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熏衣草组织培养研究



全 文 :熏衣草组织培养研究
代二娜 , 戴 平
(华东师范大学生命科学学院 , 上海  200062)
摘 要: 对熏衣草组织培养增殖和生根进行初步研究的结果表明:外植体类型、外源激素种类及浓度对增殖有显著
影响 ,其中第一节段增殖系数最高 ; 6 BA 1mg /L+ IBA 0. 1mg /L最有利于芽的增殖 ; MS+ NAA 0. 5mg / L最适诱
导生根。
关键词: 熏衣草 ;组织培养 ;增殖 ;生根
中图分类号: S573+ . 9  文献标识码: A     文章编号: 1002— 8161( 2004) 05- 0352- 03
Tissue culture of common lavender (Lavandula vera L. )
DAI Er- na , DAI Ping
( Life Science Co lleg e, No rmal Univ ersity of East China, Shangai 200062)
Abstract: The pro lifera tion and ro o ting in tissue culture o f common lavender ( Lavandula vera L. ) w ere st udied.
The r esults showed the pr olifera tion w as effec ted by the explants f rom differ ent par ts of the seedling , and the
kinds and the concent ration o f hormone. The highest r atio o f the pro lifera tion was go t fr om the first par t o f the
stem. The M S+ 1mg / L 6- BA+ 0. 1mg / L IBA was the most suitable medium fo r the pro life ration o f th e ad-
ventitio us buds, and for the ro o ting o f the plant w as M S+ 0. 5 mg / L N AA.
Key w ords: common lavender (Lavandula vera L. ) ; tissue cultur e; pro lifera tion; ro oting
  熏衣草 (Lavandula vera L. )是唇形花科熏衣
草属多年生亚灌木植物 ,原产地中海区 ,我国的河
南、陕西、新疆有分布 [1 ]。 熏衣草的茎、叶、花能释放
出宜人的浓郁香味 ,其花穗中提取的精油香气清爽 ,
是香料工业重要的天然精油之一 ,还可用于芳香治
疗 ,有安定情绪、安抚心灵的作用。鲜叶片捣烂外敷
可以消肿、止痛、止痒。 熏衣草花期长 ,花量多 ,株形
低矮紧凑 ,枝叶茂密 ,宜于盆栽 ,也适合花坛、庭院栽
培。熏衣草常规采用扦插繁殖 ,但成活率低 ,不能满
足市场的需求。熏衣草国内尚未见组织培养的报道 ,
国外采用组织培养成功的报道也很少 [2 ]。为此 ,我们
对熏衣草的组织培养体系进行了初步研究 ,以提高
繁殖系数 ,在短期内大量繁殖种苗 ,满足生产需要 ,
加快熏衣草在我国的引种推广。
1 材料与方法
1. 1 无菌材料的获得
将熏衣草种子用一层纱布包裹 ,置于小烧杯中
收稿日期: 2004 04 13
作者简介: 代二娜 ,女 , 1979年生 ,硕士研究生 ,主要从事植
物组织培养研究。
流水冲洗 2h, 70%酒精漂洗 30s,无菌水冲洗一次 ,
3% Ca( ClO) 2消毒液浸泡 20min,无菌水冲洗 4~ 5
次 ,用无菌滤纸吸干种子上的水分 ,接种于 M S培养
基中。1周左右 ,种子即可萌发。选取生长良好、生长
势大体一致的无菌苗作为供试材料。
1. 2 培养基
以 M S为基本培养基 ,加 3%蔗糖、 0. 8%琼脂、
pH值为 5. 8。培养基在 121℃高温高压灭菌 18min。
1. 3 培养条件
培养温度 ( 25± 1)℃ ,日光灯光照时间 12h /d ,
光照强度为 60μmol. m 2 . s 1。
1. 4 方法
1. 4. 1 取材部位对熏衣草芽增殖的影响 选取具
有 5对叶片、生长状况大体一致的熏衣草种子萌发
得到的无菌幼苗 ,依次分切为带 2对叶片的顶部节
段 (去除顶芽 )及各带一对叶片的第一节段、第二节
