全 文 ：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1 98 7年第 5卷第 4 期 2 8 1
藏药紫茧治疗包虫病后棘球蜘的超微结构
陈钦铭 叶于聪 许子俊 寇星灿 柴风玲
青海省高原医学科学研究所
提要 包虫病患者经直茎紫茧总碱治疗后 , 其体内棘球蜘生发膜与原头节的超微结构有明显变
化 , 透射电镜观察到生发膜皮层细胞细胞器排列紊乱 , 胞浆中微管明显扩张 、 破裂 , 线粒体呈退行
性变 。 扫描 电镜发现生发膜表面出现许多陷窝 , 原头节呈外翻型 , 顶突界面缺损 , 部分头钩脱落 ,
吸盘变形 , 体表出现虫蛀样损害 。 初步结果表明直茎紫茧对人体细粒棘球坳与原头节有广泛的细胞
内效应 。
迄今 , 治疗包虫病尚无理想的化疗药物 ,
为此 , 我们通过离体培养 【1 、 动物试验性治
疗 `幻发现藏药紫茧有一定效果 , 通过毒理学
与临床前药理研究 , 表明该药毒性较低 , 随
即推荐临床试用 。 初步观察结果提示该药对
人体细粒棘球坳病 , 即囊型包虫病有一定效
果 , 现应用透射电镜结合扫描电镜对直茎紫
荃总碱治疗后经外科手术摘除的内囊及囊液
中的原头节进行观察 , 以便探讨该药对生发
膜与原头节超微结构的影响 , 这将有利于分
析药物作用机理 , 并为临床合理用药提供依
据。
例不服药物 , 仅作内囊或囊肿摘除术 , 以上
两组均为住院患者 。
病理组织学检查 从对照 、 服药两组手
术摘除的囊肿中各选择 2 个囊肿 , 并从这些
囊肿的可疑病变部位切取 2 个组织块 , 按常
规固定 , 石腊包埋切片 , H E染色 , 光学显微
镜下观察 。
透射电镜标本的材料来源同病理切片 ,
按常规操作进行 , 用 J EM 一2 0 OE X 型透射电
镜观察 。
扫描电镜标本的制备方法按常规进行 ,
用 e a ms e a n 3一 3 o A C V扫描电镜观察 。
材料与方法
药物 直茎紫茧 ( C o r夕a zi: : t r ￡e t a s t .e
hP )采自青海省互助县 , 系全草 , 利用离子交
换树脂法提取总碱 (每 kI g生药 中含 1 39 总
碱 ) , 用时配成 2 . 5肠紫茧总碱溶液 , 不加防
腐剂与矫味剂 , 保存于 4 ” C冰箱。
病例选择 根据病史 、 体征 、 “ B ” 超 、 x
射线摄片 、 同位素肝脏扫描及卡松尼试验 、
微量间接血凝试验 ( I H A ) 、 嗜酸粒细胞计数
等化验检查确诊为囊型包虫病 15 例 , 分为服
药与对照两组 , 前者 10 例按每天 1 5m g / k g 剂
量 (约为小鼠灌胃L D S。的 1 / 90 , 相当于每天
1
.
