全 文 ：C h i n e s e J o u r n a l o fI n fo r m a t i o n o n T CM J u n
.
2 0 1 3 VO I
.
2 0 NO
.
6
不同时期攀茎钩藤钩藤碱成分的动态积累分析
朱意麟 ` , 张鹏 2 , 黄瑞松 2 , 覃冬杰 2
1
. 广西中医药大学 , 广西 南宁 5 3 0 0 0 1 ; 2 . 广西民族医药研究院 , 广西 南宁 5 3 0 0 01
摘要 : 目的 了解不 同时期攀茎钩藤钩藤碱成分的动态积 累情况 , 为确定该药材的最佳采收期提供科学依据 。
方法 采用高效液相色谱法 , 对同一产地不同时期的攀茎钩藤样品进行钩藤碱含量测定 , 色谱柱 : G e m i n i C 。 (4 . 6 m /
2 50 m
,
5 卿 ;) 流动相 : 甲醇一水 (含 0 . 0眨 mo l/ L 三 乙胺 , 用冰 乙酸调 PH 7 . 5) 一 64 : 36 ; 流速 : 1 . o mL /m i ;n 检测
波长 : 2 5 4 nm 。 结果 不同时期采集的样品钩藤碱含量在 0 . 0 9%一 0 . 01 6%范围 , 其中 1 一 5 月份样品含量较高 , 6 一 1 2
月份含量较低 。 结论 攀茎钩藤药材钩藤碱成分的动态积累随着采集时间的不 同而有所差异 , 该种药材以 1 一 5 月份
采集为宜 。
关键词 : 攀茎钩藤 ; 钩藤碱 ; 采收季节
Do l
: 1 0
.
39 69 / j
.
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.
1 005
一 5 3 04
.
2 0 1 3
.
0 6
.
0 1 8
中图分类号 : R 2 8 4 . l 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 5 一5 3 0 4 (2 0 1 3 )0 6 一 0 0 4 8 一 0 3
A n a l y s i s o n D y n a m i e A e e u m u la t i o n o f R h y n e h o Ph y l l i n e i n nU
e a 了i a s e a n de n s ( Sm i t h ) H u t e h i n s i n
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钩藤是中医和壮族 、 瑶族民间常用的药材 , 具有熄风定惊 、 钩藤碱成分的含量进行测定分析 , 现报道如下 。
清热平肝之功 , 壮族 、 瑶族民间还用于治疗风湿痹痛 、 坐骨神经 1 仪器与试药
痛 、 跌打 、 骨折 、 胃炎 、 肠炎等 。 广西是我国钩藤的主产区, 资 L C一 2 0AT 高效液相色谱仪旧本岛津 , 带 自动进样器 , 二极
源丰富 , 产量大 , 种类多 , 文献记载 , 广西钩藤属植物至少有 10 个 管阵列检测器 ) , cL s o lu t io n 色谱工作站 ; S B 32 0 0D sT 双频超
分类种 〔日 , 据笔者调查 , 广西壮族 、 瑶族民间均将钩藤属不同种植 声清洗仪 (功率 180 w , 频率 40 kH z , 宁波新芝生物科技股份有
物作为钩藤应用 〔2〕。 但历版 《中华人民共和国药典》 只是将钩藤 限公司 ) ; 雷磁 pHs 一 3 c pH 计 (上海精科 ) ; x s 2 0 5 电子天平 (瑞
如 c二角 2五尸 z动卿功刀 1a( iM q . ) iM q . e x Ha vi 1 . 、 大 叶钩 藤 士梅特勒 ) ; EA s Y Pu RE l 超纯水器 (美国热电) 。 攀茎钩藤药材
以 、 a二 . ,功刀 al w al l . 、 毛钩藤 左 力~ at a aH vl l
