免费文献传递   相关文献

高效液相色谱法同时测定百华花楸果实中金丝桃苷和芦丁的含量



全 文 :·药物研究· 中国医药导报 2016 年 2 月第 13 卷第 4 期
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 13 No. 4 February 2016
百华花楸(Srobus pohuashanensis)为蔷薇科(Ros-
aceae)花楸属(Sorbus)植物,其果实称“花楸果” [1]。 蔷
薇科 (Rosaceae)花楸属 (Sorbus)在全世界有 80 余
种,广产于热带及亚热带地区,尤其在北半球,系为分
布广阔的大属植物。 我国有 50 余种,分布于东北、西
北和东南等地区。 该属植物民间很早就入药,药用的
花楸主要有西伯利亚花楸(S.aucu Paria)、百华花楸
(S.pohuashanensis)、天山花楸(S.tianshanie)及变种天
山毛花楸(S.tianshaniea.var.tomentosa)等[2]。研究表明,
花楸属植物中含有较丰富的黄酮、花青素、类山梨酸
苷、生氰苷等成分,具有抗氧化、抗癌、抗辐射、降糖、
保护心肌缺血和止咳平喘等药理作用[2-5]。花楸属植物
的果实也具有较高的药用价值,研究证实其主要的活
性成分为黄酮类化合物,主要为金丝桃苷、芦丁等活
性物质[6-8]。 百华花楸产自我国黑龙江、吉林、辽宁、内
蒙古等地区。民间常以果实、嫩枝叶及茎皮入药。其果
实味苦甘、性平;嫩枝叶及茎皮味苦、无毒,具有清热
利肺、补脾生津之功效[9]。百华花楸在黑龙江省资源丰
高效液相色谱法同时测定百华花楸果实中
金丝桃苷和芦丁的含量
孟令锴 1 张朝立 1 高长久 1 李 洁 2
1.牡丹江医学院药学院天然药物化学与生药学教研室,黑龙江牡丹江 157011;
2.牡丹江医学院附属红旗医院血液科,黑龙江牡丹江 157011
[摘要] 目的 建立同时测定百华花楸果实中金丝桃苷和芦丁含量的高效液相色谱分析方法。 方法 采用高效液
相色谱法,色谱柱为 Zorbax SB-C18柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇∶乙腈∶0.025 mol/L 磷酸(10∶20∶70),
流速 1.0 mL/min, 检测波长 363 nm, 柱温 30℃。 结果 金丝桃苷和芦丁分别在 0.1~0.8 μg 和 0.16~1.28 μg 范围
内,进样量与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数分别为 0.9994 和 0.9992;平均回收率(n = 9)分别为 98.58%
和 98.22%,RSD 分别为 1.71%和 1.81%;平均含量分别为 0.473、0.342 mg/g。 结论 该法操作简便、准确,稳定性
及重复性好,可用于对百华花楸果实中金丝桃苷和芦丁成分的含量测定。
[关键词] 百华花楸;金丝桃苷;芦丁;高效液相色谱法
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2016)02(a)-0032-05
HPLC determination of content of hyperoside and rutin in fruit of Srobus
pohuashanensis
MENG Lingkai1 ZHANG Chaoli1 GAO Changjiu1 LI Jie2
1.Natural Medicinal Chemistry and Pharmacognosy Teaching and Research Section, Mudanjiang Medical College, Hei-
longjiang Province, Mudanjiang 157011, China; 2.Department of Hematology, the Affiliated Hongqi Hospital of Mu-
danjiang Medical College, Heilongjiang Province, Mudanjiang 157011, China
[Abstract] Objective To establish HPLC method for the determination of hyperoside and rutin in fruit of Srobus po-
huashanensis. Methods The Zorbax SB-C18 (5 μm, 4.6 mm×250 mm) column was adopted and eluted with mobile phase
consisted of methanol∶acetonitrile∶0.025 mol/L aqueous phosphoic acid (10∶20∶70) at the column temperature of 30℃.
The flow rate was 1.0 mL/min and detective wave length was 363 nm. Results Hyperoside was proved to be linear in
the range of 0.16-1.28 μg with a regression coefficient of 0.9992, the average recovery was 98.22% with RSD of
1.71%; Rutin was proved to be linear in the range of 0.1-0.8 μg with a regression coefficient of 0.9994, the average
recovery was 98.58% with RSD of 1.81%. The average content of hyperoside and rutin was 0.473 mg/g and 0.473 mg/g
respectively. Conclusion The developed method is convenient and accurate with high repeatability and stability, which
is suitable for the content determination.
