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西伯利亚花楸组织培养技术研究



全 文 :西伯利亚花楸组织培养技术研究
詹立平1,赵 鑫2
(1.辽宁卫生职业技术学院,辽宁 沈阳110101;2.辽宁林业职业技术学院,辽宁 沈阳110101)
摘要:以西伯利亚花楸的半木质化茎段为外植体,对其进行了组织培养研究。结果表明:以0.1%HgCl2 表
面灭菌8min效果最好。在丛生芽诱导增殖培养阶段,MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L丛生芽诱导率
和增殖率最高,分别为100%和13.6±2.3。在1/2MS+IBA0.5mg/L培养基中的生根效果最好,生根率为
82.6%。移栽时,选择蛭石+草炭土(体积比为1:1)较好,有利于试管苗的成活及生长。
关键词:西伯利亚花楸;组织培养;移栽
收稿日期:2012-10-18
作者简介:詹立平(1978—),女,内蒙古通辽人,蒙古族,讲师,主要从事植物育种研究。
中图分类号:S763.15      文献标识码:B  文章编号:1674-9944(2012)11-0004-03
1 引言
西伯利亚花楸(Sorbus sibirica)为蔷薇科花楸属落
叶乔木,原产俄罗斯西伯利亚地区,该树种具有较强的
耐寒能力,能够忍耐-40℃以下的严寒。花白色,果橙
黄色或红色,经冬不落,是优良的观花、观果园林绿化树
种[1,2]。此外,西伯利亚花楸的果实富含多种维生素,可
以鲜食,其鲜果黄酮含量达0.25%~0.35%,对治疗高
血压等心脑血管疾病有特殊疗效;鲜果可用于生产果
汁、果酒、果酱、果脯、罐头等食品和饮料;其树皮还能制
取烤胶[2]。因此,西伯利亚花楸是一种极具开发潜力的
珍贵资源。
西伯利亚花楸原产地为俄罗斯西伯利亚地区,该地
区冬季漫长、积雪持久,为种子打破休眠和营养物质的
转化提供了天然条件。西伯利亚花楸引种到我国后,由
于种子休眠及气候条件等多方面的因素,出苗率及幼苗
质量普遍偏低,远远满足不了快速繁殖和大量推广的需
要。因此,开展西伯利亚花楸组织培养技术研究对其开
发利用具有重要意义。
2 材料与方法
2.1 试验材料
试验用当年生半木质化枝条于2009年5月中旬采
自辽宁林业职业技术学院院内,树干通直,树型优美,果
实丰硕鲜艳,无病虫害。
2.2 试验方法
2.2.1 外植体的表面灭菌
将采集的半木质化枝条去除叶片后修剪成长约4
~5cm长的茎段,于自来水下冲洗30min,洗去表面尘
土。用1%洗涤剂溶液浸泡5min,再用流水冲洗30min
后,分割成约1.5~2.0cm带有1个腋芽的茎段;在超
净工作台上用0.1%HgCl2 溶液灭菌,灭菌时间设3个
梯度:6min、8min和10min;灭菌后用无菌水冲洗6次,
每次2min,用无菌滤纸吸干,再将茎段末端横切去约
2mm后,接种于诱导培养基 MS+6-BA1.0mg/L中进
行培养,研究不同灭菌时间对无菌外植体获得率的影
响,同时建立无菌再生系统。
2.2.2 不同激素配比对西伯利亚花楸丛生芽诱导
的影响
经诱导培养25~30d后,可获得长约3~5cm的营
养枝,每个营养枝有2~3个腋芽,将其从半木质化枝条
上切下,并分割成1.0~1.5cm含有一个腋芽的茎段,
转接至以 MS为基本培养基,附加6-BA(0、0.5、1.0、
1.5mg/L)和IBA(0、0.1、0.5mg/L)的丛生芽诱导培养
