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桂平魔芋组织培养研究



全 文 :第 23卷第 3期 西 南 农 业 大 学 学 报 Vol.23 ,No.3
2001年 6月 Journal of Southwest Agricultural University Jun.2001
文章编号:1000-2642(2001)03-0228-02
桂平魔芋组织培养研究
苏承刚 ,张兴国* ,张盛林
(西南农业大学 园艺系 ,重庆 400716)
摘要:以桂平魔芋球茎 、鳞片 、顶芽等切块为外植体 , 愈伤组织诱导的适宜培养基为 MS +6-BA0.5 ~ 1.0 mg/L +
NAA0.5 ~ 1.0mg/ L、球茎 , 鳞片诱导率达 100%, 而顶芽切块诱导无效。愈伤组织芽分化最适培养基是 MS+BA1.5+
NAA0.01mg/L ,分化率达 90%以上 ,顶芽切块在分化培养基上能长出丛生芽 , 频率达 72%。芽在MS+NAA0.3 ~ 0.5 mg/L培养
基上都能 100%生根形成完整植株。
关 键 词:桂平魔芋;组织培养;再生植株
中图分类号:S 632;Q813.1      文献标识码:A
TUSSUE CULTURE OF ALBUS GURIPINGENSIS
SU Cheng-gang , ZHANG Xing-guo* , ZHANG Sheng-lin
(Department of Horticulture , Southwest Agricultural University , Chongqing 400716 , China)
Abstract:Pieces of the corms , scales and apical buds of konjac(Albus guripingensis)were cultured as explants on different media.MS+6-
BA0.5~ 1.0mg/ L+NAA0.5 ~ 1.0mg/ L appeared to be optimum for callus induction , with an induction rate of 100% for the corms and the scales ,
though no calli were regenerated from the apical buds.For regeneration of plantlets from the calli , the optimum medium was MS+BA1.5 mg/L+
NAA 0.01 mg/L, with a differentiation rate of 90% or more.On such a differentiation medium , 72% of the cultured apical bud explants produced rosette
plantlets.All the regenerated plantlets rooted readily on MS+NAA0.3 ~ 0.5mg/ L and grew into complete plants.
Key words:Albus guripingensis;tissue culture;plant regeneration
  我国有丰富的魔芋资源 ,据报道全世界有 115个
种 ,我国有 26个种[ 1~ 3] ,近年由于大量乱伐森林 ,生
态环境日益恶化 ,魔芋资源日渐减少 ,有的珍贵种濒
临灭绝 。为挽救魔芋资源 ,对桂平魔芋(A.guripin-
gensis)进行了组织培养研究 ,为建立魔芋资源基因库
提供参考 。
魔芋组织培养已有许多报道[ 4~ 6] ,但桂平魔芋
“种”的组织培养尚未报道 ,文章对此作了较全面研究。
1 材料与方法
选取桂平魔芋球茎 、顶芽 、鳞片为外植体 ,分别用
自来水冲洗净 ,在超净台上用 75%乙醇浸泡 30S ,再
用 0.1%HgCl2 浸泡灭菌 8min ~ 10min后用无菌水漂
洗 4 ~ 6次 ,把球茎 、鳞片切成长宽 0.5cm 小块;顶芽
纵切为 2块 ,分别接入 MS附加 3%蔗糖 , 0.6%琼脂 ,
且含不同配比激素 BA , KT ,NAA , 2.4-D 的培养基
上 ,在 25℃±1℃下 ,前期暗培养 ,待长出愈伤组织转
入分化培养基中 ,置于 30W日光灯下 10h/天培养 ,促
进芽根的分化。
2 结果与分析
2.1 不同外植体愈伤组织的形成及诱导频率的影响
外植体接入适宜培养基上 ,3 ~ 4周后就形成大
繱收稿日期:2001-01-12基金项目:国家自然科学基金资助项目(30670513),博士点基金资助项目(950605)作者简介:苏承刚(1964),男 ,重庆江津人 ,西南农业大学实验师 ,从事生物技术研究。*为通讯作者。
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2001.03.013
