全 文 ：第 34 卷 第 5 期
2010 年 9 月
南京林业大学学报(自然科学版)
Journal of Nanjing Forestry University (Natural Science Edition)
Vol． 34，No． 5
Sept．，2010
http:/ /www． nldxb． com
收稿日期:2010 － 01 － 20 修回日期:2010 － 05 － 27
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD08A19122) ;国家林业局“948”项目(2003 － 4 － 38)
作者简介:张红岩(1981—) ，硕士，现在江苏农林职业技术学院工作。* 吴小芹(通信作者) :教授。E-mail:xqwu@ njfu． com． cn。
引文格式:张红岩，吴小芹，朱丽华，等． 抗病赤松组培丛生芽低温保存条件研究［J］． 南京林业大学学报:自然科学版，2010，34(5) :
7 － 11．
抗病赤松组培丛生芽低温保存条件研究
张红岩，吴小芹* ，朱丽华，谈家金
(南京林业大学森林资源与环境学院，江苏省有害生物入侵预防与控制重点实验室，江苏 南京 210037)
摘要:从抗病赤松丛生芽的保存温度和保存时间以及山梨醇浓度、NAA 和 6 － BA 组合等方面探
讨了离体条件下赤松组培丛生芽的低温保存条件。结果表明:保存温度为 17 ℃时，丛生芽存活
率达到 96． 7 %;培养基中单独添加 0． 1 mg /L的山梨醇或 0． 1 mg /L多效唑均可缓解冷害，添加
0． 2 mg /L的 6-BA +(0． 1 ～ 0． 2)mg /L 的 NAA 组合保存效果最好，可使恢复生长后丛生芽的增
殖系数提高到 5． 9 ～ 6． 0;不同基因型的丛生芽低温保存效果差异显著，其中，1# － A、7# － 7、
16# － 2 保存效果较好。
关键词:赤松;组织培养;丛生芽;低温保存;松材线虫病
中图分类号:S718 文献标志码:A 文章编号:1000 － 2006(2010)05 － 0007 － 05
Study on cryopreservation of auxiliary buds of resistant Pinus densiflora
ZHANG Hong-yan，WU Xiao-qin* ，ZHU Li-hua，TAN Jia-jin
(College of Forest Resources and Environment，Nanjing Forestry University，Jiangsu Key Laboratory for Prevention
and Management of Invasive Species，Nanjing 210037，China)
Abstract:The conditions for cryopreservation were studied at storage temperature，storage time，sorbitol contention and
the combination of 6-BA and NAA levels for better understanding of reservation and effective utilization of resistant Pinus
densiflora． The results showed that，when reserved at 17 ℃，survival rate of auxiliary buds could be up to 96． 7 %，sor-
bitol and paclobutrazol could alleviate chilling injury，0． 2 mg /L 6-BA +(0． 1—0． 2)mg /L NAA was the best combina-
tion of cryopreservation，which could improve the multiplication coefficient to 5． 9—6． 0 in the course of recovery
growth，and the effects of cryopreservation were greatly different from each other，1# － A，7# － 7，16# － 2 were elite geno-
