全 文 ：北方园艺２０１６（０８）：８９～９２ ·生物技术·
第一作者简介：王大庆（１９６９－），男，博士，研究员，现主要从事农业
经济等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：１８３１８９６３７＠ｑｑ．ｃｏｍ．
收稿日期：２０１６－０２－１４
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０８０２５
绣线菊再生体系的建立
王 大 庆，张 娇
（黑龙江省农垦经济研究所，黑龙江 哈尔滨１５００３６）
摘 要：以金山绣线菊的茎尖、茎段、叶片、叶柄为外植体，以 ＭＳ培养基为基本培养基，在初
代、继代增殖和生根培养等不同阶段通过添加不同种类和浓度的激素进行对比试验，建立了适
宜金山绣线菊组织培养的再生体系。结果表明：诱导愈伤组织培养基为：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ
＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ，愈伤组织诱导不定芽培养基为：ＭＳ＋０．８ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋
０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，生根培养基为：１／２ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，腋芽增殖培养基
为：ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ。
关键词：金山绣线菊；组织培养；再生体系；优化
中图分类号：Ｓ ６８２．１＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０８－００８９－０４
金山绣线菊（Ｓｐｉｒａｅａ×ｂｕｍａｌｄａ‘Ｇｏｌｄｅｎ Ｍｏｕｎｄ’）
属蔷薇科绣线菊属灌木，产于河南、陕西、山东、江苏、浙
江等省，喜光也稍耐阴，不耐寒冷和干旱，耐修剪，且萌
芽萌蘖能力强，生态适应性一般。枝繁叶茂，复伞房花
序，花瓣粉红色，花期长，观赏性很强，是一种有很高应
用和观赏价值的园林植物。我国绣线菊属植物资源丰
富，也相继有学者对粉花绣线菊、绣球绣线菊等属内其
它品种进行了研究，但是目前很少开展对金山绣线菊的
深入研究工作［１－２］。１９７８年报道了日本绣线菊的组织培
养和快繁体系［３－４］；之后的中科院昆明植物研究所等几
个单位先后报道了椭圆叶绣线菊、粉花绣线菊等变种的
组培与快繁技术应用研究情况［５－８］；萤雅茹等［９］研究得出
了柳叶绣线菊由腋芽到成苗的各阶段培养基配方；张立
磊等［１０］以ＭＳ培养基为基本培养基，初步建立了金叶绣
线菊组培快繁模式，可见对于金山绣线菊组织培养的研
究不深入；刘慧民等［１１］的研究表明，金山绣线菊是绣线
菊家族中抗寒性和生态适应性都较弱的品种，因此，研
究构建金山绣线菊的组织培养再生体系可为金山绣线
菊进行分子生物学方面的研究（转基因、基因克隆、基因
沉默等）奠定理论基础［１２－１４］。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
试验材料选取东北农业大学园艺试验站温室和室
外露地栽培的金山绣线菊植株。
１．２ 试验方法
１．２．１ 外植体的选择与消毒 ４—５月选择晴朗无风天
气的上午，分别采集温室和露地栽植长势良好的金山绣
线菊当年新生枝的茎段、茎尖、叶片和叶柄作为外植体，
不定芽途径的外植体选择温室和室外露地栽培的生长
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ａｎｔｈｅｒ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｃａｂｂａｇｅ ａｎｄ Ｂ５ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ａｄｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ
ｓｕｃｒｏｓｅ，ａｇａｒ，２，４－Ｄ，６－ＢＡ，ｐｏｔａｔｏ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｉｍｅ ｉｎ ｗｅａｋ ｌｉｇｈｔ ｏｎ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｒｏｗｎｉｎｇ ａｔ
ｅｍｂｒｙｏ ａｎｄ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ａｄｄｉｎｇ ２，４－Ｄ ａｎｄ
ｌｏｗｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｇａｒ ｔｏ ｍｅｄｉｕｍ ａｔ ｅｍｂｒｙｏ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅ．Ａｔ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅ，ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ
ｂｒｏｗｎｉｎｇ ｗａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｌｏｎｇｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｉｍｅ ｉｎ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｇｈｔ，ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ５２．００％，３７．５０％，２３．９１％
ａｎｄ ２２．９２％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｂｒｏｗｎｉｎｇ ｗａｓ ２０．００％，１４．５８％，８．６９％ａｎｄ ８．３３％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ
ｔｉｍｅ ｏｆ ３，５，７ａｎｄ ９ｄａｙｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ３，５ａｎｄ ７ｄａｙｓ；ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ
