全 文 :第 26卷第 5期 西 南 农 业 大 学 学 报 (自然科学版) Vol.26 , No.5
2004年 10月 Journal of Southwest Agricultural University(Natural Science) Oct.2004
文章编号:1000-2642(2004)05-0601-02
甜魔芋愈伤组织诱导与植株再生研究
苏承刚 ,张兴国*
(西南农业大学 园艺园林学院 , 重庆市蔬菜学重点实验室 , 重庆 400716)
摘要:以甜魔芋球茎为外植体 , 进行愈伤组织诱导 、芽分化及植株再生研究。结果表明:球茎在 MS 附加 1.5 mg/LBA
和 1.5 mg/ LNAA的培养基中 , 愈伤组织诱导率达 100%;在 MS 附加 1.0~ 1.5 mg/ LBA和 0.2 mg/ LNAA 分化培养
基中 ,其分化率达 90%以上;不定芽在生根培养基MS 附加 0.5 mg/ L BA和 0.2 mg/ LNAA上 , 能 100%生根形成完整
的植株。
关 键 词:甜魔芋;愈伤组织;芽分化;植株再生。
中图分类号:Q 943.1 文献标识码:A
ST UDIES ON CALLUS INDUCTION AND PLANT REGENERATION OF AMORPHOPHALLUS SP
SU Cheng-gang , ZHANG Xing-guo*
(Key Lab in O lericulture of Chongqing , College of Horticulture , Southwest Ag ricultural University , Chongqing 400716 , China)
Abstract:The corm of Amorphophallus sp.was used as explants for callus induction , bud differentiation and plant regeneration.It
show ed that the corms give a callus induction frequency of 100%w hen cultured on MS medium supplemented with BA 1.5 mg/ L and
NAA 1.5 mg/ L.Bud differentiation rate of more than 90% w as obtained w hen cultured on MS medium supplemented with BA 1.0~
1.5 mg/ L and NAA 0.2 mg/ L.All adventitious buds rooted and formed whole plants in the roo ting medium(MS medium supplement-
ed with BA 0.2 mg/ L and NAA 0.5 mg/ L).
Key words:Amorphophallus sp.;callus induction;bud differentiation;plant regeneration
甜魔芋(Amorphophallus sp.)是一种只含淀粉
(基本不含葡甘聚糖)的 、可以直接煮食菜用的魔芋
种 ,在我国的云南和广西南部有少量分布。由于植被
的破坏 ,加之自然繁殖缓慢 ,该资源逐年减少 ,利用上
存在困难。本研究用其球茎进行愈伤组织诱导及植
株再生研究 ,以期扩大数量 ,加快对它的开发利用 。
1 材料与方法
选取甜魔芋球茎 ,自来水冲洗干净 ,在超净工作
台上去除表皮 , 用 75%的乙醇浸泡 30 s 后 , 转入
0.1%氯化汞溶液中浸泡 15 min左右 ,用无菌水漂
洗 4 ~ 5次后 ,将球茎切成长宽 0.5 cm 见方小块 ,接
种于 MS 培养基上 , 附加不同浓度配比的 BA 和
NAA ,3%的蔗糖 、0.65%的琼脂 ,调 pH 至 5.8 。接
种后 ,暗培养 2周 ,以减少褐变 。芽分化阶段用 40 W
日光灯照 14 h/d ,温度为 25±2℃。每个月调查记录
1次生长情况 。
2 结果与分析
2.1 激素对愈伤组织的诱导与形成的影响
球茎组织块接种于愈伤组织培养基上 , 20 d 开
始在靠近培养基一面形成愈伤组织化 , 30 d 后在外
繱收稿日期:2004-03-09
基金项目:重庆市科委自然科学基金资助项目
作者简介:苏承刚(1964-),男 ,重庆江津人 ,西南农业大学高级实验师 ,从事蔬菜生物技术研究。
*为通讯作者
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2004.05.022
植体靠近培养基的一面形成瘤状愈伤组织。组织结
构紧实的转入芽分化培养基中进行芽分化。
试验结果(表 1)表明:激素 BA , NAA 在 0.5 ~