. 、 华钩藤 共 12 批 , 每月采集 1 次 , 均采集于广西龙州县八角乡的同一产
以 s 二、 府 s (0 1 iv . ) aH vi l . 、 无柄果钩藤 以 、 s 了万斤ac t as 地 , 样品植物标本经广西中医药研究院严克俭助理研究员鉴定 ,
刀山 .b 的带钩茎枝收入 “ 钩藤 ” 药材〔3〕 。 最近 , 我们报道了不同 为茜草科植物攀茎钩藤 如 c二角 s ca 。 从 ” s( S m i t h) Hut ch in s 。
产地攀茎钩藤 如~ 角 s ca 。 从 ” s( s m i ht ) Hut ch in S 药材所含钩 钩 藤碱对照 品 由上海 融禾 医药科技有 限公司 提供 (批号
藤碱成分的状况 , 其中部分产地攀茎钩藤含有一定量 的钩藤 1 0 0 6 0 3 , 含量 > 9 8w0) ; 甲醇由美国 F i s h e r S c i en it f ic 生产 (色
碱 〔钊 。 为进一步了解攀茎钩藤钩藤碱成分的动态积累情况 , 本 谱纯 ) ; 水为 自制 (超纯水 ) ; 其余化学试剂为分析纯 。
研究对龙州县八角乡同一产地不同时期采集的攀茎钩藤药材 2 方法与结果
_
.21 色谱条件
基金项 目 : 广西科学基金项 目和应用基础研究专项 (桂科基 G e m i in C1 8柱 (4 . 6 o X 250 。 , 5 林m ) ; 流动相 : 甲醇一水
0 99 1 0 07 ) ; 广西壮药质量标准研究项 目 (Mz Y 2 0 1 00 7 4 ) (含 0 . 0 0 2 m o L / L 三乙胺 , 用冰醋酸调 p H至 7 . 5 ) 一 4 : 3 6 ; 流
通讯作者 : 黄瑞松 , E一 m a 1 1: h r s . 3 1 30 06 4秘1 6 3 . c o m 速为 1 m L /m i n ; 柱温为 3 5 ℃ ; 检测波长为 2 5 4 二 。
2 01 3年 6月第 2 0卷第 6期 中国中医药信息杂志
2
.
2样品制备
取钩藤碱又 J照品适量 , 精密称定 , 加 7c5y0 甲醇制成约 10 林g /此
的溶液 , 作为对照品溶液 ; 取攀茎钩藤粉末 (过 60 目筛 ) 0 . 2 9,
精密称定 , 置 50 此 带塞锥行瓶中 , 精密加入 7c5y0 甲醇 巧 此 , 密
闭 , 称定质量 , 静置 60 m i n , 超声提取 40 m i n , 放冷 , 再称定质量 ,
用 75 %甲醇补足减失的质量 , 摇匀 , 滤过 , 取续滤液 , 作为供试品
溶液 。 以制备供试液的 75 %甲醇溶液作为阴性对照溶液 。
2
.
3 专属性试验
分别吸取 “ 2 . 2 ” 项下对照品 、 供试品和阴性对照溶液各
20 睡 进样 , 按 “ 2 . 1 ” 项下色谱条件试验 。 结果供试品溶液色
谱图中有与钩藤碱保留时间相同的吸收峰 , 阴性对照溶液无此
吸收峰 。 说明本方法测定钩藤碱含量无阴性干扰 , 专属性强 ,
见图 1 。
2
.
6 重复性试验
取同一药材 6 份 , 每份 0 . 2 9 , 分别同法制备供试品溶液 ,
同法测定 。 结果 6 份样品钩藤碱含量分别为 0 . 0 1c7y0 、 0 . 0 1 6%、
0
.
0 1 6%
、
0
.
0 1 7%
、
0
.
0 1 6%
、
0
.
0 1 6%
,
RS D一 1 . 4%。
2
.
7 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液分别于 。 、 2 、 4 、 6 、 8 、 24 h
进样测定 。 结果各次测定钩藤碱峰面积的分别为 80 52 4 、
7 9 6 4 5
、
7 9 6 6 6
、
7 9 0 1 0
、
7 8 8 7 1
、
7 9 2 7 6
,
RSD一 0 . 8% o
2
.
