全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１６（０９）：１０２～１０５
第一作者简介：李森（１９８２－），男，硕士，助理研究员，现主要从事园
艺植物良种繁育与商品化生产研究及科研管理等工作。Ｅ－ｍａｉｌ：
８８０４５３６１＠ｑｑ．ｃｏｍ．
责任作者：张施君（１９７４－），女，博士，副研究员，现主要从事园艺植
物育种与栽培研究及教学等工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕａｎｙｅｈｕａｚｕ＠１６３．
ｃｏｍ．
基金项目：广东省科技计划资助项目（２０１３Ｂ０２０３０４００６）；广东省科
技厅产学研合作资助项目（２０１３Ｂ０９０２０００６５）；广东省科技计划资
助项目（广东省落叶果树工程技术研究中心）（２０１５Ｂ０９０９０３０８２）。
收稿日期：２０１５－１２－２３
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０９０２７
高丛越橘“奥尼尔”的组织培养
李 森１，高 丽 霞２，刘 念３，张 施 君３
（１．仲恺农业工程学院 科技处，广东 广州５１０２２５；２．仲恺农业工程学院 健康农业研究所，广东 广州５１０２２５；
３．仲恺农业工程学院 园艺园林学院，广东 广州５１０２２５）
摘 要：以高丛越橘“奥尼尔”的带芽茎段为外植体，采用组织培养技术，研究了不同配比的
ＺＴ、６－ＢＡ、ＮＡＡ和ＩＢＡ植物激素对高丛越橘“奥尼尔”外植体诱导的影响。结果表明：最佳的外植
体消毒条件为０．１％ ＨｇＣｌ２４ｍｉｎ，萌芽率可达７１．４％。腋芽诱导的初代培养宜用 ＷＰＭ＋
１．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ培养基，侧枝能够萌发，苗高４．７ｃｍ；适宜的增殖培养基为 ＷＰＭ＋２．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ，
增殖系数达到１３．０；试管苗的生根培养基为１／２ＷＰＭ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ。当试管苗长至５ｃｍ出瓶
移栽，成活率可达８０％以上。
关键词：高丛越橘 “奥尼尔”；组织培养；增殖
中图分类号：Ｓ ６６６．２０３．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０９－０１０２－０４
越橘（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍｓｐｐ．）属杜鹃花科（Ｅｒｉｃａｃｅａｅ）越橘
属（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ）多年生浆果类灌木，果实蓝色或红色，其
中蓝果越橘俗称蓝莓。越橘果肉细腻，风味独特，营养
丰富，富含花青苷，抗氧化能力强，具有重要的保健功
能，目前已被联合国粮农组织定为世界五大健康食品
之一［１－２］。
越橘的栽培类型主要有高丛越橘（Ｖ．ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ）、
兔眼越橘（Ｖ．ａｓｈｅｉ）、矮丛越橘（Ｖ．ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｍ）等［２］。
其中高丛越橘树体高大，可达１～２ｍ，“奥尼尔”（Ｖ．
ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ‘Ｏ’Ｎｅａｌ’）是高丛中的优良品种之一，喜湿
润、温暖气候条件，适于我国黄河以南地区如华中、华南
地区种植。花期约为３月，果熟期为５月中旬至６月。
果实较大，品质佳，鲜食口感好，适合供应鲜果市场销
售，也可以加工食用。传统的越橘播种和扦插技术存在
繁殖速度慢，受母株取材限制的缺点，生产规模难以扩
大［３］。组织培养技术是越橘大量快速繁殖的有效途径，
该试验旨在研究“奥尼尔”的组培快繁技术，以期为试管
苗规模化生产提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
越橘“奥尼尔”露地栽培在仲恺农业工程学院农场，
于晴天剪取当年生枝条作为外植体。
１．２ 试验方法
１．２．１ 外植体处理 去除枝条上的叶片，剪成２～３ｃｍ
长的茎段，用自来水冲洗５ｍｉｎ。在超净工作台上用
７５％酒精浸泡３０ｓ，再用无菌水冲洗１遍，用镊子将茎段
夹出置入０．１％ ＨｇＣｌ２消毒，用无菌水冲洗６遍。
１．２．２ 外植体的初代培养 将已消毒的茎段接种到附
加不同浓度ＺＴ的 ＷＰＭ培养基上，每处理７瓶，每瓶接
种３株，３次重复。７ｄ后腋芽开始萌动，叶片逐渐伸长。
培养３０ｄ后，统计外植体污染率、萌芽率、分枝数和株高。
１．２．３ 丛生芽的继代增殖 将诱导获得的丛生芽转接
到分别附加不同浓度ＺＴ、６－ＢＡ和ＮＡＡ的培养基上，每
处理７瓶，每瓶接种３株，３次重复。３０ｄ后统计丛生芽
