全 文 :3 讨论
研究结果表明,在检测剂量范围内,马齿苋多糖对超氧阴
离子自由基几乎无清除作用,对羟自由基具有较好的清除作
用,IC50为 0. 0537 mg /ml;马齿苋多糖剂量在 0. 41 mg /ml对 OH
·的抑制率可达到 90. 5%,这与文献报道的有差异,蒋企洲
等[7]的研究结果中马齿苋多糖剂量为 0. 50 mg /ml 时抑制率为
76%,在朱晓宦等的研究结果中对 OH·抑制率为 90%时所需
的马齿苋多糖剂量是 17. 6 mg /ml,这可能与马齿苋多糖样品的
纯度有关。马齿苋黄酮对 O2
·-和 OH·均具有明显的清除作用,
IC50分别为 1. 270 mg /ml、0. 0254 mg /ml,清除效果与剂量呈现
正相关关系。在两种自由基的清除实验中,马齿苋总黄酮的
IC50均明显小于多糖的,表明马齿苋总黄酮清除自由基的能力
强,总黄酮类成分对抗氧化活性的影响大于多糖成分,是马齿
苋药材中最主要的活性部位。
参考文献
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的比较研究.实用预防医学,2007;14(2)∶ 346 ~ 348
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Comparison on antioxidant activity of different extracts from Purslane
Zhan Yan1,Wang Lizhen1,2,Xu Chaoqun1,Yuan Zhixiang1
(1 Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences,Chengdu 610041;
2 Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 610075)
Objective:To study the in vitro antioxidant activity of different extracts from Purslane. Methods:Content of Purslane polysaccharide
was determined by phenol-sulfuric acid method;UV spectrophotometry was adopted to measure the content of Portulaca oleracea flavonoids.
Under the chemical simulated conditions in vitro,Fenton reaction method as well as xanthine and xanthine oxidase reaction system in the body
were used to observe hydroxyl radicals and superoxide anion radical scavenging abilities. Results:The content of polysaccharide and fla-
vonoids in Purslane extracts was 39. 6% and 10. 51% respectively. 4. 53 mg /ml concentration of polysaccharide had only as high as 2. 4%
scavenging ratio of superoxide anion radical,compared with purslane polysaccharide,crude flavonoids showed good abilities to scavenge hy-
droxyl radicals and superoxide anion radical in dose-dependant manner,the flavonoids concentration of 0. 59 mg /ml can eliminate 43. 7% of
superoxide anion radical,flavonoids concentration of 0. 59 mg /ml ~ 4. 92 mg /ml had good abilities to scavenge superoxide anion radical. And
the both were more sensitive to hydroxyl radical than to superoxide anion radical. At the concentration of 0. 04 mg /ml ~ 0. 49 mg /ml,the pol-
ysaccharide inhibited 37. 0% ~ 90. 7% of hydroxyl radical,but flavonoid concentration of 0. 02mg /ml ~ 0. 18mg /ml can only achieve the
same result. Conclusion:The antioxidant ability of purslane total flavonoids is significantly stronger than that of polysaccharide in the two ex-
periments. Total flavonoids are the main components responsible for the antioxidant ability of purslane.
Key words Purslane total flavonoids(马齿苋总黄酮) ;Purslane polysaccharide(马齿苋多糖) ;antioxidant
蔓菁抗疲劳作用的量效关系初步研究
*
王 张,张 艺**,周 林,杨永东,王 宇,杨 洋,邝婷婷
(成都中医药大学民族医药学院,成都 611137)
摘 要 目的:初步揭示民族药蔓菁抗疲劳作用的量效关系。方法:采用对数剂量设计法 设置蔓菁水提取物的不同剂量,
观察其对小鼠室温游泳时间的影响。结果:蔓菁水提取物在 376. 20 ~ 37619. 86 mg(蔓菁药材)/kg /次剂量范围内有明显的缓解体
力疲劳的作用,其中 376. 20 mg(蔓菁药材)/kg /次剂量组小鼠的平均游泳时间最长,且明显优于阳性药红牛维生素功能饮料。结
821 中药药理与临床 2012;28(5)
* 课题来源:国家自然科学基金地区科学基金项目(30960507) **通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2012.05.043
论:蔓菁水提取物在一定的剂量范围内具有明显的缓解体力疲劳作用,但是量效关系不成简单的正比关系。
关键词 藏药;维药;蔓菁;抗疲劳;量效关系
蔓菁为十字花科植物芜菁 Brassica rapa L.的块根及种子,
秋季块根及种子成熟时采收。藏药名为妞玛(《四部医典》)
[1],西藏通称蔓菁、圆根(或芫根、元根等)[2]。在维
吾尔族中,蔓菁又名恰玛古,且只指植物芜菁的块根[3]。在
藏族和维吾尔族中,蔓菁都有较长的药食同源的历史。藏医认
为,蔓菁味甘(块根、种子) ,具有解毒(块根、种子)、滋补(块
根)的功效[1]。维吾尔医认为芜菁味甘、辛、苦,性温,具有开
胸顺气、健胃消食、解毒的功效,用于胸闷腹胃胀痛、食欲不
振、疮疖肿毒 等疾[3]。现代药理研究表明,蔓菁具有抗缺
氧[4]、抗衰老[5]、抗肿瘤[6]、提高免疫[7 ~ 9]等作用。化学研究表
明,蔓菁含大量多糖类物质[10],多糖类物质多具有抗衰老、提高
免疫、缓解体力疲劳等作用。为进一步确定蔓菁的缓解体力疲
劳作用,本文采用小鼠游泳实验对其进行验证。
1 材料和方法
1. 1 试验药物 蔓菁采自四川红原县,经成都中医药大学张
艺研究员鉴定为十字花科植物芜菁 B. rapa L.的块根。将其切
片后,于 60℃烘干,置于通风干燥处保存。称取干燥的蔓菁捣
细,以 1∶ 10 体积加入超纯水,煮水提取 1 h,重复 3 次,合并滤
液浓,缩成浸膏,即得蔓菁水提取物,1. 0g 蔓菁生药相当于 0.
