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藏药圆柏的比较鉴别



全 文 :Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2016 Vol.29 No.1
中国科技 核心期刊
经过质量标准含量测定及3批样品的测定结
果,3批样品以黄芪甲苷(C41H68O14)含量在1.493~
1.532mg/g范围内,考虑到药材来源以及制剂生
产,贮藏等其他因素影响,暂定本品每粒含黄芪以
黄芪甲苷(C41H68O14)计,不得少于1.1mg。
3 讨论
采用薄层扫描法测定自制补阳还五胶囊中黄
芪甲苷,开展方法学研究,结果表明,该法操作简
便、快速、重现性好,可有效控制补阳还五胶囊的
质量,也为含有黄芪的中成药增加黄芪甲苷的测
定提供了新思路。
参考文献
[1] 邓中甲.方剂学[M].北京:中国中医药出版社,2003:240.
[2] 王智华,陆履雯,王海英,等.补阳还五汤冲剂的质量标准研
究[J].中成药,1996,18(7):12-14.
[3] 张星,陆兔林,毛春芹,等.补阳还五汤质量标准研究[J].中
成药,2013,35(3):529-533.
[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[M].北京:中
国医药科技出版社,2010:附录34.
收稿日期:2014-11-20
*基金项目:陕西省重点创新团队计划(编号2012KCT-20)。
作者简介:刘世军(1974—),男,博士学位,高级工程师。研究
方向:天然产物研究及中药制剂与质量标准研究。
表3 样品测定结果
批号 称样量/g 面积A1 面积A2 平均面积 含量/(mg·粒-1)
061001 0.5013 4568.32 4571.06 4569.69 1.532
061002 0.4982 4472.18 4398.36 4435.27 1.493
061003 0.5026 4486.39 4513.07 4499.73 1.503
藏药圆柏的比较鉴别
武 雪 1,宋平顺 2,赵建邦 3
1 兰州大学药学院,甘肃 兰州730000;
2 甘肃省药品检验研究院;3 甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心
[摘 要]目的:研究藏药圆柏属植物的生药鉴定特征。方法:运用性状、显微、薄层色谱法对藏药圆柏属
药材进行鉴定。结果:不同基源的藏药圆柏在形态学、显微鉴定学、TLC图谱中均存在一定的差异。结论:该方
法可以作为藏药圆柏属植物的鉴定和提高相关质量标准的参考依据。
[关键词]藏药;圆柏;生药鉴定;薄层色谱鉴别
[中图分类号]R29[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2016)01-0032-05
Comparative Identification of Tibetan Medicine Yuanbai
WU Xue1, SONG Pingshun2, ZHAO Jianbang3
1 Pharmacy College of Lanzhou University, Lanzhou 730070, China;
2 Gansu Provincial Academy of Drug Inspection;
3 Research Center for Gansu Provincial Herb Quality and Safety Evaluation Engineering Technology
Abstract Objective: To study pharmacognostic identification features of Tibetan medicine YuanBai (Sabina
chinensis (L.) Ant.). Methods: Tibetan medicine YuanBai was identified from the shape and property, microscope
and thin-layer chromatography (TLC). Results: There were certain differences existed in the comparisons of the mor-
phology, microscopic identification and TLC of Tibetan medicine YuanBai with different origins. Conclusion: The
method could be taken as reference for the identification of Tibetan medicine YuanBai and the improvement of qual-
ity standard.
