全 文 ：收稿日期:2009-10-22;　修订日期:2010-03-25
基金项目:国家自然科学基金(No.30671541)
作者简介:杜天玺(1986-),女(汉族),河南许昌人 ,现为甘肃农业大学在
读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事兽医中药学研究工作.
＊通讯作者简介:魏彦明(1963-), 男(汉族),甘肃渭源人 , 现任甘肃农业
大学动物医学院教授 ,博士生导师 ,博士学位 ,主要从事中药药理 、中兽药
研发和临床兽医学相关工作.
当归炭饮片质量标准研究
杜天玺 ,郭延生 ,华永丽 ,杨洪申 ,秦　亮 ,杨小虎 ,曲亚玲 ,魏彦明＊
(甘肃农业大学动物医学院 ,甘肃 兰州　730070)
摘要:目的 建立当归炭饮片质量控制方法 , 为其质量标准的制定提供依据。方法 观察当归炭饮片性状;对其粉末进行
显微鉴别;根据《中国药典》规定的方法测定水分 、灰分 、酸不溶性灰分及其浸出物;采用薄层色谱法对其进行鉴别;基于
当归炭饮片 HPLC图谱 ,以阿魏酸峰为基准峰 , 计算阿魏酸的含量 , 对样品中指认的指纹峰以阿魏酸为参照 ,计算每个指
纹峰以阿魏酸计的含量 。结果 当归炭和生当归相比 , 外观性状 、显微结构发生了较明显的变化 , 组织颜色加深 , 淀粉粒
被糊化 , 油细胞被破坏。水分 、总灰分 、酸不溶性灰分和浸出物测量平均值分别为 3.3%, 11.5%, 4.1%和 49.2%,确定了
10个指纹峰 , 计算出指纹峰以阿魏酸计的含量。结论 建立了当归炭饮片多指标成分的定量方法 ,方法具有可操作性 , 使
药品质量控制更全面。
关键词:当归炭饮片;　质量控制;　定量方法;　阿魏酸
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.09.012
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)09-2156-03
QualityStandardofCarredRadixAngelicaSinensis
DUTian-xi, GUOYan-sheng, HUAYong-li,YANGHong-shen, QINLiang, YANGXiao-hu, QUYa-ling,WEIYan-
ming＊
(GansuAgriculturalUniversity, ColegeofVeterinaryMedicine, Lanzhou730070, China)
Abstract:ObjectiveToestablishthequalitystandardofcarredRadix.AngelicaSinensis.MethodsTraditionalidentification,
TLCandfingerprintsofCarredRadixAngelicaSinensiswereadoptedtocontrolqualityofcarredRadixAngelicaSinensis.Theten
commonpeakwereappointedasfingerprintpeaks, allthefingerprintpeakswerequantifiedgroundedonthepeakofFerulicacid.
ReferringtoChinaPharmacopoeia(2005), water, ash, andextractwerealsodetected.ResultsAppearance, microscopicstruc-
tureofRadixAngelicaSinensischangedobviously, coloroftissuedeepened, starchgranulegelatinized, oilcelsweredestroyed.
Thecontentofwater, totalash, acid-insolubleashandextractwere3.3%, 11.5%, 4.1%and49.2%, respectively.Tenfin-
gerprintpeaksweredefined, andquantifiedrestedonthepeakofferulicacid.ConclusionAmulticomponentquantitativemethod
forthecarredRadixAngelicaSinensiswasestablished.Theestablishedmethodisfeasible.Thequalitycontrolstandardsofthe
carredRadixAngelicasinensisisnormative, systematicandaccurate.