基中,二因素组成3×4的各种组合,每个处理接种5
瓶,每瓶中接种10个外植体,重复3次。
2.2.3 不同浓度的IBA对西伯利亚花楸生根培养的
选择继代培养中苗高在2.0cm以上的单株小苗接
种于以1/2MS为基本培养基的生根培养基中,其中添
加不同浓度的IBA(0、0.2、0.5、1.0mg/L),每个处理接
种5瓶,每瓶中接种10个外植体,重复3次。
以上培养基中均附加20g/L蔗糖,6g/L琼脂粉,
pH值为5.8。培养材料均置于温度25±2℃,空气相对
湿度80%,光子通亮密度为30μmol·m
-2·s-1,光周期
为16h/8h。
2.2.4 生根苗移栽
当生根培养的小苗根长为1.0~1.5cm时,将其开
瓶移入温室练苗7d,移栽前3d用50%可湿性多菌灵
800倍液喷浇灭菌,幼苗种植基质为珍珠岩+泥炭土和
蛭石+草炭土两种,每种基质中2种材料的体积比均为
1∶1。每种基质移植小苗1000株。
2.3 数据分析
应用 MINITAB 14对丛生芽诱导和生根培养试验
结果进行统计分析。
3 结果与分析
3.1 不同灭菌时间对外植体的影响
外植体灭菌处理5d后,灭菌不彻底的茎段陆续开
始出现污染,灭菌处理后20d的统计结果见表1。
从表1可知,随着消毒时间的延长,污染率下降,但
同时死亡率也逐渐升高。死亡的外植体表现为腋芽和

2012年11月           Journal of Green Science and Technology             第11期
表皮细胞逐渐褐化,最终导致死亡。在用0.1%的
HgCl2灭菌8min时,污染率与死亡率总和最低,无菌外
植体获得率最高,达到了86.5%。
表1 不同的消毒时间对无菌苗获得率的影响
消毒时间/min 污染率/% 死亡率/% 无菌外植体获得率/%
6  52.7  7.3  40.0
8  5.6  7.9  86.5
10  3.7  39.7  56.6
3.2 不同激素配比对西伯利亚花楸丛生芽诱导的
影响
将初代培养获得的营养枝茎段接种于附加不同浓度
的6-BA与IBA的增殖培养基中诱导丛生芽。培养5d
后,腋芽膨大,茎段基部逐渐隆起,形成小块愈伤组织。培
养20d后,腋芽已经萌发,在基部愈伤组织上产生大小不
同、数量不等的不定芽,但在不同培养基中外植体的表现
存在明显的差异,培养40d的观察结果见表2。
表2 植物激素对丛生芽诱导和增殖的影响
6-BA/(mg/L)IBA/(mg/L) 诱导率/% 增殖率±标准差
0 0 0 0
0.1  0  0
0.5  0  0
0.5  0  15.6  1.8±0.6
0.1  48.2  7.8±1.2
0.5  57.3  5.5±2.1
1.0  0  46.4  5.6±1.7
0.1  100  13.6±2.3
0.5  77.4  9.2±1.9
1.5  0  45.3  5.5±1.6
0.1  78.9  11.3±2.5
0.5  68.7  6.3±1.5
由表2可知,在未加入任何激素或只附加IBA的
培养基中,外植体不能再生;当6-BA和IBA配合使用
时,可明显提高诱导率和再生率,当6-BA为1.0mg/
L,IBA为0.1mg/L时,诱导率和增殖率均获得最大值,
分别为100%和13.6±2.3,且幼苗生长健壮。
3.3 不同浓度的IBA对西伯利亚花楸生根培养的
影响
选择株高2cm以上且生长健壮的单株接种至含有不
同浓度IBA的生根培养基中,20d后统计生根情况(表3)。
结果表明,附加IBA0.5mg/L的1/2MS培养基最适宜西伯
