全 文 ：HPLC-UV法测定天山花楸中金丝桃苷和芦丁的含量
李景庄 1 ,胡君萍 2 ,杨建华 3＊ ,王小青2
(1.新疆医科大学第一附属医院 , 乌鲁木齐 830054;2.新疆医科大学药学院 ,乌鲁木齐 830054;
3.新疆医科大学附属肿瘤医院 , 乌鲁木齐 830011)
摘要　目的:建立同时测定维吾尔药材天山花楸中金丝桃苷和芦丁含量的 RP-HPLC分析方法 。方法:采用 HPLC法 ,色谱柱
为 Symmetryshield　RP8(5μm, 4.6mm×150mm);流动相为甲醇 -0.05%磷酸(三乙胺调pH至 3.0)(40∶60), 柱温 40℃,流
速 1.3 mL· min-1 , 检测波长 360 nm。结果:金丝桃苷和芦丁分别在 20.0 ～ 100.0 ng和 15.8 ～ 79.0 ng范围内 ,进样量与色谱
峰积分面积呈良好线性关系 ,相关系数分别为 0.9997和 0.9999,平均回收率(n=6)分别为 102.3 %和 100.5%。结论:应用
本法测定金丝桃苷和芦丁的含量稳定可靠 ,重复性好 , 可用于天山花揪药材的质量控制。
关键词:天山花楸;金丝桃苷;芦丁;反相高效液相色谱法
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:0254-1793(2009)02-0310-03
RP-HPLCdeterminationofhyperosideand
rutininSorbustianshanicaRupr.
LIJin-zhuang1 , HUJun-ping2 , YANGJian-hua2, 3＊ , WANGXiao-qing2
(1.ThefirstAfiliatedHospital, XinjiangMedicalUniversity, Urumqi830054, China;
2.PharmacyColege, XinjiangMedicalUniversity, Urumqi830054, China;
3.TheAfiliatedTumorHospital, XinjiangMedicalUniversity, Urumqi830011, China)
Abstract　Objective:ToestablishRP-HPLCmethodforthedeterminationofhyperosideandrutininSorbustian-
shanicaRupr.fromXinjiang.Method:SymmetryShieldRP8 column(4.6 mm×150 mm, 5μm)waselutedwith
mobilephaseconsistedofmethanoland0.05% aqueousphosphoricacid(40∶60 , adjustedtopH3.0withtriethyl-
amine)atthecolumntemperature30℃.Theflowratewas1.3 mL·min-1 anddetectivewavelengthwas360nm.
Results:Hyperosidewasprovedtobelinearintherangeof20.0 -100.0 ngwitharegressioncoeficientof
0.9997, theaveragerecoverywas102.3%;rutinwasprovedtobelinearintherangeof15.8-79.0ngwithare-
gressioncoeficientof0.9999 , theaveragerecoverywas100.5%.Conclusion:Themethodisprovedtobequick,
simpleandhighsensitive.
Keywords:SorbustianshanicaRupr.;hyperoside;rutin;RP-HPLC
　　天山花楸(SorbustianshanicaRupr.)系蔷薇科
花揪属植物 ,含有多种活性成分 ,主要包括三萜类 、
黄酮类 、生氰苷类 、植物甾醇类等 ,具有抗氧化 、抗
癌 、抗辐射 、止咳平喘等药理作用 [ 1] 。天山花揪主
要分布于新疆 ,具有清热利肺 、补脾生津 、止咳平喘
等功效 。它是维吾尔族和哈萨克族民间习用的一种
