全 文 ：吉林农业大学学报　2005 ,27(6):643 ～ 644 ,648
Journal of Jilin Agricultural University
笃斯越橘果实中黄酮类化合物的分离鉴定
杨桂霞1 , 范海林1 , 郑毅男2 , 李亚东3
(1.吉林农业大学资源与环境学院 , 长春 130118;2.吉林农业大学中药材学院 , 长春 130118;
3.吉林农业大学园艺学院 , 长春 130118)
摘　要:采用柱色谱技术对笃斯越橘(Vaccinium uliginosum L.)果实中黄酮类化合物进行分离 、提纯。分离提
纯出 3 种黄酮类化合物 ,并通过1H-NMR、13C-NMR等表征了结构。结果表明:这 3 种化合物分别为二甲花
翠素-3-O-葡糖苷(Ⅰ), 矢车菊-3-O-半乳糖苷(Ⅱ),杨梅黄素(Ⅲ), 均为首次从该果实中分离得到。
关键词:笃斯越橘;果实;黄酮类化合物
中图分类号:R284.2　　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-5684(2005)06-0643-02
Separation and Identification of the Flavoniods in the Fruit
of Vaccinium uliginosum L.Blueberry
YANG Gui-xia1 , FAN Hai-lin1 , ZHENG Yi-nan2 , LI Ya-dong3
(1.College of Resources and Environmental Science , Jilin Agricultural University , Changchun 130118 ,
China;2.College of Chinese Medicinal Material , Jilin Agricultural University , Changchun 130118 ,
China;3.College of Horticulture , Jilin Agricultural University , Changchun 130118 , China)
Abstract:The flavonoids in the fruit of Vaccinium uliginosum blueberry were separated and purified by
column chromatographic techniques.The structures of the three compounds were identified by 　1H -
NMR , 13C -NMR spectroscopic.They were malvinin-3-O-glucoside (Ⅰ), cyanidine-3-O-galactoside
(Ⅱ)and myricetin(Ⅲ), respectively.The three compounds were isolated from this fruit for the first
time.
Key words:Vaccinium uliginosum L.;fruit;flavoniods
　　笃斯越橘(Vaccinium uliginosum L.)为杜鹃花
科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium spp.)植物 。通常
越橘以叶 、果入药 ,其叶苦 、涩 、温 、有小毒 ,具有利
尿 、解毒等功效;其果酸 、甘 、平 ,可止痢[ 1] 。相关研
究显示:越橘果中水溶性的花色素苷有很强的抗
氧化活性 ,可抗自由基 、延缓衰老 、防止细胞蜕变 ,
可以抑制血小板聚集 ,有效预防大脑病变 、动脉硬
化等病症。花色素类物质还有治疗和预防各类眼
科疾病的功效。25%的花色素苷提取物已经被收
入法国药典[ 2-4] 。笃斯越橘是我国野生越橘的主要
种之一 ,东北地区资源丰富[ 5-6] 。为进一步开发和
利用这一宝贵的野生资源 ,笔者对其果实的化学
成分进行了研究 ,首次从中分离提纯出3个黄酮类
化合物。经理化分析和波谱鉴定 ,分别为矢车菊-
3-O-半乳糖苷(cyanidine-3-O-galactoside)、二甲花翠
素-3-O-葡萄糖苷(malvinin-3-O-glucoside)、杨梅黄
素(myricetin)。这一结果可为笃斯越橘的进一步开
发利用提供科学依据 。