段、基部节段 4种不同的外植体材料 ,分别接种于
MS+ 6 BA 1mg /L+ IBA 0. 1mg /L的芽增殖培养
基中。每种材料处理 20个 ,实验重复一次 , 30d后统
计结果。
·352· 广西农业科学  2004年第 35卷第 5期
1. 4. 2  6 BA浓度对熏衣草芽增殖的影响 选取
具有 5对叶片、生长状况大体一致的熏衣草种子萌
发得到的无菌幼苗 ,切取第一节段作为外植体 ,分别
接种在附加不同浓度 6 BA的增殖培养基 (含 0. 1
mg / L IBA)上 , 6 BA的浓度分别为: 0、 0. 1、 0. 5、
1、 2mg /L。每个浓度处理 20个外植体 ,实验重复一
次 , 30d后统计结果。
1. 4. 3  NAA浓度对诱导熏衣草根的影响 选取
MS+ 6 BA 1mg /L+ IBA 0. 1mg /L增殖培养基获
得的生长势大体一致的顶部节段 ,接种在添加不同
浓度 NAA的生根培养基上。 NAA浓度分别为: 0、
0. 1、 0. 2、 0. 5、 1mg /L。 每个浓度处理 20个外植体 ,
实验重复一次 , 30d后统计结果。
2 结果与讨论
2. 1 不同取材部位对熏衣草芽增殖的影响
经一周培养 ,可见第一节段的部分材料顶端有
芽点出现 ,两周后 ,大部分材料都在顶端处生出新的
小芽 ,但是芽的分化频率、每个外植体的增殖芽数差
异明显。 30d后 ,统计不同外植体芽的分化频率及增
殖情况 ,见表 1。
表 1 取材部位对熏衣草芽增殖的影响
取材部位 接种数
(个 )
分化频率
(% )
增殖芽数
(个 ) 增殖系数
顶芽 20 70 26 1. 3
第 1节段 20 100 56 2. 8
第 2节段 20 100 51 2. 55
基部节段 20 90 48 2. 4
 注:①分化频率 = 分化芽的外植体数目 /接种外植体数目 ;②增殖
芽数为统计 20个外植体上增殖的总芽数 (以长度大于 0. 5cm
作为有效芽 ) ;③增殖系数 = 增殖芽数 /接种外植体数目 ;④以
下统计与此相同。
在植物组织培养中 ,外植体的生理状态对芽的
增殖有着重要影响 ,外植体着生部位不同 ,其内源激
素的含量也不同 ,诱导分化成芽的能力也就存在着
差异 [ 3]。从表 1可以看出 ,第一节段的分化频率和增
殖系数都好于其他部位的材料 ,其次是第二节段 ,最
差的是顶部外植体。这可能是因为顶部生长素浓度
过高 ,顶端优势明显 ,抑制了侧芽的萌发。 基部节段
增殖系数不高 ,可能是因为该部位的材料老化 ,脱分
化能力变差 ,导致芽增殖系数低。
2. 2  6 BA浓度对熏衣草芽增殖的影响
结果见表 2。从表 2可以看出 ,熏衣草在不添加
6 BA的培养基上也能增殖 ,但是分化频率低 ,增
殖系数小 ,添加 6 BA明显促进了芽的分化和增
殖。 在一定浓度范围内 ( 0~ 1mg /L) ,熏衣草的分化
频率和增殖系数随着 6 BA浓度的提高而增大 ,当
6 BA浓度高于 2 mg /L时 ,分化频率不变 ,形成的
芽数目多 ,并且有很多未能分化的芽点 ,但是芽短
小 ,本研究做无效芽处理。
表 2  6 BA浓度对熏衣草芽增殖的影响
浓度
( mg /L)
接种数
(个 )
分化频率
(% )
增殖芽数
(个 ) 增殖系数
0 20 75 21 1. 05
0. 1 20 90 29 1. 45
0. 5 20 100 39 1. 95
1 20 100 56 2. 8
2 20 100 53 2. 65
细胞分裂素的主要作用是诱导细胞分裂 ,促进
芽的分化 ,但是对于不同的植物诱导芽分化的细胞
分裂素浓度不同。浓度过低 ,芽的增殖系数低 ,无法
达到植物材料快繁的目的 ;浓度过高时 ,往往诱导生
成很多不能伸长的芽点 ,无法进行下一步的生根诱
导和移栽。因此 ,需要对特定材料进行细胞分裂素浓
度的实验 ,以找到最适浓度。从增殖系数和分化频率
来看 ,诱导熏衣草增殖的 6 BA最适浓度为
1mg /L。
2. 3  NAA浓度对诱导熏衣草根的影响
经芽增殖诱导的顶部节段 ,接种于含有不同浓
度 NAA的 MS培养基上诱导。经 10d左右培养 ,在
不同浓度 NAA作用下的幼苗 ,均在基部生成肉眼
可见的白色幼根。 30d进行统计 ,其时未生根幼苗此
后也不能再生根。统计结果见图 1。
  由图 1可以看出 ,幼苗在未添加激素的 MS培
养基上也可以诱导生出不定根 ,根分化频率为
75% 。在 NAA浓度 0~ 0. 5mg /L范围内 , N AA浓
度越高 ,分化频率越高 ,当 NAA浓度为 0. 5mg /L
时 ,分化频率达到 95% 。当 NAA浓度大于 0. 5mg /