2.5 mg/ L 浓度范围内 ,都能形成愈伤组织 ,但愈伤组
织的形成快慢 、结构紧实度以及诱导率与激素 BA ,
NAA 的浓度配比有关。随着 BA ,NAA 浓度的增加 ,
愈伤组织诱导率由低-高-低 ,过高过低的浓度都不
利于愈伤组织的形成 。根据愈伤组织形成快慢 、结构
紧实度以及诱导率进行分析比较 ,筛选出的适宜于甜
魔芋球茎愈伤组织诱导的培养基为 MS + BA 1.5
mg/L +NAA 1.5 mg/L , 其愈伤组织诱导率达到
100%。
2.2 激素与芽分化
将愈伤组织接入分化培养基中 , 15 d后变得更
紧实 ,在瘤状组织突出部分产生绿点 ,并形成小芽。
芽的分化与激素种类及浓度配比有关 ,试验结果(表
2)表明:激素 6-BA ,NAA 对甜魔芋芽分化有明显促
进作用 ,但因激素的配比不同而芽的分化率及生长情
况不同 。在 NAA 0.2 mg/L 时 ,随着 6-BA 浓度的
增加 ,愈伤组织芽分化率由低-高-低 ,过高过低的
6-BA都不利于芽分化。对不同配方培养基的芽分
化率及芽生长情况进行分析比较优化组合 ,筛选出适
宜分化芽的培养基是 MS +BA 1.0 ~ 1.5 mg/L +
NAA 0.2 mg/L ,其芽分化率达 90%以上。
表 1 激素对外植体愈伤组织形成的影响
Table 1 Ef fects of hormone on the callus induct ion of explants
植物激素/(mg·L-1)
Phytohormones
BA NAA
接种数/块
Inoculated number
愈伤组织诱导率/ %
Callus induction rate
0.5 0.5 30 83.3
1.0 1.0 30 96.7
1.5 1.5 30 100.0
2.0 2.0 30 100.0
2.5 2.5 30 86.6
表 2 激素对愈伤组织芽分化的影响
Table 2 Ef fects of hormone on the buds dif ferentiation
植物激素/(mg·L -1)Phytohormones
BA NAA
接种数/块
Inoculated number
分化总芽数
t otal buds
平均每块芽数
buds per explant
芽分化率/ %
Bud di fferent iation Rate
0.1 0.2 25 4 0.16 16
0.5 0.2 25 23 0.92 44
1.0 0.2 25 38 1.52 92
1.5 0.2 25 53 2.15 96
2.0 0.2 25 49 1.96 88
2.5 0.2 25 47 1.88 84
2.3 根的诱导及植株再生
从培养 30 d左右 ,高 2 ~ 3 cm 的丛生状芽块上
切下单个芽 ,转接于生根培养基MS +NAA 0.2 mg/
L+BA 0.5 mg/L 上 , 1周后开始在芽基部有锥状突
起 ,20 d所有芽都长出 2 cm 左右的不定根 ,同时 ,叶
片从鳞片中伸出 ,并展开形成完整植株 。
2.4 试管苗的练苗及移栽
当试管苗长出多条根 ,叶片从鳞片中伸出 ,并展
开叶时 ,将封口膜打开 ,练苗 1周后就可以移栽。移
栽时用自来水冲洗根上的培养基 ,再栽植于已消毒的
营养土中 ,并浇水 ,用塑料薄膜盖上保持湿度 ,其成活
率达 95%以上。
3 讨论
激素 BA ,NAA不同浓度配比对甜魔芋的愈伤组
织的诱导 、芽分化 、增殖 、生根有明显的作用。试验结
果表明:球茎在 MS+6-BA 1.5 mg/L +NAA 1.5
mg/L 培养基中 ,能 100%形成愈伤组织 ,组织结构紧
实 ,适宜芽分化。当 NAA 0.2 mg/L , BA在 1.0 ~ 2.
5 mg/L 时 ,愈伤组织都能分化出 1 ~ 2个不定芽 ,适
宜芽分化及增殖培养基为:MS +BA 1.5 mg/L +
NAA 0.2 mg/L ,分化率达 90%以上;芽在生根培养
基 MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L 上生根率达
100%。甜魔芋由球茎 、愈伤组织诱导和继代培养 、芽
分化 、生根形成完整植株 ,整个过程需 2个月左右 ,能
在较短的时间里获得大量试管苗 ,达到快繁目的。
参考文献:
[ 1] 张兴国.魔芋组织培养研究[ J] .西南农业大学学报 ,
1988 , 10(6):345-349.
[ 2] 孔凡伦 , 肖 亮 , 王爱霞.白魔芋组织培养和植株再生
[ J] .植物生理学通讯 , 1986 , (1):41.
[ 3] 张征兰 ,黄建超 , 金 聿.魔芋组织培养与植株再生研究
[ J] .华中农业大学学报 , 1986 , 5(3):224-227.
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