利亚花楸的生根培养,生根率达到82.6%,平均生根数为
5.5±0.15条,且叶色较绿,根粗壮,根长约1.2cm,能够满
足移栽的要求。当IBA浓度为1.0mg/L时,生根率也较
高,为76.4%,但在小苗基部形成的愈伤组织块较大,在移
栽过程中易出现断根的现象。
表3 不同浓度IBA对生根的影响
IBA浓度/(mg/L) 0  0.2  0.5  1.0
生根率/% 0  12.7  82.6  76.4
平均生根条数±标准差 0  0.4±0.08  5.5±0.15  3.1±0.14
3.4 不同基质对生根苗移栽的影响
选择根长1.0~1.5cm的生根苗,炼苗后洗去根部
培养基,分别移栽至珍珠岩+泥炭土(1∶1)和蛭石+草
炭土(1∶1)两种基质中,移栽后浇一次定根水,以后保持
基质湿润,温度保持在20℃左右,初期适当遮荫。缓苗
期过后,植株发出新根开始正常生长。
试验所使用的2种混合基质对移栽苗成活率的影
响不显著,成活率均在93%以上,但对小苗后期生长速
率有影响。移栽30d后统计两种基质上的平均苗高分
别为5.7cm和7.3cm。由此可见,蛭石+草炭土更适于
移栽苗的生长。
4 结语
(1)组织培养的过程当中,外植体的消毒是很重要
的一步。时间短,污染率高而时间过长,则会对外植体
造成伤害。实验结果表明:利用0.1%HgCl2 溶液对西
伯利亚花楸半木质化茎段表面灭菌8min效果最好;而
消毒6min时,污染率过高;消毒10min,HgCl2 对植物
材料的毒害作用严重,导致死亡率大大提高。白卉[3]等
(2007)在花楸组织培养的过程中采用间断灭菌4min的
方法,也获得了较好的灭菌效果。
(2)确定植物激素的种类与浓度是筛选培养基的关
键环节。本研究发现,在附加 6-BA1.0mg/L 和
IBA0.1mg/L的 MS培养基中,西伯利亚花楸的丛生芽
诱导率和增殖率最高,分别为100%和13.6±2.3;研究
中还发现,单独使用6-BA或IBA不适宜丛生芽的诱
导和增殖;
(3)西伯利亚花楸最适宜的生根培养基为1/2MS
+IBA0.5mg/L,此结论与崔崧[4]等(2010)的研究结论
相一致。西伯利亚花楸在此生根培养基上生根率可达
82.6%,且芽苗健壮,根系粗壮,移栽成活率高;当IBA
的浓度逐渐上升时,芽苗基部愈伤化逐渐加重,移栽过
程中极易断根,导致植株生长不良,甚至死亡。组培苗
的移栽基质选择蛭石+草炭土(体积比为1∶1),可充分
满足试管苗生长所需的营养物质,有利于试管苗的成活
及生长。
目前,对于花楸的组织培养研究已有少量的报道,
王爱芝[5]等(2009)就花楸组织培养过程中出现的玻璃
化现象进行研究,并提出了一些解决方法。相信随着研
究的不断深入,花楸的组织培养体系将日趋完善,将极
大地推动花楸的应用与推广。
参考文献:
[1]李作文,汤天鹏.中国园林树木[M].沈阳:辽宁科学技术出版社,
2008.
[2]姚莉莉,赵海泓,申立营,等.西伯利亚花楸组培快繁技术体系的
研究[J].辽宁农业科学,2005(6):19~21.
[3]白 卉,王秋玉,曹 焱,等.花楸组织培养技术的研究[J].林业
科技,2007,32(3):53~55.
[4]崔 崧,张文达,李 晶.西伯利亚花楸组织培养关键技术的研究
[J].中国林副特产,2010(4):12~14.
[5]王爱芝,沈海龙,张 鹏,等.花楸组织培养中玻璃化现象的发生
与防治[J].东北林业大学学报,2009,37(10):18~22.

