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金叶桃叶卫矛组织培养的研究



全 文 :林 业 科 技 情 报 2016 Vol. 48 No. 2
金叶桃叶卫矛组织培养的研究
樊祥义 于 军 张黎明
(吉林省林业调查规划院)
[摘 要] 通过对金叶桃叶卫矛进行的初步组织培养研究试验,得出的结果表明:最佳的灭菌方法是 0. 1%升汞 6min + 70%
酒精 25s;最佳的外植体是茎段;最佳的初代培养基是 WPM;最佳的继代培养基是 WPM +2. 0mg /L6 - BA + IBA(0. 5)。
[关键词] 金叶桃叶卫矛;组织培养;灭菌方法;研究
Study On Leaf Tissue Culture Of Euonymus Bungeanus
Fan Xiangyi Yu Jun Zhang Liming
(Jilin Forest Investigation And Planning College)
Abstract:On the cultivation of organization through the preliminary test of gold leaf of Euonymus bungeanus,it
showed the results obtained show that the best sterilization method is 0. 1% mercuric chloride 6min + 70% alcohol
25s. The optimum explant is stem segments;the optimal initial medium was WPM,best subculture medium was
WPM + 2. 0mg /L6 - BA + IBA (0. 5).
Key words:Leaf of Euonymus bungeanus;tissue culture;sterilization method;research in simulation
金叶桃叶卫矛 (Aurum Folium Euonymos),卫
矛科卫矛属,系桃叶卫矛变种。叶片金黄色,有自
然光泽,色泽鲜亮、艳丽。叶片长圆形,平均长
3 ~ 5cm,宽 2 ~ 3cm。叶缘小具锯齿,叶尖渐尖,
呈对状 4 片叶十字形向上舒展。枝条金黄色,色泽
鲜亮。枝条密集,叶片饱满,因此造型百变。深秋
蒴果粉红色,突出的四棱角,开裂后露出桔红色假
种皮,在树上悬挂长达 2 个月之久,耐寒强是园林
绿化观赏树种,同时具有较高的经济价值[1]。
1 材料方法
1. 1 材料来源
材料来源辽宁省开原市靠山镇柴河村一农户
苗圃。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 培养基的配置
选取了 MS、MS1 /2 (所有元素都减半)和 1 /
2MS (大量元素减半)、WPM 4 种基本培养基,附
加细胞分裂素 BA (0、0. 2、0. 5mg /L),生长素
NAA (0、0. 1、0. 2、0. 5 mg /L),蔗糖 30g /L,琼
脂 8g /L,pH5. 8,分装将已经调好的溶液分装到洗
刷干净的三角瓶中。
1. 2. 2 材料消毒
采取金叶桃叶卫矛休眠枝条,水培,以新生出
的金叶桃叶卫矛叶片、茎尖、茎段为外植体,以
0. 1%升汞 + 70%酒精不同时间的处理组合选择最
佳的消毒方法。
2 结果与分析
2. 1 不同消毒方法对外植体的影响
从表 1 中可以看出,4 号灭菌方法最佳,即
0. 1%升汞 6min + 70%酒精 25s 灭菌_ 4 号,6min
25s最佳。
表 1 不同灭菌方法对外植体的影响
序号
0. 1%
升汞
70%
酒精
外植体
死亡率%
染菌率
%
灭菌率
%
1 3min 10s 5 52. 7 42. 3
2 4min 15s 12 49. 8 38. 2
3 5min 20s 13 21 66
4 6min 25s 18. 9 10 71. 1
5 7min 30s 29. 2 9. 4 61. 4
6 8min 35 31 7. 5 61. 8
7 9min 40s 82 5. 7 12. 3
8 10min 45s 90 5 5
2. 2 不同培养基对外植体生长的影响
实验中选取了 4 种不同培养基 MS、1 /2MS、
WPM和 1 /2WPM,将灭菌后的外植体接种于上述 4
种培养基中,观察不同培养基中外植体的萌发情况
见表 2、表 3[2 - 3]。
从表 2 中可以看出培养基不同对金叶桃叶卫矛
的诱导影响很大,初代诱导以 WPM 培养基
最佳[4]。
·04·
2016 Vol. 48 No. 2 林 业 科 技 情 报
表 2 初代培养不同培养基诱导结果
培养基类型 诱导率 (%)
MS 43. 2
1 /2MS 30. 8
WPM 74. 9
1 /2WPM 50. 6
表 3 初代培养不同外植体诱导结果
培养基类型 诱导率 (%)
叶片 10. 1
茎尖 56. 4
茎段 70. 3
从表 3 中可以看出,茎尖、茎段诱导率都较
高,但以茎段最佳。
2. 2 继代培养结果
表 4 继代培养不同激素配比分化率
培养基类型 分化率 (%)
WPM +1. 0mg /L6 - BA + IBA (0. 3) 54. 1%
WPM +1. 0mg /L6 - BA + IBA (0. 5) 60. 2%
WPM +1. 0mg /L6 - BA + IBA (1. 0) 59. 3%
WPM +2. 0mg /L6 - BA + IBA (0. 3) 68. 4
WPM +2. 0mg /L6 - BA + IBA (0. 5) 75. 3
WPM +2. 0mg /L6 - BA + IBA (1. 0) 70. 2
从表 4 中可以看出,不同激素配比诱导结果差
异不大,但以 WPM + 2. 0mg /L6 - BA + IBA
(0. 5)最佳。
3 结论与讨论
本试验得出结论: (1)最佳的灭菌方法是
0. 1%升汞 6min + 70%酒精 25s;(2)最佳的外植
体是茎段;(3)最佳的初代培养基是 WPM; (4)
最佳的继代培养基是 WPM + 2. 0mg /L6 - BA +
IBA (0. 5); (5)由于时间有限本试验尚未进行生
根培养及炼苗,需要进一步试验,以后将继续研究
为工厂化育苗提供技术支撑[5]。
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来稿日期:2016 - 03 - 14
(上接第 39 页)顺序为辉南,清源,乌伊岭,东
方红,绰儿,莫尔道嘎,凉水,桓仁,宁夏,草河
口,青海,汪清,帽儿山,天水,露水河,北湖,
新疆。结合纤维素和木质素为综合标准选择优良的
种源,优先选择的应该是绰儿,东方红,清
源等[7 - 8]。
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来稿日期:2016 - 02 - 18
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