ｓｕｃｒｏｓｅ，ａｇａｒ，ａｎｄ ｐｏｔａｔｏ ｈａｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｒｏｍｏｔｅｄ ｂｙ ６－ＢＡ，
ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｒａｔｅ ｏｆ ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｂｅｓｉｄｅｓ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｉｍｅ ｉｎ ｗｅａｋ ｌｉｇｈｔ，ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｏｔｈｅｒ
ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｂｒｏｗｎｉｎｇ ｗａｓ ｌｉｔｔｌｅ ｉｎ ａｌ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｔａｇｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｉｎｅｓｅ ｃａｂｂａｇｅ；ａｎｔｈｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｂｒｏｗｎｉｎｇ
９８
·生物技术· 北方园艺２０１６（０８）：８９～９２
健壮的金山绣线菊植株上带饱满腋芽的茎段，将其放入
烧杯中加入洗洁精在流水下冲洗３０～４５ｍｉｎ后，在无菌
操作台中进行外植体表面灭菌。将外植体放到７５％乙
醇中灭菌２０～３０ｓ，无菌水冲洗２次；将外植体放到加有
２滴吐温的升汞溶液中灭菌５～７ｍｉｎ，无菌水冲洗２～
３次；再将外植体放到２％ＮａＣｌＯ溶液中消毒３０～４０ｓ，
再用无菌水冲洗３次；将外植体用无菌滤纸吸干表面水
分，将叶片切割成０．５ｃｍ×０．５ｃｍ带有主脉的方块，茎
段和叶柄切成１．０～１．５ｃｍ长，准备接种。
１．２．２ 愈伤组织途径 愈伤组织的诱导采用在预试验
中对愈伤组织诱导效果最好的培养基：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ
６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ，将灭过菌切
割完成的外植体接种到上述培养基中，每种外植体接种
１５瓶，每瓶３株，每处理重复３次；１０ｄ后观察并记录各
外植体愈伤组织的萌发量及比例；３周后对比筛选出最
适宜的诱导愈伤组织外植体。不定芽分化和增殖培养
在无菌条件下，将金山绣线菊愈伤组织接种到愈伤组织
增殖培养基中：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．０３ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ，７ｄ后将增殖的愈伤组织接种到含有不同浓度
ＴＤＺ和ＮＡＡ的诱导分化不定芽的培养基中；附加ＴＤＺ
浓度分别为０．８、１．０、１．２ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ浓度为０．０５、
０．１０、０．１５ｍｇ／Ｌ，配成９组培养基配方，２周后观察记录
并统计不定芽诱导率，筛选出最佳诱导分化不定芽培养
基激素配方。生根培养为将长到３ｃｍ左右的芽接种到
添加有不同浓度６－ＢＡ和ＮＡＡ的１／２ＭＳ培养基上诱导
生根，分别添加６－ＢＡ浓度为０、０．２５、０．５０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ
浓度设置为０．５、１．０、２．０ｍｇ／Ｌ，观察不同激素浓度对幼
芽生根的影响，２周后记录各培养基配方生根数量及比
例，选出最佳生根培养基。
１．２．３ 腋芽途径 将灭过菌的茎段切割成长１．０～
１．５ｃｍ含有饱满腋芽的茎段，分别接种到添加激素浓
度６－ＢＡ ０．５、１．０、２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ ０．１、０．２、０．３ｍｇ／Ｌ
的９组培养基中，每处理接种１５瓶，每瓶３个茎段。每
处理重复３次。７ｄ后统计萌芽展叶量，１５ｄ后统计生
长量。对比筛选出腋芽萌动的最适浓度。诱导生根培
养与愈伤组织途径诱导生根相同。
２ 结果与分析
２．１ 愈伤组织途径的优化
从表１可知，在附加１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ的ＭＳ培养基中，不同外植体都
表现出较高的诱导率，而茎尖在８ｄ左右出现浅白黄色
致密的愈伤组织，并且分化出芽，可见茎尖的诱导效果
最佳，可达到９０％，明显高于茎段、叶柄和叶片。试验
的９个不同配方对不定芽分化的影响情况如表２所
示，添加０．８ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和添加
１．０ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基的诱导率都
很高，但是添加１．０ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培
养基中诱导出的芽有明显的玻璃化现象，综合考虑诱导
率及芽的生长情况，最佳诱导分化不定芽培养基为ＭＳ＋
０．８ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ。表３表明，９组不同
激素配比的培养基中，附加０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ和０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基中
生根率较高，而附加０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ
培养基中生根数量和根长明显好于后者，因此最佳诱导
生根培养基为ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ。
表１ 不同部位外植体对愈伤
组织诱导的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｏｎ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