[Key words] Srobus pohuashanensis; Hyperoside; Rutin; HPLC method
[基金项目] 黑龙江省卫生计生委科研项目 (2014-214);黑
龙江省牡丹江医学院科学技术研究项目(ZS201326)。
[作者简介] 孟令锴(1980-),男,硕士;研究方向:生药鉴定
及品质评价。
[通讯作者] 李洁(1982-),女,硕士;研究方向:年轻急性淋
巴细胞白血病治疗临床研究。
32
中国医药导报 2016 年 2 月第 13 卷第 4 期 ·药物研究·
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 13 No. 4 February 2016
富,但相关研究却相对滞后,关于百华花楸的报道多
集中在育苗、扦插繁殖等方面。 对于其化学成分及药
理作用鲜有报道。 近年来,本课题组对百华花楸果实
进行了系统研究,已初步探明了其抗炎、镇咳、平喘等
药效物质基础及作用机制[10-12]。 为了进一步合理开发
利用该植物药材资源,控制其内在质量,本课题组以
金丝桃苷和芦丁作为指标成分,采用高效液相色谱法
同时测定其在百华花楸果实中的含量,以便建立一种
简便易行,结果准确可靠的金丝桃苷和芦丁的测定方
法,为该药材药用资源的系列开发提供参考资料。
1 仪器与试药
Agilent 1100高效液相色谱仪(美国 Agilent公司);
KQ5200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);甲
醇、乙腈为色谱纯,水为重蒸水;金丝桃苷对照品(购
于中国药品生物制品检定所,批号:111521-200303),
芦丁对照品(购于中国药品生物制品检定所,批号:
100080-200306),其余试剂均为分析纯。
百华花楸果实采自黑龙江省牡丹江地区,经牡丹
江医学院天然药物化学与生药学教研室吴兆华教授
鉴定为蔷薇科 (Rosaceae)花楸属 (Sorbus)百华花楸
(Srobus pohuashanensis)干燥成熟的果实。
2 方法与结果
2.1 检测波长的确定
取适当浓度的金丝桃苷与芦丁混合对照品溶液
进行紫外扫描,在 200~600 nm波长下,金丝桃苷与芦
丁在 363 nm波长处有较强吸收, 并且两峰分离效果
较好,故选定检测波长为 363 nm。
2.2 色谱条件的确定
色谱柱:Zorbax SB-C18柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),
流动相:甲醇︰乙腈︰0.025 mol/L磷酸(10∶20∶70),流
速为 1.0 mL/min,检测波长为 363 nm,柱温为 30℃。
在本色谱条件下,百华花楸果实中芦丁和金丝桃苷的
色谱峰与其他成分相邻的色谱峰能够达到很好的分
离,理论塔板数按金丝桃苷和芦丁色谱峰计算均不低
于 5000。 结果见图 1。
2.3 样品中金丝桃苷和芦丁提取方法的考察
称取百华花楸果实药材 9 份,每份 5 g,以甲醇超
声提取,选取溶剂用量(A)、提取时间(B)和提取次数
(C)为考察因素,每个因素选取 3个水平,因素水平表
见表 1,选用 L9(34)正交试验表安排实验,以金丝桃苷
提取率为考察指标,将结果填入正交试验表中,进行
直观分析和方差分析[13-15]。 由表 2、4 可知,RC>RA>RB,
表明提取率的影响从大到小分别为: 提取次数>溶剂
用量>提取时间;以芦丁提取率为考察指标,将结果填
入正交试验表中,进行直观分析和方差分析。 由表 3、
5 可知,RC>RA>RB, 表明提取率的影响从大到小分别
为:提取次数>溶剂用量>提取时间;通过以上实验结
果,结合直观分析、方差分析及实际实验情况,最终确
定实验方案为:20倍提取溶剂,超声提取 3次,每次 30
min。
表 1 因素水平表
表 2 金丝桃苷提取优化正交试验结果
表 3 芦丁提取优化正交试验结果
表 4 金丝桃苷含量为指标方差分析
注:* 表示显著性
2.4 溶液的制备
2.4.1 对照品溶液的制备 精密称取 4.0 mg 金丝桃苷
1
2
3
10
15
20
30
50
70
1
2
3
因素 A(倍) B(min) C(次)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
R
1
1
1
2
2
2
3
3
3
45.68
46.42
47.09
1.413
1
2
3
1
2
3
1
2
3
46.48
46.33
46.37
0.15
1
2
3
2
3
1
3
1
2
45.38
46.53
47.23
1.90
44.30
45.68
47.05
47.15
46.80
45.32
48.00
46.52
46.75
