全 文 ：收稿日期:2012 － 10 － 27;修订日期:2012 － 12 － 04
作者简介:蔡晓明(1963 －) ，男，博士，副教授，研究方向:医学生物学。
基金项目:南充市科技局课题;四川省教育厅重点项目(编号:11ZA190)。
* 通讯作者:梁素华，教授，研究方向:医学遗传学。E-mail:sh_liang_@ 163． com。
第 30 卷 第 6 期
2012 年 12 月
江 西 科 学
JIANGXI SCIENCE
Vol． 30 No． 6
Dec． 2012
文章编号:1001 － 3679(2012)06 － 0740 － 04
筋骨草甾酮提取及其对
大、小鼠生长的影响研究
蔡晓明，刘 云，母 波，曾 梅，杨俊宝，申跃武，陈保锋，梁素华*
(川北医学院基础医学院，四川 南充 637007)
摘要:研究了筋骨草甾酮分离、提取工艺，探讨了筋骨草甾酮对大、小鼠生长情况的影响。采用水提、醇提、层
析、萃取等方法，筛选筋骨草甾酮提取最佳工艺;取 5 周龄大、小鼠各 40 只雌雄分开，设立对照组，采用饮水给
药，分析筋骨草甾酮对大、小鼠生长情况的影响。结果表明，4 种工艺中以 TJ 工艺为最佳;筋骨草甾酮组大、
小鼠的生长、发育、精神状态良好，与对照组没有显著差异。
关键词:筋骨草甾酮;提取; 大鼠;小鼠;生长情况
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A
Comparing the Extraction Methods of Ajuga Decumbens
Ketosteroid and the Effect on Growth Status of Rat and Mouse
CAI Xiao-ming，LIU Yun，MU Bo，ZENG Mei，YANG Jun-bao，
SHEN Yue-wu，CHEN Bao-feng，LIANG Su-hua*
(North Sichuan Meical College，Sichuan Nanchong 637007 PRC)
Abstract:The aim is to compare the extraction method of Ajuga decumbens ketosteroid and study its
effect on the growth of rat and mouse． The extraction methods of Ajuga decumbens ketosteroid inclu-
ding water extraction，alcohol extraction，chromatography and extraction were compared to get the
best method． Through drinking water administration，forty mice and forty rats were used to study the
growth effect of Ajuga decumbens ketosteroid． TJ extraction is proved the best among all methods we
tested and the experimental groups of rat and mouse show no significant difference of growth，devel-
opment and mental state with control groups．
Key words:Ajuga decumbens ketosteroid，Extraction，Rat，Mice，Growth status
0 前言
筋骨草含有二萜、环烯醚萜、甾酮、筋骨草内
酯、筋骨草糖、黄酮甙、皂甙、生物碱、有机酸、酚性
化合物、鞣质、木犀草素等。对筋骨草的疗效研究
表明，筋骨草中的环烯醚萜成分具有体外收缩血
管活性;黄酮类成分可以抑制 HIV-RT 和马传染
性贫血病毒逆转录酶;甾酮类化合物可增加正常
鼠血液中红细胞和血红蛋白含量，能显著促进胆
汁分泌，并且增加胆汁中的胆酸及胆红素含量，降
DOI:10.13990/j.issn1001-3679.2012.06.004
低胆固醇含量。同时，甾酮类化合物可降低高血
糖素或四氧嘧啶所致小鼠高血糖，具有潜在的胰
岛素样活性;甾酮类化合物对由肿瘤细胞生长促
进剂 TPF诱导产生的 EB病毒早期抗原具有强烈
的抑制作用，表现出潜在的抗肿瘤活性［1 ～ 4］。但
有关筋骨草甾酮提取及其对大、小鼠的生长报道
甚少。因此，开展筋骨草甾酮提取研究，探索筋骨
草甾酮对大、小鼠生长的影响，为开发筋骨草甾酮
提供可靠的实验依据，为利用筋骨草甾酮的药用
价值打下坚实基础，从而让我国丰富的筋骨草资
源产生良好的社会效益。
1 材料与方法
1． 1 材料
以四川本地筋骨草为材料，将筋骨草的茎、叶
清洗干净;试验试剂石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲
醇、乙醇等均为分析纯，硅胶柱为青岛海立信;紫
外分光光度计为岛津 UV-2201 型，高效液相色谱
仪为岛津 SPD-6AV;试验鼠为川北医学院实验动
物中心提供的大白鼠、KM小鼠。
1． 2 方法
取筋骨草的茎、叶样品洗净，分别用水提法和