Keywords:CarredRadixAngelicaSinensis;　Qualitystandards;　Quantitativemethod;　Ferulicacid
　　当归为伞形科当归属植物当归 Angelicasinesis(Oliv.)Diels
的干燥根 [ 1] , 主产于甘肃岷县 , 属甘肃地道药材 , 主要成分含挥
发油和水溶性物质两大类。挥发油中以藁本内酯和正丁烯酉夫
内酯为主要成分;水溶性物质以阿魏酸和丁二酸为主要成分 [ 2] ,
是中(兽)医临床常用药 , 性温 , 味甘 、辛 , 具有补血活血 、调经止
痛 、润燥滑肠等功效。 当归炭入药 , 最初见于明代方贤 《奇效良
方》成为 “火化法”, 之后清代又有 “煅法” “烧法 ”的记录 , 如 “烧
末为灰” ,但均需存性 , 当归炭至今仍为中医临床所选用 [ 3] , 由于
当归本有活血作用 , 炒炭后又善止血 , 所以当归炭尤宜于瘀阻出
血证。当归炭质量优劣直接关系到中医及中兽医临床的疗效 ,而
目前还没有一个系统的质量控制的方法。因此 ,本文选取甘肃道
地产区的当归 , 按照《甘肃省中药炮制规范》规定的方法炮制 ,采
用传统鉴别和色谱指纹图谱结合的方法来控制当归炭饮片的质
量 , 为当归炭饮片质量控制提供科学依据。
1　材料与仪器
1.1　实验仪器 显微镜 , 自动薄层制板器 , KQ-360DE型数控超
声波清洗器 , 玻璃仪器烘干器 , TDI5-WS多管架自动平衡机 ,电
子天平 ,克罗玛 -薄层观察分析仪(254nm, 365nm), 容量瓶 , 坩
埚 , 电热恒温鼓风干燥箱 , SX-4-10智能纤维素电阻炉 ,循环水
式多用真空泵(型号 SHB-111)。
1.2　实验药品 乙醚 、乙醇 、石油醚 、醋酸乙酯 、1%碳酸氢钠 、甲
醇 、硅胶 G薄层 、阿魏酸 、正己烷 、苯 、2%碳酸钠 、水合氯醛 、稀甘
油等所用试剂均为分析纯。当归对照药材(批号 120927 -
200613中国药品生物制品检定所), 阿魏酸对照品(批号 0773-
9910中国药品生物制品检定所)。
1.3　当归炭 取当归片 , 置锅内 ,用中火炒至当归外表焦黑色 , 内
部棕褐色 ,略具焦气 , 质枯脆时 , 取出放凉。并要注意 “炒炭存
性” [ 4] 。不同产地当归炭样品分别为 t1甘肃漳县金钟镇;t2甘肃
岷县中寨镇;t3甘肃九寨镇;t4甘肃岷县;t5甘肃渭源县;t6甘肃
渭源县;t7甘肃渭源县;t8甘肃岷县;t9甘肃昌县;t10号甘肃漳
县;t11甘肃昌县哈达铺;t12甘肃漳县;t13甘肃岷县;t14甘肃省
岷县市场购买。
2　方法
2.1　饮片性状 当归炭:当归头切片有大有小 , 最大的长为 2.6
cm,宽为 1.7 cm, 厚为 0.2 cm;最小的长为 1.2 cm, 宽为 1.0 cm,
厚为 0.1 cm, 表面颜色为黑色具纵皱纹 ,断面形成层为深褐色具
环纹 , 木质部为棕褐色 , 还混有粗细 、长短不一的归身 、归尾其表
面均为黑色 ,根头部断面层有裂缝。掰开断面颜色为黄棕色 , 质
脆 , 香气较浓味苦 、微甜。见图 2。
2.2　饮片鉴别
2.2.1　粉末显微鉴别 当归炭:粉末为焦黑色 ,可观察到梯纹 、网
纹 、螺纹导管呈棕褐色 , 木栓细胞也呈棕褐色 ,纺锤形薄壁细胞有
·2156·
时珍国医国药 2010年第 21卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.9
但较少 , 碎片较多油室基本少见 , 淀粉粒糊化。见图 3。
图 1　生当归饮片　　　　图 2　当归炭饮片
1导管;2、 3木栓细胞;4纺锤形韧皮薄壁细胞
