全 文 ：图 2　药时曲线图
— ◆—1%凝胶;— ▲—5%凝胶;— ■—2%凝胶;— ×—口服
Fig 2　Concent ration-t ime cu rve
— ◆—1% sinomenine gels;— ▲—5% sinomenine gels;— ■—2% si-
n om enine gels;—×— sinomenine tab let s
表 2　青藤碱不同给药途径的药动学参数(n=6)
Tab 2　The pharmacokine tics parameter s o f sinomenine(n=
6)
　　参数 口服 1%凝胶 2%凝胶 5%凝胶
A /m g L- 1 1. 598 6 0. 385 0. 450 1. 037
K e /h - 1 0. 272 8 0. 171 0. 150 0. 170
K a /h- 1 1. 244 0 0. 460 0. 629 0. 405
t1 /2Ka /h 0. 557 1. 504 1. 102 1. 71
t1 /2Ke /h 2. 54 4. 04 4. 620 4. 08
tmax /h 1. 56 3. 41 2. 991 3. 69
Cmax /mg L- 1 0. 815 0. 155 0. 219 0. 321
AUC /mg L -1 h 4. 075 1. 414 2. 281 3. 548
C l /M l kg - 1 h - 1 4. 37 7. 06 8. 74 14. 09
V /L kg - 1 16. 02 41. 28 58. 29 82. 96
0. 01 mol L-1氢氧化钠溶液碱化 ,然后再提取 ,将氯
仿液水浴氮气挥干后 ,残渣用甲醇溶解直接进样 ,可
提高检测的灵敏度。线性范围0. 02 ～ 2. 0 mg L- 1 ,
绝对回收率(99. 9±1. 6)%, RSD 1 . 6%,相对回收
率(93. 8±1. 8)%, RSD 1. 9%,日内 、日间 RSD 分
别为 2 . 6%, 2. 3%, 最低检测质量浓度 0. 02 mg
L
-1 ,能满足药物动力学的需要。
3. 2　药动学参数　文献报道青藤碱无论卯时给药
还是酉时给药 ,大鼠血浆中青藤碱均呈二室开放模
型 ,但药动学参数存在较大差异 ,青藤碱的药动学受
生物节律的影响[ 4] 。正常人口服显二室开放模型 ,
体内消除符合一级动力学过程[ 5] 。青藤碱口服给药
时 ,其 tmax为1. 56 h , Cmax为0 . 815 mg L-1 ,AUC 为
4. 075 mg L-1 h;1%青藤碱凝胶给药时 tmax为3. 41
h ,Cmax为0. 15 mg L- 1 , AUC 为1 . 414 mg L- 1 h;
2%青藤碱凝胶给药时 , 其 tmax 为 2. 99 h , Cmax 为
0. 219 mg L-1 ,AUC 为2 . 28 mg L- 1 h;5%青藤
碱凝胶给药时其 tmax 为 3. 69 h , Cmax为 0. 321 mg
L
- 1 ,AUC为3. 548 mg L-1 h。可见 ,经皮给药后 ,
青藤碱在体内吸收缓慢 ,血中药物质量浓度较口服
低 ,但持续时间较长 , 12 h的血中药物质量浓度经
皮给药均高于口服给药 , 根据计量折算 1%, 2%,
5%青藤碱凝胶的相对生物利用度分别为 69. 4%,
55. 9%, 34. 8%。
参考文献:
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尿中青藤碱浓度及药代动力学[ J] . 药学学报 , 1997 , 32(8):
620.
