全 文 ：北方园艺 2010(8):167 ～ 169 ·生物技术 ·
作者简介:祁爽(1980-),女 ,硕士 ,工程师, 现主要从事林业生态与
林业生物技术研究工作。 E-mail:qishuangjianghao@163.com。
收稿日期:2010-01-10
欧亚花楸组培快繁技术研究
祁 　爽
(辽宁省生态公益林项目中心 ,辽宁沈阳 110036)
　　摘　要:以欧亚花楸幼嫩茎段为外植体 ,0.1%升汞消毒 8 min ,研究了不同基本培养基类型
及激素浓度 、驯化季节及基质对欧亚花楸组培快繁技术的影响。结果表明:欧亚花楸在 MS培养
基上有利于芽的增殖 ,在添加了6-BA 1.0 mg/ L、IBA 0.2 mg/ L后 ,芽的增殖系数达到最大;在1/
2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基上 ,有利于芽的生根;在3～ 4月移栽到 100%细河
沙的驯化基质中 ,组培苗生长良好。
关键词:欧亚花楸;组织培养;快繁
中图分类号:S 685.99　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2010)08-0167-03
1　材料与方法
1.1　试验材料
2004年10月从日本引进当年生欧亚花楸数株 ,定
植于辽宁林业优良苗木繁育中心苗圃 ,2008年 4月 ,剪
取生长健壮 、无病虫害的欧亚花楸幼嫩茎段。
1.2　试验方法
1.2.1　培养条件　培养温度(25±1)℃,光照强度3 000
～ 5 000 lx ,光照时间 14 h/d。
1.2.2　无菌芽的获取　剪取长 1.5 ～ 2.0 cm 欧亚花楸
幼嫩茎段 ,清水冲洗 2 ～ 3 h ,在超净工作台上 75%酒精
浸润 30 s ,无菌水冲洗2 ～ 3次 ,0.1%升汞消毒 8 min ,清
水冲洗 3 ～ 4次 ,接种 MS培养基中 ,放置培养室中。
1.2.3　基本培养基的筛选　该试验设 3个培养基对比
处理 MS 、B5 、N6。各取30个欧亚花楸幼嫩茎段和顶芽 ,
将外植体置于这 3种培养基中 ,25 d后观察统计结果 ,
以选出适宜良好生长的培养基。正常生长率=正常生
长植株数/接种总数×100%。
1.2.4　芽的增殖　待无菌芽长至1.0 cm ,分别切取 10
个无菌芽接种于MS增殖培养基中 ,增殖培养基共 9组 ,
即采用浓度为 0.2 、0.5、1.0 mg/ L 的 6-BA 与浓度为
0.1 、0.2、0.5 mg/L 的 NAA 其中之一组合 ,重复 3次 ,3
周后观察分析不同激素配比对增殖效果的影响。
1.2.5　诱导生根　当材料增殖到一定阶段时 ,即可进行
生根试验。把长至1.5 cm以上的芽从芽丛中切离转到
1/2 MS的生根培养基中 ,生根培养基共 9组(10株/
组),即采用浓度为 0、0.2 、0.5 mg/ L的 IBA分别与浓度
为0 、0.2、0.5 mg/ L的NAA其中之一组合 ,重复 3次 ,3
周后记录生根条数。
1.2.6　生根苗的驯化移栽　当苗根长达 2.5 cm时 ,选
择 3个不同的季节(3 ～ 4月 、6 ～ 7月 、9 ～ 10月),把生根
苗连瓶放在温室内 ,练苗 2 ～ 3 d ,打开瓶盖 ,向瓶内喷少
量水 ,瓶苗叶片湿润即可 ,使瓶苗接触有菌环境 ,然后将
瓶盖盖上 ,再练苗 2 ～ 3 d。温室温度控制在(25±2)℃,
练苗后 ,将生根苗取出 ,用自来水冲洗干净后 ,移栽到装
有 3种不同驯化基质(细河沙 、珍珠岩 、细河沙∶珍珠岩
=2∶1)的育苗穴盘中 ,罩上塑料薄膜和遮荫网拱棚保
持湿度 85%～ 90%,光照 2 000 ～ 3 000 lx ,试验重复 3
次 ,2周后揭开覆盖物 ,统计驯化成活率。
2　结果与分析
2.1　基本培养基的筛选
培养25 d后 ,结果见表1 ,在MS培养基中的试管芽
生长正常 、健康 ,植株颜色为绿色;在 B5培养基中的试
管芽 ,部分生长正常 ,部分植株变黄;培养在 N6培养基
中的试管芽 ,生长缓慢 ,逐渐变黄后死亡。MS培养基为
最适的基本培养基 ,有利于植物的正常生长 ,试管芽的