type． It also provided reference for the reservation of other germplasm resources．
Key words:Pinus densiflora;tissue culture;auxiliary buds;cryopreservation;pine wood nematode disease
赤松(Pinus densiflora)耐瘠薄、深根性，具有
抗旱、抗风力强等特性，是温带和暖温带针叶林
的建群树种之一，也是高山陡坡更新造林及次生
演替的先锋树种［1 － 2］。然而近年来由于松材线虫
病的危害，严重制约了易感病树种———赤松的栽
培与应用。因此，为保护我国赤松资源，扩大繁
殖抗松材线虫病的苗木尤为重要。通过组织培
养方法快速繁殖优良种质资源是加速抗性育种
进程的捷径之一。目前已对优良的抗松材线虫
病赤松家系初步建立了较为稳定的组培再生体
系［3］，但如何有效保存和利用现有的抗病赤松组
培苗，避免各无性系在长期继代过程中出现长势
衰退的现象是一个迫切需要解决的问题。低温
保存技术是用离体培养方式将植物材料贮存在
非冻结状态下，使其老化过程减缓，从而延长继
代间隔［4］，不但可以有效保存特殊基因型，还具
有降低材料代谢水平、保持材料幼态性及延缓衰
老等作用。通常认为，对温带植物用 1 ～ 9 ℃低
温保存外植体，对热带、亚热带植物在 10 ～ 25 ℃
就能延缓外植体的生长。虽然低温可有效抑制
南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 第 34 卷
植株体内的酶活性，延缓生长，但超过其耐受范
围时会导致植株受到冷害，引起外植体死亡，所
以适宜保存温度的选择是低温保存后丛生芽存
活率高低的关键［5 － 6］。但目前国内还未见有关松
属树种丛生芽低温保存的相关报道。能否将抗
病能力较强的基因型大量保存下来，关系到抗性
组培苗再生植株的推广应用及基因库的建立，因
此，对优良抗性无性系的低温保存条件进行深入
研究有着重要意义。笔者对抗病赤松丛生芽的
低温保存技术进行了探究，旨在筛选出一套有效
的保存方法，为抗性赤松丛生芽的长期保存和可
持续利用提供理论依据和技术指导。
1 材料与方法
1． 1 供试材料
选用从日本引进的抗松材线虫病赤松 1#、5#、
7#、8#、16#家系的种子为材料［7］。将抗性赤松的成
熟种子经消毒处理后，移入 PDA 培养基中培养成
无菌苗，截取其带子叶顶芽，利用器官发生方式获
得抗性赤松丛生芽。第 1 代丛生芽长至 1 cm 后，
切割下来进行增殖，所获得的芽为第 2 代芽。以第
2 代芽为外植体再进行增殖，获得第 3 代芽，依次
类推。其中，由每粒种子增殖继代获得的芽为 1 个
无性系(基因型)。选取培养瓶内生长健壮、平均
高为 1． 5 ～ 2． 0 cm的第 10 代不同基因型的抗松材
线虫病赤松丛生芽为试验材料。
1． 2 抗病赤松丛生芽的处理
将抗病赤松丛生芽单个切下并接种至待保存的
培养基中，试验均以 1 /2DCR 为基本培养基，添加
10 mg /L 蔗糖、6 g /L 卡拉胶、0． 1 g /L 肌醇，pH =
5. 8，121 ℃高温高压灭菌 15 min。每瓶接种 5 个单
芽(40 mL /瓶) ，经低温保存后，置于 25 ℃室温环境
下恢复 1 周，然后进行常规继代培养，相对湿度为
65 % ～75 %、光照度 2 000 lx、光照 12 h /d。统计其
增殖系数和增殖率，每处理重复 3次，每次 10株。
1． 3 影响因素的测定
(1)抗病赤松丛生芽保存温度的筛选。抗病
赤松丛生芽接种后分别置于 6、14、17、25 ℃条件下
进行培养，保存 13 个月后恢复生长，观察其生长状
况。以 25 ℃条件下正常继代(每 30 d 转接 1 次)
的丛生芽为对照。
(2)不同保存时间抗病赤松丛生芽生活力的
测定。将丛生芽保存时间设置为 3、6、12 个月(保
存温度均为 17 ℃) ，分别对抗病赤松丛生芽的活
力进行测定。
(3)不同添加剂(山梨醇、多效唑)对抗病赤松
丛生芽保存效果影响的测定。比较不同山梨醇质
量浓度(0． 0、0． 1、1． 0、5． 0、10． 0 mg /L)和多效唑
质量浓度(0． 00、0． 05、0． 10、0． 15、0． 20 mg /L)对
低温保存后抗病赤松丛生芽活力的影响。保存温
度为 17 ℃，保存时间为 13 个月。
(4)NAA和 6-BA激素组合对抗病赤松丛生芽