的增殖系数和植株高度。
１．２．４ 生根培养 将无菌苗分切成高约２ｃｍ的茎段转
接到附加不同浓度ＺＴ和ＩＢＡ的培养基上进行壮苗和
生根培养，每处理７瓶，每瓶接种３株，３次重复。６０ｄ
后统计生根率、生根数和根长。
１．２．５ 试管苗的移栽 用镊子将高５ｃｍ以上的试管苗
从培养瓶中取出，洗净根部培养基，栽入泥炭土中，浇透
水，环境温度２２～２５℃，湿度８０％～９０％，６０ｄ后统计移
栽成活率。
１．２．６ 培养条件 以上培养基中均添加３０ｇ／Ｌ的蔗
２０１
北方园艺２０１６（０９）：１０２～１０５ ·生物技术·
糖，６ｇ／Ｌ琼脂，ｐＨ ５．２，培养温度为（２５±２）℃，光照强
度１ ５００～２ ０００ｌｘ，光照时间为１２ｈ／ｄ。
１．３ 项目测定
萌芽率（％）＝成活的外植体数／接种的外植体数×
１００；增殖系数＝增殖芽长／接种芽长；生根率（％）＝生根
苗数／接种苗数×１００。
１．４ 数据分析
采用ＳＰＳＳ ２２．０软件对数据进行统计分析。
２ 结果与分析
２．１ 外植体的初代培养
由表１可知，０．１％ＨｇＣｌ２消毒３ｍｉｎ的外植体污染
率最高，为３０．２％。消毒时间延长１ｍｉｎ，外植体的污染
率降低至１７．５％，当消毒时间延长至５ｍｉｎ时，污染率降
低至９．５％，但芽的死亡增多，导致萌芽率显著下降。由
此可见，最佳的消毒时间应为４ｍｉｎ。将茎段接种到不
同的诱导培养基中（图１．１），约７ｄ后腋芽开始萌动，恢
复生长，叶片逐渐伸长展开，茎段也伸长（图１．２）。从表
２可以看出，３种培养基均能诱导腋芽的萌发，其中，１．０、
２．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ培养基的诱导效果差异不显著，无菌苗生
长健壮，说明１．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ即可有效诱导腋芽生长。
表１ 不同消毒时间对外植体诱导的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ ｔｉｍｅ ｏｎ ｅｘｐｌａｎｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
消毒时间
Ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ
ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔ
ｎｕｍｂｅｒ／个
污染数
Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ
ｎｕｍｂｅｒ／个
污染率
Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
萌芽数
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｎｕｍｂｅｒ／个
萌芽率
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
３ ２１ ６．３±０．６ａ ３０．２±２．７ａ １３．３±０．９ｂ ６３．５±５．６ｂ
４ ２１ ３．７±１．２ｂ １７．５±５．５ｂ １５．０±０．７ａ ７１．４±４．８ａ
５ ２１ ２．０±０．０ｃ ９．５±０．０ｃ １３．７±０．６ｂ ６５．１±２．８ｂ
注：同列数据后不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）。下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．
Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
表２ 不同激素浓度对外植体诱导的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｅｘｐｌａｎｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ＺＴ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／（ｍｇ·Ｌ－１）
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔ ｎｕｍｂｅｒ／个
分枝数
Ｂｒａｎｃｈ ｎｕｍｂｅｒ／个
株高
Ｈｅｉｇｈｔ／ｃｍ
０．５ ２１ １．２±０．１ｂ ３．９±０．４ｂ
１．０ ２１ １．６±０．１ａ ４．７±０．５ａ
２．０ ２１ １．７±０．１ａ ４．８±０．６ａ
注：１．茎段的初代培养；２．腋芽的萌发与生长；３．丛生芽的增殖培养；４．试管苗的生根培养；５．试管苗的出瓶移栽。
Ｎｏｔｅ：１．Ｐｒｉｍａｒｙ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｓｔｅｍｓ；２．Ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ；３．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ；４．Ｐｌａｎｔｌｅｔ ｒｏｏｔｉｎｇ ｃｕｌｔｕｒｅ；５．Ｐｌａｎｔｌｅｔ
ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ．
图１ 越橘“奥尼尔”的组织培养
Ｆｉｇ．１ Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｖ．‘Ｏ’Ｎｅａｌ’
３０１
·生物技术· 北方园艺２０１６（０９）：１０２～１０５
２．２ 丛生芽的继代增殖
在继代增殖试验中，比较了３种外源激素６－ＢＡ，ＺＴ
和ＮＡＡ对丛生芽增殖的效果。从表３可以看出，６－ＢＡ
对丛生芽的诱导效果不明显，而ＺＴ的诱导效果显著（图
１．３），当ＺＴ浓度为２．０ｍｇ／Ｌ时，增殖系数达到１３．０，
ＺＴ浓度继续增加，分枝数、株高和增殖系数都不再显著
增加，说明２．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ是最适合丛生芽增殖的浓度。
在基本培养基中同时加入ＺＴ和ＮＡＡ，丛生芽的长势没
有明显加强，培养２周后，芽基部出现了愈伤组织，分枝
数和株高没有显著变化，说明在增殖培养基中不需要添
加ＮＡＡ，而只需ＺＴ即可有效保证丛生芽的生长和
增殖。
表３ 不同激素组合对丛生芽增殖的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｎ ｂｕｄ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ
激素及浓度
Ｈｏｒｍｏｎｅ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／（ｍｇ·Ｌ－１）
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔ ｎｕｍｂｅｒ／个
分枝数
Ｂｒａｎｃｈ ｎｕｍｂｅｒ／个
株高
Ｈｅｉｇｈｔ／ｃｍ
增殖系数
Ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
６－ＢＡ １．０ ２１ ２．２±０．１ｃ ３．３±０．３ｃ ３．８±０．２ｃ
６－ＢＡ ２．０ ２１ ２．３±０．１ｃ ３．６±０．３ｃ ４．２±０．３ｃ
ＺＴ １．０ ２１ ３．０±０．１ｂ ５．５±０．３ｂ ８．６±０．５ｂ
ＺＴ ２．０ ２１ ３．７±０．２ａ ６．４±０．２ａ １３．０±０．４ａ
ＺＴ ２．０＋ＮＡＡ ０．１ ２１ ３．５±０．３ａ ６．０±０．２ａｂ １２．３±０．２ａ
ＺＴ ３．０ ２１ ３．６±０．３ａ ６．４±０．３ａ １３．２±０．５ａ
２．３ 试管苗的生根与移栽
把试管苗分切成约２ｃｍ的长度，从继代培养转入
添加不同浓度ＩＢＡ生根培养基中（表４）。培养３～４周
后可见幼苗的基部长出不定根，说明ＩＢＡ对试管苗生
根有明显促进作用，其中０．１０、０．２０ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ诱导的
根数和根长差异不显著。当ＩＢＡ 浓度相同时，
１／２ＷＰＭ与全量 ＷＰＭ的效果差异不显著，因此该试验
以１／２ＷＰＭ＋０．１０ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ为最适生根培养基。
表４ 不同培养基对试管苗生根的影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｌａｎｔｌｅｔ ｒｏｏｔｉｎｇ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ／（ｍｇ·Ｌ－１）
接种苗数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ／个
生根苗数
Ｒｏｏｔｉｎｇ ｐｌａｎｔｌｅｔ ｎｕｍｂｅｒ／个
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ／％
根数
Ｒｏｏｔ ｎｕｍｂｅｒ／个
根长
Ｒｏｏｔ ｌｅｎｇｔｈ／ｍｍ
ＷＰＭ＋ＩＢＡ ０．０５ ２１ ２１ ５５．５±２．７ａ ３．９±０．２ｂ ６．８±０．６ｂ
ＷＰＭ＋ＩＢＡ ０．１０ ２１ ２１ ６０．３±５．５ａ ６．６±０．４ａ ７．８±０．４ａ
ＷＰＭ＋ＩＢＡ ０．２０ ２１ ２１ ５８．７±７．３ａ ６．８±０．４ａ １０．１±０．３ａ
１／２ＷＰＭ＋ＩＢＡ ０．１０ ２１ ２１ ５７．１±４．８ａ ６．５±０．４ａ ９．６±０．５ａ
组培苗生根后，当苗长至５～６ｃｍ时，将苗从培养瓶
中取出，用自来水洗掉根部培养基，栽入泥炭土基质中
（图１．４），浇透水，保持环境温度２２～２５℃，湿度８０％～
９０％，成活率达到８０％以上。
３ 结论与讨论
ＷＰＭ基本培养基是一种低无机盐浓度的培养基，
适于多种木本植物的离体培养［４］，刘树英等［４］比较了
ＷＰＭ培养基与ＭＳ、Ａｎｄｅｒｓｏｎ和Ｋｎｏｐ培养基对兔眼越
