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也门铁组培工厂化育苗技术路线



全 文 :第 23卷 第 2期
2010年 6月       
仲恺农业工程学院学报
JournalofZhongkaiUniversityofAgricultureandEngineering         
Vol.23, No.2
June, 2010
 
收稿日期:2009-11-05
作者简介:陈兴华(1972-), 男 , 广东雷州人 , 实验师.E-mail:lxchxh1972@126.com
也门铁组培工厂化育苗技术路线
陈兴华 , 何旭君 , 张华通 , 林晓萍
(广东省林业职业技术学校 , 广东 广州 510520)
摘要:取选优质的也门铁 (Dracaenaarborea)单株的顶芽和茎段作为快速繁殖的外植体 , 对各试验阶段所采用
的培养基进行了对比分析 , 筛选出了比较适宜的培养基和比较有效的组培快速繁殖技术路线.结果表明 , 不定
芽诱导培养基为 MS+2.0 mg/L6BA+2.0mg/LKT+2.0mg/LAd+0.01mg/LNAA, 芽继代增殖培养基为 MS
+1.0mg/L6BA+0.01 mg/LNAA+ 2.0mg/LAd, 生根培养基为 1/2MS+1.5 mg/LIBA时效果最佳;比较有
效的组培快速繁殖技术路线为:无菌材料获取※不定芽诱导※壮芽继代增殖培养※炼苗与生根培养※试管苗移
植和栽培管理.
关键词:也门铁 (Dracaenaarborea);组织培养;培养基;技术路线
中图分类号:S682.36;Q813.1+2   文献标识码:A    文章编号:1674-5663(2010)02-0021-04
Studyontissuecultureindustrializedbreedingtechniques
routeofDracaenaarborea
CHENXing-hua, HEXu-jun, ZHANGHua-tong, LINXiao-ping
(ForestryVocationalTechnologySchoolofGuangdongProvince, Guangzhou510520, China)
Abstract:BytakingtheapicalbudsandstemasexplantsmaterialfromthesuperiorsingleplantofDra-
caenaarborea, diferentmediaduringeachtissueculturestagewascompared.Itwasindicatedthatthe
optimummediaandtechnicalstepfortissuecultureofDracaenaarboreawereasfolows:Adventitious
budinducingmediumwasMS+6 BA2.0 mg/L+KT2.0 mg/L+Ad2.0 mg/L+NAA0.01 mg/L;
BudproliferationmediumwasMS+6 BA1.0mg/L+Ad2.0 mg/L+NAA0.01mg/L;Rootingmedi-
umwas1/2MS+IBA1.5mg/L.TheefectivetechnicalstepsfortissueculturewereGetingsterizedex-
plants※adventitiousbudinduction※budproliferation※rootingandseedlinggrowthtraining※transplanta-
tionandnuserygrowthofplanletsinvitro.
Keywords:Dracaenaarborea;tissueculture;medium;techniqueroute
  也门铁 (Dracaenaarborea), 属百合科 (Lili-
aceae)龙血树属 (Dracaena).原产亚洲 , 于 4 ~ 5
月开花 , 为常绿小乔木.喜肥沃 、排水良好的土壤
及高温 、高湿的环境.生长适温为 23 ~ 32℃, 13
℃以下停止生长 , 低于 5 ℃容易受冻害 , 高于 35
℃生长受阻 , 适宜相对湿度为 75% ~ 90%;对光
照适应性强 , 比较耐阴 , 忌阳光直接照射.
也门铁株形美观 , 叶片挺拔 , 叶色浓绿 , 具有
较高的观赏价值.其生长较快 , 小苗栽培 18个月
左右一般可达 0.8 ~ 1.0 m.病虫害较少 , 有一定
的抗病性 , 适合于室内摆设和园林绿化 , 已被广大
种植户和消费者认可 , 有很大的推广应用价值和经
济价值.但因其种子少 , 结实率低 , 且种子苗容易
产生分化 , 故一般采用扦插繁殖的方法繁育种苗 ,
市场种苗短缺.
作者采用组织培养方法 , 对也门铁快繁技术及
工厂化生产技术路线进行研究 , 从而筛选出比较有
效的组培快速繁殖技术路线等.以期为也门铁优质
苗木的大量生产提供参考.
1 材料与方法
1.1 试验材料
从广东省林业职业技术学校生物中心在国外引
进的也门铁(Dracaenaarborea.)优良品种中选取健康
的单株作试验材料.