低温保存后活力影响的测定。分别向培养基中添
加不同浓度组合的生长调节物质 6-BA(0． 0、1． 0、
0． 2 mg /L)和 NAA(0． 0、0． 1、0． 2 mg /L) ，研究不同
组合的 6-BA和 NAA对低温保存后抗病赤松丛生
芽活力的影响。保存温度为 17 ℃，保存时间为 13
个月。
(5)不同无性系抗病赤松丛生芽低温保存效
果的测定。将 1# － A、1# － C、5# － 2、7# － 7、16# － 2
不同无性系的第 10 代丛生芽分别接种至培养基
中，比较其低温保存后生长状况的差异。保存温度
为 17 ℃，保存时间为 13 个月。
(6)抗病赤松丛生芽低温保存过程中冷害指
数的计算。按以下分级标准对低温保存后的植株
进行冷害程度统计:0．健康，无枯红针叶;Ⅰ．少数
针叶枯红;Ⅱ． 半数针叶枯红;Ⅲ． 大部分针叶枯
红，只剩芯部少数针叶;Ⅳ．全株枯萎。
冷害指数 =∑(各级受害株数 ×该级代表数值)×
100 /(总株数 ×最高级别代表数值)。
以上试验结果采用 SPSS 13． 0 分析。
2 结果与分析
2． 1 不同温度处理对抗病赤松丛生芽生活力的影响
不同温度条件下(处理 13 个月) ，抗病赤松丛
生芽的生长状态及恢复常温后芽的活力存在明显
差异(表 1)。在 25 ℃条件下，抗病赤松丛生芽的
生长速度快，幼芽经诱导并连续培养 6 个月后，全
部木质化且长出次生针叶，但不再适合于赤松丛生
芽的增殖、继代培养。保存温度为 6 ℃时，丛生芽
1 个月后出现芯部枯死、体外渗水，随后整株迅速
枯黄，至 13 个月时存活率降至 0，而 14 ℃和17 ℃
环境下保存的芽大部分可保持嫩绿状态。其中，
14 ℃条件下保存的芽未见生长现象，但保存至 13
个月时冻害指数达到 42． 5，影响了其恢复后的增
殖能力，芽增殖率仅为 73． 74 %，增殖系数也只有
2． 58，且少数芽畸形，新芽诱导后，母体芽多数枯
死;17 ℃条件下保存至 13 个月时，芽有生长现象，
成活率可达 96． 7 %，芽增殖率为96． 2 %，与 25 ℃
条件下正常继代丛生芽的增殖率相比，虽有降低，
8
第 5 期 张红岩，等:抗病赤松组培丛生芽低温保存条件研究
但增殖系数仍达 4． 8，影响相对较小。综合考虑不
同温度处理后抗病赤松丛生芽的生长现象、成活
率、增殖率，认为在 17 ℃条件下保存赤松丛生芽是
可行的，效果相对较好。
表 1 温度对赤松丛生芽生活力的影响
Table 1 Effect of temperature on viability of auxiliary
buds of resistant P． densiflora
温度 /℃
temperature
成活率 /%
survival rate
冷害指数
chilling index
增殖率 /%
proliferation rate
增殖系数
multiplication
coefficient
25(正常继代) 100 ±0c 0 ±0a 100 ±0d 5． 91 ±0． 94b
6 0 ±0a 100 ±0d — —
14 76． 67 ±5． 43b 42． 50 ±3． 12c 73． 74 ±6． 52b 2． 58 ±0． 47a
17 96． 67 ±6． 18c 29． 29 ±2． 19b 96． 21 ±7． 65c 4． 87 ±1． 12b
25 100 ±0c 0 ±0a 46． 67 ±3． 21a 1． 73 ±0． 51a
2． 2 低温保存时间对抗病赤松丛生芽生活力的
影响
将赤松丛生芽分别在 17 ℃下培养 3、6、12 个
月后恢复生长，结果表明，随着保存时间的延长，冻
害指数持续上升，增殖系数逐渐下降。低温保存
3 个月时，增殖系数基本不受影响，能保持在 5． 9;
6 个月后冷害稍加重，芽的增殖能力受到一定影
响;至第 12 个月时冷害逐渐加重，丛生芽的增殖系
数为 4． 8。可见，低温保存时间的长短，对丛生芽
活力的影响较为明显(图 1)。
图 1 保存时间对抗病赤松丛生芽生活力的影响
Fig． 1 Effects of saving time on viability of auxiliary
buds of resistant P． densiflora
2． 3 山梨醇对抗病赤松丛生芽低温保存后生活力
的影响
通过向培养基中添加不同浓度的山梨醇，发现
山梨醇的有无及其浓度大小对赤松丛生芽低温保存
后的成活率有明显影响。随着山梨醇浓度的增加，
抗病赤松丛生芽成活率呈先上升后下降趋势，质量