外植体
Ｅｘｐｌａｎｔ
愈伤组织诱导率
Ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｒａｔｅ
／％
产生愈伤组织的时间
Ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ｃａｌｕｓ
／ｄ
茎尖 ９０ ８
茎段 ７８ １０
叶柄 ７２ １３
叶片 ６８ １４
表２ 不同激素浓度对不定芽分化的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ
ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ＴＤＺ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
ＮＡＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
增殖个数
Ｍｕｌｉｐｕｌａｔｉｏｎ
ｎｕｍｂｅｒ
增殖倍数
Ｍｕｌｉｐｕｌａｔｉｏｎ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ
０．８ ０．０５ ２９．５ ２．９５
０．８ ０．１０ ５３．２ ５．３２
０．８ ０．１５ ３４．７ ３．４７
１．０ ０．０５ ４０．８ ４．０８
１．０ ０．１０ ５６．３ ５．６３
１．０ ０．１５ ４３．４ ４．３４
１．２ ０．０５ ３８．９ ３．８９
１．２ ０．１０ ２７．６ ２．７６
１．２ ０．１５ ２３．２ ２．３２
表３ 不同激素浓度对幼苗生根的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ
ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
６－ＢＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
ＮＡＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ
／％
根长
Ｒｏｏｔ ｌｅｎｇｔｈ
／ｃｍ
０ ０．５ ６９．３１ １．４８
０ １．０ ７２．５４ １．６２
０ ２．０ ７５．０８ １．７５
０．２５ ０．５ ７２．３５ ２．０８
０．２５ １．０ ９０．８７ ２．６４
０．２５ ２．０ ８４．５６ ２．３１
０．５０ ０．５ ６８．７９ １．６２
０．５０ １．０ ７１．３６ １．７３
０．５０ ２．０ ７３．６７ １．９０
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北方园艺２０１６（０８）：８９～９２ ·生物技术·
２．２ 腋芽途径的优化
由表４可以看出，不同激素浓度对芽的增殖影响很
大，当６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度比值为１０时，增殖倍数较高。
而且低浓度的６－ＢＡ可以促进芽的分化，而当提高浓度
时，增加产生丛生芽的比例也会抑制节间生长，有效抑
制苗徒长。ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和
ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基中的萌芽
情况显著好于其它培养基，而后者的萌芽展叶情况和萌
芽伸长量都更好一些，所以选择ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋
０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基进行增殖培养。生根培养与
愈伤组织诱导途径的生根培养结果相同。
表４ 不同激素浓度对腋芽萌发的影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
６－ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）
７ｄ萌芽展叶情况
Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｂｕｄ ａｆｔｅｒ ７ｄａｙｓ
１５ｄ萌芽伸长量
Ｇｒｏｗｔｈ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｂｕｄ ａｆｔｅｒ １５ｄａｙｓ
０．５ ０．１ ４株展２叶，１株展１叶 １．６７
０．５ ０．２ ２株展２叶 １．５８
０．５ ０．３ ２株展２叶，１株展１叶 １．６２
１．０ ０．１ １株展３叶，８株展２叶，２株展１叶 ２．０８
１．０ ０．２ ４株展２叶 １．７３
１．０ ０．３ ５株展２叶，１株展１叶 １．７１
２．０ ０．１ ３株展１叶 １．４２
２．０ ０．２ ２株展３叶，１０株展２叶，３株展１叶 ２．３１
２．０ ０．３ ３株展２叶，３株展１叶 １．５６
注：１．腋芽萌发；２．愈伤组织形成；３．不定芽再生；４．不定芽增殖；５．腋芽增殖；６．生根培养。
Ｎｏｔｅ：１．Ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；２．Ｃａｌｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ；３．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ；４．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；５．Ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；
６．Ｒｏｏｔｉｎｇ ｃｕｌｔｕｒｅ．
图１ 金山绣线菊组织培养不同时期形态
Ｆｉｇ．１ Ｆｏｒｍ ｏｆ Ｓｐｉｒａｅａ×ｂｕｍａｌｄａ‘Ｇｏｌｄｅｎ Ｍｏｕｎｄ’ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｈａｓｅ
３ 讨论与结论
采样时间应选择在初春４、５月份，此时金山绣线菊
结束了休眠期开始萌动，长出鲜嫩的枝梢，温室中的植
株在这段时间长势也相对较好，更有利于无性繁殖，而
夏季细菌滋生速度快，组培苗的污染率也相对较高，而
冬季属于休眠期，分生效果最差，因此取材时间选在初