试验号 A B C 提取率(%)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
R
1
1
1
2
2
2
3
3
3
32.03
32.48
33.25
1.22
1
2
3
1
2
3
1
2
3
33.06
32.29
32.42
0.77
1
2
3
2
3
1
3
1
2
31.66
32.54
33.56
1.90
31.07
31.89
33.14
33.20
32.65
31.58
34.90
32.32
32.54
试验号 A B C 提取率(%)
A
B
C
误差
2.99
0.04
5.51
4.54
2
2
2
6
1.05
0.01
1.93
5.14
5.14
5.14 *
因素 离差平方和 自由度 F 比 F 临界值 显著性
33
·药物研究· 中国医药导报 2016 年 2 月第 13 卷第 4 期
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 13 No. 4 February 2016
对照品,置于 25 mL 容量瓶中,加入少量甲醇超声溶
解并稀释定容至刻度,制成 160 μg/mL 的金丝桃苷对
照品储备液; 另精密称取 2.5 mg 芦丁对照品, 置于
25 mL 容量瓶中,加入少量甲醇超声溶解并稀释定容
至刻度,制成 100 μg/mL 的芦丁对照品储备液;分别
精密吸取 2 mL 芦丁对照品储备液和 2 mL 金丝桃苷
对照品储备液置于 10 mL 容量瓶中,摇均,甲醇定容
至刻度,制成含 20 μg/mL 芦丁对照品和 32 μg/mL 金
丝桃苷对照品的混合对照品储备液。
2.4.2 样品溶液的制备 称取百华花楸果实药材 5 g,
置于 100 mL 容量瓶中,加适量甲醇,超声提取 3 次,
每次 30 min,再加甲醇定容至刻度,离心,取上清液经
0.45 μm的微孔滤膜过滤,即得。
2.5 线性关系考察
精密吸取金丝桃苷对照品储备液 1.0、2.0、4.0、
6.0、8.0 mL 于 10 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度,摇
匀,按“2.2”项下条件,进样 10 μL,测定峰面积,以峰
面积值为纵坐标,对照品量(μg)为横坐标,绘制标准
曲线, 计算回归方程为:Y=4.08×104X +6.68×103,r =
0.9992,结果表明金丝桃苷在 0.16~1.28 μg 的范围内
呈良好线性关系;另精密吸取芦丁对照品储备液 1.0、
2.0、4.0、6.0、8.0 mL 于 10 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至
刻度,摇匀,按“2.2”项下条件,进样 10 μL,测定峰面
积,以峰面积值为纵坐标,对照品量(μg)为横坐标,绘
制标准曲线,计算回归方程 Y=3.87×104X+5.79×103,
r = 0.9994, 结果表明芦丁在 0.1~0.8 μg 的范围内呈
良好线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取金丝桃苷和芦丁混合对照品储备液,按
“2.2”项下条件,重复进样 6 次,每次进样量 10 μL,记
录峰面积,计算日内精密度;连续进样 3 d,计算日间
精密度。结果表明,日内精密度:金丝桃苷峰面积值的
RSD=0.58%,芦丁的 RSD=0.76%;日间精密度:金丝
桃苷峰面积值的 RSD=0.77%,芦丁的 RSD=0.87%。以
上结果表明仪器精密度较好。
2.7 稳定性试验
取同一份供试品溶液,按“2.2”项下条件,分别于
0、1、2、4、8 h分别进样测定,记录金丝桃苷、芦丁组分
峰面积。 结果金丝桃苷峰面积值的 RSD=0.79%;芦丁
峰面积值的 RSD=0.92%,表明金丝桃苷、芦丁组分在
8 h内稳定。
2.8 重复性试验
取百华花楸果实药材 5 g,按“2.4.2”项下样品溶
液的制备方法进行,平行制备供试液 6 份,按“2.2”项
下条件测定含量,药材中金丝桃苷和芦丁的平均含量
分别为 0.47、0.34 mg/g。RSD分别为 1.18%、1.59%。表
明方法重复性较好。
2.9 回收率试验
精密称取已测知含量的百华花楸果实药材 5 g,
按照“2.4.2”项下样品制备方法制备供试品溶液,吸取
供试品溶液 2、4、6 mL 各 3 份,分别置于 10 mL 容量
瓶中,再精密加入高、中、低浓度的金丝桃苷和芦丁对
照品溶液,加甲醇定容至刻度,按“2.2”项下色谱条件
进行进样测定,结果见表 6、7。 结果金丝桃苷回收率
的 RSD 与芦丁回收率的 RSD 均小于 2%, 表明该方
法准确度较高。
表 6 金丝桃苷回收率测定结果(n = 9)
表 7 芦丁回收率测定结果(n = 9)