浓度为 0． 1 mg /L 时，低温保存后芽的活力最高，冷
害指数明显低于对照，成活率达到 83． 33 %，增殖系
数最大，为 4． 93，芽健壮且整齐。山梨醇质量浓度
大于 1 mg /L时，少数丛生芽失水枯萎，且恢复正常
生长后部分诱导芽出现细小、针叶玻璃化等现象，甚
至褐化死亡，因此山梨醇用量不宜过高(表 2)。
表 2 山梨醇和多效唑(PP333)对抗病赤松丛生芽生活力的影响
Table 2 Effects of sorbitol and PP333 on viability of auxiliary buds of resistant P． densiflora
激素处理 /(mg·L －1)
treatment
存活率 /%
survival rate
冷害指数
chilling index
增殖率 /%
proliferation rate
增殖系数
multiplication coefficient
保存后增殖芽的状态
state after reservation
0． 0 76． 67 ± 9． 55b 42． 5 ± 7． 15a 73． 74 ± 8． 62ab 2． 58 ± 0． 27b 芽健壮，针叶直立，少数枯死
山 0． 1 83． 33 ± 10． 85b 36． 17 ± 3． 00a 90． 28 ± 6． 24b 4． 93 ± 0． 45c 芽健壮，针叶直立，无枯死
梨 1． 0 76． 67 ± 9． 55b 40． 33 ± 7． 49a 91． 67 ± 5． 27b 4． 87 ± 0． 22c 芽健壮，针叶直立，少数枯死
醇 5． 0 56． 67 ± 13． 08ab 57． 50 ± 9． 81ab 56． 95 ± 18． 80ab 2． 43 ± 0． 79b 芽细小，针叶轻微玻璃化、枯死
10． 0 36． 67 ± 17． 45a 76． 67 ± 10． 46c 37． 50 ± 17． 97a 1． 83 ± 0． 54a 芽细小，针叶轻微玻璃化、枯死
0． 00 76． 7 42． 50 ± 2． 13b 73． 7 2． 58 ± 0． 47a 芽细弱，针叶少数枯死
多 0． 05 100． 0 15． 00 ± 6． 12a 100． 0 3． 10 ± 0． 17ab 芽较健壮，针叶少数枯死
效 0． 10 100． 0 0． 00 ± 0． 00a 100． 0 4． 93 ± 0． 26c 芽较健壮，针叶直立
唑 0． 15 100． 0 15． 00 ± 6． 12a 100． 0 4． 32 ± 0． 21bc 芽健壮，针叶直立，少数枯死
0． 20 100． 0 45． 00 ± 9． 35b 100． 0 1． 91 ± 0． 22a 芽卷曲，针叶轻微玻璃化、枯死
2． 4 多效唑对抗病赤松丛生芽低温保存后生活力
的影响
试验表明，随着多效唑浓度的升高，抗病赤松丛
生芽的冻害指数及恢复正常生长后增殖率、增殖系数
均表现为先上升后下降的趋势。添加多效唑可以显
著降低芽的冷害，存活率均可达到 100 %，尤其质量
浓度在0． 05 ～0． 15 mg /L时较对照显著提高。其中多
效唑处理为 0． 10 mg /L 时，未出现冷害症状，增殖系
数可达 4. 93，恢复正常生长后新生芽健壮，针叶直立，
此时保存效果最好。但研究也表明，多效唑质量浓度
为0． 20 mg /L时，丛生芽虽存活率可达100 %，然而冷
害指数却达 45，超过了未加多效唑的处理，同时增殖
系数显著下降，仅为 1． 91，说明多效唑作为生长抑制
剂，浓度过大会抑制芽的增殖及生长(表 2)。
2． 5 NAA和 6-BA组合对抗病赤松丛生芽低温保
存后生活力的影响
在单独添加 NAA 的处理中，其质量浓度为
0． 1 mg /L时，芽的存活率较不加激素的处理下降
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南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 第 34 卷
了 2． 3 %，而此时增殖系数可达 6． 25，明显高于其
他组合;0． 2 mg /L 处理时，存活率能达到 100 %，
但冷害指数显著高于处理 1，影响了其增殖系数。
在仅添加 6-BA的处理中，保存的芽也出现明显冷
害现象，尤其在 6-BA 质量浓度为 0． 2 mg /L 时，冷
害指数达到 68． 05，增殖系数仅为 2． 08，恢复后活