[收稿日期] 2006-08-20
[ 基金项目] 国家自然科学基金项目(编号:30470193)　[ 作者简介] 黎莉 ,女 , 博士研究生 , E-mail:lilys tar@126. com　[ 通讯作者] 陈科力,
男 ,教授 ,博士生导师 ,电话:027-62326589 , E-mai l:kelichen@126. com
卷柏属 7种药用植物的提取物对脂氧化酶的抑制作用
黎莉1. 2 ,陈科力1 ,朱田密1 ,范小磊1 　(1 . 湖北中医学院 药学院 ,湖北 武汉 430061;2. 武汉工程大学化工与制药学院 ,
湖北 武汉 430073)
[ 摘要] 　目的:对卷柏属 7 种药用植物的 28 种提取物在体外对脂氧化酶的抑制活性进行了研究和比较。方法:用带有酶动力
学分析软件的紫外分光光度计 ,测定 28 种提取物对脂氧化酶的抑制活性 , 波长为 234 nm 、脂氧化酶浓度为1 . 08 mg L - 1 , 反
应时间为 2 min。结果:卷柏属 7 种药用植物的醋酸乙酯提取物部位显示较强的活性 , 95%乙醇提取物部位显示出一定的抑
制活性。结论:醋酸乙酯提取物是卷柏属药用植物抑制脂氧化酶的主要活性部位 ,可进一步分离纯化得到活性化合物。
[ 关键词] 　卷柏属;脂氧化酶;动力学分光光度法
[中图分类号] R285. 5　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2006)12-1514-04
Inhibition of lipoxygenase by the extracts from the medicinal plants of Selaginella genus
1514 中国医院药学杂志 2006年第 26卷第 12期 Chin H osp Pharm J ,2006 Dec , Vol 26 , No. 12
LI Li
1 , 2 , CHEN Ke-li1 , ZHU Tian-mi1 , FAN Xiao-lei1(1. Pha rmaceutical Depar tment , Hubei College of T r aditional
Chinese Medicine , Hubei Wuhan 430061 , China;2 . Schoo l o f Chemical Engineering & Pharmacy , Wuhan Institute o f Tech-
nolog y , Hubei Wuhan 430073 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　Lipoxygenase(LOX) inhibito ry activities in vitr o o f 28 ex tracts f rom 7 medicinal plants o f S elagi-
nella genus have been investig ated and compared. METHODS　A ultr avio let spect rophotome ter with kinetics ana ly sis sof tware
was used to de te rmine inhibitory ac tivities of 28 ext racts on LOX. I t is shown tha t the optimum determination condition may be
obtained w hen w aveleng th w as 234 nm , the concent ration o f enzyme is 1 . 08 mg L - 1 , the reaction time w as 2 min. RESULTS
　Ethy l ace ta te ex tr ac ts show ed strong inhibito ry ac tivities on lipoxygenase and 95% alcoho l ex tracts from these ma te rials
show ed ac tivities to a certain ex tent. CONCLUSION　Ethy l ace ta te ex tracts are the main effective fractions inhibiting lipo xyge-
nase of the medicinal plants of Se lagine lla. The availability compounds will been gained by further iso la ting and purify ing
process.
KEY WORDS:Selaginella genus;lipoxygena se;kinetics spectrophotome try
　　卷柏属药用植物具有广泛的药理活性 ,尤其在
抗肿瘤 、抗病毒 、降血糖 、抑菌与抗炎方面的作用较
为显著[ 1-2] 。在该属植物中已发现了具有抗肿瘤 、抗
病毒作用的活性成分[ 3-5] 。我们在前期的抗病毒药
用植物的研究中 ,发现细叶卷柏具有较强的抗脂氧
化酶(lipo xygenase , LOX)、黄嘌呤氧化酶和环氧化
酶的活性[ 6] 。脂氧化酶涉及到白三烯 、前列腺素等
的生物合成路径并诱导脂肪酸的氧化 ,这些也涉及
到炎症 、硬化 、癌症等过程[ 7] 。因此 ,我们拟系统比
较卷柏属药用植物的抑制脂氧化酶的活性和强度 ,
这对于了解该属植物控制炎症 、预防一些疾病(例如
癌症)的发展的这一作用机理 ,具有临床意义 。
1　材料
1. 1　植物材料　卷柏属 7种药用植物的实验材料
来源见表 1。这 7种材料的原植物均经中南民族大
学万定荣教授鉴定 ,药材标本留存于湖北中医学院
标本室[ 1] 。
1. 2　仪器和试剂　DU640 分光光度计(Beckman
Inc. USA),带有动力学 /时间软件。脂氧化酶(Sig-
ma , lot118F03422 )、 亚 油 酸 ( Sigma ,
lot015K1200);槲皮素(中国药品生物制品检定所 ,
10081-9906);二甲亚砜和聚山梨醇酯-20(Amres-
co),其余试剂均为分析纯 。
1. 3　卷柏属植物材料的指纹特征和含量测定　为
了确定这些用于实验的卷柏属植物材料的化学属
性 ,对这些不同来源的植物材料进行了指纹特征分
析和穗花杉双黄酮的含量测定 。样品中穗花杉双黄
酮的含量见表 1 ,含量测定方法参照文献[ 8]进行。
1. 4　植物提取物的制备　将采集的新鲜植物材料
晒干 ,去除杂质 ,粉碎成粗粉。分别称取各种材料
50. 0 g ,依次用石油醚 、醋酸乙酯 、95%乙醇和水进
行提取 ,每种溶剂连续提取 3次 ,过滤 ,合并滤液 。
表 1　卷柏属植物样品来源
Tab 1　Source o f plant samples f rom Selaginella genus
编
号 植物来源
采集时间
和地点
穗花杉双
黄酮含量 /%
2
薄叶卷柏
Sela ginel la d el ica tu la ( Desv.)