醇提法抽取初提物;取水提液、醇提液，分别用等
体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯依次萃取各 3 次，回
收溶剂，收集相应萃取石油醚组分 A，氯仿组分
B，乙酸乙酯组分 C，乙醇组分 D。将各组分分别
上硅胶柱层析，用相应萃取溶剂梯度浓度洗脱，再
用甲醇洗脱，反复柱层析，依次得到各晶体药物成
分;用紫外分光光度计、HPLC 法测定含量及成
分，筛选筋骨草甾酮提取最佳工艺。
取 5 周龄大、小鼠各 40 只雌雄分开，大、小鼠
雌雄各分 4 组(每组 5 只)用基础饲料喂养，其中
大、小鼠雌雄各 2 组对照、2 组给筋骨草甾酮，给
药组是在大、小鼠饮水中加入筋骨草甾酮，给药量
为每 1 000 mL加入纯筋骨草甾酮量 2． 5 g，每日
称量基础饲料重量，每周称量大、小鼠体重计算生
长量，大、小鼠体重数据由 SAS软件作方差分析。
2 结果与分析
2． 1 筋骨草甾酮提取工艺筛选
采用 JJ(醇提浓缩、小孔树脂)、S(水提浓缩、
小孔树脂)、TJ(醇提水提混合浓缩、大孔树脂)、
TP(细硅胶等)4 种工艺对筋骨草甾酮进行分离，
用岛津 UV-2201 型紫外分光光度计检测 4 种工艺
总甾酮含量;用岛津 SPD-6AV高效液相色谱仪检
测 4 种工艺筋骨草甾酮含量。将对照品溶液于
UV-2201 型紫外分光光度计上，在 220 ～ 400 nm
波长范围内进行扫描。结果对照品溶液在 246． 3
nm波长处有最大吸收，故确定测定波长为 246． 3
nm。紫外分光光度法中将对照品溶液与供试品
溶液于 246． 3 nm测定吸收值，在高效液相色谱法
中将对照品溶液与供试品溶液于 246 nm 测定吸
收峰面积，计算样品溶液浓度。以 50%甲醇溶液
为空白，照紫外分光光度法试验，在 246． 3 nm 波
长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，筋骨草甾
酮含量为横坐标，绘制标准曲线，线性方程为:
Y = － 0． 021 4 + 0． 023 7X，r = 0． 999 7，线性
范围为 0． 02 ～ 0． 07 mg /mL。
以高效液相色谱法，在 246 nm 波长处测定吸
收度(图 1)。以峰面积为纵坐标，筋骨草甾酮含
量为横坐标，绘制标准曲线，线性方程为:
Y = － 6 584． 3 + 6 059． 1X，r = 0． 999 8，线性
范围为 0． 01 ～ 0． 10 mg /mL。
试验表明，4种工艺总甾酮含量 S工艺为 34． 56
mg /mL，TJ工艺为 68． 06 mg /mL，TP工艺为 24． 98
mg /mL，JJ工艺为 65． 40 mg /mL。其中筋骨草甾
酮含量 S 工艺为 1． 56 mg /mL，TJ 工艺为 51． 17
mg /mL，TP 工艺为 3． 76 mg /mL，JJ 工艺为 2． 20
mg /mL，说明 TJ工艺为筋骨草甾酮提取的最佳工
艺。
图 1 筋骨草甾酮对照与样品色谱图
·147·第 6 期 蔡晓明等:筋骨草甾酮提取及其对大、小鼠生长的影响研究
2． 2 筋骨草甾酮对大、小鼠生长的影响
2． 2． 1 筋骨草甾酮对小鼠生长的影响 筋骨草
甾酮对小鼠生长试验表明，筋骨草甾酮组雌雄小
鼠生长情况良好，发育状态和精神状态等生物学
特性与对照组雌雄小鼠相比没有发现任何差异，
甾酮组雌鼠 1 － 7 周的体重平均分别为 20． 75 g、
22． 04 g、27． 62 g、31． 85 g、34． 52 g、39． 26 g、42． 05 g，
对照组雌鼠 1 － 7 周的体重平均分别为 20． 79 g、
21． 93 g、27． 60 g、31． 55 g、34． 29 g、39． 21 g、41． 97
g，差异较小;甾酮组雄鼠 1 － 7 周的体重平均分别
为 20． 69 g、21． 92 g、27． 53 g、31． 85 g、34． 57 g、
39． 33 g、42． 07 g，对照组雄鼠 1 － 7 周的体重平均
分别为 20． 51 g、21． 78 g、27． 37 g、32． 16 g、34． 91
g、39． 52 g、42． 19 g，差异也较小。方差分析表明，
小鼠每周体重雌雄小鼠之间没有显著差异，甾酮
组与对照组之间也没有显著差异。
小鼠周净生长量情况如图 2所示，甾酮组体重
周平均增加 3． 29 g、对照组体重周平均增加 3． 39
g，差异不大;从小鼠性别来看，甾酮组雌鼠体重周
平均增加 3． 08 g、对照组雌鼠体重周平均增加 2． 90
g，甾酮组高 6． 2%，与之相反，甾酮组雄鼠体重周
平均增加 3． 51 g、对照组雄鼠体重周平均增加 3． 88
g，对照组高 10． 5%，其引起的原因尚需进一步深
入研究。
图 2 小鼠周净生长量
2． 2． 2 筋骨草甾酮对大鼠生长的影响 筋骨草
甾酮对大鼠生长影响试验表明，筋骨草甾酮组雌
雄大鼠生长情况良好，与对照组雌雄大鼠相比生
物学特性依然没有发现任何差异，甾酮组雌大鼠
1 － 7 周的体重平均分别为 87． 42 g、105． 24 g、
125． 78 g、144． 56 g、169． 48 g、194． 78 g、214． 42 g，
对照组雌大鼠 1 － 7 周的体重平均分别为 92． 20