正常生长率可达96.7%。
　　表 1　不同培养基对欧亚花楸试管芽生长的影响
接种数 存活数 正常生长率/ % 生长状况
MS 30 29 96.7 生长正常,植株绿色
B5 30 28 70 部分生长正常 ,部分变黄
N6 30 29 32 生长缓慢,逐渐变黄后死亡
2.2　不同浓度6-BA和 IBA组合对腋芽增殖的影响
基本培养基能保证培养物的生存与最低生理活动 ,
只有配合使用适当的外源激素才能诱导细胞分裂的启
动 、芽的分化等合乎理想的变化[ 5] 。常用于组织培养的
植物激素有2大类:即生长素类和细胞分裂素类。生长
素类主要作用是促进细胞的伸长生长 ,促进生根;细胞
分裂素的主要作用是促进细胞的分裂和扩大 ,使茎增
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　　表 2　　　不同激素配比对欧亚花楸增殖的影响
培养基编号 6-BA/ mg·L-1
BA 浓度
/mg·L-1 平均每外植体增殖个数
1 0.2 0.1 5.17 ±0.52　E
2 0.2 0.2 7.37 ±0.33　D
3 0.2 0.5 6.53 ±0.66　DE
4 0.5 0.1 9.93 ±0.24　C
5 0.5 0.2 12.77 ±0.92　B
6 0.5 0.5 11.23 ±0.27　BC
7 1.0 0.1 12.90 ±0.56　B
8 1.0 0.2 15.07 ±0.24　A
9 1.0 0.5 10.20 ±0.31　C
粗 ,而抑制茎伸长 ,诱导芽的分化[ 9] 。
　　对表2中的数据进行单因素的方差分析 ,结果表明 ,
不同激素配比对欧亚花楸增殖系数差异达到极显著水平。
进一步对欧亚花楸增殖系数进行多重比较 ,欧亚花楸增殖
最适的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。
2.3　不同浓度 IBA和NAA组合对诱导生根的影响
试管苗生根是保证组培苗工厂化生产的关键之一 ,
并且一些植物的组培苗较难生根 ,成为了组培技术中的
难点之一 ,所以需针对不同的植物种类进行试验 ,以求
得适宜的生长素种类和浓度 ,获得更好的生根结果 ,并
且避免由于生长调节物质使用不当 ,而影响生根效果和
移栽成活率[ 6] 。植物激素对试管苗生根起着决定性的
作用 ,一般认为 , IBA与 NAA混合使用对生根效果好 ,
IBA被组培苗吸收后 ,不易在苗体内输送 ,往往停留在
处理的部位 ,多促进苗生出细而疏 ,分叉多的根系 ,而
NAA能被组培苗吸收与运输且积累在分生组织中 ,促
进根系发出根原基与生长发育 ,使根直而粗 ,侧根少[ 7] 。
　　表 3　　IBA和 NAA组合对诱导生根的影响
培养基编号 IBA 浓度/mg·L-1
NAA浓度
/mg·L-1
平均每外植体生根数
/条
1 0 0 0.17±0.12　E
2 0 0.2 2.77±0.15　D
3 0 0.5 5.83±0.33　B
4 0.2 0 3.77±0.38　CD
5 0.2 0.2 8.07±0.37　A
6 0.2 0.5 6.57±0.35　B
7 0.5 0 6.73±0.47　B
8 0.5 0.2 6.60±0.15　B
9 0.5 0.5 4.40±0.20 C
　　对表3中的数据进行单因素的方差分析及多重比
较 ,得出:不同 IBA与NAA浓度配比对欧亚花楸生根的
株数差异达到极显著水平 ,欧亚花楸增殖最适的生根培
养基为 1/2MS+IBA 0.2 mg/ L+NAA 0.2 mg/L。
2.4　生根苗驯化移栽
生根试管苗的移栽是工厂化生产中最为复杂的一
项技术 ,也是商品化生产取得效益的最重要环节。试管
苗在移栽过程中 ,要由异养转为自养 ,生长环境条件发
生了剧烈的变化 ,如何能为幼苗提供适合的过渡生长条
件 ,是移栽成活的关键。这就要求对移栽的基质 、水分、
温度 、湿度等加以严格控制 ,只有这样才能提高移栽成
活率 ,同时又达到工厂化育苗的要求[ 8] 。
MS培养基　　　　　　　　　　　　　　B5培养基　　　　　　　　　　　　　　N6培养基　　
