全 文 ：第 , J卷 第 2 期
19 QS 年 6 月
海 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版
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1 99 5
经组织培养快速繁殖象牙白
( yC m b i d i
u m e b u r n 。 u m )的研究
李任珠
(海南大学农学院 . 海 口 5 7 0 2 2 8)
摘 要 本文论述了利用组织培养手段快速繁殖象牙白的研究结果 . 试验表明 : v 、 V改 对诱导
和增殖象牙白原球茎有良好效果 . 采用附加 K T I 一 Z m以 L 和 N从 0 . 1 一 0 . s m以L 的 v 、 V改
培养基 , 原球茎发生率可达 95 % , 用该培养基继代培养 2 个月后 , 原球茎可增殖 6 一 8 倍 ; 2 , 4
一 D 对原球茎的形成有强烈抑制作用 . 培养基中含有 0 . l m以 L 的 2 , 4 一 D 就足以完全抑制原
球茎的形成 ;6 一 B A 对原球茎的增殖和分化效果不理想 , K T 的效果较好 ; 生根壮苗阶段以 附
加 5 % 一 10 % 香蕉汁的 12/ M s 培养基效果最佳 . 文中还介绍了象牙白试管苗的移栽技术 .
关键词 象牙白 ; 组织培养 ; 快速繁殖
中国图书资料分类号 Q 9 4 9 . 7 18 . 4 3 ; Q 9 4 4 · 6
0 引 言
兰花是名贵的观赏植物 , 象牙白 ( q m b id iu m eb ur n eu m dL l . l) ’ ]是海南岛及 云南特有的
名贵花种之一 海南分布于五指山 、坝王岭 、尖峰岭和黎母山等地 . 象牙白属于地生兰 , 喜欢高
温多湿 、 荫凉 、 微风吹拂的环境 , 土壤 p H S 一 6 最适生长 . 象牙 白叶形优美 (叶带状 , 长约 45
c m
, 宽 1 . 8 。 m , 基部叶成两行排列 ) , 花形美妙 , 香味清幽 , 花瓣洁白无瑕 , 唇盘金黄色 , 能给人
一种清雅高洁的感受 , 真可谓 “ 花 中君子 ” . 由于近几年来热带原始雨林破坏严重 , 再加上人 民
生活水平不断提高 , 养花者日益增多 , 不断有人挖野生兰花上市 , 从而使海南的野生兰花资源
面临着逐年减少和 日趋枯竭的局面 . 由于兰花传统的繁殖方法增殖速度太慢 , 目前市场价格每
个分生芽价格已达 25 一 30 元 . 笔者用象牙白种子作外殖体 , 通过组织培养手段进行快速繁殖
获得成功 ,这对于保护和开发利用海南岛的兰花资源有重要意义 . 本文报道该研究的实验方法
与结果 , 供科研工作者和养兰爱好者参考 .
1 材料与方法
1
.
1 灭菌处理 取成熟尚未开裂的象牙白茹果 , 用洗洁精擦洗果实表面 , 再用清水洗净 , 在超
净工作台上无菌条件下用 0 . 1% 氯化汞溶液浸泡 10 一 12 m in , 倒出氯化汞溶液 , 用无菌水冲洗
3一 4 次 , 再用充分消毒的解剖刀切开果实 , 用无菌镊子取出种子 , 移入培养基中 .
1
.
2 培养基 选用改 良了的 V W 培养基 (利用 M S 培养基的微量元素 )或 V W 、 M S 培 养基中
附加活性炭 0 . 2 % 、蔗糖 2 % 、 琼脂 0 . 9 % , 不同阶段加入不同配比的 N AA 、 K T , p H 5 . 5 一 5 . 8 .
收稿 日期 : 19 9 4一 1 0一 15
DOI : 10. 15886 /j . cnki . hdxbzkb. 1995. 02. 006

李任珠 :经组织培养牲 :速繁殖象牙白 (C .vm )i li d“ 。 。 b“ , 一、 “ 1n ) 的研究 131
足以完全抑制原球茎的形成 . 在所试验 的几个处理中 , 以 K T I 一 2 m g / I J 十 N A A 0 . 1一 0 . 5 m g /
I
才 的效果较好 , 原球茎发生率高达 95 % . 而各处理均无愈伤组织产生 .