图 3　当归炭粉末显微扫描图
2.2.2　薄层色谱鉴别 取 14个产地当归炭粉末 0.5g, 加乙醚 10
ml, 超声处理 10 min, 滤过 , 取滤液蒸干 , 残渣加乙醇 1 ml使溶
解 , 作为供试品溶液。另取标准当归粉末 0.5 g,依供试品同法操
作 , 即为对照品溶液;吸取上述 15种溶液各 5 μl, 分别点于同一
块硅胶 G薄层板上 , 以石油醚(30 ～ 60℃)醋酸乙酯(4∶1)为展
开剂 , 展开 ,取出 , 晾干。置紫外灯下 365 nm波长处观察荧光斑
点。见图 4。
取 14个产地当归炭饮片粉末 3 g, 加 1%碳酸氢钠 50 ml,超
声处理 10min,离心 , 取上清液 , 用稀盐酸调至 pH值 2 ～ 3, 用乙
醚振荡萃取两次 , 20 ml/次。 合并乙醚液蒸干 ,残渣加甲醇 1ml,
使溶解 , 作为供试品溶液。 吸取上述 14种溶液各 10 μl, 分别点
于同一块硅胶 G薄层板上;另吸取 10 μl阿魏酸点于同一块硅胶
G薄层板上作为对照样品。以正苯 -醋酸乙酯 -甲酸(4∶1∶0.
1)为展开剂 , 展开 ,取出 , 晾干。置紫外灯下 365 nm波长处观察
荧光斑点。见图 5。
　　1～ 14为表 1中的当归炭样品　　　　　 1～ 14为表 1中的当归炭样品　　
15为当归对照药材　　　　　　　 15为阿魏酸对照品　
图 4　药材薄层色谱鉴图　　　图 5　阿魏酸薄层色谱图
2.3　检查 照《中国药典》 2005年版Ⅰ部(附录), 分别测定当归
样品中的水分 , 总灰分 ,酸不溶性灰分 , 浸出物测定法项下醇溶性
浸出物测定法热浸法测定。结果见表 1。
2.4　基于当归炭饮片的 HPLC图谱的样品含量测定
2.4.1　色谱条件 AgilentZorbaxSB2C18(4.6 mm×25cm, 5μm)
分析柱;流动相:1%乙酸水(A相):乙腈(B相);梯度洗脱条件:
B, 0 ～ 10min(8% ～ 13%);18 ～ 20min(13% ～ 18%);20 ～ 28min
(18% ～ 20%);28 ～ 50min(20% ～ 49% );50 ～ 55 min(49% );
55 ～ 75 min(49% ～ 100%)。流速:1 ml· min-1;柱温:25 ℃;检
测波长:280 nm。
表 1　 14个产地当归样品中水分、总灰分 、酸不溶性灰分 、浸出物测定结果
%
样品编号 水分含量 总灰分 酸不溶性灰分 浸出物
t1 3.71 19.05 8.40 34.57
t2 2.53 13.46 2.57 48.08
t3 3.00 7.79 1.60 43.46
t4 2.81 12.74 6.12 31.12
t5 2.68 10.70 4.67 44.87
t6 3.12 12.39 5.18 50.18
t7 3.94 10.47 3.95 75.09
t8 2.80 15.04 3.91 71.63
t9 2.65 9.66 3.04 44.17
t10 4.64 12.82 4.07 52.96
t11 3.25 9.63 3.09 42.00
t12 2.59 11.83 6.02 50.56
t13 3.11 8.54 2.97 49.47
t14 5.54 7.23 1.50 50.89
平均值 3.3 11.5 4.1 49.2
2.4.2　阿魏酸对照品溶液制备 称取阿魏酸对照品 4.8 mg, 加
甲醇至 100 ml容量瓶中 , 得 4.8 μg· ml-1对照品溶液。
2.4.3　供试品溶液制备 精密称取当归粉末(40目)0.5 g,置 50
ml具塞三角瓶中 ,精密量取甲醇 -甲酸(95∶5)溶液 25 ml加入
