全 文 ：热带农业科技 2007，30（2）
Tropical Agricultural Science & Technology
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心叶球兰组织培养与快速繁殖试验
管 艳，肖三元，梁国平
（云南省热带作物科学研究所，云南 景洪 666100）
摘 要 ：以心叶球兰叶片为外植体，愈伤组织诱导和继代增殖培养基 MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+2,4-D1.0
mg·L-1+GA1.0mg·L-1+白糖 3%，诱导的愈伤组织多，生长旺盛，增殖倍数为 2～3倍；丛芽诱导培养基 MS+KT0.5
mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+GA1.0mg·L-1+白糖3%,芽的诱导率为79.3%；在丛芽增殖及复壮培养基1/2MS+IBA1.0mg·L-1+白
糖2%上，有20%～30%玻璃化丛芽转为绿色苗，玻璃化单芽经复壮培养长成绿色苗；诱导生根培养基为1/2MS+IBA0.5
mg·L-1+白糖2%,玻璃化生根率为56.4%，淡绿色苗生根率达91.1%。瓶苗移栽基质泥炭土∶珍珠岩∶甘蔗渣（1∶1∶1）的
成活率最高，达91.4%。
关 键 词：心叶球兰； 组织培养； 快速繁殖；玻璃化苗
中 图 分 类 号：S682.2　文 献 标 识 码：B　文 章 编 号：1672-450X（2007）02-0041-03
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Hoya kerrii in Vitro and Its Rapid Propagation
GUANG Yan, XIAO Shan-yuan, LIANG Guo-ping
Yunnan Institute of Tropical Crops, Jinghong 666100, China
Abstract:Take the leave of Hoya kerrii as explant, the optimum medium for more induce callus and inherit multiplication was MS+6-BA
2.0mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+GA1.0 mg/L+3% sugar, with strong growth and 2-3 times of proliferation; Induction of cluster bud
reaches to 79.3% in the medium of MS+KT0.5mg/L+NAA0.5mg/L+GA1.0mg/L+3% sugar; Vitrification of shoots in the medium for
proliferation and regenation of1/2MS+IBA1.0mg/L+2% sugar turned to green one (20%-30%); Induction of roots is in medium of
1/2MS+IBA0.5mg/L+2% sugar, rooting rate of vitrification and light green shoots were 56.4% and 91.1% respectively.The survival rate of
bottle shoots in media of mud:pearlite:sugarcane waste (1:1:1) was the highest (91.4%).
Key words: Hoya kerrii; In vitro culture; rapid propagation; vitrification of shoots
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收稿日期：2006－11－10
心叶球兰（Hoya kerrii），又称腊兰、腊花、腊腺
花、凹叶球兰，为萝摩科球兰属肉质附生植物，原产