2
.
2 增殖与分化 将原球茎转接到 ( 1 ) 、 ( 2) 和 ( 5) 号培养基上 , 经一个月培养后均能成倍增
殖 . 其中以 ( 1) 号培养基增殖倍数最大 , 其次为 ( 2) 号培养基 . 再继续培养一 个月 , 即可发现在
( 1 )
、
( 2 )号培养基上培养的有芽分化 . 其中一部分分化出芽的材料还带有短粗的根 (图 2 ) . 在
( 5 )号培养基上的培养材料因培养时间长 , 有个别原球茎死亡的现象 (图 3 ) . 这可能是由于 6 -
B A 的增殖效果和分化效果不理想 , 或与其浓度有关 , 应作进一步调整 (表 3) .
表 3 不同培养荃对象牙白原球茎增殖与分化的影响 ( 1 9 9 4 )
代 号 培 养 基 ( m以 )L 1 个月后增殖倍数 2 个月后增殖倍数及分化情况
( 1 ) V W改 + K T I一 2 + N A A 0
.
1一 0 . 5
( 2 ) V不V + K T I ~ 2 + N A A 0 . 1一 0 . 5
3一 5 6 一 8 ;
2 一 3 3 一 4 ;
分化出芽并形成
小植株
分化出芽并形成
小植株
( 5 ) V 、 V改 + 6 一 B A I 一 2 + N AA 0 . 1~ 0 . 5 1 一 2 个别原球茎死亡
2
.
3 壮苗 为了使分化出的芽形成良好的根系并使试管小苗健壮 , 在壮苗阶段 , 培养基中完
全去掉了分裂素类激素 , 且降低了生长素类激素的浓度 , 在部分壮苗培养基中还加入了5 % 一
10 % 的香蕉汁 . 结果表明 , 1/ 2 M S 和 v w 这两种基本培养基附加 0 . 1 m g / L N AA 或 5% 一
10 % 香蕉汁 (去掉所有激素 )的处理均有较好的壮苗效果 , 其中又以加入香蕉汁者为佳 , 培养两
个月后叶色浓绿 , 根系粗壮 (表 4 ) .
表 4 象牙白试苍苗在不同培养签上的生长情况 《1 99 4 )
代 号 培 养 基 ( m以)L 培养 2 个月以后根数 /株
( 7 ) l / Z M S + N A A O
.
1
( 8 ) 1 / 2 M S + 香蕉汁 5 % 一 10 %
( 9 ) V、 V + N A A 0 . 1
( 1 0 ) V 、 V + 香蕉汁 5% 一 1 0 %
2 一 3
2 一 3
2一 3
3一 4
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/根
4 一 5
4 一 5
4 一 5
4 一 6
c
m /叶
5一 6
5一 6
5一 6
5 一 6
植株长势
叶淡绿
叶浓绿 . 根粗壮
叶淡绿
叶浓绿 , 根粗壮
2
.
4 炼苗与移栽 象牙白试管苗长到苗高 4 一 6 c m , 根长 2 一 3 c m 时即可进行炼苗移栽 , 过
早或过迟均影响成活率 .
移栽前 , 先将装有小苗的培养瓶移出培养室 , 置于通风明亮的常温房间内 2 一 3 天 , 并在移
栽前 4 一 6 h 打开瓶盖 .
用于移栽象牙白小苗的基土以人工合成的效果较好 , 可按发酵过的锯屑 :发酵过的椰糠 :
碎木炭 : 河沙 二 2 : 1 : 1 : 1 的比例混合 , 然后装盆备用 .
移栽时 , 用长镊子取出小苗 , 用清水将粘附在根上的培养基洗净 , 并对洗净的小苗进行药
剂消毒处理 . 试验表明 , 栽前用不同杀菌剂消毒处理小苗 , 对移栽成活率有较大的影响 . 如使用
多菌灵粉剂处理 , 浓度 以 0 . 2 % 一 0 . 5 % 为宜 , 处理时间 10 一 15 m in (表 5 ) .