三角瓶中 ,密封 , 称重 ,超声提取 60 min, 放置至室温 , 称重 , 补足
失重 , 0.45 μm滤膜过滤。取续滤液进样 10μl。
2.4.4　指纹峰的鉴定 采用相对保留时间确认峰。指纹峰峰面
积比值即各指纹峰面积与同一图谱中阿魏酸峰面积的比值。
3　结果
3.1　方法学考察 精密度 取同一份当归样品(t4)的供试液 , 重
复进样 5次 , 计算得各主要色谱峰的相对保留时间 RSD为
0.03% ～ 0.14% , 峰面积比值 RSD为 0.54% ～ 2.06% , 符合指
纹图谱的检测要求。
3.1.1　稳定性 取同一份当归样品(t4)的供试液 , 分别于 0, 3,
6, 9, 12和 15 h检测 ,计算各主要色谱峰的相对保留时间 RSD为
0.03% ～ 0.12%,峰面积比值 RSD为 0.29% ～ 2.66% , 表明供试
液在 15h内基本稳定。
3.1.2　重复性 取当归样品(t4)6份 , 分别精密称定 , 按供试品
溶液制备方法平行制备供试液 , 再分别按上述液相色谱条件测
定 , 计算各主要色谱峰的相对保留时间 RSD为 0.28% ～
0.46%,峰面积比值 RSD为 0.75% ～ 1.82% , 符合指纹图谱的
检测要求。
3.1.3　当归样品中指纹峰的定量 按上述液相色谱条件测定了
自 14个不同产地的当归炭样品 , 根据各样品图谱中色谱峰的相
对保留时间和阿魏酸对照品的相对保留时间 ,鉴定 10个指纹峰 ,
见图 6。峰 1为阿魏酸 , 将指纹峰的紫外光谱与文献 [ 5 ～ 8]比
较 , 推测峰 2 ～ 10依次为洋川芎内酯 I、洋川芎内酯 H、阿魏酸松
柏酯 、洋川芎内酯 A、丁基酜内酯 、E-藁本内酯 、Z-藁本内酯 、Z
-丁烯基酞内酯 、levistolideA.。对这些指纹峰含量以基准峰阿
魏酸为依据 ,计算每个指纹峰的相对含量。结果见表 2。
4　讨论
“道地药材”是公认的优质药材 , 可以用某中药的道地药材
的质量情况作为该中药的质量标准。本研究选择甘肃道地产区
的当归样品 , 对当归炭(14批)各组研究数据资料进行系统分析 ,
以此为基础制定当归炭饮片的名称 、药材来源 、饮片规格 、显微鉴
别 、水分限量 、总灰分限量 、酸不溶性灰分限量 、浸出物限量及以
阿魏酸为基准的有效成分相对含量下限等质量标准。 研究发现
当归炭的显微结构发生了较大的变化 , 组织颜色加深 、油细胞减
少 、淀粉粒基本都被糊化等 , 而其外部变化也非常明显 ,如表面呈
焦黑色等 ,水分含量明显下降 , 而灰分含量明显增加 ,建议在制定
当归炭饮片质量标准时考虑。
·2157·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.9 时珍国医国药 2010年第 21卷第 9期
A样品;B对照品;1阿魏酸;2洋川芎内酯Ⅰ ;3洋川芎内酯 H;4阿魏酸
松柏酯;5洋川芎内酯 A;6丁基酜内酯;7E-藁本内酯;8Z-藁本内
酯;9Z-丁烯基酞内酯;10 levistolideA
图 6　当归炭饮片 HPLC色谱图
表 2　14批当归炭样品指纹峰以阿魏酸计相对含量测定结果
mg· g-1
样品
量 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 总量
t8 0.54 0.51 0.09 0.05 0.29 0.09 0.75 8.84 0.15 0.12 11.44t9 0.74 0.68 0.41 0.14 0.26 0.18 0.44 5.48 0.11 0.12 8.57
