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天山花楸乙酸乙酯部位降糖效果研究



全 文 :表 4 沙枣仁油及 VE对 DPPH·的清除活性的回归方程和 EC50值
样品 回归方程 EC50 /mg·ml -1
沙枣仁油 Y = 0. 7034X + 5. 868 62. 74
VE Y = 1. 059 4X + 4. 254 43. 18
DPPH自由基清除率大小以 EC50表示:VE 的 EC50 = 43. 18
mg·ml -1,沙枣仁油的 EC50 = 62. 74 mg·ml -1。通过表 4 数据得
知,与 VE对照组相比,沙枣仁油具有较强的清除自由基能力。
4 讨论
实验结果表明,宁夏野生沙枣仁的含油率为 22%,出油率较
高;沙枣仁油的折光率为 1. 7050,无旋光性;沙枣仁油的碘值为:
62. 50 gI /100g。通过 GC - MS分析了沙枣仁油的化学成分,鉴定
得到了 6 种化合物,即亚油酸、亚麻酸、8 -十八碳烯酸、7 -十八
碳烯酸、棕榈酸和硬脂酸。其中含量最高的是亚油酸,占 35%,
其次是亚麻酸,占 19. 4%;不饱和脂肪酸有 4 种,占 80. 99%;饱
和脂肪酸有 2 种,占 19%。
从沙枣仁油体外清除 DPPH自由基试验研究表明,沙枣仁油
具有很强的清除 DPPH自由基的作用,而沙枣仁油中的亚油酸和
亚麻酸是人体必需脂肪酸,二者具有降低血脂、软化血管、降低血
压、促进微循环的作用,可预防或减少心血管病的发病率,对高血
压、高血脂、心绞痛、冠心病、动脉粥样硬化等的防治具有积极的
作用,本实验研究证明沙枣仁具有很好的药用价值,值得进行进
一步的研究和产品开发。
参考文献:
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收稿日期:2013-06-27; 修订日期:2013-11-27
基金项目:国家自然科学基金( No. 81260627) ;新疆兵团重点领域科技攻关( No. 2013BA034) ;石河子大学优秀青年科技人才培育计划立项项目( No.
2012ZRKXYQ21)
作者简介:李 乐( 1981-) ,男( 汉族) ,山东鱼台人,石河子大学药学院讲师,硕士学位,主要从事新疆特种植物药的研究工作.
* 通讯作者简介:唐 辉( 1967-) ,女( 汉族) ,重庆人,石河子大学药学院教授,博士学位,主要从事新疆特种植物药的开发与利用研究工作.
天山花楸乙酸乙酯部位降糖效果研究
李 乐1,仇秀红2,苏向辉3,唐 辉1*
(1.石河子大学药学院,新疆 石河子 832002;2.乌苏市人民医院,新疆 乌苏 833300;
3.石河子大学第一附属医院,新疆 石河子 832002)
摘要:目的 对天山花楸有效成分进行提取分离,探索乙酸乙酯部位的降糖效果。方法 采用回流提取法对天山花楸进行
提取,系统分离,获得乙酸乙酯部位,以链脲佐菌素( STZ) 诱发小鼠糖尿病模型,利用该部位进行降血糖试验。结果 乙酸
乙酯部位中剂量给药组与模型组比较,降糖效果明显,具有统计学意义( P < 0. 01) 。结论 天山花楸具有一定的抗糖尿病
作用。
关键词:天山花楸; 乙酸乙酯部位; 糖尿病
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2014. 05. 014
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2014) 05-1060-02
Hypoglycemic effect of Ethyl Acetate Part of Sorbus tianschanica
LI Le1,QIU Xiu-hong2,SU Xiang-hui3,TANG Hui1*
( 1. Pharmacy College of Shihezi University,Shihezi Xinjiang 832002,China; 2. People's Hospital of Wusu City,
Wusu Xinjiang 833300,China; 3. The First Affiliated Hospital of Shihezi University,Shihezi Xinjiang 832002,
China)
Abstract: Objective To study the hypoglycemic effect of ethyl acetate part of Sorbus tianschanica.Methods Sorbus tianschaniea
was extracted and separated. Obtain ethyl acetate part of Sorbus tianschanica. The diabetic rat model was induced by intraperitoneal
injection of STZ,the rat blood glucose levels was detected. Results Middle dose group of Ethyl Acetate Part could obviously lower
blood glucose level in STZ induced hyperglycaemic rats( P < 0. 01) . Conclusion Sorbus tianschanica has significant hypoglycemic
effect.
