全 文 ：第 31卷第 5期
2008年 10月
云南中医学院学报
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
Vol. 31No. 5
10. 2008
不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量测定＊
赵 磊 2 , 李智敏1 , 杨 俊 2 , 张金渝 1 , 金 航1 , 饶高雄 2■
(1.云南省农业科学院药用植物研究所 , 云南昆明 650231;2.云南中医学院 , 云南昆明 650200)
摘 要:目的:测定并比较不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量 , 评价其利用价值。方法:建立高效
液相色谱方法以测定样品龙胆苦苷含量 , 并依据其含量来评价开发利用价值。结果:不同产地滇龙胆地上部分
龙胆苦苷的含量在 0.13% ～ 6.39%之间 , 平均含量 1.95%.结论:滇龙胆地上部分含有约 2%的龙胆苦苷 , 具
有综合开发利用价值。
关键词:滇龙胆;地上部分;龙胆苦苷;含量测定;资源开发
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1000— 2723(2008)04— 0023— 03
龙胆为常用中药 , 《中国药典》 收载龙胆 Gen-
tianascabraBge.、 条叶龙胆 G.manshuricaKitag.、
三花龙胆 G.trifloraPal.、 坚龙胆 G.rigescens
Franch.共 4种龙胆科植物的根及根茎作为龙胆药
材药用 , 前 3种主产东北称为关龙胆 , 坚龙胆主产
云南称为滇龙胆 。龙胆的主要有效成分是龙胆苦苷
(Gentiopicroside), 属裂环环烯醚萜苷类 [ 1 ～ 4] 。
传统上龙胆入药仅用根及根茎 , 地上部分在采
收加工时废弃。在滇龙胆资源调研工作中我们初步
考察了滇龙胆的生物产量 , 其地上部分约占全株的
50%, 且含有龙胆苦苷 , 有综合开发利用的价值 。
目前 , 由于野生资源减少 , 龙胆药材已经逐步走向
人工栽培 , 在水肥供给较好的种植条件下 , 地上部
分的生物产量会更多 , 采收加工也更方便 。为综合
开发利用这一资源 , 我们研究了测定滇龙胆地上部
分龙胆苦苷含量的高效液相色谱方法 , 并比较了云
南省内不同产地的 46份滇龙胆样品地上部分龙胆
苦苷的含量 。
1 仪器与试药
1.1 仪器和设备
LC-10AvP液相色谱仪 (日本岛津), N2000色
谱工作站 (浙江大学);XS125A电子分析天平 (瑞
士普利塞斯), SK3300LH超声清洗器 (上海科导)。
1.2 试剂和药品
龙胆苦苷对照品 (编号 110770-200308, 含
量测定用), 流动相用色谱纯溶剂 , 水用反渗滤纯
化水;提取处理等用分析纯试剂 。滇龙胆药材的地
上部分共 46份样品 , 均于 2007年 8-10月采集于
云南省内不同地区 , 经云南省农业科学院药用植物
研究所张金渝副研究员鉴定均为龙胆科植物坚龙胆
G.rigescensFranch.(表 1)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
经对比研究确定色谱条件为:用 KromasilC18色
谱柱 (4.6mm×150mm, 5μm);流动相用甲醇 -水
(35∶65), 流速 1.0mL/min;柱温 30℃;检测波长
270nm;进样量 10μL。在此条件下 , 龙胆苦苷对照
品吸收峰保留时间约 11min, 拖尾因子 1.03, 理论
板数大于 3000, 样品色谱中龙胆苦苷吸收峰的分离
度大于 2, 符合含量测定要求 (图 1)。
2.2 溶液的制备
精密称取龙胆苦苷对照品适量 , 加甲醇制成浓
度为 5mg/mL的对照品储备溶液。滇龙胆地上部分
于 60℃烘干 , 粉碎过 40目筛 , 精密称取约 0.2g加
甲醇 10mL, 放置过夜 , 超声处理 30min后过滤 , 取
续滤液经 0.45μm微孔滤膜过滤即为供试品溶液。
23
＊基金项目:云南省发改委产业关键技术开发专项
收稿日期:2008— 06— 11 修回日期:2008— 07— 04
作者简介:赵磊 (1984 ～ ), 女 , 贵州人 , 2006级研究生 , 从事中药化学及中药质量控制研究工作。 ■通讯作者:金
航 , 0871 - 8060003;E -mail:jinhang1516 @ sina.com;饶 高 雄 , 0871 - 6212194;E -mail:
rao13987124569@qq.com
2008年 云南中医学院学报 第 31卷
2.3 方法学考察
线性关系:取对照品贮备溶液分别稀释成浓度
为 0.01, 0.05, 0.10, 0.50, 1.00, 1.50, 2.00,
2.50mg/mL的对照品溶液 , 进样测定 , 以峰面积
(Y)对进样量 (X, μg)回归处理 , 得线性回归
方程:Y=803383＊X– 10226 (r=0.9999), 在
0.1μg～ 25μg范围内 , 龙胆苦苷进样量和峰面积有
良好线性关系 。
图 1 滇龙胆地上部分龙胆苦苷测定的 HPLC图谱
精密度试验:精密吸取同一对照品溶液 , 连续
进样 6次测定 , 色谱中龙胆苦苷吸收峰保留时间的
RSD=0.3%, 峰面积的 RSD=0.62% (n=6), 分
析方法精密度良好。
重复性试验:取同一产地的滇龙胆地上部分粉
末 6份 , 平行处理制成样品溶液 , 进样测定龙胆苦
苷的含量 , 其含量的 RSD=1.28% (n=6), 分析
方法重现可行。
加样回收率试验:取已经测定含量的滇龙胆地
上部分粉末 , 共 9份分成 3组 , 分别按照含量的
80%, 100%, 120%在各组样品中定量加入龙胆苦
苷对照品 , 平行处理制成样品溶液 , 测定总含量并
计算回收率。结果表明 , 加样回收率在 98.12%至
102.1%之间 , 平均回收率为 99.4% (RSD=
1.08%, n=6), 分析方法准确可靠 。
2.4 样品测定
采于云南省内不同产地的 46份滇龙胆药材地
上部分 , 按照上述确定的方法制备样品溶液 , 分别
进样测定龙胆苦苷的含量 , 结果如表 1。
表 1 不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量
编号 产地 含量% 编号 产地 含量% 编号 产地 含量%
1 禄劝 -A 1.79 17 姚安 -B 1.94 33 保山 -B 2.16
2 禄劝 -B 3.11 18 大姚 -C 0.59 34 龙陵 -C 1.36
3 禄劝 -C 1.28 18 禄丰 -D 1.82 35 施甸 -D 0.90
4 禄劝 -D 2.90 20 南华 -E 3.42 36 砚山 -A 2.40
5 禄劝 -E 3.80 21 鹤庆 -A 6.39 37 马关 -B 5.17
6 寻甸 -F 1.40 22 剑川 -B 1.05 38 文山 -C 1.03
7 寻甸 -G 1.22 23 建水 -A 1.14 39 文山 -D 1.17
8 昆明 -H 4.48 24 建水 -B 1.88 40 文山 -E 1.02
9 嵩明 -I 2.70 25 蒙自 -C 3.41 41 泸水 -A 0.15
10 江川 -A 0.58 26 蒙自 -D 5.56 42 泸水 -B 0.33
11 江川 -B 0.38 27 绿春 -E 1.68 43 云县 -A 1.16
12 新平 -C 0.93 28 石屏 -F 0.90 44 云县 -B 0.13
13 玉溪 -D 1.94 29 屏边 -G 1.91 45 潞西 -A 0.36
14 玉溪 -E 2.54 30 个旧 -H 2.04 46 罗平 -A 2.35
15 易门 -F 1.07 31 永胜 -A 4.70
16 楚雄 -A 1.27 32 腾冲 -A 0.32
24
第 5期 赵 磊 , 等:不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量测定
3 结果与讨论
对 46份不同产地滇龙胆地上部分含量测定的
结果表明 , 各产地滇龙胆地上部分均含有龙胆苦
苷 , 含量在 0.13% ～ 6.39%之间 , 平均含量
1.95%.对于天然药用物质而言 , 约 2%的含量和
丰富的资源生物产量意味着已经具备产业化开发价
值 。本文研究结果为滇龙胆地上部分的综合利用提
供了客观可靠的科学依据和分析方法 。
对于目前尚作为废弃物的滇龙胆地上部分 , 若
能通过进一步的研究得到实际开发利用 , 将会使龙
胆药物资源更为充分的利用。滇龙胆资源主要分布
云南中部及中南部的丘陵山区 , 人工种植的发展也
集中在该地区 , 其地上部分资源的综合利用 , 将会
增加山区农民收入 , 提高龙胆种植产业的经济效
益。
[参考文献 ]
[ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 (一部)
[ M] .北京:化学工业出版社 , 2005.64.
