全 文 ：作者简介:叶锦雄，男，主管中药师，主要从事药物分析和临床药学。E － mail:yaehi@ 126. com
拳参薄层色谱的鉴别研究
叶锦雄 李睿钧 黄伟佳 梁志锋
广州市东升医院，广东 广州 510140
【摘 要】 目的:改进拳参的薄层色谱鉴别方法。方法:以拳参对照药材为对照，通过改变提取方法和展开剂
系统，改进其薄层鉴别方法。结果:在薄层色谱中检出拳参的特征斑点，所建方法操作更加简单。结论:该方法专
属性强，可用于拳参的质量控制。
【关键词】 拳参;薄层色谱法;鉴别
【中图分类号】Ｒ282. 5 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2016)13 － 0018 － 03
Study on Identification of Bistort Ｒhizome by TLC
YE Jinxiong LI Ｒuijun HUANG Weijia LIANG Zhifeng
Guangzhou Dongsheng Hospital，Guangzhou 510140，China
Abstract:Objective To improve the TLC identification method of bistort rhizome． Method Through the improvement of extrac-
tion method and expansion system，the feasibility of experimental was evaluated by TLC based on bistort rhizome control． Ｒesult Bistort
rhizome in TLC had characteristic spots and the method was simpler． Conclusion The result showed the TLC method was highly specif-
ic． It was capable to control the quality of bistort rhizome．
Key words:bistort rhizome;TLC;identification
拳参为蓼科植物拳参 Polygonum bistorta L. 的干
燥根茎［1］，多生长在山坡草从阴湿处，产于华北、
西北、河南、湖北、山东、江苏、浙江等地［2］，又
名山虾子、倒根草、紫参、虾参、回头参、山柳柳
等，具有清热解毒、消肿、止血的作用，用于赤痢、
热泻、肺热咳嗽、痈肿、瘰疬、口舌生疮、吐血、
衄血、痔疮出血、毒蛇咬伤。拳参含有黄酮、蒽醌、
鞣质等化合物，具有一定的止血、抗菌和保护心脑
血管的作用［3 － 5］。拳参中的没食子酸、儿茶素、表
儿茶素等具有强抗氧化、抑制肿瘤生长和抗菌消毒
等活性［6］;拳参水提取物能显著增强小鼠单核巨噬
细胞吞噬能力，增强 NK细胞的细胞毒作用，促进 T
淋巴细胞增殖，增加血清溶血素及血清 IL － 2 水平，
具有增强正常小鼠的免疫功能作用［7］。药典［1］十六
味冬青丸、八味檀香散、感冒退热颗粒等处方中均
含拳参，但均未收录其薄层鉴别方法。为更好方便
地对该药进行薄层色谱鉴别，对拳参的薄层色谱鉴
别方法进行研究，现报告如下:
1 仪器与材料
KQ － 1060 型超声清洗仪;自制硅胶 G 薄层
板;Merck 硅胶 G 薄层板;Apple 4s (薄层色谱拍
照);拳参药材 (产地:云南，批号:150101、
150102、150201);拳参对照药材 (批号:121569
－ 201301，中国药品生物制品检定所);甲酸、甲
苯、乙酸乙酯、甲醇等均为分析纯;水为灭菌注
射用水。
2 方法
2. 1 拳参的薄层鉴别
2. 1. 1 供试品溶液的制备 取本品 0. 5g，加水
30mL，煎煮 30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇
15mL，超声处理 15min，滤过，滤液蒸干，残渣加
甲醇 1mL溶解作为供试品溶液。
2. 1. 2 对照品溶液的制备 取拳参对照药材
0. 5g，加水 30mL，煎煮 30min，滤过，滤液蒸干，
残渣加甲醇 15mL，超声处理 15min，滤过，滤液
蒸干，残渣加甲醇 1mL溶解作为对照药材溶液。
2. 1. 3 阴性对照液的制备 取甲醇 10mL，超声处
理 15min，滤过，滤液作为阴性对照溶液。
2. 1. 4 定性鉴别 照薄层色谱法 (《中国药
典》2015 年版一部通则)方法试验，吸取上述
三种溶液各 5μL、分别点于同一硅胶 G 薄层板
上，以甲苯 － 乙酸乙酯 － 甲酸(5 ∶ 4 ∶ 1)为展开
剂，展开，取出，待干后，喷以 5%三氯化铁溶
液，在日光下观察。供试品与对照药材色谱在
相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无相
同颜色斑点。见图 1。
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2. 2 拳参薄层色谱鉴别耐用性考察
2. 2. 1 不同薄层板的考察 取 Merck 硅胶 G 薄
层板和自制硅胶 G 薄层板，分别按上述薄层色
谱鉴别方法进行试验。结果显示，自制硅胶 G
薄层板及 Merck 硅胶 G 薄层板所得的色谱图斑
点清晰，阴性无干扰，均可达到鉴别要求。见
图 2。
2. 2. 2 不同温度的考察 取已点样的 Merck 硅
胶 G 薄层板，分别置于温度为 5℃和 25℃的条
件下按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果
显示，该方法在不同温度下适应性较好。见
图 3。