橘的离体培养，发现越橘丛生芽在 ＷＰＭ培养基中的长
势最好。黄文江等［５］、朱宏芬等［６］、李丽容等［７］、张力思
等［８］均以ＷＰＭ为基本培养基建立了蓝莓的离体培养体
系。ＺＴ是越橘组织培养中常用的植物激素［９－１０］，该试验
比较了ＺＴ与６－ＢＡ、ＮＡＡ对外植体诱导与增殖的影响，
发现ＺＴ对越橘的芽诱导和增殖效果显著，而６－ＢＡ促进
不定芽生长的效果不明显，ＮＡＡ会导致茎段基部产生
褐色愈伤组织，说明增殖培养基中不宜加入ＮＡＡ，而只
需添加ＺＴ即可有效诱导丛生芽的萌发和生长。
综上所述，越橘“奥尼尔”的最佳消毒时间为４ｍｉｎ，
腋芽萌发的最佳培养基为ＷＰＭ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ，试管苗
增殖的最佳培养基为ＷＰＭ＋２．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ，生根的适宜
培养基为１／２ＷＰＭ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ。
参考文献
［１］ 苑兆和．世界蓝莓生产历史与发展趋势［Ｊ］．落叶果树，２００３，２０（１）：
４９－５２．
［２］ 刘庆忠，赵红军．越桔高效栽培与加工利用［Ｍ］．北京：中国农业出版
社，２００３：６４－７１．
［３］ 张长青，李广平，朱士农，等．兔眼越橘茎段快繁高效技术研究［Ｊ］．果
树学报，２００７，２４（６）：８３７－８４０．
［４］ 刘树英，安伟，孔令学，等．兔眼越橘芽的诱导及再生［Ｊ］．吉林农业大
学学报，２００４，２６（６）：６３２－６３５．
［５］ 黄文江，刘庆忠，阚显照．高灌蓝莓离体繁殖的研究［Ｊ］．安徽师范大
学学报（自然科学版），２００４，２７（３）：３１４－３１７．
［６］ 朱宏芬，沈岚，黄坚，等．兔眼蓝莓“灿烂”组织培养与植株再生研究
［Ｊ］．北方园艺，２０１２（１９）：１０５－１０７．
［７］ 李丽容，金开正．兔眼蓝莓组培快繁试验［Ｊ］．中国南方果树，２０１０，３９
（１）：７１－７２．
［８］ 张力思，魏海蓉，艾呈祥，等．培养基组分对蓝莓组培增殖效率的影
响［Ｊ］．落叶果树，２００６，３８（４）：１３－１４．
［９］ 刘庆忠，赵红军．高灌蓝莓的组织培养及快速繁殖［Ｊ］．植物生理学
通讯，２００２，３８（３）：２５３．
［１０］宁志怨，江芹，陈静娴，等．蓝莓丛生芽的诱导及植株再生［Ｊ］．分子植
物育种，２００７，５（Ｚ１）：６４－６６．
４０１
北方园艺２０１６（０９）：１０５～１０８ ·生物技术·
第一作者简介：张波（１９８４－），女，宁夏中宁人，硕士，研究实习员，
现主要从事枸杞遗传育种等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇ＿ｂｏ＿０３０９＠
１２６．ｃｏｍ．
责任作者：曹有龙（１９６３－），男，博士，研究员，现主要从事枸杞遗传
育种及分子生物学等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｏｕｌｏｎｇｃｈｋ＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：宁夏回族自治区自然科学基金资助项目（ＮＺ１３１２６）；国
家科技厅枸杞育种专项资助项目（２０１３ＮＹＹＺ０１０５）；宁夏农林科
学院自主研发资助项目（ＮＫＹＪ－１４－０８）。
收稿日期：２０１５－１２－２２
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０９０２８
宁夏枸杞花药培养胚状体的诱导
张 波，罗 青，张 曦 燕，曹 有 龙
（国家枸杞工程技术研究中心，宁夏 银川７５０００２）
摘 要：以宁夏枸杞新优品系为试材，利用花药培养技术，研究了不同基因型、激素配比、低
温预处理、热激处理、添加活性炭对其胚状体诱导率的影响。结果表明：宁夏枸杞新优品系‘０６－１６’在
基因型筛选中，诱导率最高为０．９５％，通过对试验体系进行优化，２．０ｍｇ／Ｌ ＫＴ与０．２ｍｇ／Ｌ
２，４－Ｄ的组合诱导率达到２．０７％。４℃低温预处理３ｄ或５ｄ、３３℃热激处理５ｄ、活性炭浓度为
０．８％，均能提高新优品系‘０９－１０６’的胚状体诱导率。
关键词：宁夏枸杞；花药培养；胚状体
中图分类号：Ｓ ５６７．１＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０９－０１０５－０４
宁夏枸杞（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍＬ．）是我国重要的特色
药用植物资源之一［１］，其根、茎、叶、果均可入药［２］，具有
生态、经济及社会效益［３］。采用群体选优、杂交的方法
选育新品种耗时耗力、效率低［４］。而利用花药培养直接
成苗技术，可快速获得纯系和突变体［５］，同时可为分子
理论研究提供基础材料。
我国枸杞花药培养起源于２０世纪８０年代，顾淑
荣［６］首次获得宁夏枸杞花粉植株，樊映汉等［７］通过胚状