力较差，部分芽畸形、褐化死亡。在不同浓度 NAA
和 6-BA组合的低温保存处理中，丛生芽在保存期
间均有生长表现，但不影响恢复后芽的增殖能力，
其中经 0． 1 mg /L 6-BA +0． 1 mg /L NAA、0． 2 mg /
L 6-BA +(0． 1 ～ 0． 2)mg /L NAA处理下保存的芽
冷害指数低，恢复生长后，增殖系数较高，有效芽
多，生长状态较好(表 3)。说明单独使用高浓度的
细胞分裂素和生长素均不利于芽的保存，适宜浓度
的 NAA和 6-BA组合有利于赤松丛生芽低温保存
后生活力的恢复。
表 3 NAA和 6-BA组合对低温保存后赤松丛生芽生活力的影响
Table 3 Effects of combination of 6-BA and NAA on viability of auxiliary buds of resistant P． densiflora
after stored at low temperature
处理
treatment
c(6-BA)/
(mg·L －1)
c(NAA)/
(mg·L －1)
存活率 /%
survival rate
冷害指数
chilling index
增殖率 /%
proliferation rate
增殖系数
multiplication coefficient
1 0． 0 0． 0 96． 71 ± 2． 08ab 29． 29 ± 4． 12ab 96． 21 ± 3． 12 4． 87 ± 0． 98cd
2 0． 0 0． 1 94． 42 ± 3． 17a 38． 88 ± 9． 78bc 100 6． 25 ± 0． 52e
3 0． 0 0． 2 100 ± 0b 60． 42 ± 9． 36cd 100 4． 67 ± 0． 2bcd
4 0． 1 0． 0 100 ± 0b 54． 16 ± 7． 68cd 100 2． 90 ± 0． 44ab
5 0． 1 0． 1 100 ± 0b 12． 50 ± 8． 54a 100 5． 10 ± 0． 14cd
6 0． 1 0． 2 100 ± 0b 29． 17 ± 7． 68ab 100 3． 83 ± 0． 08bc
7 0． 2 0． 0 97． 21 ± 2． 31ab 68． 05 ± 5． 86d 100 2． 08 ± 0． 34a
8 0． 2 0． 1 100 ± 0b 16． 66 ± 8． 33ab 100 5． 92 ± 0． 33d
9 0． 2 0． 2 100 ± 0b 12． 50 ± 5． 59a 100 6． 01 ± 0． 68de
2． 6 抗病赤松不同基因型丛生芽低温保存后生活
力的差异
不同无性系丛生芽间耐低温的能力不同，恢复
正常生长后的生活力差异显著。其中，1# － A、
7# － 7、16# － 2 无性系低温保存后，生活力恢复情况
较好，增殖系数都能保持在 5． 0 左右，尤其是16# － 2，
增殖能力反而有所提高;5# － 2 和8# － 1耐低温能力
较弱，存活率较低，为 70． 0 %左右，特别是 8# － 1
冷害指数达 68． 1，恢复后增殖系数受到显著影响，
仅为 2． 9，保存效果最差(表 4)。
表 4 抗病赤松各无性系丛生芽低温保存后生活力的比较
Table 4 Comparision of viability of auxiliary buds of resist-
ant P． densiflora after stored at low temperature
基因型
genotype
存活率 /%
survival rate
冷害指数
chilling index
增殖系数 multiplication coefficient
保存前 恢复后
1# － A 96． 71 ± 2． 3b 29． 29 ± 4． 12bc 5． 93 ± 0． 980a 4． 87 ± 0． 98b
1# － C 94． 43 ± 4． 6b 32． 30 ± 4． 65c 4． 62 ± 1． 020a 3． 21 ± 0． 72a
5# － 2 75． 01 ± 4． 9a 45． 62 ± 4． 72d 4． 73 ± 1． 130a 2． 32 ± 0． 54a
7# － 7 88． 91 ± 5． 9b 22． 61 ± 3． 11b 5． 34 ± 1． 080a 5． 23 ± 1． 14b
