全 文 :·贮藏保鲜加工· 北方园艺2014(12):110~112
第一作者简介:陈萍(1959-),女,河北保定人,本科,教授,研究方
向为生物科学。E-mail:shmily3205@126.com.
收稿日期:2014-01-24
芦荟多糖提取及酸水解动力学研究
陈 萍,苗 晓 燕,何 富 强
(保定学院 生化系,河北 保定071000)
摘 要:以新鲜库拉索芦荟为试材,采用改良的超声醇沉法提取芦荟多糖,并用旋光法测定
了多糖在不同浓度HCl条件下水解反应动力学。结果表明:水解反应很好的符合一级动力学方
程;改良的超声醇沉法简化了多糖提取工艺,耗能少,产率高,适用于实际生产;特别是用简单的
旋光法测定的芦荟多糖的可控酸水解,为制备目标分子量规格的活性低聚糖奠定了理论基础。
关键词:芦荟多糖;提取;酸水解动力学
中图分类号:Q 949.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2014)12-0110-03
芦荟(Aloe barbadensis miler)属百合科多年生草本
植物,原产于非洲及地中海,热带、亚热带地区也有大量
分布[1]。鉴于其富含芦荟多糖[2]、芦荟素以及多种人体
必需的氨基酸、维生素、矿物质,已被联合国粮农组织
(FAO)誉为“21世纪最佳保健品”。芦荟多糖作为无毒、
无害、无刺激的中草药成分,具有杀菌消炎[3]、抗肿瘤[4]、
抗艾滋病[5]、降血糖[6]、调节机体的免疫水平[7]、清除皮
肤色素抗氧化性[8]、改善由于辐射引起的白细胞减少
症[9]、抑制细胞凋亡[10]等作用,被广泛用于医疗、美容、
保健、食用、观赏,甚至是材料研发。因此芦荟多糖的提
取和开发具有非常重要的意义。
芦荟多糖的提取有很多种方法,热水浸提、水提醇
沉法[11]、微波辅助法[12]、超声辅助提取[13]等。该试验采
用改良超声醇沉法提取芦荟多糖,比传统水提醇沉法操
作方法简便,耗能少。多糖水解形成的低聚糖有不同的
功用,提纯不同类型和不同分子量的低聚糖成为很多研
究者的目标。目前对多糖水解反应动力学的研究报道
极少,仅见张燕[14]开展了关于白及多糖酸水解反应动力
学的研究,但其采用凝胶渗透色谱-蒸发光散射检测法,
对仪器设备要求比较高,可操作性差。现以新鲜库拉索
芦荟为试材,采用改良的超声醇沉法提取芦荟多糖,并
用旋光仪测定考察芦荟多糖酸水解过程,以期为芦荟多
糖的深加工利用和提高附加值提供新的途径。
1 材料与方法
1.1 试验材料
鲜芦荟(库拉索芦荟);无水乙醇(天津市富裕精细
化工有限公司);葡萄糖(天津市化学试剂三厂)。
WZZ-2SS型数字式自动旋光仪(上海精密科学仪器
有限公司);离心机(北京京立离心机有限公司);烘箱(上
海申贤恒温仪设备器厂);FW80型高速万能粉碎机(天
津市泰斯特仪器有限公司);B3200S-T型超声波清洗器
(杭州旭东升科技有限公司)
1.2 试验方法
1.2.1 改良超声醇沉法提取芦荟多糖及纯化 取1株
鲜芦荟,洗净,剪碎,40℃恒温干燥36h,高速粉碎打成粉
末状,精确称取13.463g,加入适量蒸馏水(约1∶20),超
声1h,抽滤,滤液用6MHCl,调pH 3.0~3.5,加入4
倍体积无水乙醇,超声30min,静置2h,4 000r/min离
心10min,弃上清液,沉淀为芦荟粗多糖,用Sevag法[15]
(氯仿∶正丁醇=4∶1混合液)脱蛋白,分离,干燥,称量
1.085g。紫外扫描芦荟多糖水溶液是否脱蛋白。
1.2.2 芦荟多糖酸水解动力学研究 取芦荟多糖
0.058g溶于20mL蒸馏水中,超声30min,离心,取
