全 文 ：2011（04）
Resource and Application Of Landscape Plants
园林植物资源与应用
·
常绿萱草组培快繁技术研究
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Hemerocallis Hybrida
郑慧俊 龚仲幸
Zheng Hui-jun Gong Zhong-xin
（杭州职业技术学院，杭州 310018）
（Hangzhou vocational&technical college,Hangzhou 310018）
摘 要：以常绿萱草茎尖为外植体，研究了不同消毒方式、培养基配方对于外植体生长的影响，并探索了最适于愈伤
组织形成、不定芽增殖和生根的培养基配方。结果表明：在无菌条件下，用 75％酒精消毒 30S，再转入 0. 1％升汞溶液
浸泡 8分钟消毒效果最好；有利于外植体产生愈伤组织的培养基配方是 MS+2. 0mg/ L BA + 0. 2mg/ L NAA；适
合愈伤组织诱导生芽培养基配方是 MS+1. 0 mg/ L 2. 4- D + 1. 0 mg/ L KT；适合幼苗生根的培养基配方是
MS+NAA0. 5 mg/ L+ 活性炭 0. 2 mg/ L。
关键词：常绿萱草；组织培养；快速繁殖；愈伤组织；培养基
Abstract：The stem apex of Hemerocallis Hybrida was taken as explant cultured in vitro．The effects of
different disinfection way and medium formula on explant grow th Disinfection way was studied．The re-
sults showed that w ith 75% ethanol disinfection 30S, again into eight minutes HgCl2 solution soaking
0. 1% disinfection was the best way; MS+2. 0mg/ L BA + 0. 2mg/ L NAA solid culture medium was
advantageous to induce callus；after cultured in MS+1. 0 mg/ L 2. 4- D + 1. 0 mg/ L KT solid culture medi-
um was suitable for callus induction born bud; and MS+NAA0. 5 mg/ L+ Activated carbon 0. 2 mg/ L solid
culture medium was the best medium to induce root．
Key words：Hemerocallis Hybrida；Tissue culture；Rapid propagation；Callus tissue；Medium
常绿萱草(Hemerocallis Hybrida)为百合科(Liliaceae)萱
草属(Hemerocallis)多年生宿根草本植物。萱草类性强健而耐
寒，适应性强，又耐半阴，花色鲜艳、栽培容易，园林中多丛植、
路旁栽植或做地被应用[1]，是优良的园林地被植物。常绿萱草繁
殖主要采用分株法，一般 1株萱草每年仅可繁殖 4~5株[2]，由于
分株法繁殖系数低，从而限制了常绿萱草在园林中的大量应
用。为了突破萱草属植物快速繁殖的技术瓶颈，近年来运用组
织培养法对萱草属植物进行快繁的研究日益增多，但主要集中
在大花萱草、萱草等少数几个种，对常绿萱草的组织培养鲜见
报道。因此，开展常绿萱草组培快繁研究具有重要的应用价值。
本试验探索了利用组培技术繁育常绿萱草的外植体消毒方法
和培养基配方，对加快常绿萱草繁殖速度，打破繁殖的季节限
制，实现育苗工厂化生产具有重要实践意义。