8# － 1 72． 22 ± 6． 2a 68． 13 ± 5． 08e 4． 20 ± 1． 120a 2． 91 ± 0． 74a
16# － 2 97． 24 ± 1． 6b 12． 51 ± 2． 73a 4． 31 ± 0． 792a 5． 10 ± 0． 95b
3 讨 论
目前，运用组织培养技术保存种质已在 1 000
多种植物种和品种上得到了应用，并取得了良好的
效果［8］。通过调整培养基配方、降低培养温度可以
限制或延缓保存材料的生长，可达到延长继代培养
时间的目的。该研究表明，赤松丛生芽对温度变化
较为敏感，适当降低培养温度能明显延缓芽的生长，
保持其幼态性，其中 17 ℃条件下的保存效果相对较
好，虽芽有轻微生长现象，但存活率较高，增殖系数
也大于其他处理。温度较低时丛生芽受到的损害较
重，在 6 ℃条件下几乎不能正常生存，6 个月后全部
死亡，这说明赤松丛生芽可能由于其本身基因型、生
长状态等原因而不耐低温。另外，随着保存时间的
延长，赤松丛生芽的恢复能力随之减弱，保存 6 个月
以后，增殖系数下降较为明显，表明单纯依靠温度的
调节并不能长期有效地保存丛生芽，需进一步对其
培养条件进行调整。
蔗糖、甘露醇和山梨醇等化合物可以提高培养
基的渗透势，造成水分胁迫，降低细胞膨压，使细胞
吸水困难，减弱新陈代谢活动，延缓细胞生长。因
此，在培养基中添加此类高渗化合物，也是一种常用
的丛生芽保存手段［9 － 10］。试验中，通过向培养基中
添加不同浓度的山梨醇表明，质量浓度为 0． 1 mg /L
时，芽的冷害指数较低，增殖率和增殖系数相对较
高。超过 1． 0 mg /L 时，植株出现了体外渗水、少数
植株枯死的现象，对芽表现出一定的毒害作用。因
此认为，在赤松丛生芽的低温保存过程中添加低浓
度的山梨醇可以缓解冷害，有利于芽的恢复。
向培养基中添加生长调节剂也是低温保存中
常用措施。大量研究证明，外源生长抑制剂多效唑
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第 5 期 张红岩，等:抗病赤松组培丛生芽低温保存条件研究
(PP333)具有抑制细胞生长的生理活性;不同激素
间组合以及激素与其他添加物共同使用也能起到
良好的保存效果［11 － 12］。张希太［13］研究发现，培养
基中添加 0． 216 ～ 0． 288 μmol /L 的 PP333，可使甘
薯试管苗在常温下保存 1 a 以上，且外源赤霉素能
消除甘薯试管苗多效唑处理后的效应;张玉进
等［14］在 MS 培养基中添加了 1 mg /L 6-BA +
0． 05 ～ 0． 1 mg /L NAA，发现保存 180 d后魔芋不定
芽存活率仍为 100 %，同时恢复生长的速度加快。
该试验表明，适当浓度的多效唑(0． 1 mg /L)可以
显著降低芽的冻害，对恢复生长后芽的状态起到明
显改善作用，但浓度略高时易降低芽的增殖系数。
在 17 ℃环境下，向 1 /2DCR 基本培养基中添加适
当组合的 6-BA 和 NAA 后，抗性赤松丛生芽保存
13 个月仍能维持较高的存活率和恢复后的增殖系
数，且诱导出的芽健壮、无畸形，有效延长了赤松丛
生芽的保存时间，效果较为理想。
植物对低温的耐受性不仅与其生长状态有关，
还取决于其基因型，不同植物乃至同一种植物不同
基因型对低温的敏感性存在较大差异［15］。通过对
不同基因型抗性赤松组培材料进行低温保存研究
表明，不仅不同家系之间耐受低温的能力差异明
显，同一家系的不同无性系之间也存在显著差异，
但丛生芽的抗性强弱是否与耐受低温的能力之间
存在一定关系还有待进一步探讨。
综上所述，在温度为 17 ℃，激素组合为
0． 2 mg /L 6-BA +0． 2 mg /L NAA的条件下，保存的
赤松丛生芽不但冷害指数低、生长状态好，而且恢
复生长后存活率、增殖率、增殖系数也均较高，比较
适合于抗病赤松丛生芽的保存。经低温保存后抗
病赤松丛生芽的抗病性如何有待测定。至于其他
激素、渗透调节物的组合是否更有利于抗病赤松丛
生芽的保存尚待进一步研究。此外，有研究表明，
在黑暗条件下，降低培养基的养分、水分以及使用
生长延缓剂也有利于材料的低温保存［16 － 17］，今后
可进一步从这些方面开展研究，以筛选出对抗性赤
松丛生芽更有利的保存条件。
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(责任编辑 郑琰燚)
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