于泰国、老挝[1,2]。心叶球兰是近年来引进的一种新型
观赏植物，生长缓慢，耐旱、耐荫，适宜室内摆放观
赏，极具市场开发前景。常规繁殖方式是利用茎段扦
插，繁殖系数低，生长缓慢，对此，我们进行了心叶
球兰的组织培养与快速繁殖试验，现将试验结果报道
如下：
1　材料和方法
1.1　材料
供试材料为从泰国引进的心叶球兰，取生长健壮
的成熟叶片作外植体。
1.2　试验方法
1.2.1　外植体愈伤组织诱导
将心叶球兰叶片材料用饱和洗涤剂浸泡5～
10min，经自来水冲洗10～15min，然后用75%乙醇
浸泡30s，无菌水冲洗一次，再用0.1%HgCl2浸泡10～
15min，最后用无菌水冲洗4～5次，滤干水分。在无
菌状态下，将经表面灭菌的材料切成1.0cm2 左右的小
块，分别接种于A1: MS+6-BA2.0mg·L-1+ NAA0.5
mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+GA1.0mg·L-1+白糖3%；A2：
MS+6-BA1.0mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1+
2,4-D1.0mg·L-1+白糖3%；A3：MS+6-BA2.0
mg·L-1+KT2.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1+2,4-D1.0
mg·L-1+白糖3%等3种处理的诱导培养基中。
1.2.2　愈伤组织增殖培养
将培养45～50d的愈伤组织块切下，分别转接在
B1：Ms+6-BA2.0mg·L-1 +NAA0.5mg·L-1+2,4-D1.0
mg·L-1+GA1.0mg·L-1 +白糖3%；B2：Ms+6-BA1.0
mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1+2,4-D0.5
mg·L-1+白糖3%；B3：Ms+6-BA2.0mg·L-1+NAA1.0
mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+白糖3%等3个不同处理的
愈伤组织继代增殖培养基中。
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1.2.3　丛芽诱导
将亮绿色紧密的愈伤组织切成1.0cm3左右的团
块，分别转接在以MS+NAA0.5mg·L-1+GA1.0
mg·L-1+白糖3%为对照，再分别附加不同细胞分裂
素6-BA、KT、ZT各0.5mg·L-1的4种处理培养基中。
1.2.4　丛芽增殖及复壮
将带有少量愈伤组织的玻璃化丛芽转接在
1/2MS+IBA1.0mg·L-1 +白糖2%的培养基中，培养40～
45d，观察丛芽增殖和玻璃化芽复壮情况。
1.2.5　生根培养
将玻璃化单芽和淡绿色单芽分别转接在生根诱导
培养基中，以1/2MS+白糖2%为基本培养基，分别附
加生长素IBA1.0mg·L-1、NAA1.0mg·L-1、IAA1.0
mg·L-1和IBA（0.5、1.5、2.0mg·L-1）。以上培养基
均附加琼脂粉5g·L-1， pH5.8。培养室温度（27±2）
℃，光照强度1 000～1 500 lx，光照时间10h·d-1左
右。
2　结果与分析
2.1　不同处理对外植体愈伤组织诱导的影响
培养10d后，材料切口处开始膨大呈淡绿色，20d
后开始产生愈伤组织，40d后A1、 A2 、A3处理的愈伤
组织诱导率分别为88.5%，67.5%，41.7%。A1培养基
诱导的愈伤组织大，生长旺盛，呈绿色团块。A3培养
基多数外植体产生的愈伤组织小，生长慢。
2.2　不同处理对愈伤组织继代增殖培养的影响
继代增殖的愈伤组织培养30d后，B1、B2、B3三
种处理中均形成2种质地的愈伤组织，一种为亮绿色
紧密颗粒状组织，一种为亮黄色疏松颗粒状组织。前
一种愈伤组织有分化芽的能力，而后一种愈伤组织没
有分化能力，培养50～60d后逐渐褐变死亡。B1培养
基中的愈伤组织生长旺盛，增殖2～3倍，而在B2、B3
培养基中愈伤组织生长较慢，增殖1～2倍。
2.3　不同细胞分裂素对诱导丛芽分化的影响
在4种丛芽诱导培养基中，愈伤组织增殖1～2倍
后基本不再增殖，30d后直接从愈伤组织上分化出2～
4个芽点，随后大部分长成玻璃化的苗（仅有10%的