A lston.
2003年 8月
湖北恩施鹤峰 0. 271
4
翠云草
S . uncinata( Desv. ) Sp ring.
2004年 8月
湖北宜昌
雾渡河
- *
6
垫状卷柏
S . p ulv inata ( Hook. et Grev. )
Maxim.
2003年 10月
湖北宜昌
雾渡河
1. 64
7
卷柏
S . tamariscina ( P. B eauv. )
Spr in g.
2003年 8月
湖北宜昌
雾渡河
1. 15
8
细叶卷柏
S . labordei Hieron. ex Ch rist .
2003年 7月
江西庐山 0. 295
9
疏叶卷柏
S . remoti fol ia S p ring .
2004年 8月
湖北宜昌车溪 1. 10
13
江南卷柏
S . moel lendor f f ii Hieron.
2004年 8月
湖北宜昌
雾渡河
1. 33
注:*含量低于测定下限 ,没能测出
滤液用旋转蒸发器回收溶剂 ,干燥剩余物 ,分别得到
石油醚提取物 、醋酸乙酯提取物 、95%乙醇提取物和
水提取物 。
2　方法
2. 1　试液配制　3. 3 mmol L-1底物溶液:取亚油
酸157. 2 μL , Tw een-20 157 . 2μL , 水 10 mL , 再加
1 mol L-1氢氧化钠0 . 5 mL 使溶液澄清 , 加水至 25
mL , 混合均匀得到底物储备液 。底物储备液用0. 2
mo l L- 1磷酸盐缓冲液稀释得3. 3 mmol L- 1底物
溶液 , 使用前充氧 2 min。
2. 2　LOX活力测定　实验方法参照 Chen等[ 10] 描
述的方法 ,在 234 nm 处用分光光度法测定 ,脂氧化
酶浓度为1. 08 mg L-1 ,每隔 5 s在 234 nm 处纪录
1515 中国医院药学杂志 2006年第 26卷第 12期 Chin H osp Pharm J , 2006 Dec , Vol 26 , No.12
吸光度及吸光度增长的数值 ,测定时间 5 min ,吸光
度随时间呈线性增加 ,斜率为反应速率(dA /m in),
斜率越大 ,说明酶的活力越强 。
2. 3　样品测定　把植物提取物溶解在二甲亚砜
(DMSO ,最终浓度<1%)中 ,得到不同浓度的溶液 。
取适量加到石英比色皿。重复上述操作 ,每隔 5 s
在 234 nm 处纪录吸光度增长的数值 ,共计 2 min 。
每个样品平行操作 3次 ,分别记录反应速率 ,取平均
值计算样品的抑制率 。
2. 4　空白对照　重复上述操作 ,不加样品和 LOX ,
但加与样品同样体积的 DMSO , 记录吸光度的变
化 ,作为空白对照。
2. 5　LOX对照品测定　方法与样品测定相同 ,只
是不加样品。
2. 6　阳性对照品　为了核对实验结果的可信性 ,取
槲皮素溶解在 DMSO 中得到不同浓度的溶液 , 按
“2. 3”方法进行测定 。
3　结果
采用 SPSS 13. 0统计软件包进行数据处理 ,先
根据下列公式计算样品对 LOX的抑制率:
抑制率=[ 1 -(Rs - Ro)/(Rp - Ro)] ×100%,
式中 Rs 、Ro 、Rp :分别表示样品 、空白对照和 LOX对
照品的反应速率 。再以抑制率(inhibitory rate)为
因变量 ,以样品浓度(concentrat ion)为自变量计算
回归方程 。因抑制率与样品质量浓度呈线性关系 ,
直接根据回归方程计算抑制率为 50%的样品浓度
IC50 ,实验结果见表 2。
表 2　卷柏属药用植物提取物对脂氧化酶的抑制作用(IC50 /
mg L -1)
Tab 2　IC50 of LOX by the plant ex tracts from Selaginella
genus(mg L -1)