5235 g 该提取物。红牛维生素功能饮料:红牛维他命饮料有限
公司生产,批号:20110819,实验时用直接使用该液体;三勒浆抗
疲劳液:四川华美制药有限公司生产,批号:1103008,实验时用
超纯水将其稀释成含 0. 25%抗疲劳液的液体。
1. 2 动物 昆明种小鼠,普通级,雌雄各半,20 ± 2 g,由成都
达硕实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(川)2008-24。
1. 3 方法 参考化学药物的有效剂量筛选中量效关系的对
数剂量设计法 (下简称对数剂量设计法)进行给药剂量的
设置。化学药物的有效剂量筛选中量效关系的对数剂量设计
法为:剂量(mg(生药)/kg /d)= 10 指数,如蔓菁水提取物某组
的指数为 4. 8254,则其剂量(mg(生药)/kg /d)= 104. 8254 =
66898. 62 mg(蔓菁生药)/kg /d,且有剂量(mg(生药)/kg /d)
=给药体积(ml /kg /d)×药物浓度(mg(生药)/ml)。
根据蔓菁水提取物溶解实验和小鼠灌胃实验确定其最大
给药剂量为 66898. 62 mg(蔓菁生药)/kg,指数为 4. 8254,以该
指数为基数,依次递减 0. 25 作为其余各剂量的指数,并按上述
公式计算其给药剂量。本实验共设置 12 个剂量,剂量范围为
118. 96 ~ 66898. 62 mg(蔓菁生药)/kg。
将小鼠按体重分层后再随机分为 15 个组,即空白组、红牛
组、三勒浆组、蔓菁水提取物的 12 个剂量组,每组 5 ~ 6 只。空
白组灌胃(ig)给予超纯水,红牛组给予红牛原液,三勒浆组给予
0. 25%的三勒浆(超纯水稀释)、蔓菁水提取物组给予1. 3. 1 给
药剂量设置设置的不同剂量(见表 1) ,给药体积均为 20ml /
kg /次。每天给药 2 次(即早晚各给药一次) ,连续给药 7 次。
末次灌胃给予受试样品 30 min后,将小鼠放置于游泳箱中
游泳(水温约 20℃)。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即小
鼠游泳时间。
2 结果
红牛对照组、三勒浆对照组小鼠游泳时间均长于空白对照
组小鼠游泳时间,红牛对照组具有统计学意义(P < 0. 05)。蔓
菁水提取物在 376. 20 ~ 37619. 86 mg(蔓菁药材)/kg剂量范围
内有明显的缓解体力疲劳的作用,从图 1 可知,药效剂量和小鼠
游泳时间之间不成正比关系,而是波浪形变化。376. 20 mg(蔓
菁药材)/kg剂量组的小鼠游泳时间平均值在所有组中最大,且
长于空白组和阳性药红牛组小鼠游泳时间,提示该剂量有可能
具有较好的缓解体力疲劳的功效。
小鼠游泳时间见表 1,其量效曲线图见图 1。实验结果如
下:
表 1 蔓菁水提取物不同剂量对小鼠常温游泳时间的影响(珋x ± s)
组别
鼠数
(只)
剂量
(mg /kg)
游泳时间
(min)
空白对照 11 22. 13 ± 16. 05
三勒浆 10 5. 00 ml /kg 28. 51 ± 5. 19
红牛 8 20. 83 ml /kg 23. 58 ± 19. 52
蔓菁水提取物第 1 组 9 66898. 62 17. 99 ± 3. 96
蔓菁水提取物第 2 组 10 37619. 86 53. 01 ± 35. 41 * #
蔓菁水提取物第 3 组 10 21155. 20 40. 65 ± 29. 14
蔓菁水提取物第 4 组 9 11896. 44 47. 86 ± 25. 38 * #
蔓菁水提取物第 5 组 10 6689. 86 26. 92 ± 17. 86
蔓菁水提取物第 6 组 10 3761. 99 54. 32 ± 33. 45 *
蔓菁水提取物第 7 组 10 2115. 52 26. 86 ± 23. 21
蔓菁水提取物第 8 组 10 1189. 64 36. 09 ± 31. 41
蔓菁水提取物第 9 组 10 668. 99 50. 53 ± 33. 95 * #
蔓菁水提取物第 10 组 10 376. 20 57. 80 ± 37. 48* * #
蔓菁水提取物第 11 组 9 211. 55 36. 00 ± 27. 54
蔓菁水提取物第 12 组 10 118. 96 43. 48 ± 53. 02
与空白对照组比较 * P <0. 05,** P <0. 01;与红牛对照组比较 # P <0. 05
图 1 蔓菁水提取物对小鼠常温游泳时间影响的量效曲线图
3 讨论
本实验除采用对数剂量设计法对蔓菁水提取物缓解体
力疲劳有效剂量范围进行筛选,还对蔓菁粗多糖、余甘子提取
物、红景天水提取物进行了实验。在筛选出各单味药有效剂量
范围基础上,采用均匀试验设计对蔓菁水提取物、余甘子提取
物、红景天水提取物的最佳配伍配比进行了研究。结果表明,蔓
菁水提取物、余甘子提取物、红景天水提取物三者或两者相互配
伍均不具有明显延长小鼠游泳时间的作用,提示其相互配伍不
具有缓解体力的价值。