药材 ,常以果实 、嫩枝叶和茎皮入药 ,临床上主要用
于肺结核 、哮喘 、咳嗽 、胃炎 、胃疼等症的治疗。金丝
桃苷和芦丁均为黄酮类化合物 ,具有多种生物活性 ,
在以前的研究工作中我们曾采用 RP-HPLC法同
时测定了新疆贯叶连翘中芦丁和金丝桃苷的含
量[ 2] 。新疆有着丰富的天山花楸资源 ,但研究却相
对滞后 ,为合理开发利用植物药材资源及控制生药
和制剂的质量 ,本课题组以金丝桃苷和芦丁作为指
标成分 ,采用 HPLC法同时测定了它们在天山花揪
中的含量 ,为该药材的质量控制和评价提供参考分
析资料。
—310— 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2009, 29(2)
＊ 通讯作者　Tel:(0991)7819169;E-mail:yjh-yft@163.com
DOI :10.16155/j.0254-1793.2009.02.029
1　仪器与试药
Waters2690型高效液相色谱仪 (带自动进样
器), Waters2487型可见紫外检测器 , WatersMilen-
nium32色谱工作站 , BS110S电子天平(德国 Sartori-
us), SB3200超声振荡仪(上海 Branson)。甲醇为色
谱纯 ,水为重蒸水 ,其他试剂均为分析纯。
对照品金丝桃苷 (1521 -200202)和芦丁
(100080-200306)均由中国药品生物制品检定所
提供 ,天山花楸采于新疆乌鲁木齐市近郊天山南麓 ,
由新疆医科大学药学院天然药物化学教研室堵年生
教授鉴定。
2　色谱条件
色谱柱:SymmetryshieldRP8 (5 μm, 4.6 mm×
150mm);流动相:甲醇 -0.05%磷酸(三乙胺调 pH
至 3.0)(40∶60);流速 1.3 mL· min-1;检测波长
360nm,柱温 40 ℃。在本色谱条件下 ,天山花揪药
材中金丝桃苷和芦丁的色谱峰与其他组分峰均得到
较好分离 ,结果见图 1。
3　溶液的配制
3.1　对照品溶液 　精密称取金丝桃苷对照品 1
mg、芦丁对照品 15 mg,分别置于 10 mL量瓶中 ,加
少量甲醇超声溶解后定容 ,摇匀。分别吸取上述溶
液适量 ,加甲醇稀释成 20.0μg·mL-1和 15.8 μg·
mL-1的金丝桃苷和芦丁对照溶液 ,摇匀 ,即得 。
3.2　供试品溶液　将天山花揪药材干燥 、粉碎 ,过
40目筛 ,得供试药材样品 。精密称取药材样品 0.25
g,置于 10 mL量瓶中 ,加适量甲醇浸泡 1 h,然后超
声提取 30 min,再加甲醇至刻度 ,摇匀 ,上清液经
0.45μm微孔滤膜过滤 ,即得 。
4　方法与结果
4.1　线性关系考察　分别精密吸取金丝桃苷和芦
丁对照品溶液各 1, 2, 3, 4, 5 μL,进样 ,以进样量为
横坐标 ,峰面积积分值为纵坐标 ,得金丝桃苷和芦丁
的回归方程分别为:
A=7856.93C+4593.4　r=0.9997(n=5)
A=1124.6C+148.3　r=0.9999(n=5)
表明金丝桃苷和芦丁进样量分别在 20.0 ～ 100.0 ng
和 15.8 ～ 79.0 ng范围内线性关系良好。
4.2　精密度试验　分别吸取金丝桃苷和芦丁对照
品溶液各 4μL,重复进样 5次 ,按峰面积计算 ,金丝
桃苷和芦丁的 RSD分别为 0.8%和 0.6%。
4.3　稳定性试验　取天山花揪 0.25 g,按 “样品测
定 ”项下方法制备样品溶液 ,分别于 0, 2, 4, 6, 8 h进
样 ,每次 4μL,测定峰面积 ,结果表明样品溶液在 8
图 1　对照品及样品色谱图
Fig1　Chromatogramsofreferencesubstancesandsample
A.金丝桃苷对照品 (hyerosidereferencesubstance)　B.芦丁对照
品 (rutinreferencesubstance)　C.样品 (sample)
1.金丝桃苷 (hyeroside)　 2.芦丁 (rutin)
h内稳定 , RSD为 1.2%。
4.4　重复性试验　取天山花揪药材样品 0.25 g,按
“样品测定 ”项下方法分别制备 5份样品 ,在该色谱
条件下测定含量 ,金丝桃苷和芦丁的平均含量分别