2 13海 南 大 学 学 于及卜 !然 科 尸乒版
表 5多菌灵处理对象牙 白试管苗移栽成活率的影响 ( 1 9 94 )
处 理
多菌灵 0 .2 %
多菌灵 0 . 5 %
C K
时 l司 ( m in )
0 1一 1 5
0 1一 15
放置 10 一 15
移 栽 株 数
30
0 3
0 3
2 周后成活株数 成 活 率 ( % )
小苗经消毒处理后 , 移入盆时要注意苗身直立 , 根系舒展 , 入土深度适宜 , 适度压实并及时
淋水定根 . 栽植象牙白小苗的花盆最好是置于有塑料大棚覆罩的荫凉兰圃中 , 如无塑料大棚 ,
可制作高度为 30 一 40 。 m 的塑料薄膜套 , 将每个花盆罩住 . 套宽以正好罩住花盆为度 . 为便于
透气 , 可在套上打直径为 0 . 5 c m 的小孔数个 , 并于早晚打开膜罩喷雾保湿 . 3 周后 , 小苗已适
应苗圃中的盆栽条件并形成完整根系 , 此时可去掉膜罩 . 试验表明 , 在没有塑料大棚的情况下 ,
套膜与不套膜对移栽成活率有较大影响 , 套膜处理的成活率为 1 0 % , 不套膜的处理 只有 83 %
(表 6 ) .
表 6 塑料膜套对象牙白移栽成活率的影响 ( 19 94)
处 理 移 栽 株 数 3 周后成活株数 成 活 率 ( % )
1 0 0
83
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3 讨 论
在兰花的组织培养中 , 首批无菌材料的建立可以用生长点 、幼叶或幼嫩花梗以及包裹在尚
未干裂的茹果中的种子等器官作外植体 . 不同外植体各有其优缺点 , 本研究是采用种子作外植
体 .
用种子作外植体的优点主要表现在 : ( 1) 容易灭菌 , 因为种子包裹在茹果内 , 可将灭菌剂
浓度适当增大 , 灭菌时间适当延长而达到彻底灭菌之 目的 , 但又不致损伤种子 . ( 2) 种子的基
因型多种多样 , 由种子经原球茎而再生的试管苗其基因型也多种多样 , 经栽培开花后 , 表现型
也多种多样 , 故可为消费者提供多种选择 (如不同的花型 、 花色 、香 味 、 叶态等 ) , 也可为育种工
作者提供多种原始材料 . ( 3) 用种子作 外植体不伤母株 , 由于一枚茹果中包含成千上万的种
子 , 故繁殖速度 比用其 他器官作外植体要 快得 多 . ( 4) 由于兰科植物种子无胚乳 , 胚不分
化 .a[ ’ 〕 ,在 自然条件下一般不能发芽 , 故在兰花的杂交育种工作 中 , 用种子作外植体 , 借助组织
培养手段获得杂种后代就具有特别重要的意义 .
用种子作外植体的缺点主要在于有一定的变异性 . 因为兰花为异花授粉植物 , 各种名贵的
兰花品种往往都是杂合体 , 一般都是通过分株繁殖来保持种性 . 如果为了确保某一材料的特征
不致变异 , 就不能用种子作外植体 , 而应当用生长点 、幼叶或幼嫩花梗等器官作外植体 . 然而育
种家往往就是利用这种变异性来培育新的品种 , 因此这种一定的变异性又可成为积极因素 .
参 考 文 献
广东省植物研究所编 . 海南植物 志 . 科学出版社 . 19 7 7
李扬汉 . 主编 . 植物学 . 上海科学技术 出版社 , 19 8 6 . 3 47 一 3 4 8
胡德中 , 戴 抗 , 编著 . 东方兰花— 兰花的鉴赏与栽培 . 四 川科学 技术 出版社 , 19 9 3 . 8 6一 1 14
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