L时 ,分化频率开始下降 ,当 NAA浓度为 2mg /L
时 ,分化频率下降到 70% ,低于未加激素的培养基。
NAA浓度为 0. 2mg /L时 ,熏衣草诱导生根的
平均根数最多 ,为 6. 95条 /棵。 当 NAA浓度升高
时 ,平均每棵外植体生根数下降 ,且生根数随着
NAA浓度的升高而降低。 NAA浓度为 2mg /L时 ,
平均生根数仅为 4. 6条 /棵 ,低于不加激素的状态。
·353·广西农业科学  2004年第 35卷第 5期
   NAA浓度同样对熏衣草诱导生成的根的根长
也有着显著的影响。添加 0. 2mg /L N AA的培养基
上的熏衣草根生长最好 ,平均根长为 0. 67cm。 浓度
过高过低都不好 ,并且当 NAA浓度高于 0. 2mg /L
时 ,根长随着 NAA浓度的进一步升高而降低 ,这说
明根在 0. 2mg /L N AA的培养基上生长最快。根据
以上结果 ,从生根率、生根数、平均根长等方面综合
考虑 , 0. 5mg /L为诱导薰衣草生根的最适 NAA浓
度。
3 小结
试验结果表明 ,外植体类型、外源激素种类及浓
度对熏衣草组织培养增殖有显著影响 ,其中第一节
段的分化频率和增殖系数最高 ; 6 BA 1mg /L+
IBA 0. 1mg /L为最适诱导芽增殖的浓度 ; M S+
N AA 0. 5mg /L为最适诱导生根浓度。
【 参 考 文 献 】
[ 1] 中国植物志编辑委员会 [M ].中国植物志 .北京: 科学
出版社 , 1979. 65( 1) 248~ 250.
[2 ]  Andrade LB, Echeverriga ray S, Fraca ro F, e t al. The
effect o f g r ow th regulato rs on shoo t propagation and
ro o ting of common lavender ( Lavandula vera D C )
[ J]. Plant Cell Tissue and O rgan Culture , 1999, 56
( 2): 79~ 83.
[ 3]  Debergh P, Aitken- Christie J, Cohen D, et al. Re-
consider ation o f the term v itrifica tion a s used in mi-
c ropr opaga tion[ J]. Plant Cell Tissue O rgan Cultur e ,
1992, 30: 135~ 140.
(责任编辑 麻小燕 )
柑桔壮果期的管理
   9~ 10月是柑桔类中、晚熟品种如温州蜜柑、沙田柚、脐
橙、甜橙、金桔等果实的快速壮果期。 必须加强管理 ,才能增
产增收。
1.防旱抗旱 壮果期需水量较大 ,但秋季又是少
雨干旱季节。 为此 ,要加强防旱抗旱 ,以满足果树生
长的需要 ,确保增产增收。 具体做法:①松土盖草保
湿 ,即在树冠滴水线下的树盘内外 ,进行一次全面松
土 ,并在冠内浅锄 7~ 10cm,冠外 (线外 10cm为限 )
深锄 17~ 20cm,盖草保湿 ;②若遇连续干旱天气 ,应
及时浇灌 ,每 5~ 7d灌水一次 ,若出现连续高温日灼
天气 ,还要对树冠进行喷水。
2.合理施肥 施肥既是满足壮果期果实对营养
的需要 ,又是补偿树体在秋稍抽发时对营养的消耗。
每次施肥量不宜过大 ,应坚持少量多次、薄肥勤施的
原则。 施肥量过大 ,会使壮果速度过快 ,导致果实破
裂 ,降低果实质量和延缓成熟 ,不利于贮藏保鲜。为
了增强叶片在光合作用过程中制造碳水化合物的能
力 ,供壮果期补充营养 ,可用叶面喷肥。 具体做法是
每隔 10~ 12d,用 0. 2%磷酸二氢钾加 0. 3%尿素溶
液 ,或 300g多元复合肥加 100kg水喷洒树冠。在树
冠喷肥中加入 20mg /kg 2, 4- D液 ,既可促使果实
壮大 ,又可防止落果。
3.防治虫害 虫害主要是危害活动进入高峰期
的红、黄蜘蛛。 防治方法:①辣椒苦楝叶合剂。用新
鲜、成熟的辣椒 4kg、苦楝叶 2kg ,分别捣烂后混合
加水 2倍 ,浸泡 1d,滤去渣后再加水 4倍喷洒 ,每周
1次。②马尾松针叶。取鲜叶 3 kg ,加水 6kg ,放入锅
中煮 30min,冷却后滤出针叶 ,再加水 60 kg ,每周喷
1次 ,对红、黄蜘蛛防治效果可达 90%以上。 ③化学
药剂。每周喷洒一次 73%的克螨特 2000~ 3000倍
液 ,或 20%牵牛星可湿性粉剂 2000~ 3000倍液 ,有
较高的防治效果。
摘自《特种经济动植物》
·354· 广西农业科学  2004年第 35卷第 5期