1.2 方法
将优选的也门铁单株 , 剪取带顶芽的茎段或无
顶芽茎段 , 去除叶片 , 用自来水冲洗约 30min, 在
超净工作台上按以下程序进行表面消毒处理:用体
积分数 75%的酒精浸泡 30 s, 随后用体积分数
0.1%的升汞液浸泡 8min, 无菌水冲洗 2次后 , 再
用体积分数 0.1%的升汞液浸泡 5 min, 无菌水冲
洗 5次 , 无菌吸水纸吸干表面水分后 , 切去与药液
直接接触的伤口部分 , 将消毒过的材料切成 2.0 ~
2.5cm长的茎段 , 接种于不同培养基上进行组织
培养 , 每处理 10个重复.
所有培养基都以 MS[ 1]为基本培养基 , 附加质
量分数 3%的蔗糖 、 0.6%的卡拉胶及不同含量配
比的激素 , 调 pH至 5.8.
培养室温度控制在 (25 ±2)℃, 光照时间
10h/d, 光照强度 2 000 ~ 3 000 lx.
1.3 统计指标
平均诱导率%=芽萌动的外植体数接种的总外植体数 ×100%
平均增殖率 (倍) =增殖的不定芽总数接种的总芽数
生根率%=不定芽生根总数接种的总芽数 ×100%
2 结果与分析
2.1 不同培养基对外植体的影响
从经消毒处理后的无菌材料中 , 选出具有活力
的材料作为外植体 , 分别按表 1进行试验处理 , 每
处理接种 10个茎段.
表 1 外植体接种于不同培养基的表现情况
Table1 Performanceofexplantsinoculatedindifferentmedium
处理号
No.
培养基组成
Mediumcomposition
接种数
Inoculationnumber
诱导数
Inductionnumber
平均诱导率
Average
inductionrate/%
1 MS+3.0 mg/L 6BA +0.01 mg/L
NAA+2.0 mg/LAd
10 5 50
2 MS+2.0 mg/L6BA+2.0 mg/LKT+
0.01 mg/LNAA+2.0mg/LAd
10 9 90
3 MS+1.0 mg/L6BA+0.01 mg/LNAA
+2.0mg/LAd
10 7 70
 *:Ad为腺嘌呤 , 下表同.Adasadenine, thesameasbelow.
  外植体接种 15 d后 , 叶芽开始萌动抽长 , 30d
后潜伏芽膨大长出 , 60 d统计外植体芽的诱导率
(表 1).由表中可以看出 , 培养基中添加不同含量
的激素(6BA及 KT), 对外植体的诱导率不同.从
整体来看 , 含量为 2.0 mg/L6BA +2.0mg/LKT
的 2号培养基诱导率最高 , 为 90%, 外植体表现
为叶芽萌动抽长 、潜伏芽膨大长出 、 短小;含量为
1.0mg/L6BA的 3号培养基诱导率为 70%, 外植
体表现为只有叶芽萌动抽长 、 潜伏芽不长出;而含
量为 3.0 mg/L6BA的 1号培养基诱导率最低 , 只
有 50%, 表现为叶芽萌动抽长 , 潜伏芽不长出.
因此 , 选择平均诱导率为 90%的 2号培养基作为
不定芽诱导培养基比较合适.
2.2 不同培养基对芽增殖的影响
将诱导出的叶芽和潜伏芽切离原外植体 , 继续
在培养基 MS+1.0 mg/L6BA +0.01 mg/LNAA
+2.0mg/LAd进行培养一段时间后 , 挑选表现正
常的芽在设计的继代培养基上进行继代增殖培养 ,
每处理接种 50个芽丛(2个芽), 每 40 d转 1次 ,
80d后统计增殖率.结果表明 , 不同增殖培养基
对芽的增殖和表现效应影响不同 , 4号培养基芽的
平均增殖率为 2.8倍 , 叶芽膨大并产生团状芽点 、
黄绿色.将团状芽点转入 6号培养基 , 芽伸长长
高;5号培养基芽的平均增殖率为 1.7倍 , 叶芽萌
动并产生小丛芽 、 丛芽伸长长高;6号培养基芽的
平均增殖率为 1.4倍 , 叶芽萌动并产生小丛芽 、 丛
芽伸长长高;7号培养基芽的平均增殖率为 1.3
倍 , 叶芽萌动并产生少量小芽 、 芽伸长长高 (表
2).从上述的结果看 , 可选择增殖率较高 , 芽生
长正常的 5号培养基作为芽继代增殖培养基.