Key words: Sorbus tianschanica; Ethyl Acetate; Diabetes
天山花楸 Sorbus tianschanica Rupr. 属蔷薇科花楸属落叶灌 木或小乔木,生长在天山海拔 2 000 ~ 2 500 m 针叶林带,枝叶及
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2014 VOL. 25 NO. 5 时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 5 期
果实系新疆维吾尔族和哈萨克族民间用药。民间常以果实、嫩枝
叶及茎皮入药。其果实味苦甘、性平;嫩枝叶及茎皮:味苦、无毒,
具有清热利肺、补脾生津之功效[1]。国外文献报道花楸属植物
具有降血糖功效[2]。
国内学者对天山花楸醇提物及水提物的药理作用进行了研
究,发现醇提物对心肌缺血有保护作用,水提液有抑制心肌收缩
力的作用[3]。天山花楸的药理学虽然有了一些研究,但治疗糖
尿病方面并没有作系统的研究。本实验在前期化学成分研究的
基础上,进一步对天山花楸降血糖的有效部位进行研究。
1 材料与仪器
1. 1 材料 天山花楸采自新疆玛纳斯林场,经药学院高级实验师
成玉怀鉴定。
1. 2 试剂 链脲佐菌素(STZ):批号 S - 0131,购于 Sigma 公司,
使用前将 STZ用 0. 1mol /L的柠檬酸 -柠檬酸钠溶液配制成 1%
STZ溶液,避光保存,冰浴即用;沙格列汀片购于中美上海施贵宝
制药有限公司。石油醚,乙酸乙酯,乙醇均为分析纯。
1. 3 仪器 罗氏罗康全手持式活力型血糖仪,罗氏公司生产;
EL2204 电子天平,梅特勒 -托利多仪器有限公司生产;RE - 52A
型旋转蒸发仪,上海洪纪仪器设备有限公司生产。
1. 4 动物 为昆明种小鼠,石河子大学动物中心提供,雌雄兼用,
实验前在实验室饲养一周适应环境,除正常对照组外均给予高糖
高脂饲料喂养。
2 方法
2. 1 样品制备 取天山花楸叶 3 ㎏,粉碎,用 8 倍量 95%乙醇水
浴回流提取 1h,水浴温度 80℃,过滤,合并滤液,将提取液倒入旋
转蒸发仪中,旋蒸温度 45℃除去乙醇,蒸至粘稠状液体,依次用
石油醚和乙酸乙酯进行萃取,得乙酸乙酯提取物(A部位)[4,5]。
2. 2 糖尿病小鼠模型建立 将小鼠禁食(不禁水)约 16 h 后,腹
腔注射新配置的 STZ诱发糖尿病,剂量为 100mg /kg。于 5d后再
禁食(不禁水)12 h,断尾取血。用罗氏血糖仪测定小鼠血糖值,
大于 11. 1mmol /L为合格的实验性糖尿病小鼠模型,纳入本次试
验[6]。
2. 3 动物分组及给药 将造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性
对照(沙格列汀)组,A部位高剂量组,A部位中剂量组,A部位低
剂量组,每组 15 只,另取 15 只同批健康小鼠,设为空白对照
组[7]。
A部位高剂量组给药剂量为 8g /kg,中剂量组给药剂量为 4
g /kg,低剂量组给药剂量为 2 g /kg,沙格列汀片剂量为 0. 25 mg /
kg,模型组及对照组均给予等容量生理盐水灌胃。按照上述剂量
连续灌胃 5d,末次给药前禁食不禁水 12 h,给药后禁食不禁水 1h