品 种 石油醚提取物
醋酸乙酯
提取物
95%乙醇
提取物
水提
取物
薄叶卷柏 26. 0 5. 7 36. 8 55. 3
翠云草 12. 0 6. 6 5. 3 47. 6
垫状卷柏 - * 7. 2 3. 7 19. 5
卷 柏 22. 2 7. 3 2. 7 64. 6
细叶卷柏 - * 8. 6 12. 9 65. 6
疏叶卷柏 28. 9 9. 3 15. 6 - *
江南卷柏 - * 11. 1 8. 3 - *
槲皮素 0. 11
注:*加入样品后, 吸收度-时间曲线波动较大 ,且不呈线性 ,无法计
算 IC50
4　讨论
本文对 LOX抑制剂的测定方法参考文献[ 9] ,
其原理是脂氧化酶催化亚油酸和氧形成共轭二烯的
氢过氧化物(conjugated dieny l hydropero xide), 后
者在 234 nm 有最大吸收作为分光光度法测定的基
础。但是由于在该测定过程中需要往反应液中反复
添加氧气 ,氧气分压的不稳定使整个反应过程的重
现性和稳定性受到一定程度限制 。测定结果是 3次
反应的平均值 , 其抑制效果是反应速率斜率的倒
数。实验结果显示 , LOX 抑制作用较强(IC50小于
20的数值),测定结果重现性往往较好 ,测定值较可
信。相反 ,作用较弱时(IC50大于 30 以上),测定波
动性较大 ,测定结果重现性较差。
实验结果显示 ,卷柏属 7种药用植物的醋酸乙
酯提取物对 LOX的 IC50一般小于 10 mg L-1 ,均显
示了较强的 LOX抑制活性 ,是主要活性部位。 6种
95%乙醇提取物(除薄叶卷柏外)也显示一定的抑制
作用(IC50 <20 mg L-1),是又一个活性部位。而 7
种卷柏属药用植物的石油醚提取物和水提取物对
LOX的抑制活性相对较弱或基本无活性 。
在我们继续进行的研究中 ,在某些卷柏属植物
的醋酸乙酯提取部位发现具有活性的成分均为黄酮
类化合物 ,已从这些部位分离得到了 5 种具有活性
的双黄酮化合物 ,尚未鉴定结构 ,穗花杉双黄酮是其
中成分之一 ,这项研究工作还在继续。
本文较系统研究了卷柏属药用植物抗脂氧化酶
的作用和强度 。卷柏属植物具有抗肿瘤 、抗病毒等
多种药理活性 ,其中江南卷柏和翠云草两种药物已
经有抗肿瘤的中药产品 ,并且报道了它们具有的抗
肿瘤和抗病毒的活性成分 。在药用植物中 ,所具有
的直接抗肿瘤 、抗病毒的成分的含量往往很低 ,植物
中这样的成分一般难以达到有效作用的血药浓度要
求。由于植物中还含有其他发挥多重协同作用的成
分而产生整体疗效 ,所以虽然某一活性成分含量很
低 ,其植物制剂仍然能显示明显的疗效 ,植物成分抗
脂氧化酶的活性正是这种作用的机理和原因之一。
我们正在研究卷柏属植物中具有的抑制黄嘌呤氧化
酶(XOD)、脂氧化酶(LOX)和环氧化酶-Ⅱ(COX-2)
等多重作用 ,由于这些作用整体发挥协同作用 ,能多
靶点 、多途径地控制炎症的发展 ,防止癌症等各种疾
病的恶化 ,所以这些药用植物及其制剂 ,能显示较好
的及多种多样的治疗效果。
致谢:湖北中医学院附属医院 冯汉鸽 教授 指
导动力学分光光度法测试。
参考文献:
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[收稿日期] 2006-02-18
首届全国妇产科药学大会暨生殖内分泌药物与临床学术研讨会征文通知
　　为了促进我国辅助生殖技术的发展 ,分析交流药物对生殖医学领域的影响 , 研讨生殖内分泌药物在临床应用的最新进
展 ,同时探讨目前许多亟待解决的问题 , 中国药学会医院药学专业委员会定于 2007 年 4 月在杭州召开“首届全国妇产科药学
大会暨生殖内分泌药物与临床学术研讨会” 。此次会议将邀请国内知名的医院药学 、生殖内分泌学专家参加会议 ,本着认真