1材料与方法
1. 1供试材料
供试材料采自生长健壮、无病虫害的常绿萱草植株，外植
体为常绿萱草的茎尖。
1. 2方法
1. 2. 1无菌材料的获得
将清洗干净的萱草茎尖用自来水冲洗半小时，在无菌条件
下，用 75％酒精消毒 30S，再转入 0. 1％升汞溶液浸泡，升汞溶
液浸泡时间分别设置 6min、8min、10min 三个梯度，最后用无
菌水冲洗 4次。用消毒的解剖刀将最外层的叶片剥去后，将茎
輫輰
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尖基部与升汞接触部位切去 2毫米左右，留下 1 cm 左右的茎
尖接种到愈伤组织诱导培养基上培养。
1. 2. 2培养基与培养条件
以 MS为基础培养基，添加琼脂 7g/ L，加 3％蔗糖，激素
配比随着各个培养阶段有所不同。在 103 kPa、121℃条件下灭
菌 18 min。培养室温度控制在 (25±2)℃，光照强度
1800~2000 lx，每天光照 12h。
1. 2. 3愈伤组织诱导
将灭菌过的常绿萱草茎尖接种到愈伤组织诱导培养
基中，培养基配方分别如下：
MS+6- BA1. 0mg/ L+NAA0. 1mg/ L；
MS+6- BA1. 5mg/ L+NAA0. 1mg/ L；
MS+6- BA2. 0mg/ L+NAA0. 1mg/ L；
MS+6- BA1. 0mg/ L+NAA0. 2mg/ L；
MS+6- BA1. 5mg/ L+NAA0. 2mg/ L；
MS+6- BA2. 0mg/ L+ NAA0. 2 mg/ L。
1. 2. 4诱导出芽
将愈伤组织分别转移到不定芽诱导培养基中，培养基配
方 分 别 如 下 ：MS+2. 0mg/ LBA+0. 2mg/ LNAA；MS+1.
5mg/ LBA+0. 2mg/ LNAA；MS+1. 0mg/ L2. 4- D+1. 0mg/ L
KT。
1. 2. 5诱导生根
将出芽的幼苗转移至生根培养基中，培养基配方分别如下：
MS+NAA0. 5 mg/ L；MS+NAA0. 5 mg/ L+ 活性炭 0. 2 mg/ L。
2结果与分析
2. 1外植体消毒
表 1 升汞处理时间对茎尖消毒效果的影响
升汞不同处理时间对常绿萱草茎尖消毒效果的影响见表
1，结果表明升汞处理 8min 茎尖无污染且成活率最高，达到
90%。升汞处理 6min 茎尖污染率较高，虽然成活率较高，但无
污染成活率只有 70%。升汞处理 10min 茎尖成活率偏低，虽然
污染率较低，但无污染成活率只有 56. 7%。综合来看，升汞处理
8min 茎尖是较好的消毒处理方式。
2. 2愈伤组织诱导
表 2 MS培养基上不同植物激素配比对诱导愈伤组织的影响
将灭菌过的外植体接种到愈伤组织诱导培养基，约 30天
后，产生淡黄色到黄绿色颜色不等的愈伤组织。不同植物激素
配比对诱导愈伤组织的影响见表 2，结果表明 2. 0mg/ L BA +
0. 2mg/ L NAA 有最高的出愈率，达到 96. 7℅，且愈伤组织偏
淡黄色或嫩绿色，如图 1。这与刘长利、崔俊茹（2007年）观察到
的诱导出萱草愈伤组织团块外部特征类似[3] 。根据实验结果来
看，当细胞分裂素和生长素浓度接近 10: 1的情况下，诱导愈伤
组织的效果较好；同等比例条件下，2. 0mg/ L BA + 0. 2mg/ L
NAA比 1. 0mg/ L BA + 0. 1mg/ LNAA效果要好。
2. 3诱导出芽
表 3 MS培养基上不同植物激素配比对不定芽诱导的影响
将诱导出的愈伤组织转入含有不同激素配比的继代培养
基中。一周后，淡黄色的愈伤组织逐渐变绿，开始产生许多新生
芽点（图 2）。这与王晓娟等（2003年）观察到的现象类似[2]。比较
不同植物激素配比对不定芽诱导的影响见表 3，结果表明
MS+1. 0 mg/ L 2. 4- D + 1. 0 mg/ L KT 诱导效果较好，不
定芽增殖系数达到 8，且芽体健壮。
2. 4诱导生根