1　材料与方法
1.1　试验材料 、仪器
笃斯越橘的成熟果实于2002年7月采自内蒙

通讯作者
基金项目:科技部成果转化基金资助项目(03EFN212200077)
作者简介:杨桂霞(1970-),女 ,在读博士 ,讲师 ,研究方向:天然产物的活性成分。
收稿日期:2005-02-24
DOI :10.13327/j.j jlau.2005.06.014
古大兴安岭呼伦贝尔盟鄂伦春自治旗 ,经吉林农
业大学园艺学院李亚东教授鉴定为笃斯越橘 。
电喷雾质谱仪(ESI-MS ,美国 Finngan MAT
公司), INOVA-500型核磁共振波谱仪(美国Vari-
an 公司 ,TMS为内标),X-4型数字显示显微熔点
测定仪(北京泰克仪器有限公司),BSZ 系列自动
部分收集器(上海青浦扈西仪器厂),Sephadex LH
-20(Phermacia公司),聚酰胺薄膜(浙江黄岩化学
实验厂),Amberlite XAD-7树脂(美国罗门哈斯公
司)。其它试剂均为分析纯 。
溶剂系统:(1)V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=
65∶35∶10;(2)V(正丁醇)∶V(乙酸)∶V(水)=40∶
10∶50;(3)V(正丁醇)∶V(乙醇)∶V(水)=10∶40∶
50。
1.2　提取与分离方法
粗称冷冻笃斯越橘果1 kg ,用0.1 %HCl的甲
醇溶液3 L 浸泡提取 ,共提取3次 ,每次24 h ,合并
提取液减压浓缩至小体积。取浓缩液上 Ambeilter
XAD-7 树脂柱 ,水洗除杂质 ,用α-萘酚和浓硫酸
检识至阴性时 ,用甲醇洗脱到颜色很浅 ,收集并浓
缩甲醇洗脱液得提取物 A 。用乙酸乙酯对提取物
A进行多次萃取 ,萃取液浓缩得棕黄色水不溶物
质 B 和水相剩余物质 C , 再将 B 、C 分别通过
Sephadex LH-20柱层析 。C用20 %甲醇溶解上样 ,
用20%～ 60%甲醇梯度洗脱 , 部分收集器收集
(5 mL/20 min),聚酰胺薄膜和硅胶板的 TLC结果
显示 Rf值相同部分合并 ,得化合物 Ⅰ(25 mg)、化
合物 Ⅱ(34mg)。B用60%甲醇溶解上样 ,用60%～
100%甲醇梯度洗脱 , 部分收集器收集(3 mL/
15 min),聚酰胺薄膜 TLC 显示 Rf 值相同部分合
并 ,并用甲醇重结晶 ,得化合物 Ⅲ(32 mg)。
2　结构鉴定结果
2.1　化合物 Ⅰ
紫红色粉末 ,m.p.=178 ～ 180 ℃,能溶于水 ,
易溶于甲醇 、乙醇 ,难溶于乙酸乙酯 ,酸性溶液中
显鲜红色 ,碱性溶液中显棕色 —蓝色 ,提示为花色
素类物质 。薄层层析分析:使用3种溶剂系统展开 ,
聚酰胺薄膜均显示单一斑点。ESI-MS分析结果:
m/z 493(C23H25O12)[ M-Cl ] 、碎片峰331[M-
162-Cl] ,提示含有1分子单糖 ,化合物 Ⅰ分子量
为528。1H-NMR(500 Hz , 0.1 %TFA-CD3OD)δ:
aglycone 9.012 (s , 4-H), 7.966 (s , 2H , 2′-H , 6′-
H),6.959 (s ,8-H),6.652(s , 6-H),4.107(s ,6H ,
3′、5′—OCH3);glucose 5.353 (d , J =7.5 Hz , 1-
H)。13C-NMR(125 Hz , 0.1% TFA-CD3OD)δ:agly-
cone 170.604(7-C), 163.829(2-C), 149.708(3′-C ,
5-C), glucose 103.863(1″-C), 78.905 , 78.203 ,
75.022 , 71.185 , 62.373(6″-C), 57.277(—OCH3)。
综合分析上述理化性质和波谱数据 ,与文献[ 7]中
二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷数据一致 ,鉴定其为二
甲花翠素-3-O-葡萄糖苷。
2.2　化合物 Ⅱ
红色粉末 ,m.p.=181 ～ 183 ℃,溶于水 ,易溶
于甲醇 ,难溶于乙酸乙酯 。酸性水溶液中显鲜红
色 ,碱性水溶液中显棕色 —蓝色 ,提示可能为花色
素类物质 。薄层层析分析:使用3种溶剂系统展开 ,
聚酰胺薄膜均显示单一斑点 。FAB - MS:m/z
449(C21H21O11)[ M -Cl] 、主要碎片峰287[ M -