2.10 样品测定
取百华花楸果实药材样品 6 份, 精密称定,置
100 mL量瓶中加甲醇适量,超声提取 3次,每次 30 min,
放冷,用甲醇稀释至刻度,摇均,过滤,取滤液再经
A
B
C
误差
2.29
1.02
5.46
4.77
2
2
2
6
0.78
0.35
1.87
5.14
5.14
5.14 *
因素 离差平方和 自由度 F 比 F 临界值 显著性
表 5 芦丁含量为指标方差分析
注:* 表示显著性
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.047
0.047
0.047
0.094
0.094
0.094
0.141
0.141
0.141
0.032
0.048
0.064
0.080
0.096
0.112
0.128
0.144
0.160
0.078
0.096
0.110
0.172
0.191
0.205
0.267
0.281
0.297
96.88
102.08
98.43
97.50
101.04
99.11
98.44
97.22
97.50
98.22 1.81
序号
样品中金丝桃苷
的量(mg)
加入金丝桃苷
的量(mg)
测得金丝桃
苷的量(mg)
回收率
(%)
平均回
收率
(%)
RSD
(%)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.034
0.034
0.034
0.068
0.068
0.068
0.102
0.102
0.102
0.032
0.040
0.048
0.048
0.060
0.072
0.080
0.100
0.120
0.065
0.073
0.081
0.115
0.126
0.141
0.181
0.203
0.221
96.88
97.5
97.91
97.92
96.67
101.39
98.75
101.00
99.17
98.58 98.58
序号
样品中芦丁
的量(mg)
加入芦丁
的量(mg)
测得芦丁
的量(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
34
中国医药导报 2016 年 2 月第 13 卷第 4 期 ·药物研究·
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 13 No. 4 February 2016
0.45 μm的微孔滤膜滤过,即得。精密吸取供试品溶液
10 μL,注入高效液相色谱仪,按“2.2”项下条件测定,
记录色谱峰面积,采用标准曲线记录含量。结果样品中
金丝桃苷与芦丁的平均含量分别为 0.473、0.342 mg/g;
RSD分别为 1.29%、1.28%。 结果见表 8。
表 8 含量测定结果(n = 6)
1.芦丁 2.金丝桃苷
图 1 混合对照品(A)与样品溶液(B)高效液相色谱图
3 讨论
黑龙江省花楸属植物资源较为丰富,花楸属植物
果实具有较高的药用价值,其主要的活性成分为黄酮
类化合物,主要为金丝桃苷、芦丁等活性物质,具有解
痉、镇咳、抗炎、抗病毒等作用。目前,对黑龙江省百华
花楸果实相关研究较匮乏,尚未见有同时测定百华花
楸果实中金丝桃苷、芦丁两组分的文献报道。 本研究
采用高效液相色谱法同时测定金丝桃苷和芦丁的含
量,方法简便易行,结果准确、可靠。 可作为百华花楸
果实中金丝桃苷和芦丁的含量测定方法。
本实验对百华花楸果实中金丝桃苷和芦丁成分
的提取条件进行了优化, 分别对提取溶剂用量(10、
15、20倍)、提取时间(30、50、70 min)、提取次数(1、2、
3 次)进行正交试验,最终确定 20 倍的甲醇为提取溶
剂,超声提取 3 次,每次 30 min 作为最佳提取工艺,
该条件下金丝桃苷和芦丁提取率较高, 且方法简单,
经济实用; 在进行金丝桃苷色谱条件优化试验中,依
据资料记载情况 [16-23],分别对甲醇-磷酸;乙腈-水;乙
腈-磷酸;甲醇-乙腈-磷酸等多种流动相进行了考察,
结果发现以甲醇-磷酸为流动相条件下, 金丝桃苷与
芦丁色谱峰不能达到很好的分离, 基线漂移严重;以
乙腈-水为流动相条件下,金丝桃苷色谱峰存在拖尾现
象;以乙腈-磷酸为流动相条件下,金丝桃苷色谱峰出
现拖尾,且基线不稳;因此选择甲醇-乙腈-磷酸为流
动相;考察了加入不同物质量的磷酸(0.01、0.025、0.05、
0.075 mol/L)的实验结果,发现当加入 0.025 mol/L 的
磷酸进行洗脱时的柱效和分离度最好,并能有效消除
拖尾现象, 因此最终确定以甲醇∶乙腈∶0.025 mol/L 磷
酸(10∶20∶70)为最佳流动相。
[参考文献]
[1] 国家中医药管理局.中华本草[M].上海:上海科学技术出
版社,1999:2903-2906.