为正常苗）。玻璃化苗叶、茎呈透明或半透明状，失
绿，叶片肥厚卷曲，最后变黄脱落。
培养50d后（表1），4种处理中以KT芽的诱导
率最高，达79.3%，其次是6-BA、ZT，分别为54.0%、
43.7%，CK诱导率最低，为18.3%。在丛芽分化过程
中同样出现2种质地的愈伤组织，一是亮绿色紧密组
织分化出芽或芽丛；另一种最初是亮绿色紧密组织，
但在培养过程中逐渐转变成亮黄色疏松组织，不分化
芽，并且逐渐褐变死亡。
2.4　丛芽增殖及复壮
培养40～45d的玻璃化丛芽基部密集叶腋处或愈
伤组织上，又分化出3～6个新的玻璃化丛芽，而原来
的玻璃化芽逐渐伸长2～5cm，1～2个节，无叶，其
中有20%～30%的从顶部往下渐转为淡绿色苗。
把长2cm以上的玻璃化或淡绿色丛芽分切成单芽
转接在相同的新鲜培养基中，培养40～45d，芽伸长
3～5cm，为绿色或淡绿色苗，长出1片绿色叶片，茎
粗壮，有2～3节，其中约有10%的苗长出1～2条根。
2.5　生根诱导
培养40d后（表2），玻璃化苗和淡绿色苗在附加
IBA的培养基中生根率最高；其次是IAA，根从愈伤
组织中产生，黄褐色，易断；NAA不生根。在培养过
程中，在3种培养基中均产生愈伤组织：IBA形成愈
伤组织少，呈褐色；IAA多呈亮褐色；NAA最多，呈
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透明状。从苗的长势来看，IBA中玻璃化苗转为淡绿
色或绿色，淡绿色苗转为绿色，其上部仍为淡绿色，
有少量苗倒伏。NAA中玻璃化苗不变，上部苗茎肥粗，
倒伏。IAA中玻璃化苗从苗基部起2/3为淡绿色，1/3
为绿色，淡绿色苗从苗基部起1/3为淡绿色，2/3为绿
色。IBA不同浓度培养基培养50天后的试验结果（表
3）表明：低浓度（0.5mg·L-1）的诱导玻璃化苗和淡
绿色苗生根率最高，无愈伤组织产生，长0.5～1.5片
绿色叶，1～3条白色的根，根长1.0～3.0cm。随着IBA
浓度的增高，生根率逐渐下降，产生褐色的愈伤组织
量逐渐增多，叶片数下降，根1～2条，为白色、浅褐
色至褐色，根短，容易脱落。
2.6　移栽
将瓶苗放置在自然散射光下炼苗一周，取出瓶苗
洗净附着在根部的培养基，移栽至4种不同的混合基
质（表4）中，浇足定根水，置于荫蔽度为80%的荫
棚下，湿度保持在60％～70%。60d后调查成活率。
试验结果（表4）：以泥炭土∶珍珠岩∶甘蔗渣（1∶
1∶1）的混合基质最好，移栽成活率为91.4%，长出
0.5～ 1.0片新叶；而泥炭土∶珍珠岩（1∶1）混合基
质的排水性较差，成活率仅为57.7%。
3　讨论
本项试验结果，心叶球兰成熟叶片为外殖体组培
的愈伤组织诱导和增殖培养基，以MS+6-BA2.0
mg·L-1+ NAA0.5mg·L-1+2,4-D1.0+GA1.0 mg·L-1+白
糖3%为好（诱导率88.5%；增殖2～3倍）；加入KT
的MS+KT0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+GA1.0mg·L-1+
白糖3%的丛芽诱导率最高，达79.3%；玻璃化苗在
1/2MS+IBA1.0 mg·L-1培养基上有20%～30%转变为
绿色苗；生根培养基1/2MS+IBA0.5 mg·L-1+白糖2%
的生根率较高，玻璃化苗为56.4%。淡绿色苗为91.1%;
瓶苗移栽基质泥炭土∶珍珠岩∶甘蔗渣（1∶1∶1）的
成活率最高，达91.4%。
试验观察到，所诱导的愈伤组织有两种形态：一
种为亮绿色紧密颗粒状组织，有分化芽的能力；另一
种是亮黄色疏松颗粒状组织，没有芽分化能力。
试验还观察到，加入NAA1.0 mg·L-1的生根培养
基，对玻璃化苗和深绿色苗均不能刺激生根，玻璃化
苗亦不能转为深绿色、绿色，与加其它生长素培养基
上的表现不同。丛芽分化培养基中有NAA（0.5
mg·L-1），分化出的均为玻璃化苗。由此看来，也许
NAA及其使用浓度是心叶球兰组培产生玻璃化苗的一
个重要因素。
参考文献：
[1] 薛聪贤. 补遗·新品种180种［M］. 北京：北京科学技术
出版社，2002： 9.
[2] 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志：第36卷
［M］．北京：科学出版社，1997：484.