全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１１（２３）：１１６～１１８
第一作者简介：刘思言（１９７９－），女，吉林四平人，硕士，讲师，研究
方向为作物生物技术。Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｉｙａｎ＿２００１＠１６３．ｃｏｍ。
基金项目：转基因生物新品种培育重大专项资助项目（２００８ＺＸ
０８００４－００４）；吉林省科技厅科技发展计划资助项目（２０１１０１１１１）。
收稿日期：２０１１－０９－１２
“库拉索”芦荟的组织培养研究
刘 思 言１，姚 丹１，关 淑 艳１，李 胜 男１，王 丕 武２
（１．吉林农业大学 生命科学学院，吉林 长春１３０１１８；２．吉林农业大学 农学院，吉林 长春１３０１１８）
摘 要：以“库拉索”芦荟为试材，以ＭＳ为基本培养基，添加不同浓度的ＮＡＡ和６－ＢＡ，研究
不同浓度激素组合对“库拉索”芦荟不定芽诱导及组培苗生根的影响。结果表明：ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ５００ｍｇ／Ｌ为最佳的不定芽诱导培养基；继代培养以ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ５００ｍｇ／Ｌ的效果最好；生根培养基以 ＭＳ＋ＮＡＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ
０．１２％最佳。
关键词：“库拉索”芦荟；组织培养；不定芽诱导
中图分类号：Ｓ ６８２．３３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００１－０００９（２０１１）２３－０１１６－０３
芦荟（Ａｌｏｅ）系百合科芦荟属多年生常绿肉质草本
植物［１－２］，其含有大量具有特定功能的活性成分［３－９］，对
肠胃病、肝病、糖尿病、肺结核、心脏病、冻疮、烧伤、皮
肤溃疡等有独特的疗效［１０］，且具有增强人体免疫功
能、抑制癌细胞扩散的作用。全世界共有各类芦荟品
种５００多个，大部分生长在热带和亚热带地区，在世界
各地广泛开发应用的大致有２０多种［１１］。“库拉索”芦
荟原产于非洲，拉丁语有“味苦”之意，在我国叫翠叶芦
荟，也称美国芦荟，株体高，叶片大而肥厚，含叶肉多，
幼株表皮布有白色斑点，成株后消退［１２］，是国内外大
规模种植和用于加工生产的品种，有关生产专利和研
究报道较多。该试验以“库拉索”芦荟为材料，以 ＭＳ
为基本培养基，６－ＢＡ及ＮＡＡ为调节激素对芦荟进行
无性快繁研究，旨在找出最佳的培养基及解决培养过
程中出现的问题。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
试验材料为“库拉索”芦荟。
１．２ 试验方法
选取生长良好的“库拉索”芦荟，首先用自来水冲
洗干净，然后用７０％的酒精消毒３０ｓ，再用０．１％的升
汞灭菌１０ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗３～４次，
放在无菌
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ２，４－Ｄ ｏｎ Ｓｏｍａｔｉｃ Ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ Ｍａｔｕｒｅ ａｎｄ
Ｉｍｍａｔｕｒｅ Ｚｙｇｏｔｉｃ Ｅｍｂｒｙｏ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ
ＪＩＮ Ｈａｉ－ｊｕｎ，ＱＩＮ Ｇｏｎｇ－ｗｅｉ，ＬＩＵ Ｙａｎ－ｌｉ，ＺＨＡＮＧ Ｇａｉ－ｊｕａｎ，ＣＡＯ Ｘｉａｏ－ｙｏｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒｔｏｒｉｅｓ ｏｆ Ｓｈａａｎｘｉ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ，Ｈａｎｚｈｏｎｇ，
Ｓｈａａｎｘｉ ７２３０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｍａｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｍｍａｔｕｒｅ Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍｓｅｅｄｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ
ｗｅｒｅ ｄｉｓｓｅｃｔｅｄ ｏｕｔ ａｓｅｐｔｉｃａｌｙ ａｎｄ ｐｌａｃｅｄ ｏｎ ｓｏｌｉｄ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ２，４－Ｄ ｉｎ
ｔｈｅ ｌｉｇｈｔ ａｎｄ ｄａｒｋ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｅｆｅｃｔ ｏｆ ２，４－Ｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ａｍｅｒｉｃａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．
Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｃｏｕｌｄ ｏｃｃｕｒ ｏｎ ｔｈｅ ｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ２，４－
Ｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ０．５ｍｇ／Ｌ，ａｎｄ ｉｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ；Ｔｈｅ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏ
ｃｏｕｌｄ ｆｏｒｍ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ．Ｔｈｅ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ｗｅｒｅ ｔｈａｔ ２，４－Ｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｎ ｔｈｅ ｍａｔｕｒｅ
ｅｍｂｒｙｏｓ，ｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍａｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏ ｗｅｒｅ ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ ｄｉｆｅｒｅｎｔ；Ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｉｎ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍｗａｓ ｆｒｏｍ ｔｈａｔ ｉｎ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ；ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ；２，４－Ｄ；ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ
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北方园艺２０１１（２３）：１１６～１１８ ·生物技术·
的培养皿中晾干，然后将茎部和根部切成０．５ｃｍ的小
段，叶切成０．５ｃｍ见方的小块，备用。将准备好的材
料接种于配制好的芽诱导培养基上，待长出芽后移至
继代培养基中，当继代后的无菌苗长到合适的大小后，
将其转接到生根培养基中，培养２０ｄ左右练苗移栽。
不定芽的诱导：将不同部位的材料用不同激素浓
度的培养基进行培养、观察；继代培养：将诱导产生的
不定芽进行切割，接种到不同的培养基中培养，并进行
多次继代；生根培养：将高度为２ｃｍ以上的，至少有２
片叶片的单株切下，接种到不同的生根培养基中进行
培养、观察。
２ 结果与分析
２．１ 芽的诱导
将茎、叶、根、茎尖分别接种于不同的芽诱导培养
基中，经培养１５ｄ后发现叶片和根无明显变化，茎尖
和茎都长出许多芽点，结果见表１、表２和图１。从表
１～２中可看出，以６－ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ
为培养条件时诱导效果最好，且茎尖出芽率较茎段高。
２．２ 继代培养
将诱导产生的不定芽转入到不同的继代培养基
中，２０ｄ后进行统计，结果见表３和图２。从表３可看
出，继代培养时以 ＮＡＡ ０．１０ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ
为最佳培养基。
表１ ＮＡＡ和６－ＢＡ对茎段芽诱导的影响
Ｔａｂｌｅ１ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＮＡＡ ａｎｄ ６－ＢＡ ｏｎ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｓｔｅｍ
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
接种数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅ ａｍｏｕｎｔ
出芽数
Ｂｕｄｄｉｎｇ ａｍｏｕｎｔ
出芽率
Ｂｕｄｄｉｎｇ ｒａｔｅ／％
０．１２ ２．０ １２ ５ ４１．６７
０．１２ ３．０ １２ ７ ５８．３３
０．１２ ４．０ １２ ９ ７５．００
０．１２ ５．０ １２ ８ ６６．６７
０．１２ ６．０ １２ ６ ５０．００
０．２０ ２．０ １２ ６ ５０．００
０．２０ ３．０ １２ １０ ８３．３３
０．２０ ４．０ １２ １２ １００．００
０．２０ ５．０ １２ １１ ９１．６７
０．２０ ６．０ １２ ７ ５８．３３
表２ ＮＡＡ和６－ＢＡ对茎尖芽诱导的影响
Ｔａｂｌｅ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＮＡＡ ａｎｄ ６－ＢＡ ｏｎ ｂｕｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｓｈｏｏｔ ｔｉｐ
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
接种数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅ ａｍｏｕｎｔ
出芽数
Ｂｕｄｄｉｎｇ ａｍｏｕｎｔ
出芽率
Ｂｕｄｄｉｎｇ ｒａｔｅ／％
０．１２ ２．０ １２ ７ ５８．３３
０．１２ ３．０ １２ ９ ７５．００
０．１２ ４．０ １２ １１ ９１．６７
０．１２ ５．０ １２ ８ ６６．６７
０．１２ ６．０ １２ ７ ５８．３３
０．２０ ２．０ １２ ８ ６６．６７
０．２０ ３．０ １２ １１ ９１．６７
０．２０ ４．０ １２ １２ １００．００
０．２０ ５．０ １２ ９ ７５．００
０．２０ ６．０ １２ ７ ５８．３３
图１ 诱导形成的不定芽
Ｆｉｇ．１ Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ
表３ 不同激素浓度对不定芽继代的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ
ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ
ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ／ｍｇ·Ｌ－１ 芽增殖数Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｂｕｄ
０．１０ ２．０ ２
０．１０ ３．０ ３
０．１０ ４．０ ５
０．１５ ２．０ ２
０．１５ ３．０ １
０．１５ ４．０ ２
０．２０ ２．０ ２
０．２０ ３．０ ２
０．２０ ４．０ ３
０．２５ ２．０ １
０．２５ ３．０ １