8 加样回收率试验
分别取己知含量的同一药材粉末 6 份 , {i到分0 . 1 9 , 置具塞锥
形瓶中, 分别加入新配制的钩藤碱甲醇溶液 (l . 028 林g /此 )巧 m L,
按 “ 2 . 2 ” 项下方法制备供试品溶液 。 各精密吸取供试液 20 睡
进样测定 。 结果平均回收率为 95 . 3 cy90 , RSD 一 1 . 5 0% (。一 6 ) , 见表 1 。
表 1 加样回收率试验结果 物一 6)
样品中含量 加入量 实测量 回收率 平均回收率 RS D
(呢 ) (呢 ) (。 g ) (%) (% ) (%)
0
.
0 15 3 0
.
0 15 4 0
.
0 29 9 94
.
7 9
0
.
0 14 6 0
.
0 15 4 0
.
0 29 4 9 5
.
3 7
0
.
0 14 6 0
.
0 15 4 0
.
0 29 6 9 7
.
3 8
9 5
.
39 1
.
5 0
0
.
0 14 8 0
.
0 15 4 0
.
0 29 5 9 5
.
5 0
0
.
0 14 5 0
.
0 15 4 0
.
0 2 8 9 9 3
.
2 2
0
.
0 14 2 0
.
0 15 4 0
.
0 29 0 96
.
0 8
2
.
9 样品测定
分别取钩藤碱对照品 、 各药材样品 , 按 “ 2 . 2 ” 项下方法制
备对照品和供试品溶液 , 按 “ 2 . 1 ” 项下色谱条件进行钩藤碱含
量测定 (以干燥品计算 ) , 结果见图 2 、 表 2 。
囊
{匕二
10 11 12
注 : A . 对照品 ; B . 供试品 ; C . 阴性对照 ; 1 . 钩藤碱
图 1 攀茎钩藤中钩藤碱 Hp L C 图
2
.
4 线性关系考察
分别精密吸取钩藤碱对照品甲醇溶液 (0 . 104 5 m g / m L ) 0 . 1、
1
、
2
、
4
、
6
、
8 m L
, 各加 75 %甲醇定容至 10 mL , 即得 。 分别精
密吸取上述稀释液 20 泌 , 测定峰面积 , 以峰面积积分值作为纵
坐标 , 钩藤碱进样量 (四 )作为横坐标 , 进行直线回归 。 回归方程
为 : 厂一 1 . 9 45 x l o 6 ) 一 2 . 2 3 2 x 1 0 性 (二 一 0 . 9 9 9 8 ) , 钩藤碱在
0
.
02 0一 1 . 67 0 林g 与峰面积呈良好的线性关系 ·
2
.
5 精密度试验
取同法制备的同一供试品溶液 , 重复进样测定 5 次 。 结果
5 次测定钩藤碱峰面积分别为 8 0 5 2 4 、 7 8 4 5 8 、 7 8 2 5 9 、 7 9 6 45 、
7 8 2 5 5
.
RS D一 1 . 3%
样品采集时间/ 月份
图 2 不同时期攀茎钩藤药材钩藤碱成分动态积累图
表 2 不同时期攀茎钩藤药材中钩藤碱含量 (刀 一2 )
编号 采集时间 钩藤碱含量 (cy0)
}
编号 采集时。司 钩藤碱含量 (% )
1 2 0 1 1
.
0 1 0
.
0 1 3
}
7 ,。 1。 · 。 7 。一
2 2 0 1 1
.
0 2 0
.
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}
洲 只() 1 () ’ 。洲 。 ’ 。 1 1
3 2 0 10
.
0 3 0
.
0 14
}
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4 20 10
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0 4 0
.
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5 20 10
.
0 5 0
.
0 15
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1 1 只() 1 () ’ 1 1 。 ’ 。 () ,
6 20 10
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0 6 0
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3 讨论
文献记载 , 钩藤碱和异钩藤碱是钩藤类药材 的主要有效成
分 〔引 , 由于异钩藤碱的化学性质极不稳定 , 其溶液稍放置一定时
间易分解 , 造成分析测试结果的误差 。 钩藤碱溶液的稳定性相对
较好 。 因此 , 本试验采用钩藤碱为测试指标 。
C h in e e sJ ou n ra l o fI n f om ra t i on on TC M Ju n
.