上清液,过微滤膜,取15mL置于干燥的锥形瓶中,
加入1mL 2MHCl溶液(25℃),在加入一半时开始计
时,每3min测1次旋光度αt,将旋光管置于65℃的水浴
中30min,以加速水解反应,冷却至室温,测量其旋光
度,此数值即为α∞。测定芦荟多糖酸水解速率常数。
1.2.3 催化剂浓度对反应速率的影响 用1mL 6M
HCl替代1.2.2项下1mL 2MHCl,记录αt和α∞数
据。考察改变催化剂浓度对反应速率的影响。
2 结果与分析
2.1 改良超声醇沉法提取芦荟多糖结果
由试验结果可知,改良超声醇沉法提取芦荟粗多糖
为土黄色,产率12.41%,传统水提醇沉法产率为
12.09%,2种方法虽然产率接近,但改良法提取工艺简
便,操作时间缩短,耗能少,可节约生产成本,因此适于
工业生产推广。
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北方园艺2014(12):110~112 ·贮藏保鲜加工·
2.2 芦荟多糖紫外扫描图谱
由图1可以看出,芦荟多糖的紫外图谱呈双曲线
型,为多糖典型图谱,且在280nm处无吸收,表明不含
蛋白质。
图1 芦荟多糖紫外扫描图谱
Fig.1 UV scanning spectrum of aloe polysaccharide
2.3 芦荟多糖的酸水解反应分析
分别考查2MHCl和6MHCl作为催化剂对芦荟
多糖水解反应速率的影响,以ln(αt-α∞)对时间t作
图,均为一直线。由图2可知,a为2MHCl作催化剂的
反应,直 线 方 程 为 y= -0.0488x-1.131,R2 =
-0.99458;斜率为-0.0488,则反应速率常数 K=
0.0488min-1=8.13×10-4s-1,半衰期t1/2=ln2/k=
0.693/0.0488=14.2min。b为6MHCl作催化剂的反
应,直线方程为y=-0.126x-1.9097,R2=-0.9995;
斜率为-0.126,则反应速率常数K=0.126min-1=
0.0021s-1;t1/2=ln2/k=0.693/0.126=5.5min。
图2 芦荟多糖酸水解反应速率
Fig.2 Acid hydrolysis rate of aloe polysaccharide
综上可知,2种浓度HCl作催化剂的芦荟多糖水解
反应均符合一级动力学反应。即在水解反应过程中,随
反应时间增加,多糖的水解反应速度与反应物的浓度成
正比关系,但随催化剂浓度的增加,水解反应速率明显
增大。因此工业生产中,可以通过改变催化剂浓度,控
制反应速率,缩短反应时间,可较好的保持低聚糖的生
物学活性。
3 讨论与结论
经过改良的超声醇沉法得到的芦荟多糖由于没有
高温,没有其它溶剂的影响,可极大程度保护芦荟多糖
的活性,而且比传统方法操作简便,能耗小,得到芦荟多
糖产率相差无几,适合推广于工业生产。
通过对芦荟多糖酸水解动力学的研究可知,改良超
声醇沉法提取的芦荟多糖,在添加不同浓度HCl的酸水
解过程中,均符合一级反应类型。其反应速度只与反应
物浓度的一次方成正比,而且添加高浓度的 HCl催化
剂,可加快反应速率,缩短反应时间,从而较好保持低聚
糖的生物学活性。因此在工业生产中,可通过控制反应
速率和条件来制备目标分子量规格的产品,对芦荟多糖
的开发具有重大意义。
参考文献
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第一作者简介:刘季平(1982-),女,博士,实验员,研究方向为切花
采后生物学。E-mail:liujipingpipi@163.com.
