全 文 ：[中药指纹图谱]
11种卷柏属药用植物 HPCE指纹图谱的研究
王钢力1 , 　戴　忠2 , 　鲁　静1 , 　林瑞超1
(1.中国药品生物制品检验所 ,北京 100050;2.中国药材集团公司华邈中心 ,北京 100029)
关键词:卷柏属;高效毛细管电泳;指纹图谱
摘要:目的:研究黄酮类化合物在 11 种卷柏属药用植物中的分布。方法:采用 HPCE 的 MECC 的分离模式 , 对18 个
卷柏属植物样品的乙酸乙酯提取物进行测定。结果:以槲皮素为内标 ,以相对迁移时间和相对峰面积为参数 ,建立
18 个样品的毛细管电泳的指纹图谱。结论:被测样品的黄酮类成分既有共性 , 也存在差别 , 这种差别对于药材品种
的鉴别有着一定的意义。
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2002)07-0489-03
HPCE fingerprints on 11 species of plants for medicinal use of Selaginella
WANG Gang-li1 , 　DAI Zhong2 , 　LU Jing1 , 　LIN Rui-chao1
(1.National Insti tute for Control of Pharmaceut ical and B iological Products , Beij ing , 100050 ;2.Huamao Center , Na tional Company of Chi-
nese Materia Medica , Beij ing , 100029 , China)
Key words:Selaginella;HPCE;fingerprint
Abstract:Objective:To study the dist ribution of flavonoids among the plants for medicinal use of Selaginella.
Methods:HPCE analysis was carried out on the ethy l acetate ex t racts of 18 Selaginel la plants (from 11
species), using MECC separation model.Results:HPCE fingerprints of 18 Selaginel la plants were established
w ith quercetin as interanl standard and relat ive migrat ion time and relative peak area as parameters.Conclusion:
The contributions of flavonoids has not only generity , but also difference among the tested samples.
收稿日期:2001-12-04
基金项目:科技部九五科技攻关项目资助(97-B-14)
作者简介:王钢力(1969～ ),女 ,医学博士;现于复旦大学药学博士后流动站从事天然药物活性成分及中药质量控制的研究 ,电话:021-
64041900-2078 , E-mail:duneer@hotmail.com
　　卷柏属(Selaginella)植物为多年生草本 ,在全世
界共有 700 多种 ,我国约有 50种 。分布于全国各
地 ,资源十分丰富。该属植物中有相当数量的品种
具有药用价值 ,中国药典一直收载卷柏属植物卷柏
(S .tamariscina (Beauv.)Spring)和垫状卷柏(S .
pulv inata(Hook.et Grev.)Maxim.)作为法定药材
使用 ,目前在许多现有成方制剂和中医处方中都有
卷柏的使用 ,其中包括 5个药典品种和 12个部颁及
地方标准品种。另有 20个品种的卷柏属植物在民
间作为药用 ,如深绿卷柏(S .doederleinii Hieron)、
翠云草(S .uncinata(Desv.)Spring)、江南卷柏(S .