2.3 生长素 IBA对不定芽生根的影响
将继代增殖培养基上长至 1.5 ~ 2.0 cm, 生长
正常的芽切下 , 接种于不同含量 IBA的培养基上
进行生根培养 , 每处理接种 100个芽 , 35 d后统计
22    仲恺农业工程学院学报 第 23卷 
生根率.结果显示 , IBA含量对生根状况有明显的
影响 , 3.0 mg/LIBA培养基芽的平均生根率为
85%, 根细长 , 2 ~ 3条;1.5 mg/LIBA培养基芽
的平均生根率 100%, 根粗短 , 2 ~ 4条;0.5 mg/L
IBA培养基芽的平均生根率 45%, 根细长 , 仅 1 ~
2条 (表 3).因此含 1.5 mg/LIBA的培养基更利
于生根 , 故选用该培养基为生根培养基.
表 2 不同培养基对芽增殖及生长的影响
Table2 EffectsdiferentmediumonbudproliferationofDracaenaarborea
处理号
No.
培养基组成
Mediumcomposition
接种芽(丛)数
Budsnumber
增殖芽数
Budsproliferationnumber
平均增殖率(倍)
Average
proliferationrate(times)
4 MS+2.0 mg/L6BA+2.0 mg/L
KT+2.0 mg/LAd
50 140 2.8
5 MS+1.0 mg/L6BA+0.01 mg/L
NAA+2.0 mg/LAd
50 85 1.7
6 MS+0.5 mg/L6BA+0.01 mg/L
NAA+2.0 mg/LAd
50 70 1.4
7 MS+0.2 mg/L6BA+0.01 mg/L
NAA+2.0mg/LAd+800mg/LAC
50 65 1.3
 *:AC为活性炭.ACasactivecarbon.
表 3 生长素 IBA对也门铁不定芽生根的影响
Table3  EfectsofdiferentconcentrationsofIBAonrootingofDracaenaarborea
处理号
NO.
培养基组成
Mediumcomposition
接种芽数
Budsnumber
生根芽数
Thenumberof
rootedbuds
平均生根率
Average
rootingrate/%
8 1/2MS+3.0 mg/LIBA 100 85 85
9 1/2MS+1.5 mg/LIBA 100 100 100
10 1/2MS+0.5 mg/LIBA 100 45 45
2.4 炼苗及试管苗移植和栽培管理
2.4.1 生根培养与炼苗 将单芽接种到生根培养
基后 , 于第 2 d置于玻璃温室中进行生根培养.13
d后芽开始生根 , 20 d约有 98%的芽生根 , 30 d
左右可开始移植.整个生根的过程 , 也就是炼苗的
过程.这样培养出来的苗健壮 , 移栽成活率高.
2.4.2 试管苗移栽及管理  将移栽基质 V(泥炭
土)∶V(珍珠岩)=9∶1混合 , 并用体积分数 35%的
甲醛溶液 50倍水淋透 15d后使用 , 移栽时 , 将已
生根且炼苗过的合格试管苗取出 , 用自来水冲洗干
净基部的培养基 , 然后种植于装好基质的育苗筛上
并盖上塑料盖保湿 , 3 d后逐渐打开塑料盖通风 ,
7 d后将塑料盖完全打开.
种植后第 1 ~ 2d喷急救回生丹 1次 , 以后每 7 d
喷多菌灵或甲基托布津或急救回生丹和 1/2 MS无机
成分溶液或 “花多多” 1次 , 每天根据天气及基质干
湿情况进行喷水 , 注意基质不能过湿 , 特别是冬季和
早春 , 否则容易引起烂根而死亡 , 影响移栽成活率.
本试验结合生产共移栽试管生根苗 10万株 ,
30d后统计成活种苗数为 9.9万株 , 60d后出圃销
售时统计出圃种苗数为 9.7万株 , 移栽成活率达到
99%, 出圃率达到 97%.
2.5 组培快速繁殖技术路线筛选
根据多年组织培养积累的经验 , 结合也门铁自
身特点 , 拟出两条组培快繁技术路线:①无菌材料
获取※不定芽诱导※壮芽继代增殖培养※炼苗与生
根培养※试管苗移植和栽培管理;②无菌材料获取
※不定芽诱导※继代增殖培养※壮芽培养※生根培
养※炼苗※试管苗移植和栽培管理.历经 30个月
的对比试验 , 按年产 15万也门铁苗 , 从外植体接
种开始到出苗的时间段 , 途经 1只需 21个月 , 苗
表现变异少 , 苗木较壮 , 移栽成活率高;而途经 2
需 25个月 , 苗表现变异高 , 苗木较弱 , 移栽成活
率比较低.