[2] 于明,李铣.花楸属植物化学成分、药理作用及其研究进
展[J].辽宁中医学院学报,2004,6(5):364-365.
[3] 耿玮峥,吕铭洋,崔新明,等.天山花楸叶总黄酮对心肌
缺血再灌注损伤大鼠心肌酶和心肌超微结构的影响[J].
中国实验诊断学,2015,19(6):877-879.
[4] 李乐,仇秀红,苏向辉,等.天山花楸乙酸乙酯部位降糖
效果研究[J]. 时珍国医国药,2014,25(5):1060-1061.
[5] Termentzi A,Alexiou P,Demopoulos V,et al. Inhibitory ef-
fect of Sorbus domesticca fruits extracts on aldose reduc-
tase enzyme in correlation to their phenolic content [J].
Phar Mazie,2008,63(9):8567-8569.
[6] 常军民,向阳,李毓斌,等.天山花楸药材质量标准研究[J].
新疆医科大学学报,2013,36(6):785.
[7] 常军民,向阳,孟磊,等.高效液相色谱-质谱法同时测定
天山花楸枝叶及果实中苦杏仁苷和金丝桃苷的含量[J].
中国新药杂志,2013,22(13):1578-1586.
[8] 柴小东.百华花楸果实有效成分研究[J].辽宁林业科技,
2015,(4):74-75.
[9] 长春中医学院革命委员会.吉林中草药[M].长春:吉林人
民出版社,1970:114-115.
[10] 李雪梅,周雪,赵英福,等 .百华花楸果实水提取液镇
咳、平喘作用的实验研究 [J].中国医学装备 ,2015,11
(1):118-119.
[11] 侯甲福,李雪梅,李文超,等.百华花楸果实抗炎有效部
位的研究[J].中国药物经济学,2013,9(5):225-226.
[12] 侯甲福,刘世娟,刘丹丹,等.百华花楸果实水提物的急
性毒性实验研究[J].中国药物经济学,2014,9(10):221-
222.
[13] 芮鸣,唐辉,王鲁石,等.天山花楸叶中总黄酮超声提取
工艺研究[J].时珍国医国药,2009,20(12):3038-3040.
1
2
3
4
5
6
0.480
0.469
0.472
0.479
0.471
0.464
0.337
0.344
0.338
0.342
0.340
0.349
样品序号 金丝桃苷(mg/g) 芦丁(mg/g)
时间(min)
A
时间(min)
B



( m
AU




( m
AU

(下转第 40页)
35
·综 述· 中国医药导报 2016 年 2 月第 13 卷第 4 期
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 13 No. 4 February 2016
expressions of mitofusin-2 and procollagen in uterosacral
ligament fibroblasts of postmenopausal patients with
pelvic organ prolapse [J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Bi-
ol,2014,174:141-145.
[25] Choi DH,Kim JH,Seo JH,et al. Matrix metalloproteinase-
3 causes dopaminergic neuronal death through nox1-regen-
erated oxidative stress [J]. PLoS One,2014,9(12):e115954.
[26] Hagler MA,Hadley TM,Zhang H,et al. TGF-β signalling
and reactive oxygen species drive fibrosis and matrix re-
modelling in myxomatous mitral valves [J]. Cardiovasc Res,
2013,99(1): 175-184.
[27] Samarakoon R,Overstreet JM,Higgins SP,et al. TGF -
beta1→ SMAD/p53/USF2→ PAI-1 transcriptional axis in
ureteral obstruction-induced renal fibrosis [J]. Cell Tis-
sue Res,2012,347(1): 117-128.
[28] 蒋树龙,花宝金.JAK2/STAT3/SOCS3信号通路与肿瘤转
移[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2014,21(6):698-701.
[29] 王卫真,孟明辉,孔丽,等.Jak/Stat 信号通路在经典CCl4
大鼠肝纤维化模型中的动态变化及扶正化瘀方对其
影响[J].临床肝胆病杂志,2014,30(4):344-348.