2. 2. 3 不同湿度的考察 取已点样的 Merck 硅胶
G薄层板，分别置于湿度为 88%和 32%条件下按
上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，该
方法在不同湿度下适应性较好。见图 4。
3 讨论
研究分别用 Merck硅胶 G薄层板和自制硅胶 G
对拳参进行实验，在 T = 25℃和 T = 5℃、ＲH =
32%和 ＲH =88%条件下展开，斑点清晰，色谱效
果基本一致，均能达到鉴别要求，表明以上方法
适用性良好，可用于拳参的鉴别。
拳参的薄层色谱鉴别按药典的方法展开条
件为［1］:以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G
薄层板上，以二氯甲烷 － 乙酸乙酯 － 甲酸为展
开剂，展开后，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。
但氨气是有强烈刺激性臭味的无色气体，与酸
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反应产生热，有燃烧爆炸危险，有腐蚀作用，
属于危险化学品［8］。改进其方法后，Ｒf 值适中，
展开完成后就有可用于鉴别的斑点，但颜色较
浅，不利于观察;喷显色剂后，放置 1 周依然
显色清晰，且阴性对照无干扰，故未对其他显
色剂进行比较性研究。且实验所用试剂安全性
均较高，斑点颜色清晰，专属性较强，容易观
察，显色稳定可靠。
研究没对其他产地的拳参进行试验，但避免
使用危害性较大的试剂，对斑点判断有明显改善，
且处理方法较简单、快捷，专属性强，可用于拳
参的鉴别，具有一定的实用价值。
参考文献
［1］国家药典委员会． 中国药典 (一部)［S］． 北京:中国医药科技出版社，2015．
［2］ 江苏新医学院． 中药大辞典 ［M］． 上海:上海科学技术出版社，
1977:1959．
［3］ 张齐雄，曹蓓． 中药拳参生物活性研究进展 ［J］． 亚太传统医药，2012，
8 (7):195 － 196．
［4］ 黄志华，李良东，韩立民． 拳参的心脑血管保护作用研究进展 ［J］． 赣
南医学院学报，2013，33 (4):625 － 627．
［5］ 曾靖，单热爱，钟声，等． 拳参水提取物镇痛作用的实验观察 ［J］． 中
国临床康复，2005，9 (6):80 － 81．
［6］ 夏晶，夏斌峰，季申． 反相高效液相色谱法测定拳参中儿茶素的含量
［J］． 中国中药杂志，2007，32 (11):1103 － 1104．
［7］ 李珂珂，栾希英，刘现兵． 拳参水提物对小鼠免疫功能的影响 ［J］． 中
药材，2010，33 (8):1302 － 1306．
［8］ 刘钢，王昌荣． 浅谈液氨泄漏的应急处置 ［J］． 石油化工安全环保技
术，2015，31 (2):50 － 56．
(收稿日期:2016. 0. 00
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)
(上接第 17 页)
3 讨论
3. 1 提取方法的确定 国内虽有多篇文献报道了
蟾酥中蟾毒配基的提取方法，但多数是为了分离
少量试验样品，因此考虑不是很全面，存在着各
种问题。研究综合文献的优缺点，使用回流提取
法以乙醇为溶剂对蟾酥中脂溶性成分进行提取。
该法简便，省时，溶剂用量较少，同时使用
萃取工艺对蟾毒配基进行富集，最终萃取物中三
种目标化合物的纯度和在 50% 以上，转移率在
90%以上，为工业化放大奠定了一定实验基础。
3. 2 纯化工艺的选择 蟾毒灵、华蟾酥毒基及脂
蟾毒配基属于强心苷成分，极性较小不适合用大
孔树脂来分离。若将这三种蟾毒配基的纯品于环
己烷 －丙酮中用中性氧化铝吸着，经 1 ～ 3d即起吸
附剂副反应，综合比较使用硅胶柱分离效果较
好［7］。研究使用湿柱层析法，进行梯度洗脱，可
一次性将三种蟾毒配基从萃取物中进行分离，最
终蟾酥分离物中三种蟾毒配基的含量和达到了
92. 26%，转移率为 80. 54%。在实验室工艺放大
过程中，可适量增加上样量，减少分离硅胶的使
用，多次层析分离后可将每根层析柱的少量交叉
部分合并，再次上柱层析分离，可使纯化效率提
高同时也保证了蟾毒配基的转移率。
参考文献
［1］ Y． Chen，J． Xiang，W． Gu，et al． Chemical constituents of Bufo siccus
［J］． 中国中药杂志，1998，23 (10):620 － 640．
［2］ K． K． Chen，A． Kovax:Pharmacology and toxicology of toad venom ［J］．
J． Pharm． Sci． 1967，56，1535 – 1541．
［3］ 李妍，王四旺，孙纪元，等． 正交试验法优选蟾酥脂溶性成分提取工艺
［J］． 西北药学杂志，2006，22 (3):112 － 113．
［4］ 赵大洲，邱鹰昆，陈继永，等． 大孔树脂富集蟾皮总二烯内酯的工艺研
究 ［J］． 时珍国医国药，17 (10):1991 － 1992．
［5］ 乔莉，段文娟，姚遥，等． 蟾酥中强心甾类化学成分的分离与鉴定
［J］． 沈阳药科大学学报，2007，24 (10):593 － 596．
［6］ 霍建中，孙云霞． 蟾酥的分离及微量组分分析 ［J］． 天津化工，1997，
10 (1):39 － 40．
［7］ 徐任生，陈仲良． 中草药有效成分提取与分离 ［M］． 上海:上海科学
技术出版社，1983．
(收稿日期:2016. 05. 03)
·02· 中国民族民间医药 2016年 7月第 25卷第 13期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 13