[ 2] 杨书彬 , 王承.龙胆化学成分和药理作用研究进展
[ J] .中医药学报 , 2005, 33 (6):54-56.
[ 3] 宋万志.中国龙胆科药用植物的研究概况 [ J] .中药
通报 , 1986, 11 (11):3.
[ 4] 云南省药物研究所.云南重要天然药物 [ M] .昆明:
云南科技出版社 , 2006.343-353.
(编辑:岳胜难)
HPLCDeterminationofGentiopicrosideintheAerialParts
ofGentianarigescensFranch.FromDifferentRegionsofYunnan
ZHAOLei1, 2 , LIZhi-min1 , YANGJun2
ZHANGJin-yu1 , JINHang1 , RAOGao-xiong1, 2
(1.InstituteofMedicinalPlantofYAAS, KunmingYunnan650231, China;
2.YunnanUniversityofTCM, KunmingYunnan650200, China)
ABSTRACT:Objective:ToevaluatetheutilizationoftheaerialpartsofGentianarigescensFranch., by
meansofdeterminationthecontentofgentiopicrosideinthesamplesfromdiferentregionsofYunnanProvince.
Method:TheHPLCmethodhasbeenestablishedfordeterminationofthecontentofgentiopicroside, whichcanbe
usedforevaluatingthevalueoftheaerialpartsofGentianarigescensFranch..Results:Thegentiopicrosidecon-
tentintheaerialpartsofGentianarigescensFranch.wasintherangeof0.13% ～ 6.39%, andtheaverageis
1.95%.Conclusion:Theresultshowedtherewasapproximately2% gentiopicrosideintheaerialpartsofGenti-
anarigescensFranch.anditwouldbedeservingofutilizationtogetherwiththerootsandrhizomesofthismedicinal
plant.
KEYWORDS:GentianarigescensFranch.;AerialPart;Gentiopicroside;ContentDetermination;Plant
ResourceExploitation
《国医论坛 》 2009年征订启事
《国医论坛》 是面向国内外公开发行的中医药学术期刊 , 国际连续出版物号 ISSN1002-1078, 国内统一刊号 CN41 -
1110/R, 国内邮发代号 36-100, 国际邮发代号 BM4417。本刊创刊 20多年来 , 一直把张仲景学说研究作为办刊特色 , 常
设栏目有张仲景学说研究 、 经方实验录 、 老中医经验 、 学术探讨 、 研究生论坛 、 临床研究 、 临床报道 、 中西医结合 、 实验
研究 、 中药天地 、 医学护理 、 医苑百花 、 文献综述 、 医著评析等。本刊为大 16开 , 56页 , 双月刊 , 每册定价 4.00元。错
过订期者可直接向本刊编辑部索购。地址:河南省南阳市卧龙路 1439号 , 邮编:473061, 电话:0377-63529058, 电子邮
箱:gylt1986@126.com
25