春，这与ＪＡＣＯＢＳＳＯＮ等［１５］的试验结果相一致。
由于试验材料本身特点，腋芽被芽鳞包裹，而芽鳞
上有致密的绒毛，将会影响表面灭菌的效果，因此在次
氯酸钠溶液中加入２滴吐温，吐温是一种表面活性剂和
分散剂，有助于将叶片和有芽鳞包裹的腋芽张开充分灭
菌。同时，在接种时将不同外植体分别接种，防止交叉
感染细菌和霉菌［１６－１７］。
在愈伤组织途径中，诱导愈伤时很容易出现褐化现
象，叶片容易皱缩，组培苗长势弱，很难进行下一步的继
代操作。针对这个问题可以通过采用最佳培养基、添加
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·生物技术· 北方园艺２０１６（０８）：８９～９２
防褐剂、黑暗培养、调低温度、尽量缩短继代周期等方法
来尽量减轻和避免。
“玻璃化”是指植物在进行组织培养过程中，常会出
现试管苗叶或嫩梢呈现透明或半透明状态，植株矮小肿
胀生长缓慢，叶片皱缩失绿且易碎的现象。植物在出现
玻璃化现象后，很难继续扩繁和增殖培养，移栽也会难
以成活，这会严重降低组培的效率。因此总结出应对措
施有：在培养过程中，培养室的光照强度要保证在
１ ６００ｌｘ以上［１８］；降低培养基中外源激素的浓度尤其是
６－ＢＡ浓度，并且降低培养基中的水势可以有效减少玻璃
化苗的出现［１９］；采用适宜的温度，换用通透性良好的封
口膜增加透气性都有助于降低玻璃化苗出现的概率［２０］。
组培苗在继代培养过程中，随着增殖系数的提高，
长出的芽往往会出现生长势减弱、纤细弱小、很难生根
和移栽成功。这个问题同样也影响着木本植物的组织
培养，该试验中通过选择适宜的细胞分裂素和生长素的
种类及不同浓度配比，可以同时满足增殖和壮苗的不同
要求。高浓度的生长素和低浓度的细胞分裂素的组合
有利于形成壮苗。因此，在以丛生芽方式进行增殖时，
适当降低培养基中６－ＢＡ等细胞分裂素的浓度，并增加
ＮＡＡ等生长素的浓度，并且提高Ｃ／Ｎ比值等方式来达
到壮苗培养的目的。
该试验初步建立了金山绣线菊再生体系，４种不同
的外植体中，茎尖的诱导率最高，明显好于茎段、叶柄
和叶片，诱导愈伤组织最佳培养基为 ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ
６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ；愈伤组
织诱导不定芽最佳培养基为 ＭＳ＋０．８ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋
０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ；最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ
６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ；最佳诱导腋芽增殖培养基为
ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ。
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ＷＡＮＧ Ｄａｑｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉａｏ
（Ｅｃｏｎｏｍｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ，Ｈａｒｂｉｎ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ １５００３０）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｔｅｍ ａｐｅｘ，ｓｔｅｍ，ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ ｐｅｔｉｏｌｅ ｏｆ Ｓｐｉｒａｅａ×ｂｕｍａｌｄａ‘Ｇｏｌｄｅｎ Ｍｏｕｎｄ’ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｆｏｒ
ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｗｅｒｅ ａｄｄｅｄ ｔｏ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｐｅｒｉｏｄｓ ｏｆ ｆｉｒｓｔ，ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｃｕｌｔｕｒｅ ｆｏｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ｏｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ
Ｓｐｉｒａｅａ×ｂｕｍａｌｄａ‘Ｇｏｌｄｅｎ Ｍｏｕｎｄ’．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ，ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋
０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ，ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ＋０．８ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．１０ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ，ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ ｗａｓ １／２ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ
ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｐｉｒａｅａ×ｂｕｍａｌｄａ‘Ｇｏｌｄｅｎ Ｍｏｕｎｄ’；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ；ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ
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