向为食物(含生物质)资源开发利用。
红薯叶茎大孔树脂分离物的抑菌作用
张 彧1,高荫榆1,*,季 玲2
(1.南昌大学 食品科学教育部重点实验室,江西 南昌  330047;
2.大连市产品质量监督检验所,辽宁 大连 116021)
摘 要:选用AB-8大孔树脂对红薯茎叶70%乙醇提取液进行分离,以不同浓度的乙醇溶液进行洗脱,研究各洗
脱物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺杆菌、葡枝根霉和黑曲霉的抑制效果,以苯甲酸钠和丙酸钙为对照。结
果表明,采用大孔树脂分离手段可以获得抑菌作用存在显著差异的红薯茎叶各提取物。红薯茎叶中不同极性的成分
的抑菌作用不同。
关键词:红薯茎叶;大孔树脂;抑菌活性
Bacteriostasis of Absorbent Resin Extracts of Sweet Potato Stem and Leaf
ZHANG Yu1,GAO Yin-yu1,*,JI Ling2
(1.Key Laboratory of Food Science,Ministry of Edu ation, Nanchang University, Nanchang 330047,
China;2.Dalian Product Quality Supervision and Testing Institute, Dalian 116021, China)
Abstract :The 70% ethanol extract of SPSL was separated by AB-8 absorbent resin with elution of gradient of ethanol. The
bacillus (Escherichia coli, St phy ococcus aureus and Shig bacillus) and fungus (Rhizopus stolonifer and Aspergillus niger) were
chosen in bacteriostasis experiments of alcoholict eluents, and calcium propionate and sodium benzoate were used to be control.
The results showed that there was a striking dissimilarity of bacteriostasis between the extracts of alcoholict eluents separated
by absorbent resin. The components of SPSL with different polarity had different effect on inhibition of bacillus and fungus.
Key words:sweet potato stem and leaf;absorbent resin;bacteriostasis
中图分类号:TS202.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)11-0188-04