t10 0.83 0.68 0.59 0.70 0.12 0.66 0.35 7.15 0.20 0.12 11.42
t11 0.80 0.50 0.64 0.12 0.19 0.08 0.34 3.77 0.23 0.10 6.77
t12 0.65 0.66 0.39 0.15 0.20 0.16 0.45 4.99 0.25 0.10 8.01t13 0.68 0.62 0.33 0.14 0.36 0.20 0.53 6.42 0.11 0.10 9.49
t14 0.60 0.52 0.15 0.11 0.19 0.04 0.26 3.64 0.13 0.10 5.73
t1 0.75 0.92 0.52 0.15 0.36 0.29 0.57 7.34 0.38 0.10 11.38
t2 0.47 0.35 0.07 0.06 0.27 0.08 0.52 5.99 0.25 0.09 8.15t3 0.88 0.75 0.51 0.12 0.17 0.08 0.33 3.98 0.21 0.12 7.15
t4 0.55 0.13 0.44 0.08 0.31 0.23 0.32 3.75 0.24 0.13 6.18
t5 0.51 0.34 0.06 0.03 0.18 0.16 0.33 5.22 0.33 0.11 7.26
t6 0.75 0.59 0.43 0.06 0.28 0.26 0.36 5.29 0.23 0.10 8.37t7 0.85 0.47 0.32 0.08 0.18 0.06 0.35 4.27 0.18 0.13 6.88
平均 0.69 0.55 0.35 0.14 0.24 0.18 0.42 5.44 0.21 0.11 8.34
计算方法:以基准峰计指纹峰含量 =(指纹峰峰面积 /基准
峰峰面积)×基准峰含量
当归炭饮片作为多组分复杂体系 ,其化学成分经过炒炭以后
发生了很多变化 , 如宋金春 [ 9]报道 , 制炭后 , 阿魏酸含量显著降
低 , 鞣质显著增加 , 水溶性和醇溶性成分均有下降 , 加上药材品
种 、产地 、加工 、贮藏等因素的影响 , 其质量控制一直是当归炭饮
片分析的重点和难点。目前对当归炮制品的研究大多停留在饮
片的性状鉴别 , 2005版《中国药典》上只是规定了酒当归饮片的
性状 , 没有化学成分的鉴别方法 , 无法从化学组分的内在因素上
鉴定当归炮制品以控制其质量 ,且对当归药材只规定了阿魏酸含
量的限度 , 也不能代表整个药材的质量 [ 10] , 同时市场上能形成商
品的对照品数量较少 , 一味药多成分定量就成为质量分析的难
点。本研究针对以上问题 ,在分析出的组分中尽可能多地选取含
量测定对象 , 选择一个能代表某味药材的组分色谱峰 , 然后再选
择其他各味药材代表峰 , 并对代表峰与标准峰比值作一限度范
围 , 即可对所要检测中药做出一个较好的定性定量 ,以此来控制
制剂的质量 [ 11] 。本文采用以阿魏酸单一对照品为基准对多指标
成分定量分析方法 ,测定洋川芎内酯 I、洋川芎内酯 H、阿魏酸松
柏酯 、洋川芎内酯 A、丁基酜内酯 , E-藁本内酯 、Z-藁本内酯 、Z
-丁烯基酞内酯 、levistolideA10种成分以阿魏酸计的相对含量 ,
这样可以全面控制当归炭饮片的质量 ,提高当归炭饮片质量控制
水平 , 为其质量评价提供科学依据 , 同时为当归炭饮片的生产 、经
营及鉴定提供了参考标准。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005.
[ 2 ] 　黄伟晖 ,宋纯清.当归的化学和药理学研究进展 [ J].中国中药杂
志 , 2001, 26(3):147.