[30] Huang JS,Chuang LY,Guh JY,et al. Antioxidants atten-
uate high glucose-induced hypertrophic growth in renal
tubular epithelial cells [J]. Am J Physiol Renal Physiol,
2007,293(4):F1072 -F1082.
[31] 潘澎,刘绍能 .PI3K/Akt 信号通路与肝纤维化 [J].临床
肝胆病杂志,2013,29(5):389-392.
[32] Qin J,Xie YY,Huang L,et al. Fluorofenidone inhibits
nicotinamide adeninedinucleotide phosphate oxidase via
PI3K/Akt pathway in thepathogenesis of renal interstitial
fibrosis [J]. Nephrology (Carlton),2013,18(10):690-699.
[33] Yu SM,Kim SJ. Production of reactive oxygen species by
withaferin A causes loss of type collagen expression and
COX -2expression through the PI3K/Akt,p38,and JNK
pathways in rabbit articular chondrocytes [J]. Exp Cell Res,
2013,319(18):2822-2834.
[34] Zhang H,Wang ZW,Wu HB,et al. Transforming growth
factor-β1 induces matrix metalloproteinase-9 expression
in rat vascular smooth muscle cells via ROS-dependent
ERK-NF-κB pathways [J]. Mol Cell Biochem,2013,375
(1-2):11-21.
[35] Oh CJ,Kim JY,Min AK,et al. Sulforaphane attenuates hep-
atic fibrosis via NF-E2-related factor 2-mediated inhi-
bition of transforming growthfactor-β/Smad signaling [J].
Free Radic Biol Med,2012,52(3):671-682.
[36] Huang K,Huang J,Xie X,et al. Sirt1 resists advanced
glycation end products-induced expressions of fibronectin
and TGF -β1 by activating the Nrf2/ARE pathway in
glomerular mesangial cells [J]. Free Radic Biol Med,2013,
65:528-540.
[37] Saw CL,Yang AY,Huang MT,et al. Nrf2 null enhances
UVB-induced skin inflammation and extracellular matrix
damages [J]. Cell Biosci,2014,4:39.
[38] 王真,史宏晖,陈娟,等.经典 Wnt信号转导通路在盆腔
器官脱垂发病中的作用[J].中华医学杂志,2012,92(24):
1669-1672.
[39] Hsu YC,Lee PH,Lei CC,et al. Nitric oxide donors res-
cue diabetic nephropathy through oxidative -stress -and
nitrosative-stress-mediated Wnt signaling pathways [J]. J
Diabetes Investig,2015,6(1):24-34.
(收稿日期:2015-10-11 本文编辑:苏 畅)
[14] 于晓瑾,王振宇,高宇,等.超声提取百华花楸总黄酮工
艺研究[J]. 中医药信息,2015,32(5):27-31.
[15] 林锦锋,杨志业,李曼莎,等.巴戟天薄层色谱鉴别用对
照提取物的研制与应用 [J]. 中国医药导报,2015,12
(27):22-25
[16] 王幻,唐辉,王国军,等.HPLC 测定天山花楸叶提取物
中 6 种黄酮成分[J].中国实验方剂学杂志,2014,20(15):
58-61.
[17] 张薇,常军民,沈美英,等.RP-HPLC 法测定天山花楸
果实中苦杏仁苷、芦丁、金丝桃苷和橙皮苷的含量[J].
药物分析杂志,2011,31(5):935-937.
[18] 李景庄,胡君萍,杨建华,等.HPLC-UV 法测定天山花
楸中金丝桃苷和芦丁的含量 [J].药物分析杂志,2009,
29(2):310-312.
[19] 马晓丽,常军民,李毓斌,等.毛细管电泳法测定天山花
楸中的黄酮类化合物[J].中成药,2011,33(3):534-536.
[20] 李毓斌,常军民,王岩.天山花楸药材 HPLC 指纹图谱
的研究[J].中成药,2011,33(5):742-745.
[21] 李凤霞,王凤儒,李宏伟.高效液相色谱仪对甲硝唑注
射液灭菌工艺筛选研究[J].中国医学装备,2015,1(2):
37-39.
[22] 宋学英,杨华,赵逸松.高效液相色谱仪的应用分析[J].
中国医学装备,2015,12(1):29-31.
[23] 王悦,童建.高效液相质谱法测定大鼠血浆中布洛芬浓
度[J].中国医学装备,2014,11(B12):105.
(收稿日期:2015-10-26 本文编辑:赵鲁枫)
(上接第 35 页)
40