moellendorf ii Hieron)、兖州卷柏 (S .involvens
(Sw .)Spring)等。该属药用植物含有大量的双黄
酮类化合物 ,具有广泛的药理活性[ 1 ,2] 。为了研究
卷柏属药用植物在含双黄酮类化合物的种类及含量
上有无差别 ,是否具有类似的活性 ,本文利用含量测
定的样品处理方法及电泳条件 ,分别对 11个品种的
18个药材作指纹图谱分析 ,以期阐明双黄酮类化合
物在卷柏属植物中的分布 ,及其在卷柏属植物的分
类中的作用 。
1　结果与讨论
1.1　由于 HPCE 峰的绝对迁移时间变化较大 ,经
多次实验 ,选择槲皮素作为参比内标较为合适。所
以采用相对迁移时间对色谱峰进行鉴别。结果见表
1。相对迁移时间αi从小到大排列 ,相对迁移时间αi
下面列出了相对峰面积 βi。
相对迁移时间αi =ti/ ts(ti 为样品峰的迁移时
间 , ts 为内标峰的迁移时间)
489
2002 年 7 月
第 24 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2002
Vol.24　No.7
表 1　 18 个卷柏样品的 HPCE指纹图谱的特征峰群(n=3)
αi 0.718 0.733 0.746 0.769 0.775 0.793 0.809 0.821 0.834 0.841 0.877
No. βi
1 0.214 0.249 0.227 0.694 0.197 0.184
2 0.172 0.420 0.917 0.196
3 0.568 0.118
4 0.334 0.219 0.432 0.421
5 0.132 0.305 1.204
6 0.222 0.695
7 0.057 0.104
8 0.224 0.177 0.152 0.159
9 0.449 0.312
10 0.481
11 0.225 0.081 0.146
12 0.040
13 0.271 0.218 0.130
14 0.079 0.115 0.185
15 0.124 0.254
16 0.078 0.212
17 0.020 0.043
18 0.097 0.641 0.185
0.902 0.935 0.963 0.971 1.016 1.043 1.052 1.079 1.175 1.201 1.278 1.350
βi
0.120 0.220 0.137 0.199 0.626 0.711 0.097
0.489 0.724 0.608 0.564 0.933 2.047 0.357
0.174 0.196 0.326 0.417 0.121 0.824 1.783 0.232 0.162
0.109 0.444 4.214
0.266 0.773 7.424 0.421
0.353 1.244 5.559 0.210
0.124 1.287 8.495
0.131 0.738 4.569 0.115
0.737 1.569 4.943
0.136 2.356 6.568
0.244 0.220 1.501 0.080
0.891 2.333 6.420 0.355
0.379 0.154 0.150 0.338 1.021 0.462 0.038 0.240
0.811 1.135 4.250
0.182 0.042 2.432
0.049 0.448 0.371 2.116
0.159 0.543
0.803 0.992 4.960 0.073
　　相对峰面积 βi=Ai/A s(A i为样品峰面积 ,A s 为
内标峰面积)
结果显示:各种卷柏的指纹图谱峰主要分为两
个峰群 ,其相对迁移时间一个在 0.80 ～ 0.84 之间
(包括 ginkgetin),一个在 1.05 ～ 1.17之间(包括 a-
mentoflavone , hinokiflavone),其余区间的色谱峰相
对较少 。各主要色谱峰的 DAD 光谱均显示黄酮特
征(240 ～ 280nm ,300 ～ 400nm),说明卷柏属植物在
黄酮类成分上既有共性 ,也存在差别 ,这种差别对于
药材品种的鉴别有着一定的意义。
1.2　卷柏属植物含有大量的双黄酮类化合物[ 3] ,
并且它们在理化性质上很相似 ,这样就给分析鉴定
带来了一定的困难。本文利用 HPCE 高效的分离
特性 ,使每一个样品得到充分的分离 ,从而更具“指
纹”特征 ,便于比较分析 。
1.3　采用胆酸钠作胶束相 ,由于它具有良好的分离
特性 ,加之可以相容大量的有机改进剂[ 4] ,使得这
一系统分析非极性化合物成为可能。
1.4　由于 MECC 本身具有一定的不稳定性 ,所以 ,
缓冲液不宜长期使用。
2　实验部分
2.1　试剂与材料
胆酸钠及 SDS为 Sigma 公司产品 ,去氧胆酸钠
为北京怀柔生物研究开发所产品。其它如硼砂 、
490
2002 年 7 月
第 24 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2002