詹立平,等:西伯利亚花楸组织培养技术研究                      植物研究
湘东黄脊竹蝗监测方法与防治效果研究
张志桥1,黄海英2,黄雪辉1,钟 微1
(1.江西省萍乡市湘东区林业局,江西 萍乡337016;2.江西省芦溪县林业局,江西 芦溪337200)
摘要:指出了湘东黄脊竹蝗主要危害毛竹,其次危害刚竹、水竹等,在食料缺乏时也危害水稻等禾本科农作
物。通过建立监测调查样地,针对湘东黄脊竹蝗各个生长期的不同特点,采取不同的防治措施,对防治效
果进行了总结和探索。
关键词:效果;监测;防治;湘东黄脊竹蝗
中图分类号:S763.31      文献标识码:B  文章编号:1674-9944(2012)11-0006-02
1 引言
黄脊竹蝗(Ceracris kiangsu)俗称竹蝗,是我国南方
竹林的主要食叶害虫,已知其寄主植物有25种,隶属于5
科,而以毛竹(又称楠竹)(Phylostachys pu-bescens)、青皮
竹(Bambusa textilis)为其最喜食,大发生时常使竹林大面
积枯死,在食料缺乏时也危害水稻等禾本科农作物[1]。
湘东现有有林地88万亩,其中毛竹32万亩,占全区林
地面积的37%,主要分布在广寒、白竺、五峰林场等乡
(镇、场)。为更好地加强对湘东黄脊竹蝗防治,分别在
广寒乡和白竺乡选择立地条件相近的样地,进行了黄脊
竹蝗的发生及防治效果样地监测和对比性总结,有利于
进一步加强黄脊竹蝗防治工作。
2 实验地的选择
通过目测和踏查相结合的方法,确定产卵地范围,
然后根据产卵地面积的大小,随机抽取5~10个有代表
性的样点,每个样点1m2,调查记录挖查的卵块数和虫
口密度[2]。本次调查样地选择在危害程度轻微、杂草稀
疏、土质松紧适度、向阳山坡的山腰、山脚和路边,共设
置调查样地4个用于监测和防治效果对比。分别在白
竺乡黄岗村、广寒乡江山村的大面积毛竹林中山腰和山
脚各设置调查样地1个。
3 监测方法
3.1 卵期调查
湘东黄脊竹蝗卵期调查时间一般选择在9月至翌
年4月,调查最佳时期在9~11月。据调查发现:湘东
黄脊竹蝗卵呈长椭圆形,上端稍尖,中间稍弯曲。长径
6~8mm,棕黄色,有巢状网纹。卵囊圆筒形,长18~
30mm,土褐色。每个乡镇选择大面积毛竹林面积和发
生面积相近的2个样地进行湘东黄脊竹蝗产卵地调查,
调查结果如表1。
3.2 跳蝻调查
湘东黄脊竹蝗跳蝻调查时间一般选择在1龄跳蝻
盛发期进行跳蝻调查。由于湘东黄脊竹蝗系集中产卵,
跳蝻孵出后呈核心分布。湘东黄脊竹蝗跳蝻期地面虫
情调查结果如表2。
表1 湘东黄脊竹蝗卵期调查结果表
样点号 卵块数/块 卵粒数/粒 孵化率/% 备注
白竺1  2  1200  35 地点:白竺乡黄岗村、广寒乡
白竺2  4  3000  48 江山村;
广寒1  3  2800  50 林木组成:毛竹、杂灌;
广寒2  2  1100  43 林相:好;
合计 11  8100  176 竹林面积:3.0万亩;
平均 3  2025  44 有虫害面积:0.3万亩
收稿日期:2012-10-04
作者简介:张志桥(1976—),男,江西萍乡人,助理工程师,主要从事林业有害生物防治工作
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶

Research on Tissue Culture of Sorbus Sibirica
Zhan Liping1,Zhao Xin2
(1.Liaoning Health Vocational and Technical College,Shenyang110101,China;
2.Liaoning Forestry Vocation technical College,Shenyang110101,China)
Abstract:This article studies the tissue culture of Sorbus sibirica by softwood shoots section.The results
show that sterilization effect is best with 0.1%HgCl2in 8min.In the subculture stage,shoots induction rate
and multiplication rate are the highest in MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L,100%and 13.6±2.3,re-
spectively.The shoots roots wel on the basic medium1/2MS+IBA0.5mg/L and the rooting rate is 82.6%.
In domestication,it is better to use vermiculite and leaf mold for the growth of tender shoots in the trans-
planting soils.
Key words:sorbus sibirica;tissue culture;transplanting

2012年11月           Journal of Green Science and Technology             第11期