[ 3 ] 　席淑华 ,石延榜.当归的炮制及有效成分研究 [ J] .中国现代药物应
用 , 2008, 2(4):50.
[ 4 ] 　甘肃省卫生厅.甘肃省中药炮制规范 [ M].兰州:甘肃人民出版社 ,
1999:53.
[ 5 ] 　LuGH, KelvinC, LiangYZ, etal.Developmentofhighperformance
liquidchromatographicfingerprintsfordistinguishingChineseAngelica
fromrelatedUmbelliferaeherbs[ J] .JChromatogrA, 2005, 1073:
383.
[ 6 ] 　YiT, ZhangH, XieJ, etal.Anewprocedureforthepreparative
separationandisolationofZ-ligustilidefromtherootsofAngelica
sinensis[ J] .JSepSci, 2007, 30:1973.
[ 7 ] 　YiT, KelvinL, LuGH, etal.Comparativeanalysisofligusticum
chuangxiongandrelatedumbelliferousmedicinalplantsbyhighper-
formanceliquidchromatographyelectrosprayionizationmassspectrome-
try[ J] .PlantaMed, 2007, 73:392.
[ 8 ] 　YangF, XiaoYS, ZhangFF, etal.Highperformanceliquidchroma-
tography2massspectrometryanalysisofRadixAngelicaSinensis[ J] .
ActaPharmSin, 2006, 41:1078.
[ 9 ] 　宋金春 ,胡传芹 ,刘　红 ,等.炮制对当归药材有效成分的影响 [ J] .
中国药学杂志 , 2007, 42(14):1052.
[ 10]　李晓光 ,陈志霞.中药质量标准研究方法与思路 [ J] .山东中医药大
学学报 , 2001, 25(5):235.
[ 11]　洪筱坤 ,王智华.色谱指纹谱在中药质量标准研究中的应用 [ J] .中
成药 , 2001, 23(3):157.
欢迎您订阅 2011年 《环球中医药 》杂志
《环球中医药 》是由中华人民共和国卫生部主管 , 中华国际医学交流基金会主办 , 国内外公开发行的中医药学术期
刊。本刊以 “立足科技前沿 ,贴近临床 , 服务读者”为宗旨 , 以 “打造科学性 、思想性 、可读性俱佳的中医学术期刊”为编辑方
针。本刊已被中国知网 、万方数据 、维普资讯 、美国《化学文摘》和美国 ProQuest数据库等收录。
王永炎院士任名誉总编辑 ,张伯礼院士任总编辑。陈可冀 、郭应禄等 7名两院院士 , 100多名国内外著名中医药专家分
别担任杂志顾问 、编委或领导职务。本刊在重点反映科研成果与临床进展的同时 , 强调学术思考与海内外信息交流。主要
栏目有:述评 、论著 、临床经验 、中医病案析评 、学术争鸣 、硕博园地 、海外中医 、循证医学与中医药 、中医文化 、名医心鉴 、中药
研究 、针灸推拿 、病例讨论 、讲座 、综述 、中医护理 、中医院管理 、中医药热点 、信息之窗等。
欢迎订阅《环球中医药》杂志。国内统一刊号:CN11-5652/R, 国际标准刊号:ISSN1674-1749。本刊为双月刊 , 单月 6
日出版 , 16开 ,正文 80面 ,每册 10元。接受邮局订阅或杂志社邮购。
《环球中医药》杂志真诚向国内外中医药学者和其他传统医药学者和其他传统医药学者征求稿件。本刊 2010年来稿免
收稿件处理费。欢迎浏览本刊网站 www.hqzyy.com, 可以免费下载阅读本刊过刊文章 , 并了解本刊稿约和学术活动。
收稿邮箱:hqzhyy@163.com
通讯地址:北京市东城区东四西大街 46号红楼 597室　100711
电话:010-65133322转 1597　传真:010-65269860
·2158·
时珍国医国药 2010年第 21卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.9