表 4 不同培养基配方对诱导生根的影响
经过一段时间的继代培养后，当再生植株长到 2cm 以上
时，将丛生芽切分成带少量愈伤的单株转到不同的生根培养基
中，15天后观察其生根情况，如图 3。比较两种生根培养基对诱
导生根的影响见表 4，结果表明加了活性碳的培养基在生根
率、生根数、健壮度方面都占优。这与郭达初等（1990年）的试
验结果有所不同[4]，而刘志洋等（2008年）则认为适合幼苗生根
的培养基配方是 1/ 2MS+NAA 0. 5 mg/ L[5]。通过本试验研
究，我们认为添加活性炭对诱导生根具有重要影响。
3讨论
常绿萱草繁殖主要采用分株法，由于分株法繁殖系数低，
在快速大量生产上存在局限性。本文通过对常绿萱草组培生产
体系的研究，建立了以常绿萱草茎尖为外植体，历经愈伤组织
诱导、诱导出芽、诱导生根的生产技术体系，对常绿萱草组培苗
工厂化快速生产具有重要实践指导意义。筛选出较优的培养基
处理时间（min） 接种外植体
无污染成活
外植体
无污染
成活率（℅）
6 30 21 70
8 30 27 90
10 30 17 56. 7
培养基编号
6- BA
(mg·L- 1)
NAA
(mg·L- 1)
愈伤数量
（块）
出愈率
（℅）
1 1. 0 0. 1 26 86. 7
2 1. 5 0. 1 20 66. 7
3 2. 0 0. 1 25 83. 3
4 1. 0 0. 2 10 33. 3
5 1. 5 0. 2 22 73. 3
6 2. 0 0. 2 29 96. 7
培养基
编号
激素配方
不定芽
增殖系数
不定芽
生长状况
7 MS+2. 0mg/ L BA + 0. 2mg/ L NAA 6
叶翠绿、
苗较细
8 MS+1. 5mg/ L BA + 0. 2mg/ L NAA 5
叶翠绿、
较健壮
9 MS+1. 0 mg/ L 2. 4- D + 1. 0 mg/ L KT 8
叶翠绿、
较健壮
培养基
编 号
培养基
配 方
生根情况
10 MS+NAA0. 5 mg/ L 生根率 95%，株均根数 6条。
11
MS+NAA0. 5 mg/ L+
活性炭 0. 2 mg/ L
生根率 100%，株均根数 8条，
根粗壮。
︵
无
菌
外
植
体
30
个
︶
輫輱
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配方：愈伤组织诱导培养基 MS+2. 0mg/ L BA + 0. 2mg/ L
NAA；不定芽增殖培养基 MS+1. 0 mg/ L 2. 4- D + 1. 0
mg/ L KT；生根培养基 MS+NAA0. 5 mg/ L+ 活性炭 0. 2
mg/ L。
参考文献
[1]北京林业大学园林系花卉教研组. 花卉学[M]. 中国林业出版社，
1990. 281- 283.
[2]王晓娟,金樑,陈家宽.萱草的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学
通讯, 2003, 39(3): 234.
[3]刘长利,崔俊茹.萱草组织培养及植株再生的研究[J].中华中医药学
刊，2007, 25（12）
[4]郭达初 , 刘克斌 , 柴明良 , 刘非厌 [J]. 浙江农业学报，1990, (3):
137- 141.
[5]刘志洋,李海涛,朱祥春,孟婧,高继国[J].东北农业大学学报，2008,
39(1): 43- 45.
作者简介
郑慧俊，1980年生，男，浙江人，2005年毕业于浙
江大学园林植物与观赏园艺专业，现为杭州职业技术
学院园艺专业讲师，主要从事园林植物组织培养教学
与科研工作。
龚仲幸，1974年生，女，浙江人，杭州职业技术学
院园艺专业副教授，主要从事园林植物栽培养护的教
学与科研工作。
图 1从外植体上诱导出愈伤组织
图 3 诱导出不定根后的再生植株
图 2从愈伤组织诱导出不定芽
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