学习 、求实的态度 , 围绕辅助生殖 、妇科内分泌药物的应用研究等话题 ,通过大会报告 、论文交流等方式 , 为参会代表搭建一个
进行广泛 、深入 、富有成效的学术交流平台 ,共同打造并推动我国生殖药学的新局面。会议由中国药学会医院药学专业委员
会主办 ,《中国药学杂志》编辑部 、《中国医院药学杂志》编辑部和浙江大学医学院附属妇产科医院共同承办。现面向全国医院
药师 、临床医生 、研究开发及医药相关领域人员征稿 ,欢迎大家踊跃投稿 
一 、征文范围
生殖内分泌药物的药动学和药效学研究;保胎药物的合理使用及新剂型研究与开发;多囊卵巢综合征促排卵药物的应
用;多囊卵巢综合征相关代谢综合征的药物治疗;促排卵药物与卵巢过度刺激综合征;促排卵药物的合理应用及相关医学伦
理 、法律 、法规;功能失调性子宫出血的药物治疗;骨质疏松及性激素替代治疗;实施辅助生殖技术中抗生素的使用问题;子宫
内膜异位症的药物治疗;促排卵药物与女性生殖健康;使用尿促性腺激素和重组人促卵泡激素等相关安全问题;储存条件对
促排卵药物疗效的影响;妇产科药学学科建设的思考与体会;我国专科医院药学工作的实践与思考;妊娠和哺乳期妇女用药。
二 、征文要求
论文未在公开发行期刊或全国性学术会议上发表或交流过 , 文责自负;论著不超过3 500字 , 综述不超过5 000字 ,并附 300
字以内的中英文摘要;稿件要求宋体 、4号字 、1. 5倍行距。稿件格式按《中国药学杂志》2006 年第一期稿约;请用 E-mail传递 ,
同时邮寄稿件应一式两份并附软盘;要求字迹清楚 ,数据准确;作者注明姓名 、职称 、单位 、地址 、邮编 ,合格论文将录入大会论
文集;投稿截止日期 2007 年 3 月 10 日(以邮戳为准),稿件及信封请注明(生内药征文)字样;提交论文收到后 ,会议筹备组将
回复电子邮件或其他形式确认 ,论文录用与否 ,一律不退稿 , 请自留底稿。
三 、稿件的评审发表及学分
评审:评审专家组拟邀请知名的医院药学专家 、临床专家 、《中国药学杂志》编辑部以及《中国医院药学杂志》编辑部组成
评审小组 ,对来稿进行科学 、公正的评审与修改;
发表:由评审专家组评选产生的优秀论文将被推荐在《中国药学杂志》或《中 国医院药学杂志》上发表;
学分:参会代表将被授予中国药学会Ⅱ类药学继续教育学分 6 分。每位参会代表将获赠一套由中国药学会编辑出版的
药学继续教育教材《妇产科疾病与药物治疗新进展》,本教材构成:《妇产科疾病与药物治疗新进展》、考试试卷 、中国药学会 I
类药学继续教育学分 12 分。
四 、会议地点和时间
具体地点和时间见第二轮通知。也可登录中国药学会网站(w ww . cpa. or g. cn)或查阅《中国药学杂志》及《中国医院药学
杂志》查询本次会议通知。
五 、联系人与联系电话
地址:北京市朝阳区建外大街 4号建外 SOHO九号楼 18 层 1806“首届全国妇产科药学大会暨生殖内分泌药物与临床学
术研讨会”会务组;
邮　编:100022;
电　话:(010)58699131、58699025、58699016 /18 /19 /20 /21 /23-8000;
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浙江组委会
地　址:浙江大学医学院附属妇产科医院(浙江杭州学士路 1 号);
邮　编:310006;
电　话:(0571)87087370 、87061501-1732;
传　真:(0571)87087370 、87012661;
联系人:赵轶 、郑彩虹 、虞和永;
E-mail:sfby jk@yahoo . com. cn
中国药学会医院药学专业委员会
二 OO 六年十一月十八日
1517 中国医院药学杂志 2006年第 26卷第 12期 Chin H osp Pharm J , 2006 Dec , Vol 26 , No.12