162-Cl] ,提示含有1分子单糖 ,化合物分子量为
485。1H-NMR(500 Hz , 0.1%TFA-CD3OD)δ:agly-
cone 8.987(s , 4-H), 8.24(dd , J =2.0Hz , J =
2.0 Hz ,6′-H),8.045(d J =2.0 Hz ,2′-H), galactose
5.254(d , J =7.5 Hz ,1-H),4.001(t , J =9.0 Hz ,2-
H)。13C-NMR(125 Hz ,0.1 %TFA-CD3OD)δ:agly-
cone 170.611(7-C), 164.165(2-C), 95.154 (8-C),
159.244 (5-C), 147.359 , 145.627 , 136.831 ,
128.203 , 121.253 , 118.415 , 117.406 , 113.395 ,
103.348 , galactose 102.715(1′-C), 77.768 , 76.815 ,
74.831 ,70.101 ,62.167(6″-C)。以上理化性质和波
谱数据与文献[ 8]中矢车菊-3-O-半乳糖苷数据一
致 ,鉴定为矢车菊-3-O-半乳糖苷。
2.3　化合物 Ⅲ
黄色针状晶体(稀乙醇), m.p.=355 ～
357 ℃,不溶于水 ,易溶于甲醇 ,溶于乙酸乙酯 。盐
酸镁粉实验显鲜红色 ,氢氧化钠溶液中显蓝绿色 ,
提示为有邻位羟基的黄酮醇。ESI-MS:m/z 317
(C15H9O8)[M -H] ,化合物的分子量为318。1H-
NMR(500 Hz ,CD3OD)δ:6.36(d , J =7.5 Hz ,6-H),
6.17(d , J =6.0 Hz , 8-H), 7.228(s , 2H , 2′-H、6′-
H),12.484(s ,3-H);13C-NMR(125 Hz ,CD3OD)δ:
175.743 , 163.842 , 160.707 , 56.045 , 146.815 ,
145.693 , 135.844 , 120.754 , 107.129 , 102.949 ,
98.120 ,93.161。以上理化性质 、波谱数据与文献
[ 9]中杨梅黄素的数据一致 ,鉴定为杨梅黄素。
(下转第 648页)
644 　吉　林　农　业　大　学　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　2005年
比例依次为茎叶 17.3%、果肉 16.4%、花蕾
16.3%、花柄 16.3%、主根 4.1%。因此 ,最适从西
洋参的花蕾 、花柄中提取分离拟人参皂苷 F11 ,制
备标品。
表 1　西洋参不同部位中拟人参皂苷 F11的含量
Table 1.Content of pseudoginsenoside F11 in different
growing parts of American ginseng
部位
Part
w(P-F11)/ % w(P-F11/T.S)/ %
w(总皂苷)/ %
Content of
total saponins
花蕾
Flower
2.34 16.3 14.87
花柄
Footstalk
1.93 16.3 12.18
果肉
Fruit
1.54 16.4 9.67
茎叶
Leaf
0.97 17.3 5.79
根
Root
0.28 4.10 6.98
3　讨　论
人参 、西洋参和三七的化学成分基本相似 ,在
外观上也很难区分 ,三者经常造成混淆 。本试验
确立了西洋参中拟人参皂苷 F11的结构和提取分
离纯化方法 ,为西洋参及其制剂的定性定量提供
了标准品 。
试验中拟人参皂苷 F11的测定方法为薄层扫
描法 ,测定过程中要注意标准品和样品要作同板
测定 ,要做 3个以上的平行样 ,注意显色温度和均
匀性 ,下步试验可以采用高效液相色谱法来代替
薄层扫描法。
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(上接第 642页)
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(上接第 644页)
　　致谢:各样品1H-NMR , 13C-NMR光谱及结
构鉴定得到北京大学药学院杨秀伟教授的指导 ,
在此深表感谢。
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