Keywords Tibetan medicine; YuanBai; pharmacognostic identification; thin-layer chromatography
方 药·质量分析
2.10 样品测定取本品3批,按供试品制备方法 制备样品,依上述色谱条件测定,见表3。
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中国科技 核心期刊
园柏[Sabina chinensis(L.)Antoine]属柏科
园柏属植物。园柏常绿,树形优美,成为风景园林
的重要植物[1]。在我国,除东北及西北北部外,其
余各省均有分布或栽培。四川盆地及盆地周边缘
山区广泛分布。尤其川西北高原地区多成片生长,
资源蕴藏丰富[2-3]。各地藏医用柏科大果圆柏、方
枝柏、侧柏、高山柏等多种植物作为秀巴入药,根
据各地藏医用药情况,以大果圆柏属的几种植物
作为甲秀用药。藏区各地使用的品种互不相同,结
合本研究对样品的鉴定,发现圆柏属已有10种植
物作为藏药圆柏使用。包括大果圆柏、方枝柏、祁
连山圆柏、圆柏、曲枝圆柏(垂枝柏)、滇藏方枝柏、
香柏 Sabina pingii (Ferre)Ching et W.T.Wang
var.Wilsonii(Rehd.)Cheng et L.K.Fu、叉子圆柏
Sabina vulgaria Ant.、密枝圆柏 Sabina convallium
(Rehd.et Wlis.)Ching et.W.T.Wang、塔枝圆柏
Sabina komarovii Ching et.W.T.Wang[5]。表明作
为藏药材的圆柏来自柏科柏属10种植物,综合资
源分布及各地使用品种分析,本标准在藏药标准
(1978年版)基础上,规定大果圆柏Sabina tibetica
Kom.、垂枝柏 Sabina recurva(Buch.-Hamilt.)An-
toine、祁连山圆柏 Sabina przewalskii Kom.等同
属数种植物的带叶或果的嫩枝作为圆柏的主要品
种来源。为确保藏药圆柏的质量标准,本研究对其
圆柏同属树种植物从性状、显微、薄层层析3个方
面进行了比较鉴别,现报道如下:
1 仪器与药材
1.1 仪器OLYMPUS BX51 显微数码成像系统
(日本奥林巴斯公司);METTLER AL204 型电子天
平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]。
1.2 药材在甘肃兰州、甘南进行标本采集,并
查阅甘肃省药检所标本室存留的圆柏属(Sabina)
藏药植物标本11份,共计21批。另外甘肃甘南佛
阁药业提供1批2003年的样品。对标本进行了初
步的分类学鉴定,经兰州大学植物分类学蒲训教
授复核鉴定,见表1。
2 方法与结果
2.1 性状鉴别
2.1.1 大果圆柏 小枝四棱形。多为鳞叶,呈绿
色,稀微被蜡粉,背面拱圆或上部有钝脊,中部有
明显的椭圆形腺体,干后呈腺槽。稀见有刺叶。球
果卵圆形或近球形,灰褐色或黑色,长 9~16 mm,
径6~8mm。种子1粒,卵圆形,长7~11mm,稍扁压,
两侧中上部有棱脊,表面有4~8较深的树脂槽。气
微香,味苦、涩。
2.1.2 祁连山圆柏 小枝圆柱形或微呈四棱形。
刺叶与鳞叶皆有。刺状叶三叶交叉轮生,长4~8mm,
三角状披针形,背面拱圆,在腹面尚有白粉带残
留;鳞叶背部的腺体位于基部或近基部。球果宽卵
形,长 9~13 mm,成熟时蓝黑色或黑色,含种子 1
粒。种子卵圆形,扁压,径6~9mm,两侧有明显棱
脊,周围有树脂槽。
2.1.3 密枝圆柏 小枝弧形或直,下垂,其上的
鳞叶交叉对生,先端微钝或微尖,微向内曲,背面
拱圆或上部有不明显的钝脊,腺体明显,微凹,矩
圆形、窄椭圆形或近条形,稀卵形,位于叶背中部,
干时腺槽通常明显,常从近基部伸至中上部或几
达先端;刺叶仅生于幼树上,三叶交叉轮生或交叉
对生,斜展,上面凹,下面有不明显的纵脊。球果锥
状卵圆形或圆球形,熟时红褐色或暗褐色,无白
粉,稍有光泽,有1粒种子;种子锥状球形,上端有
两条棱脊,顶端钝尖或尖,基部圆,有树脂槽。
表1 圆柏样品收集与标本鉴定
样品 产地 基原 药用部位 采集时间
1 青海 圆柏Sabina chinensis 标本 自采2010年5月
2 甘肃1 圆柏Sabina chinensis 标本 自采2010年6月
3 甘肃2 圆柏Sabina chinensis 标本 自采2010年9月
4 甘肃1 垂枝圆柏Sabina chinensis var penduia(Franch)Cheng et W.T.Wang 标本 自采2010年9月
5 甘南 圆柏Sabina chinensis 枝、叶 2003年样品
6 西藏1 圆柏属Sabina sp 果实 2011年4月25日
7 西藏2 大果圆柏Sabina tibetica 枝、磷叶、刺 2011年4月25日
8 西藏3 密枝圆柏Sabina convallium(Rehd.et Wils.)Cheng.W.T.Wang 枝、磷叶、刺叶 2011年4.25
9 甘肃3 叉子圆柏Sabina vulgaris 藏药植物标本 70年代存留
10 甘肃4 塔枝圆柏Sabina komoroii 藏药植物标本 70年代存留
11 甘肃5 密枝圆柏Sabina convallium 藏药植物标本 70年代存留
方 药·质量分析
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Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2016 Vol.29 No.1