图 1　欧亚花楸试管芽在 3种培养基上的生长情况
图 2　欧亚花楸在最佳增殖培养基中的生长状况 图 3　欧亚花楸在最佳生根培养基中的生根状况
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图 4　欧亚花楸的驯化移栽情况
　　表 4　不同移栽季节和基质对欧亚花楸驯化成活
率的影响
细河沙/ % 珍珠岩/ % 细河沙∶珍珠岩=2∶1/ %
3～ 4月 98 89 95
6～ 7月 86 78 81
9～ 10月 93 87 92
　　由表4可知 ,欧亚花楸在3 ～ 4月的平均驯化成活率
达最高 94%,在细河沙中的平均驯化成活率达最高
92.33%,综合来看 ,欧亚花楸移栽季节和基质的选择以
3～ 4月 100%细河沙的基质中驯化最佳。
3　讨论
植物快繁的目的是在最短的时间内生产最多的优
质苗木 ,通过调节外源激素的绝对浓度及不同种类激素
的相对配比 ,可改变增殖系数 ,欧亚花楸试管芽在增殖
培养基中添加一定比例和浓度的 6-BA 、IBA后 ,取得了
较佳的增殖效果。有些易生根的植物不需要加任何植
物生长调节剂即可生根 ,而有些植物则需要添加一定浓
度的生长素。在生根培养前 ,先在 MS 培养基中培养
20 d 左右再转入生根培养中 ,可以提高生根率。原因可
能是组培苗在继代培养时体内已经积累一定浓度的生
长素 ,直接接入含有一定浓度生长素的生根培养基中 ,
根原始体形成后 ,较高浓度的生长素的继续存在 ,不利
于幼根的生长发育。
试管苗是在人为控制条件下生长的 ,移出三角瓶后
则由异养转为自养。环境条件的剧烈变化 ,影响着试管
苗的成活率。因此 ,调节合适环境条件是提高欧亚花楸
生根苗驯化成活率的重要环节。
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Studies on Tissue Culture and Rapid Propagation of Sorbus commixta Hedl
QI Shuang
(Liaoning Eco logical Commonweal Forest Centre of Project , Shenyang , Liaoning 110036)
Abstract:Explants f rom stem segments of Sorbuscommixta Hedl , it with 0.1 percent mercuricchloride on 8 min ,what af-
fects tissue culture and rapid propagation technic w as studied with dif ferent basic media and concentration of phytokinin ,
different acclimatized season and base material , tissue culture and rapid propagation system of Sorbus commixta Hedl was
effective.The results showed that the MS medium supplied with with 6-BA 1.0 mg/L , IBA 0.2 mg/L was good to bud
propagation.The 1/2 MS medium supplied with IBA 0.2 mg/L , NAA 0.2 mg/ L w as good to bud rootage.Tissue cul-
ture seedling which was planted in pure thin sand of river in March to April grow w ell.
Keywords:Sorbus commixta Hedl;acclimatization and transplant;rapid propagation
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