g、110． 26 g、129． 70 g、144． 90 g、166． 20 g、189． 48
g、199． 52 g，差异较小;甾酮组雄大鼠 1 － 7 周的
体重平均分别为 96． 08 g、113． 64 g、131． 44 g、
151． 30 g、171． 38 g、200． 84 g、222． 86 g，对照组雄
大鼠 1 － 7 周的体重平均分别为 97． 62 g、114． 30
g、133． 10 g、152． 52 g、179． 30 g、203． 24 g、224． 70
g，差异也较小。方差分析表明，大鼠每周体重雌
雄鼠之间没有显著差异，甾酮组与对照组之间亦
没有显著差异。
大鼠周净生长量情况如图 3 所示，甾酮组体
重周平均增加 21． 15 g、对照组体重周平均增加
19． 54 g，甾酮组高 8． 3%;从大鼠性别来看，甾酮
组雌鼠体重周平均增加 21． 17 g、对照组雌鼠体重
周平均增加 17． 89 g，甾酮组高 15． 49%，而甾酮
组雄鼠体重周平均增加 21． 13 g、对照组雄鼠体重
周平均增加 21． 18 g，二者差异不大。从大鼠和小
鼠的周净生长量看，筋骨草甾酮好像对雌鼠生长
具有促进作用，但这是否属实以及详细原因需要
继续实验探索。
图 3 大鼠周净生长量
3 结论与讨论
用 4 种工艺方法对总甾酮及筋骨草甾酮进行
分离，结果表明，4 种工艺中，总甾酮含量以 TJ 工
艺和 JJ 工艺为最佳，达 65 mg /mL 以上，因此，总
甾酮的提取以 TJ工艺和 JJ 工艺为主。从筋骨草
甾酮含量看，S工艺占 4． 5%，TJ工艺占 75． 18%，
TP工艺占 15． 01%，JJ工艺占 3． 36%，因此，筋骨
草甾酮提取以 TJ工艺为最佳。试验表明，由于总
甾酮提取和筋骨草甾酮提取均涉及较多方法和步
骤，在层析和萃取过程中应注意操作误差，因为层
析和萃取过程中的介质稳定性、层析和萃取条件
等因素不易调控［5］。
通过近 2 个月试验，观察筋骨草甾酮对大、小
鼠生长的影响，发现筋骨草甾酮组雌雄大、小鼠生
长情况良好，发育状态和精神状态等生物学特性
与对照组雌雄大、小鼠相比没有任何差异。
(下转第 749 页)
·247· 江 西 科 学 2012 年第 30 卷
转诊工作。大量研究已经证实:70% ～ 80%的涂
阳肺结核患者均有症状，有可能到各种医疗机构
就诊，因此，建立通畅的转诊和追踪渠道是当今结
核病病例发现的主要途径。
加大督导力度，尤其对综合医院转诊工作进
行检查落实;对转诊未到位的肺结核患者定时进
行追踪，落实肺结核患者的归口管理和督导治疗。
利用各种有效的宣传方式，开展广泛、深入、
持久的社会动员和健康教育，提高不同目标人群
对结核病防治政策和防治知识的认识，改变其陈
旧、错误的观念和认识，增强个人和全社会参与结
核病控制的意识。
参考文献:
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汇编［M］．北京:军事医学科学出版社，2011:8．
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组．广东省第五次结核病流行病学抽样调查实施细
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则［M］．广州:广东省第五次结核病流行病学抽样
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市结核病控制项目办公室，2000:2 － 3．
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2010 年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告
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檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
503 － 504．
(上接第 742 页)
小鼠实验表明，甾酮组雌鼠体重 7 周平均增
加 1． 03 倍，对照组雌鼠 7 周体重平均增加 1． 02
倍，差异较小;甾酮组雄鼠 7 周体重平均增加 1． 03
倍，对照组雄鼠 7 周的体重平均增加 1． 06 倍，差
异也较小。方差分析表明，小鼠每周体重雌雄小
鼠之间、甾酮组与对照组之间没有显著差异。大
鼠实验表明，甾酮组雌大鼠 7周体重平均增加 1． 45
倍，对照组雌大鼠 7 周体重平均增加 1． 16 倍，差
异明显;甾酮组雄大鼠 7 周体重平均增加 1． 32
倍，对照组雄大鼠 7 周体重平均增加 1． 3 倍，差异
较小。方差分析表明，大鼠每周体重雌雄鼠之间、
甾酮组与对照组之间没有显著差异。
影响大鼠和小鼠的生长的因素较多，饲料营
养成分、大鼠和小鼠的生长环境甚至不同音乐都
对其生长产生明显影响［6，7］，因此，筋骨草甾酮是
否对雌鼠生长具有促进作用尚需进一步深入研
究。
参考文献:
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·947·第 6 期
董秋兰等:珠海市将军社区结核病流行病学调查结果与
全国第五次结核病流行病学抽样调查结果比对分析