量的瘤状愈伤组织 。球茎切块接种后 ,表面渐渐褐
变 ,3周后切块靠近培养基一面开始出现瘤状突起 ,
体积增大 ,以后瘤状愈伤组织覆盖于切块上。鳞片切
块 ,4周后在边缘上 ,产生绿豆大小瘤状物 ,并不断增
殖。芽切块 ,基部切口处有极少量愈伤组织。
不同类型外植体对愈伤组织诱导频率有显著差
异。试验结果表明:在适宜培养基MS+6-BA0.5~ 1+
NAA0.5 ~ 1mg/L上 ,球茎 、鳞片的诱导频率达 100%,而芽
切块为5.5%左右(见表 1)。
2.2 激素种类及配比对愈伤组织形成的影响
试验结果表明:在培养基中加入0.5mg/L~ 1.5 mg/L BA
或NAA或 BA与 2.4-D激素不同配比的处理 ,都不
能形成愈伤组织 。但在0.5 mg/L ~ 1.5 mg/L BA培养基上芽
切块可直接产生丛生芽 ,最少为2个 。在不同浓度的
BA与NAA配合时 ,球茎切块和鳞片切块都能形成愈
伤组织 ,但二者浓度不同 ,其诱导频率有差异。不同
外植体以 BA 和 NAA 各为0.5 mg/L ~ 1 mg/L配比效果最
好 ,而对芽切块效果不明显。见表 1。
表 1 激素种类及配比对不同外植体愈伤组织形成影响
BA NAA
不同外植体愈伤组织诱导率(%)
球茎切块 鳞片切块 顶芽切块
0.1 0.1 22 18.9 0
0.5 0.5 100 100 0
1.0 1.0 100 100 5.5
1.5 1.5 87.5 84.4 4.0
2.3 芽分化
2.3.1 不同外植体愈伤组织与芽分化 外植体不
同 ,其芽分化能力也不同 。试验结果表明 ,球茎 、鳞片
愈伤组织分化率分别是 96.7%, 91%。把芽切块直
接接入分化培养基上能产生丛生侧芽 ,最高频率为
72.5%。
2.3.2 激素种类及浓度对芽分化影响 试验以块茎
愈伤组织为材料 ,当 BA 和 KT 在0.5 mg/L ~ 1.5 mg/ L各种
浓度分别与 NAA0.01 mg/ L各种组合对愈伤组织分化没
有明显作用;当 BA , KT 为0.5 mg/L~ 1.5 mg/ L分别与
NAA0.01 mg/L组合对愈伤组织分化的影响 。结果表明 ,
在试验浓度范围 ,KT 与NAA组合对愈伤组织分化无
促进作用 ,而 BA 与 NAA 组合有明显促进作用 ,以
BA1.5 mg/L为最佳 ,分化率达96.7%。见表 2。
表 2 BA 与NAA配比对愈伤组织分化影响
NNA BA 愈伤组织数 分化芽数 分化率(%)
0.01 0.5 30 21 70
0.01 1.0 30 26 86.7
0.01 1.5 30 29 96.7
2.4 生根诱导和植株再生
芽转接到MS+NAA0 mg/L ~ 0.5 mg/L生根培养基上都
能生根 ,但有一定差异 。最佳生根培养基是 MS +
NAA0.3 mg/L ~ 0.5 mg/ L ,生根率达 100%。
随着芽基部长出多条根时 ,芽从鳞片内伸出并展
开叶 ,形成完整的植株 ,大致需 2周左右时间。
2.5 试管苗移栽
试验苗展叶并长出良好根系就可以移栽。移栽
前应在室内炼苗 3 ~ 5天 ,然后移栽于营养土中 ,注意
遮荫保湿 ,成活率达 90%以上。
3 讨论
桂平魔芋是魔芋属中一个珍贵种 。在组织培养
中 ,和其他种如:白魔芋 、花魔芋等的组织培养有着相
同之处 。KT:2.4-D对其愈伤组织诱导 ,分化都没有
明显作用 。只有 BA 与 NAA 配合对桂平魔芋愈伤组
织诱导 ,分化有显著促进作用[ 4~ 6] ,但激素浓度使用
有一定差异 ,其最佳愈伤组织诱导培养基是:MS +
BA0.5 mg/L ~ 1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L ~ 1.0 mg/L;球茎 、鳞片诱
导率达 100%,对芽切块无效。分化培养基是 MS +
NA1.5 mg/L+NAA0.01 mg/ L ,分化率达 96.7%。芽切块在
分化培养基上能直 接长出丛生芽 。在 MS +
NAA0.3 mg/L ~ 0.5 mg/ L ,培养基上都能 100%长出根 ,并形
成完整植株 。
该魔芋“种”具有很强的抗病能力是一个很难得
的抗病育种材料 。因此 ,利用少量球茎 、鳞片进行组
培快繁 ,也可利用顶芽切块直接成苗 ,能有效地增加
和保护该魔芋资源。
参考文献:
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[ 4]  张兴国.魔芋组织培养的研究[ J] .西南农业大学学报 ,
1988 , (6):345-349.
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[ 6]  孙凡伦.白魔芋的组织培养和植株再生[ J] .植物生理学
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229第 23卷第 3期          苏承刚等 桂平魔芋组织培养研究