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2.1.4 塔枝圆柏 小枝圆或近方形。鳞 叶呈卵
状三角形,少为宽披针形,交互对生,间或顶生小
枝之叶三枚交互轮生,微内曲,先端钝尖或微尖,
腹面凹,背面圆或上部有钝脊,基部或近基部有椭
圆形或卵形腺体,有时腺槽达中下部。球果成熟前
绿色,微被白粉,熟时黄褐色至紫蓝色,干时变成
黑色,有光泽,卵圆形或近圆球形,直立,有1粒种
子;种子卵圆形或倒卵圆形,长6~8mm,有深凹或
细浅的树脂槽,两侧或上部具钝脊。
2.1.5 叉子圆柏 枝密集,斜上展,小枝细,近圆
形,裂成薄片。叶两型,刺叶生于幼树上,常交互对
生或3枚轮生,上面凹,下面拱圆,中部有长椭圆
形或条状腺体;鳞叶常生于壮龄植株或老树上,交
互对生,斜方形,先端微钝或急尖,背面中部有椭
圆形或卵形明显腺体。球果生于下弯的小枝顶端,
呈倒三角状球形或叉状球形。种子1~4(5)粒,多
为2~3粒,微扁,长4~5mm,顶端钝或微尖,有纵脊
和树脂槽。
2.1.6 垂枝圆柏 全为刺状叶。小枝细,通常较
长而下垂;叶常呈覆瓦状排列,叶背拱圆,仅中下
部有纵槽。球果仅具l粒种子。
2.2 显微鉴别对大果圆柏、密枝圆柏、塔枝圆
柏、叉子圆柏、垂枝圆柏、祁连山圆柏、圆柏植物标
本进行茎、鳞叶和刺叶的横切面特征观察。初步认
为,种间鳞叶和刺叶无明显差异,显微特征基本相
同。
2.2.1 茎横切面 木栓层5~23列细胞,呈扁平
的长方形,黄棕色至棕褐色,有的具纤维。皮层属
列细胞,扁平的不规则多边形。韧皮部宽广,细胞
多边形,小于皮层细胞,细胞中充满草酸钙细小结
晶样物,略呈环排列;靠内侧可见少量纤维散在或
呈环排列;或偶见纤维,射线明显,常1列细胞。木
质部细胞全部木质化,璧厚,管饱常常单个散
在,木质纤维发达。
2.2.2 叶横切面 上表皮为1列类圆形细胞,壁
较厚,外层角质化,凹陷处为气孔。维管束外韧型,
具缘纹孔管胞类圆形,壁木化;纤维壁较厚,具纹
孔;韧皮部细胞不规则形,射线弯曲。叶肉由薄壁
细胞组成,多呈类圆形、不规则形,细胞间隙明显,
位于表皮下方的叶肉细胞呈长圆形。维管束的下
方有一圆形的树脂管,由 12~13 个细胞排列组
成。下表皮1列类圆形细胞,下皮层为1~2列排列
较紧密的纤维状的细胞,由两侧延伸至上表皮,壁
增厚,几无胞腔。但种间茎的组织特征有细微的差
异。主要表现为:1)圆柏的韧皮部中无或偶见纤
维,其他品种多少有纤维散在或呈环排列。2)大果
圆柏的木栓层有明显的纤维散在,其他品种没有。
2.3 薄层色谱鉴别取大果圆柏、祁连山圆柏、
垂枝圆柏、密枝圆柏、塔枝圆柏、叉子圆柏粉末各
1g,加80%甲醇50 mL,加热回流1小时,滤过,滤
液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶
液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版附录Ⅵ B)
试验,吸取上述溶液各1μL,分别点于同一硅胶G
薄层板上,以环己烷-三氯甲烷 -乙酸乙酯-冰
醋酸(20∶5∶8∶0.1)为展开剂,展开,取出,晾干。喷
以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清
晰,置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中,各
圆柏属药材显示斑点清晰,分离适中,见图1。
1 2 3 4 5 6
注:1大果圆柏;2祁连山圆柏;3垂枝圆柏;4密枝圆柏;5塔枝圆柏;6叉子圆柏
图1 圆柏属植物的薄层色谱图
方 药·质量分析
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2016年第 29卷第 1期
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2.3.1 薄层色谱鉴别条件考察
2.3.1.1 提取条件考察 A:取祁连山圆柏粉末
1g,加80%甲醇50 mL,加热回流1小时,滤过,滤
液蒸干,残渣加甲醇 1 mL使溶解,作为供试品溶
液;B:取祁连山圆柏粉末1g,加 70%甲醇25 mL,
盐酸1mL,加热水解1小时,滤过,滤液蒸干,残渣
加水10mL使溶解,用乙酸乙酯提取2次,10mL/次,
合并乙酸乙酯,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作
为供试品溶液。
2.3.1.2 展开条件考察 A:以环己烷 -三氯甲
烷-乙酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶ .1)为展开剂;B:
以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(8∶4∶0.4)为展开剂。
2.3.1.3 显色条件考察 A:喷以10%硫酸乙醇溶
液,在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外灯(365nm)
下检视;B:喷以5%三氯化铝乙醇溶液,置紫外灯
(365nm)下检视。
根据上述提取、展开和显色薄层色谱结果比
较,认为提取方法A、展开方法A和显色方法A的
薄层色谱效果较好,斑点清晰。直接置紫外灯
(365nm)下检视,荧光斑点较少;而喷以10%硫酸
乙醇溶液,在105℃稍加热至斑点显色清晰,再置
紫外灯(365 nm)下检视,明显出现不同颜色的荧