1冰 / kg 生药 ) 连服 30 d ,随即复查上述各项
检查指标 (卡松尼试验除外 ) , 并作内囊或囊
肿摘除术 ,直接验证药物脸疗效果 ;对照组 5
结 果
对照组包虫囊腔中含透 明无色囊液 , 囊
壁张力高 , 病理切片可见正常生发膜与板状
层结构 , 囊液中含有活的原头节 (多为内陷
型 , 原头节死亡率仅 4 . 9 ~ 9 . 8呱 ) ,原头 节重
移植试验后小鼠感染率达 93 帕。 服药组 10 例
中 3 例无效 , 7例有效表现为症状改善或消
失 , “ B ” 超 、 x 射线摄片 、 同位素肝脏扫描显
示包虫囊肿有不同程度缩小 , 经手术验证包
虫囊腔中囊液少 , 囊壁张力低 , 原头节死亡率
达68 ~ 96 呱 , 原头节重移植试验的感染率低
于 30 帕 , 病理切片均显示生发膜细胞变性坏
死 、 溶解脱落 , 板状层 内出现空泡 、 棕褐色
颗粒沉着 、 玻璃样变或板层结构断裂等病理
改变。
2 8 2
扫描电镜观察 对照组生发 膜 外 表 面
(板状层面 )有外生性育囊 , 又称育囊外部发
育现象 , 这些外生囊呈密集型或散在分布 ,
大小不等 , 形状相似 (图 1 ) 。 生发膜内表面
(囊腔面 )可见内生性育囊 (图 2 ) 。 原头节多
呈内陷型 ,在其顶端可见盘状内凹的内陷孔 ,
外径 约 17 ~ 2娜m , 中央有外突物 , 此即外翻
型原头节的顶突 , 内陷孔周围可见形状 、 大
小基本一致的细柱状浆膜突起 (图 3 ) 。
服药组生发膜外表面微绒毛断裂 、 脱落 ,
未见外生性育囊 , 但可见大小不等 、 深浅不
一 、 形状各异 、 边缘不规则的陷窝 , 形似虫
蛀样损害 (图 4 ) 。 生发膜内表面的乳头状或
往状突起排列紊乱 , 未见内生性育囊 , 仅见
大量不规则细胞碎片及断裂的乳 头 状 突 起
(图 6 )。 服药组原头节多呈外翻型 , 顶突界
面缺损 , 部分头钩脱落 , 吸盘变形 , 体表出
现边缘不整齐的凹陷 (图 6 ) 。
透射电镜观察 对照组棘球坳的板状层
由细丝和小泡构成 , 生发膜含皮层细胞 、 肌
细胞 、 火焰细胞 、 导管细胞等 。 其中以皮层
细胞为最重要 , 皮层区与板状层相邻接 , 由
皮层细胞的远端胞浆和微绒毛构成胞浆合胞
体区带 , 微绒毛数量多 , 发育 良好 。 皮层细
胞区为生发膜第二区带 , 皮层细胞一般有一
个胞核 , 核质均匀 , 核膜为双层膜 , 在核周
胞浆中可见丰富的微管 、 线粒体 、 高尔基复
合体 、 溶酶体 、 内质网 、 囊泡 、 核糖体及糖
原颗粒等 (图 7 )。
服药组生发膜有一系列超微结构变化 :
微绒毛脱落或消失 , 皮层细胞胞浆微管明显
扩张 、 破裂 、 融合成大空泡或呈现片状空化
区 (图 8 ) , 线粒体变性 , 蜡断裂消失 , 基质
明显减少 , 电子密度降低 , 出现局限性空化
区 , 有的出现环层小体或髓样小体 , 溶酶体
数量增多 (图 9 ) , 高尔基复合体离开核附近 ,
解体为不规则的高尔基器 , 出现小泡与小泡
散布于胞浆中 , 胞核核周间隙局 限性扩大 ,
异染色质呈现边聚现象 ( C hr ~
t in ma
r ig an
-
t i o n
, 图 1 0 ) 。
讨 论
鉴于接受药物治疗的原发性囊型包虫病
患者感染包虫时间较长 、 包虫囊壁较厚 , 且
大部分为育囊 , 故药物要穿透厚囊壁对生发
膜 、 原头节 、 子囊发挥药理作用就比较 困难 。
然而 , 根据患者症状 、 x 射线摄片 、 “ B 超 、
同位素肝脏扫描 、 包虫囊肿病理学观察 、 原
头节死亡率测算 、 原头节重移植试验作为疗
效评定标准 , 藏药直茎紫茧总碱治疗 10 例包
虫病近期有效者为 7 例 `3 , , 应用电镜技术观
察到服药后生发膜 、 原头节均出现明显的超
微结构改变 , 这些变化与动物试验中观察到
的结果基本一致 「4] , 提示该药对原发性和继
发性细粒棘球坳病均有较恒定的治疗效果 。
应用透射电镜观察到生发膜皮层细胞出
现以微管损害与线粒体变性为主要特征的膜
系统超微结构改变 。 由于胞浆内微管扩张 、
破裂 , 可引起细胞支架与细胞器间隔消失 、
水解酶等分泌物在合成部位堆积与运输通道
阻塞 , 从而导致细胞变性与溶解 。 由于线粒
体变性 、 峭断裂 、 出现空化区 , 使线粒体功
能遭受严重破坏 , 从而使生发膜细胞分裂 、
产生原头节 、 形成育囊 、 分泌囊液等功能受
阻 , 这与甲苯达哇 `功 、 阿苯达哇 〔6 , 引起的棘
球蜘损害有相似之处 。
应用扫描电镜 , 我们不仅在对照组生发
膜内表面观察到有内生囊 , 而且在生发膜外
表面发现有外生囊 , 这与R e d d y ( 1 9 6 9 ) `7 , 、
R e t t a ( 1 9 7 5 )〔 8 ,
、
T h om p
s o n ( 1 9 7 6 ) 【91等报道的
动物原发性包虫囊中的育囊外部发育现象柑
似 ,有人提出这种现象的出现是由于 “ 拥挤作
用 ” ( C r ow id gn ef f etC )的结果 〔O1 。 已知生发
膜不同部位存在着高度差异的代谢区域 , 在