根据试验结果 , 筛选出培养时间短 , 出苗快 ,
变异少 , 苗木质量好 , 生产效率较高的技术路线①
23 第 2期      陈兴华 , 等:也门铁组培工厂化育苗技术路线    
应用于生产实践.
3 结论与讨论
本试验筛选出的也门铁组培工厂化育苗各环节
的最佳培养基分别是不定芽诱导培养基为 MS+2.0
mg/L6BA+2.0mg/LKT+2.0 mg/LAd+0.01
mg/LNAA;芽继代增殖培养基为 MS+1.0 mg/L
6BA+0.01 mg/LNAA+2.0 mg/LAd;生根培
养基为 1 /2MS+1.5 mg/LIBA;比较有效的组培速
繁技术路线是无菌材料获取※不定芽诱导※壮芽继
代增殖培养※炼苗与生根培养※试管苗移植和栽培
管理.
工厂化育苗中 , 不定芽培养过程的芽增殖率是
一个主要的经济指标 [ 2] , 但在继代增殖过程中发
现 , 芽的增殖方式与芽的变异率有很大的关系.采
用以芽繁芽的继代增殖方式 , 苗的变异率低 , 而采
用诱导愈伤组织再分化芽的继代增殖方式 , 苗的变
异率高.6BA的含量也影响芽的变异率 , 含量越
高 , 变异率越高.
试管苗移栽环境的温度在一年中随季节的变化
而变化 , 其高低影响着试管苗移栽的成活率.从多
次大量移栽试验的结果看 , 一年中不同季节移栽的
成活率不同 , 呈现出较大的差异 , 其中冬季和早春
移栽的成活率较低 , 如技术不过关 , 最好避开这一
时期 , 晚春和秋季移栽的成活率最高 , 在 95%以
上 , 其次是夏季在 85% ~ 95%之间.
在试管苗移栽及栽培管理过程中 , 培育强壮的
生根苗是提高移栽成活率的基础 [ 3] , 而温度和水
分的控制是提高移栽成活率的主要措施 , 因此 , 培
育壮苗 , 选择晚春和秋季进行移栽 、适当提高移栽
环境的相对湿度(90%以上), 控制基质的水分 ,
可提高试管苗移栽的成活率 [ 3] , 使移栽成活率大
大提高.
参考文献:
[ 1]  MURASHIGET, SKOOGF.Arevisedmediumforrapidgrowth
andbioassayswithtobaccotissueculture[ J] .Physiolplant, 1962,
15:473-497.
[ 2]  周丽华 , 张华通 , 龚峥 , 等.互叶白千层工厂化育苗技术 [ J] .
广东林业科技 , 2001, 17(1):16-19.
[ 3]  何旭君 , 刘善辉 , 冯远来 , 等.海南龙血树组织培养快速繁殖
技术研究 [ J] .广东林业科技 , 2006, 22(1):22-25.
【责任编辑 徐 妍】
《仲恺农业工程学院学报 》第六届编委会成立大会暨
第一次会议在从化召开
2010年 4月 24日上午 , 仲恺农业工程学院院长 、 学报主编崔英德教授在从化主持召开
了 《仲恺农业工程学院学报 》 第六届编委会成立暨第一次编委会会议 , 与会人员包括学报
第六届编委会编委 、 优秀作者 、 特邀代表蔡立彬教授和学报工作人员.崔院长为新一届编委
会成员颁发了聘书 , 并为在学报累计发表论文处于前 10名的优秀作者颁发了荣誉证书和奖
金.学报副主编冯元璋研究员代表学报编辑部作了工作报告 , 对学报创刊 23年来的经验教
训进行了总结 , 并对学报现状和发展目标进行了汇报.与会人员对学报建设中存在的问题和
发展进行了热烈的讨论 , 为学报的建设和发展出谋划策 , 提出了很多很好的建议.编委们纷
纷表示要从自身做起 , 积极投稿 、 组稿 , 提升学报的学术水平.崔院长最后作了总结发言 ,
肯定了编委们的工作和学报取得的成绩 , 鼓励大家为学报的发展多做贡献.
24    仲恺农业工程学院学报 第 23卷