光斑点。结果见图2。
点样量1μL 点样量2μL 点样量3μL 点样量1μL 点样量2μL 点样量3μL
点样量1μL 点样量2μL 点样量3μL 点样量1μL 点样量2μL 点样量3μL
注:提取方法为A、展开方法为A、显色方法为A。
注:提取方法为A、展开方法为B、显色方法为B。
注:提取方法为B、展开方法为A、显色方法为A。
注:提取方法为B、展开方法为B、显色方法为B。
图2 圆柏属植物薄层色谱图
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藏药烈香杜鹃花和叶中
挥发性成分的 GC-MS分析
李明珠 1,宋平顺 2△,赵建邦 3
1兰州大学药学院,甘肃 兰州730000;
2 甘肃省药品检验研究院;3 甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心
[摘 要]目的:对藏药烈香杜鹃叶和花的挥发油化学成分进行分析研究。方法:采用水蒸气蒸馏法提取
叶和花中的挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对提取物中的挥发性成分进行分离分析,并计算各
成分的相对百分含量。结果:叶和花的挥发油分别鉴定出44种和58种化合物。其中,叶的主要成分为苄基丙
酮,相对百分含量为54.748%;花的主要成分为桉叶油二烯,相对百分含量为8.740%。结论:烈香杜鹃叶和花的
挥发油无论在成分还是含量方面都存在一定差异。
[关键词]烈香杜鹃;挥发油;气相色谱-质谱联用
[中图分类号]R284.13[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2016)01-0036-04
Analysis of Volatile Components in Tibetan Medicine LieXiang DuJuan by GC-MS
LI Mingzhu1, SONG Pingshun2△, ZHAO Jianbang3
1 Pharmacy College of Lanzhou University, Lanzhou 730070, China;
2 Gansu Provincial Academy of Drug Inspection;
3 Research Center for Gansu Provincial Herb Quality and Safety Evaluation Engineering Technology
AbstractObjective: To analyze volatile components in the leaves and the flowers of Tibetan medicine
LieXiang DuJuan (Rhododendron anthopogonoides Maxim.). Methods: Volatile components contained in the leaves
and the flowers were extracted by steam distillation, volatile components in the extracts were separated and analyzed
by using GS-MC, and relative percentage composition of the components were calculated. Results: Altogether 44
and 58 compounds were identified respectively from volatile oil of the leaves and the flowers. Among them, major
constituents of the leaves were benzyl acetone, relative percentage composition was 54.748%; main constituents of
the flowers were Eucalyptus oil, relative percentage composition was 8.740%. Conclusion: Certain differences are
existed in the comparisons of the ingredients and the contents of volatile oils in the leaves and the flowers of LieXi-
ang DuJuan.
KeywordsLieXiang DuJuan; volatile oil; gas chromatography-mass spectrography
3 讨论
随着中药界对藏药圆柏药用价值的深入认
识,对其的需求也将增加,但因为目前的藏药圆柏
基源繁杂,资源珍稀,流通及混用情况也极其复
杂。有效掌握不同基源藏药圆柏的鉴别方法,将成
为其应用及研究的首要任务,本研究可以作为藏
药圆柏属植物的鉴定和相关质量标准提高的参考
依据,以便于最终确定藏药圆柏的正品。
参考文献
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收稿日期:2015-03-30
作者简介:武雪(1983—),女,硕士学位。研究方向:药品流通
与管理。
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