Vol.24　No.7
NaH2PO4均为分析纯 ,乙腈为色谱纯。对照品 a-
mentoflavone , hinokiflavone 和 ginkgetin 为从中华
卷柏中分得 ,并经光谱鉴定。槲皮素对照品 ,中国药
品生物制品检定所。
实验中配制缓冲液和样品液所用的水均为去离
子水(M illi-Q)。
样品名称及来源见表 2。所用样品均由中国药
品生物制检定所张继老师鉴定并保存于中国药品生
物制检定所标本馆 。
表 2　 实验用样品来源
编号 样　　品 产地 编号 样　　品 产地
1 毛枝卷柏 b).Braunii 福建 10 漫出卷柏 S.davidii 河北
2 毛枝卷柏 b).Braunii 浙江 11 深绿卷柏 S.doeder leinii 浙江
3 峨眉卷柏 S.omeiensis 贵州 12 中华卷柏 S.sinensis 河北
4 圆枝卷柏 S.sanguinolenta 河北 13 深绿卷柏 S.doeder leinii 福建
5 江南卷柏 S.moel lendorf i i 福建 14 卷柏 S.tamariscina 福建
6 江南卷柏 S.moel lendorf i i 安徽 15 垫状卷柏 S.pu lvinata 浙江
7 江南卷柏 S.moel lendorf i i 广东 16 卷柏 S.tamariscina 福建
8 兖州卷柏 S.involvens 福建 17 垫状卷柏 S.pu lvinata 广东
9 漫出卷柏 S.davidi i 北京 18 旱生卷柏 S.tauntoniana 河北
2.2　仪器及实验条件
仪器　美国 Beckman P/ACE 5500型毛细管电
泳仪 ,DAD检测器 ,弹性石英毛细管柱(河北永年光
导纤维厂),80 cm×75μm i.d.。
实验条件　进样方式 ,压力进样20p.s.i.9s;运
行时间 , 35min;电压 ,20kV(恒压分析);柱温 25℃;
检测波长 280nm;运行缓冲液(10mmol· L-1
NaB4O7 , 15mmol·L -1 NaH2PO4 , 40mmol·L-1胆酸
钠)-乙腈(3∶2), pH =7.0。每次运行前毛细管用
0.1mmol·L-1 NaOH溶液冲洗 2min ,去离子水冲洗
2min ,运行缓冲液冲洗 2min。
2.3　供试品溶液的制备
称取 1g 的样品 ,用甲醇 50mL 索氏提取器回流
提取 5h ,提取液浓缩至 25mL 。取 5mL 至 10mL 量
瓶中 , 加 1mL 内标(0.5mg·mL-1的槲皮素甲醇
液),甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。此供试品液过
0.45μm的微孔滤膜后注入毛细管电泳系统 。
参考文献:
[ 1] 　Lin Y M , et al.Ant ivi ral Act ivit ies of Biflavonoids [ J] .Plan ta
med., 1999 , 65:120.
[ 2] 　Vlietinck , A. et al.Plant-Derived Leading Compounds for
Chemotherapy of Human Immunodef iciency Virus(HIV) Infec-
tion [ J] .Planta Med.1998 , 64 , 97-109.
[ 3] 　Okigaw a M , et al.Biflavones in Selaginella Species [ J] .Phyto-
chemist ry , 1971 , 10(12), 3286.
[ 4] 　Cole R.et al.Bile S alt Surfactants in Micellar Elect rokinet ic Cap-
illary Chromatot raphy [ J] .Journal of Chrom atography , 1991 ,
557:113.
《中成药》第五届编委会
　　　　　　　　主 任 编 委:任德权
副主任编委:龙致贤　邹健强　罗国安　林瑞超　陈保华
编 委:丁建弥　王　宁　王淑仙　王依婷　孔德云
文英强　方鸿兴　白慧良　李大宁　李沈明
冯帆生　孙立立　刘法锦　匡海学　陆伟根
张　晶　张汉明　张立国　金若敏　林　
罗佳波　陈德兴　陈发奎　陈建民　季伟苹
侯世祥　杨　明　梁挺雄　郭亚健　徐莲英
徐德生　贾天柱　陶建生　钱忠直　顾振纶
梁　宏　程国 　谢德隆
主 编:朱立中
顾 问 编 委:吴伟英　张元珍　郭济贤　黄哲夫　曹光明
刘国杰　许锦柏　范洪哲　任德呈　刘保延
洪筱坤　王智华　邓　修
491
2002 年 7 月
第 24 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2002
Vol.24　No.7