形成育囊与原头节部位出现脂质和多种酶的
积聚 `幻 , 表明这些物质对原头节 、 育囊的生
长至关重要 。 经直茎紫茧总碱治疗后 , 生发
膜内表面与外表面均未见到育囊 , 仅观察到
2 83
生发膜外表面有许多大小不等陷窝 , 生发膜
内表面乳头状突起排列紊乱 、 断裂 。 一般认
为皮层细胞合成的分泌物与板状 层 形 成 有
关 , 而后者又起到保护层作用 , 使虫体免遭
宿主攻击 , 并控制着营养物质的输送 , 另外
皮层细胞合成的水解酶经微管系统运转到板
状层 , 可起到营养物质的细胞外消化作用 ,
当胞浆微管遭受破坏时 , 引起水解酶在合成
部位长时间堆积 , 导致细胞自溶 , 推想人体
棘球拗生发膜外表面陷窝形成可能与此机理
有关 。 由于原头节的顶突 、 头钩 、 吸盘遭受
破坏 , 使其摄取营养物质并钻入宿主肠粘膜
或内脏组织的功能受到严重影响 , 原头节很
难在宿主体内存活 , 似可解释经直茎紫荃总
碱治疗后的原头节进行重移植难以在宿主体
内形成棘球勤 。 总之 , 该药经胃肠道吸收后
可通过棘球蜘囊壁的屏障进入囊腔而发挥药
物的生理活性 。 有关直茎紫茧治疗人体棘球
勤病及其对生发膜 、 原头节超微结构的影响 ,
在文献中尚未见报道 。
综上所述 , 应用电镜技术观察药物治疗
后人体棘球勤与原头节超微结构改变 , 有助
于探讨药物作用的部位及其作用机理 。 据临
床观察结合 电镜观察 ,如延长给药时间 , 适当
加大剂量 , 并对受治病人延长观察时间 , 既
可能加重生发膜与原头节的损害 , 又可观察
这些损害是否可逆 , 这些均有待今后进一步
研究 (本文图 1一 10 见插图第 16 页 ) 。
海平、 周生祥 、金凯平等同志曾参加部分实验工作。
参 考 文 献
1
. 陈钦铭 , 等 .寄生虫学与寄生虫病杂志 1 9 85 ; 3 : 92 .
2
. 叶于聪 , 等 .寄生虫学与寄生虫病杂志 198 5 ; 3 : 295 .
3
. 陈钦铭 , 等 .中华外科杂志 19 86 ; 24 : 了68 .
4
. 陈钦铭 , 等 .药学学报 1 985 ; 2:0 326 .
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V e r h e y e n A
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2 P a r a s i t e n ku n d
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M
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39
.
1 9 86年4月 3 日收稿 1 9 8 7年 1月 2 7日修回
E L E C T R O N M I C R O S C O P I C S T U D I E S O N T H E E F F E C T O F
C OR Y D A L I S S T R I C T A S T E P H O N n U M A N E CH I N O C O C C U S
吞丑A N U L O S U S A N D P R O T O S C O L I C E S
C h e n Q i n m i雌 , Y e Y u e o n g , X u Z i j u n , K o u X i n罗a n
C h a i F e n g l i n g
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A B S T R A C T
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S t e户 f o r 3 0 da v s ( 1 5m g / k g · d , P o ) w e r e 心b s e r v e d . C y s t s f r om t h e t o t a l a l k a l o i d 一 t r e a t e d
P a t i e n t s w e r e s h o 、 v n b y t r a n s m i s s ion
e l e e t r o n m i e r o s e o P e t o h a v e d i s t u r b a n e e i n t h e
a r r a n g e m e nt of or g a n e l l e s d i l a t a t ion a n d d i
s r u P t i o 玫 o f m i cr o t u b u l es , 功尽r e a s e i n s i z e a n d
n u m b e r o f l邵 os o m e s , d e e r e a s e i n n u m be r o f G o l g i b o啦 e s , a n d d e罗n e r a t ion o f
d r i a
.