责任作者:何生根(1965-),男,博士,教授,研究方向为观赏植物生
物学。E-mail:howtoroot@163.com.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31071829,31272193);广东
省自然科学基金资助项目(10151022501000035,S2012010010418);广
东省高校优秀青年创新人才培育计划资助项目(2012LYM0079)。
收稿日期:2014-01-17
纳米银和硫代硫酸银预处理对减轻
蜡花切花乙烯伤害的研究
刘 季 平1,2,张 昭 其2,李 红 梅1,冼 锡 金1,黎 洪 波1,何 生 根1
(1.仲恺农业工程学院 生命科学学院,广东 广州510225;2.华南农业大学 园艺学院,广东 广州510642)
摘 要:以乙烯敏感型切花蜡花为试材,用10、20mg/L纳米银(nano-silver,NS)溶液及
0.5mmol/L硫代硫酸银(silver thiosulfate,STS)溶液分别预处理蜡花切花茎基端24h,以去离子
水为对照,随后移至去离子水中瓶插,并用5μL/L外源乙烯处理24h,观测瓶插期间的观赏品
质、瓶插寿命和花朵脱落率。结果表明:乙烯处理可加快蜡花切花失水凋萎及花朵脱落,并抑制
花朵开放,而NS和STS预处理可显著减轻乙烯处理对蜡花切花的不利影响,其中以0.5mmol/L
STS处理效果最佳,10mg/L NS处理次之;另外,采用电感耦合等离子体 -原子发射光谱
(ICP-AES)法测定10mg/L NS和0.5mmol/L STS溶液预处理后银(Ag)在蜡花切花体内分布发
现,2种处理的茎末端、茎上部、花瓣和叶片均有Ag分布,但NS处理的茎末端Ag含量明显高于
STS处理,而前者花瓣Ag含量则显著低于后者。
关键词:蜡花切花;纳米银;硫代硫酸银(STS);乙烯;花朵脱落
中图分类号:S 681.5 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2014)12-0112-04
蜡花(Chamelaucium uncinatum)属桃金娘科(Myr-
taceae)蜡花属(Chamelaucium)植物[1-2]。蜡花切花是典
型的乙烯敏感型切花,采后贮运过程中的水分缺失、病
菌感染等均会促使蜡花内源乙烯释放量增加而导致其
小花脱落[3-4]。Ag+可通过竞争性地结合到乙烯作用位
点而有效抑制乙烯的作用,而硫代硫酸银(silver thiosul-
fate,STS)作为一种含Ag的阴离子复合物,可有效防止
由乙烯引起的蜡花脱落[5-6],目前在蜡花切花贮运保鲜
上广泛应用。但是STS溶液性质不稳定,见光易有沉淀
产生、需要现配现用,且使用浓度较高,废液进入环境中
会造成对土壤和水体的污染,因此其应用受到关注和
限制[7-8]
。
Study on Kinetics of Acid Hydrolysis and Extraction of Polysaccharide From Aloe
CHEN Ping,MIAO Xiao-yan,HE Fu-qiang
(Department of Biochemistry,Baoding University,Baoding,Hebei 071000)
Abstract:Taking fresh Curacao aloe as material,polysaccharide was extracted by the optimized ultrasound alcohol
sedimentation method,the polysaccharides was determinated in diferent concentration of HCl conditions with the optical
method.The results showed that the hydrolysis reactions was coincidence with first grade equation.The optimized
traditional alcohol sedimentation method was suitable for the industrial production because of simplified procedure and
low energy consumption;these results would lay a theoretical foundation for the development application of aloe
polysaccharide,especialy in the preparation of active oligosaccharide with certain molecular under the acid-controlable
conditions.
Key words:aloe polysaccharide;extraction;acid hydrolysis kinetics
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