为 0.0453%, 0.0407%;RSD分别为 2.3%, 1.8%。
表明方法重复性较好。
4.5　加样回收率试验　分别取已知含量的天山花
楸药材样品 0.125 g,共 6份 ,精密称定 ,分别置 10
mL量瓶中 , 2份为一组 ,每组分别加入金丝桃苷和
芦丁对照品各 25, 50, 75 μg,加甲醇至刻度 ,超声提
取 30 min,上清液经 0.45 μm微孔滤膜过滤后 ,进
样 4 μL测定 。金丝桃苷和芦丁的平均回收率分别
为 102.3%, 100.5%;RSD分别为 1.3%, 2.1%。
4.6　样品测定　精密称取天山花楸样品 0.25 g,置
10 mL量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,超声提取 30 min,上
清液经 0.45 μm微孔滤膜过滤后 ,进样 4 μL测定。
结果样品中金丝桃苷和芦丁的平均含量 (n=6)分
别为 0.0445%, 0.0411%;RSD分 别为 0.7%,
1.5%。
—311—药物分析杂志 ChinJPharmAnal2009, 29(2)
5　讨论
5.1　黄酮类化合物是天山花楸中重要的活性成分 ,
金丝桃苷具有凉血止血 、清热解毒等活性 ,芦丁具有
抗病毒和抗炎等活性 。目前尚未见有同时测定天山
花楸中两组分的文献报道 。本文采用 HPLC-UV
法同时测定金丝桃苷和芦丁的含量 ,方法简便易行 ,
适用于控制和评价天山花楸的质量。
5.2　金丝桃苷和芦丁在 360 nm均有较强吸收 ,故
选择 360 nm为测定波长 ,在该波长测定时 ,色谱峰
对称 ,干扰少 。
5.3　传统方法以天山花楸嫩枝 、果实和皮入药 ,其
有效成分的含量受采药时间的影响很大。为有效开
发新疆丰富的天山花楸药用资源 ,本课题组对该药
材不同采收期有效成分的含量变化也进行了考察 ,
将另文报道。
参考文献
1　YUMing(于明), LIXian(李铣).Reviewonresearchofthechemi-
calconstituentsandpharmacologicalactivitiesofSorbusL.(花楸属
植物化学成分药理作用及其研究进展).JLiaoningCollTradit
ChinMed(辽宁中医学院学报), 2004, 6(5):364
2　HUJun-ping(胡君萍), YANGJian-hua(杨建华), ZHANGXu-
an(张烜), etal.RP-HPLCdeterminationofrutinandhyperoside
inHypericumperforatumL.fromXinjiang(反相高效液相色谱法同
时测定新疆贯叶连翘中芦丁和金丝桃苷的含量).ChinJPharm
Anal(药物分析杂志), 2003, 23(5):363
(本文于 2008年 12月 12日收到)
中国药学会主办期刊 10篇论文
荣获第六届中国科协期刊优秀学术论文称号
中国科协 2009年 1月 4日公布了 “第六届中国科协期刊优秀学术论文评选”活动结果。此次评选共选出优秀学术论文
471篇 , 其中一等奖 50篇 ,二等奖 150篇 , 三等奖 271篇。经中国药学会推荐 , 学会主办期刊有 10篇论文获奖。其中一
等奖 1篇 、二等奖 4篇 、三等奖 5篇。
第六届中国科协期刊优秀学术论文评选中国药学会主办期刊论文获奖名单如下:
序号 奖项 主要作者 刊载期刊
1 一等奖 李荣坡 、周伟澄 、周伟良 药学学报
2 二等奖 刘丽 、赵玲 、李雅莉等 中国药学杂志
3 二等奖 白进发 、刘志强 、再帕尔·阿不力孜等 药学学报
4 二等奖 王阶 、郭丽丽 、王永炎 中国中药杂志
5 二等奖 王素军 、李晓天 、王广基等 中国新药杂志
6 三等奖 葛盛芳 、孟夏 、赵毅等 中国药学杂志
7 三等奖 李佐刚 、李晶 、闻镍等 药物分析杂志
8 三等奖 代现平 、李行舟 、郑志兵等 中国药物化学杂志
9 三等奖 赵明镜 、王硕仁 、李敏等 中国中药杂志
10 三等奖 单爱莲 、权菊香 、魏敏吉等 中国临床药理学杂志
详情请浏览中国药学会网站:www.cpa.org.cn。
—312— 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2009, 29(2)