体途径获得２种枸杞植物花药单倍体。曹有龙等［８］通
过枸杞花药愈伤组织细胞悬浮培养获得了单倍体再生
植株。段丽君等［９］通过激素、活性炭、蔗糖、低温预处理
等因素对枸杞花药愈伤组织诱导率进行研究，建立了
“宁杞１号”花药离体培养技术体系。钱春艳［１０］在前者
研究基础上，采用Ｌ３２（２×４５）正交设计对影响枸杞花药
培养的几个因素进行了系统的研究，认为影响花药愈伤
与胚状体诱导的主次因素顺序不同。罗青等［１１］认为低
温预处理有利于“宁杞１号”胚状体的诱导。现以宁夏
枸杞新优品系为试材，利用花药培养技术，研究了不同
基因型、激素配比、低温预处理、热激处理、添加活性炭
Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ ‘Ｏ’Ｎｅａｌ’
ＬＩ Ｓｅｎ１，ＧＡＯ Ｌｉｘｉａ２，ＬＩＵ Ｎｉａｎ３，ＺＨＡＮＧ Ｓｈｉｊｕｎ３
（１．Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｚｈｏｎｇｋａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０２２５；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ
Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｚｈｏｎｇｋａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０２２５；３．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ
Ｌａｎｄｓｃａｐｅ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｚｈｏｎｇｋａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０２２５）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｓｔｅｍｓ ｗｉｔｈ ｂｕｄｓ ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ ‘Ｏ’Ｎｅａｌ’ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ
ＺＴ，６－ＢＡ，ＮＡＡ ａｎｄ ＩＢＡ ａｄｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｗａｓ ｓｏａｋｉｎｇ ｉｎｔｏ ０．１％ ＨｇＣｌ２ｆｏｒ ４ｍｉｎ ｗｉｔｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ７１．４％．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ
ＷＰＭ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ ｏｎ ｗｈｉｃｈ ｓｏｍｅ ｂｒａｎｃｈｅｓ ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ ａｎｄ ｐｌａｎｔｌｅｔ ｌｅｎｇｔｈ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｏ ｂｅ ４．７ｃｍ．Ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＷＰＭ＋２．０ｍｇ／Ｌ ＺＴ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｔｏ ｂｅ １３．０．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ
ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ １／２ＷＰＭ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ．Ｔｈｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｏ ｂｅ ５ｃｍ ｉｎ ｌｅｎｇｔｈ ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ
ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｏｕｔｓｉｄｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｅｘｃｅｅｄｅｄ ８０％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｃｏｒｙｍｂｏｓｕｍ ‘Ｏ’Ｎｅａｌ’；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
５０１