921中药药理与临床 2012;28(5)
《保健食品检验与评价技术规范》(2003 年版)规定缓解体
力疲劳功能评价中负重游泳实验结果必须为阳性。本实验在
小鼠游泳实验时未给小鼠负重,主要基于如下考虑:本实验为
初步筛选实验,且实验用小鼠数量大,减少小鼠负重步骤,可较
快速地完成筛选实验。对数剂量设计法可在最大的受试物
剂量范围内进行剂量设置,但因其以等指数为变化梯度,每个
剂量之间的变化梯度较大,因此筛选出的剂量范围也相对较粗
糙,为获得更为准备的剂量范围,需在现有有效剂量范围基础
上再进行实验。由于本实验只是通过小鼠游泳实验初步筛选
蔓菁水提取物、蔓菁水提取物、红景天水提取物、余甘子提取物
缓解体力疲劳保健功效有效剂量范围,本实验结果可为后期的
相关研究及产品开发提供实验依据。
通过前期单个药的有效剂量范围和后期的重复实验,均表
明 376. 20 mg(蔓菁药材)/kg的给药剂量具有较好的缓解体力
疲劳的作用,且优于阳性药红牛组。但由于受商品红牛液体浓
度的限制,本实验只能设置 2. 5 倍临床人用剂量(20. 83 ml(红
牛饮料)/kg) ,未设置其小鼠等效剂量(10 倍临床剂量———83.
32 ml(红牛饮料)/kg) )。
参考文献
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Study on the dose-effect relationship of the anti-fatigue effects in the ethnomedicine of Brassica rapa
Wang Zhang,Zhang Yi,Zhou Lin,Yang Yongdong,Wang Yu,Yang Yang,Kuang Tingting
(College of Ethnomedicine of Chengdu University of TCM,Chengdu 611137)
Objective:To preliminary study the dose-effect relationship of the anti-fatigue effects in the ethnomedicine of Brassica rapa. Methods:
The logarithmic dose design method of the dose-effect relationship was applied by setting different dosages of the water extracts of Brassica ra-
pa (WEB) ,and the water extracts' influences on the mice swimming time were detected at room temperature. Results:The WEB 376. 20 ~
37619. 86 mg (crude drug)/ kg / dose had significant anti-fatigue effect (P < 0. 05). The mice giving WEB 376. 20 mg (crude drug)/
kg /dose had the longest swimming time,which was significantly better than the positive Red Bull group (P < 0. 05). Conclusion:The
WEB had significant anti-fatigue effects in a certain dose range,but the dose-effect relationship is not the proportional relationship.
Key words Brassica rapa(蔓菁) ;anti-fatigue effect;dose-effect relationship
藏药多刺绿绒蒿提取物体外抗流感病毒作用的初步研究
*
李长山1,王聚乐2,普 珍2,卓 玛1,袁瑞英2,杜宝中1**
(1西藏大学医学院病原生物学教研室,拉萨 850002;2西藏大学医学院药学系,拉萨 850002)
摘 要 目的:研究藏药多刺绿绒蒿提取物体外抗流感病毒的作用;方法:制备了全草醇提取物;采用常规试管凝集实验方
法,测试该提取物体外抗流感病毒活性;结果:发现该药液在 1:4 稀释度时(12. 5mg /ml,按生药量计算) ,对体外甲型流感病毒有抑
制作用。结论:多刺绿绒蒿提取液对流感病毒有一定的抗病毒活性,值得继续追踪研究。
关键词 藏药;多刺绿绒蒿;流感病毒;体外抗病毒实验
绿绒蒿为罂粟科(Papaveraceae)第二大属———绿绒蒿属 (Meconopsis Vig.)植物的总称,是著名的高山花卉植物。全属
031 中药药理与临床 2012;28(5)
* 本研究受 2011 年西藏自治区科技厅科研项目《绒蒿属藏药抗病毒作用初步筛选的研究》的基金资助。 **通讯作者