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.
6
LP HC 同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素
和 2’ , 4 ’ 一二轻基查耳酮含量
朱建明 ` , 郭敏 ` , 胡君茹 2 , 姜华 2
1
. 甘肃省中医院 , 甘肃 兰州 7 3 0 0 5 0 ; 2 . 甘肃省中医药研究院 , 甘肃 兰州 7 3 0 0 5 0
摘要 : 目的 建立 同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素和 2 ’ , 4 ’ 一二羚基查耳酮含量的高效液相色谱方法 。 方法 色
谱柱 : L i e h r o s p h e r e 。柱 ( s 林m , 4 . 6 m m / 2 5 0 m m ) : 流动相 : 0 . 4%磷酸水溶液一甲醇 (3 0 : 7 0) : 流速 : 1 . 0 m L /m i n :
检测波长 : 2 6 6 nm ; 柱温 : 30 ℃ 。 结果 鼠李柠檬素 、 2 ’ , 4 ’ 一二羚基查耳酮分别在 0 . 08 0 一 0 . 6 0 畔 (二 一 0 . 9 99 8) 、
0
.
2 2 一 1 . 6 8 畔 (二 一 1 . 0 00) 范围内与峰面积线性关系良好 , 平均加样回收率分别为 98 . %8 (RDS 一 1 . 1 7%) 、 99 . %0 (Rs D =
1
.
1%5 )
。 结论 本法快速 、 简便 , 结果准确 、 可靠, 可用于镰形棘豆中鼠李柠檬素和 2 ’ , 4 ’ 一二羚基查耳酮的质量监控 。
关键词 : 镰形棘豆 ; 鼠李柠檬素 ; 2 ’ , 4 ’ 一二羚基查耳酮 ; 高效液相 色谱法
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1 0 05
一 5 3 04
.
2 0 1 3
.
0 6
.
0 1 9
中图分类号 : R 2 8 4 . l 文献标识码 : A 文章编号 : 10 0 5 一5 3 0 4 (2 0 1 3 )0 6 一 0 0 5 0 一 0 3
D e t e r m i n a t i o n o f R h a m n o e i t r i n a n d Z
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K e y w o r d s : 口犯尹艺7叫q户is af l ca 艺a B u n g e ; R l l
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o e lt r血 ; 2 ’ , 4 七 d止ly cl r 0 X y c h al e o n e ; H P L C— 藏药镰形棘豆 必少打oP 括 fa l ca at Bun ge 为豆科棘豆属植基金项 目 : 国家 自然科学基金 (8 1 2 6 06 3 3) ; 甘肃省 中医药科研 物 , 生长于海拔 2 7 0 0一 46 0 0 m 的河滩 、 沙地 、 沟谷 、 山坡 、 灌项 目 (06一 2 98一 30 ) 丛 、 草甸 , 主产于我国青海 、 甘肃南部 、 四川西部 。 镰形棘豆通讯作者 : 姜华 , E一 m a i l : h ua j i an g 931 秘S i na . c om 收载于 1 9 9 5 年颁布的 《中华人民共和国卫生部药品标准 (藏钩藤属植物药材钩藤碱的动态积累随着植物 的种类不同而有所差异 。 近年来 , 我们分别对大叶钩藤 、 钩藤和无柄果钩藤的带钩茎枝在不同时期钩藤碱成分的动态积累情况进行了
报道 〔子 8〕。 本研究结果表明 , 龙州县八角乡不同月份采集的攀茎
钩藤样品均含有一定量的钩藤碱成分 , 但其含量随着采集时间
的不 同而有所变化 , 一年时间内钩 藤碱成分的积累范围在
0
.
0 0 9%一 0 . 0 1 6%之间 , 其中 , 1一 5 月份含量较高 , 6一 12 月份
含量较低 。 因此 , 对攀茎钩藤而言 , 以每年冬季至初春采集为
宜 。
参考文献 :
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(收稿 日期 : 201 2一 0 7一 2 5 , 编辑 : 华强 )