U n d e r s e a单i飞 e l e e t r o n 而 e r o s e叩 e m a n y ` p i t s w e r e o b s e r v e d a r i s i gn
t h e r w i t h d i s r u P t i o n
m i t o e h o n
_
t h e o u t e r
a dn i n
e r S u r f a c e s o f th e ge r m i n a l
p l a s
am m
e m b r a n e
,
h o o k d e t a hc m 亡n t
,
S e e m s e l e a r t h a t t h o t o t a l a l k a l o id
g ar
n “ Z仍u s e y s t s a dn P r o t o s e o l ic es i n
h y山 t id `公 ae s己. - -
m e m b r a n e t o 罗 o f t h e e x t e r n a
s u 亡k e r 改 f o r m i t y o f e v a g i n a t e d
h a s a P r o f o u n d i n t r a e e l lu l a r
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p r ot o s c o l i e e s
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藏药紫菌治疗包虫病人后棘球翰的超微结构变化
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I N H U M A N S A F T E R C O R Y D A L I S S T R I C T A S T E P H T R E A T M E N T
(正文见第2 8 1页 F o r t e x t , s e e p . 2 8 1 )
图 1、 3和 7为对照组 , 图 4、 6 , 8、 10 为服药组 图 1 . 生发膜外表面 , 箭头示外生性育囊 2 60 x 图2 . 生发膜内表
面 , 箭头示内生性育囊2 8 00火 图 3 . 内陷型原头节 , 可见内陷孔 60 x 图 4 . 生发膜外表面布满许多陷窝 1 Zo X
图5 .生发膜内表面乳头状突起排列紊乱 , 可见脱落的细胞碎片与喷火口样陷窝1 20 0 x 图 6 .外翻型原头节 , 可
见外浆膜受损 , 部分头钩脱落 、 吸盘变形 70 x 图 7 .生发膜皮层细胞中央有个核质均匀的胞核 ( N ) 10 O0 x
图 8 生发膜皮层细胞大多数微管局限性扩张 、 破裂 (箭头 )9 00 x 图9 .生发膜皮层细胞线粒体肿胀 。 空泡化
幼 OOD x 图 1 0 . 生发膜皮层细胞核呈现异染色质边聚现象川 0 O x
F i g 1
.
o u t e r s u r f a e e o f 力 o r m a l g e r m i n a l m e m b : a n e , s h o w i n g b r o o d e a p s u l e ( a r r o w ) 2 6 0 0 x F i g 2
.
I n n e r s u r f a e e o f n o r m
a l g e r m i
n a l m
e
m b
: a n e , s h o w i n g b : o o d e a P : u l e (
a r r o w ) 2 ￡0 0 x F i g 3 . N o r m a l
i n v a g i
n a t e d P r o t o s e o le x
, n o t e t h e b a s a l o r l f i e e 6 0 0 x F i g 4
.
o u t e r s u r f a e e o f g e r m i
n a l m e m b ar n e
w 主t h n u m e r o u P i t s f r o m t r e a t e d e a s e 1 2 00 x F i g 5 . I n e r s u r f a e e o f g o r m i n a l m e m b r a n e s h o w i n g
e e l l d e b
r i s a n d e r a t e r
一 s h a P e d p i t s f r
o
m t
r e a t e d e a s e 1 2 00 x F i g 6
.
E x t e r n a l P l a s m
a m e nr b r a n e d i s
-
了u P i o n o f e va g i n a t e d P厂o t o s e o le x f r o m t r e a t e d e a s e , s h o w i n g d e t a e h m e n t o f h o o k s a n d d e g o r m i t y o f
s u e k e r s : 0 0又 F ig : . N o r m a l : e s u m e n at l 。 e xl w i th a 。 e击。 。 u e le u , i 0 00o x F i g 5 . M i e r o tu比 xe s
s h o w i n g d i la ta t i on a n d d i s r u P t i o n ( a r r o w ) 9 000 x F i g 9
.
S w e l l i n g a n d va
e u o la r d e g e n e r a t i o l t
o f m i t o e h o d r i a
.
25 000 X F i g 10
.
C h r o m
a t i n m a r g i n
a t i o n o f t h e n u e le u s 2 0 00 0 x
1 6
.