后断尾取血,用血糖仪测定血糖值(见表 1)。
表 1 天山花楸提取物对小鼠血糖的影响(珋x ± s)
组别 剂量 / g·kg -1
血糖值 /mmol·L -1
0d 5d
正常组 等量生理盐水 7. 31 ± 1. 57 7. 11 ± 1. 08
模型组 - 23. 77 ± 3. 50 24. 87 ± 2. 63
B部位高剂量组 8 26. 50 ± 3. 01 13. 72 ± 1. 682)
B部位中剂量组 4 22. 30 ± 3. 40 14. 49 ± 1. 262)
B部位低剂量组 2 23. 47 ± 3. 79 17. 30 ± 0. 941)
沙格列汀组 0. 25 × 10 -3 24. 44 ± 4. 04 10. 20 ± 1. 542)
与模型组比较,1)P < 0. 05 ,2)P < 0. 01
2. 4 统计学分析 试验数据均以 珋x ± s 表示,对实验各组动物数
据进行 t检验,P < 0. 05 为具有统计学意义。
2. 5 药物对正常小鼠的影响及给药剂量考察 正常小鼠按上述
天山花楸中剂量试验,连续灌天山花楸 5d,末次给药前禁食不禁
水 12h,给药后禁食不禁水 1 h 后断尾取血,用血糖仪测血糖值,
结果小鼠血糖均为正常水平。通过实验结束后继续给药 1 周后
小鼠的死亡情况来考察给药剂量。结果见表 2。
表 2 药物的剂量考察
组别 存活数 /只 死亡数 /只 死亡率(%)
正常组 15 0 0. 0
模型组 6 9 60. 0
天山花楸高剂量组 9 6 40. 0
天山花楸中剂量组 13 2 13. 3
天山花楸低剂量组 13 2 13. 3
沙格列汀组 15 15 0. 0
3 结果
3. 1 一般观察 正常组小鼠生长活动正常,被毛有光泽,体重随
喂养时间逐渐增加,糖尿病对照组动物死亡率高,被毛蓬松无光
泽,出现了体重减轻,多饮多尿等糖尿病症状,部分小鼠出现浮肿
等并发症。
3. 2 天山花楸乙酸乙酯部位对小鼠血糖的影响 实验表明,乙酸
乙酯部位给药组与模型组相比有明显差异(P < 0. 05),证明该部
位具有明显降低 STZ 诱发糖尿病小鼠血糖的作用,在与降糖药
沙格列汀比较中,降糖效果较差,还需要对提取物进行进一步的
纯化工艺研究。
3. 3 最优给药剂量 在天山花楸乙酸乙酯部位不同剂量组降糖
效果研究中,高剂量组与中剂量组降糖效果接近,优于低剂量组,
但是高剂量组死亡率较高,中低剂量组死亡率较低,综合评价,中
剂量给药组为最优给药剂量。
4 讨论
本研究利用 STZ腹腔注射,辅以高糖高脂饲料进行 2 型糖尿
病模型建立,造模成功率高,造模 5d 后,小鼠空腹血糖值明显高
于对照组,说明造模成功。以往小鼠糖尿病阳性对照药物常采用
二甲双胍,本实验采用新型降糖药沙格列汀作为阳性对照药,具
有起效快,降糖效果平稳,给药剂量小的优点。
综上所述,天山花楸乙酸乙酯部位对糖尿病小鼠具有较强的
降糖作用,实验室正进一步对天山花楸提取液的石油醚萃取部位
及正丁醇萃取部位进行研究,同时对乙酸乙酯萃取部位部分化学
成分进行分离,以期为开发天山花楸提供更全面的实验依据。
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2014 VOL. 25 NO. 5