０．２５ ４．０ ２
图２ 芦荟的继代培养
Ｆｉｇ．２ Ａｌｏｅ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ
２．３ 生根培养
将高度在２ｃｍ以上，至少有２片叶片的无根苗转
入到以 ＭＳ为基本培养基的生根培养基中，通过附加
不同的ＮＡＡ和活性炭来研究对于“库拉索”芦荟生根
的影响，结果见表４和图３。从表４可看出，ＮＡＡ为
１．５ｍｇ／Ｌ、ＡＣ含量为０．１２％时，生根效果最好。
２．４ 练苗移栽
将装有根系发达、生长健壮的试管苗的培养瓶封
口膜取下，并在培养瓶内加入少量的水，在无菌培养室
内２０～３０℃条件下练苗２ｄ。然后将其取出，用清水洗
净植株上的培养基，放入小盘中让其自然阴干２～３ｄ，
直到苗身稍失水，再移栽于培养钵中，浇水，约７ｄ后
长出新根再浇１次水，以后每３ｄ浇水１次，并按常规
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·生物技术· 北方园艺２０１１（２３）：１１６～１１８
栽培要求管理（图４）。
表４ 不同激素浓度及活性炭含量对生根的影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃａｒｂｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｎ ｒｏｏｔ
ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ ＡＣ／％ 生根情况Ｒｏｏｔｉｎｇ
１．０ ０．１０ 根细长、不健壮
１．０ ０．１２ 根不健壮
１．０ ０．１４ 根正常
１．５ ０．１０ 根正常
１．５ ０．１２ 根粗壮、长、数目多
１．５ ０．１４ 根正常
２．０ ０．１０ 根正常
２．０ ０．１２ 根正常
２．０ ０．１４ 根细长、不健壮
２．５ ０．１０ 根正常
２．５ ０．１２ 根正常
２．５ ０．１４ 根细长、不健壮
图３ 芦荟的生根
Ｆｉｇ．３ Ａｌｏｅ ｒｏｏｔ
图４ 芦荟的组培苗
Ｆｉｇ．４ Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ
３ 讨论与结论
受生长素和细胞分裂素比例不同影响，不同激素
浓度的培养基出芽情况不同，且在接种初期材料有褐
化，所以初期需要暗培养或弱光培养，并添加一些防褐
化物质，以降低褐化率，如添加活性炭［２２］，不仅能够防
止褐化还能吸附生长过程中的有毒物质，且茎尖诱导
产生的芽比茎产生的芽点多。诱导产生的芽经过一段
时间培养后需经分割后转入继代培养基中，不同激素
浓度对芽的增殖作用不同，且茎尖的分化率高，所以继
代过程中增殖得多。在生根培养基中添加活性炭可以
促进根的生长，但要控制其浓度，防止发生抑制作用。
挑选根生长健壮，且长势良好的植株进行移栽。
该试验结果表明，ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．２ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ５００ｍｇ／Ｌ为最佳的芽诱导培养基，诱
导过程中出芽率高，且出芽点较多。ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ５００ｍｇ／Ｌ为最佳继代培
养基，芽长势良好，增殖数多。ＭＳ＋ＮＡＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋
ＡＣ ０．１２％为最佳生根培养基，根粗壮、数量多、长，移
栽后生长情况较好。
参考文献
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Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ａｌｏｅ ｖｅｒａ
ＬＩＵ Ｓｉ－ｙａｎ１，ＹＡＯ Ｄａｎ１，ＧＵＡＮ Ｓｈｕ－ｙａｎ１，ＬＩ Ｓｈｅｎｇ－ｎａｎ１，ＷＡＮＧ Ｐｉ－ｗｕ２
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ，Ｊｉｌｉｎ １３０１１８；２．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ，Ｊｉｌｉｎ １３０１１８）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ Ａｌｏｅ ｖｅｒａａｓ ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｕｓｉｎｇ ＭＳ ａｓ ｍｉｎｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ，ａｄｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＡＡ ａｎｄ
６－ＢＡ，ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｈｏｒｍｏｎｅ ｏｎｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｈｏｏｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ
ｒｏｏｔ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ５００ｍｇ／Ｌ；ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ
５００ｍｇ／Ｌ；ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ ｗａｓ ＭＳ＋ＮＡＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ ０．１２％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｌｏｅ ｖｅｒａ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｅ
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