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日本绣线菊的组织培养



全 文 :笙人A o. 6+ NA A o.4 +G A I+ 6一A B I, p H 6 。 培养
温度 , 白天为 20 一 25 ℃ , 夜晚为 15 一20 ℃ , 每天光
照 2 0小时左右 , 光照度为 10 0 0一 1 5 0 0 l x 。
生长与分化情况 : 将美洲商陆种子浸润 子 10
p p rn G A溶液中 2 4小时 , 保持 5℃低温静置 30 天左
右。 取出后用滴有洗涤精的温开水搅拌 漂 洗 数 分
钟 , 再用 冷开水冲淋数次 , 然后用滤纸吸去多余水
分 , 将种子浸于 70 %酒精溶液中消毒 5分钟 , 再经
心 . 15 %升汞溶液消毒 15 分钟 , 取出后用无菌水浸漂
四次 , 接种于盛有 [ 1〕号培养基的 I O 0 tn l三 角烧 瓶
中。 于 1 9 8 6年 1月中旬接种 ,至 3 月下旬发芽出苗 .
种皮内外胚乳首先形成网状白色愈伤组织 , 但不久
枯萎失去生命力。 而无菌苗生长茁壮 , 根系发达 ,
、同时在主根外皮层再次形成粉红色愈伤组织。 待无
菌苗长到 4一 sc m时 , 可用消过毒的快剪将嫩梢 、 幼
茎逐节剪截 , 另行接种于 2[ 〕号培养基中。 经培养十
五天左右 , 即在茎段切面产生粉红色 、 极其艳嫩的
愈伤组织 , 有的长出 2一 3条玉白色幼根 。 同时腋芽
萌发 , 嫩茎直立长高呈紫红色 。 一个月后 , 各个茎
段或嫩梢均形成带根的健壮植株 。 如按上法反复剪
截 , 继代培养 , 即可连续不断地再生并形成大量完
整植株 , 如排除杂菌污染因素 , 其成苗率可达 95 %
以上。 待试管苗长到 3一 c4 m 高时 , 可移植到蛙 石
或沙士中 , 浇施少量 l 2/ M S营养液 , 盆钵上覆盖玻
璃罩或塑料薄膜保湿 , 并适当照光 , 约培养十天左
右 , 就可揭去透明外罩 , 移置露地 。 试管苗富有生
命力 , 抗菌力强 , 移栽极易成活 。
新进展 : 用美洲商陆种子育成无茵苗 , 然后反
复剪截嫩茎进行微型扦插 , 不断获得再生植株进行
繁殖 , 在国内外尚未见报道。
意义和用途 : 美洲商陆茎红叶翠 , 果穗成串 ,
庭院种植可供观赏 , 根叶可供药用 , 性味苦寒 , 有
毒 , 能利尿逐水肿 、 解毒散结 , 外治痈肿恶疮 。 植
株含促有丝分裂素 , 故临床上用作刺激剂 , 通过淋
巴细胞转化试验来测定机体免疫功能状态 。
日本绣线菊的组织培养
李云峰 王玉贤 (吉林省生物研究所 , 长春 )
T IS SU E C U L T UR E O F SP 玄r a e a j aP o n i e a
L 呈Y u n 一 f e n g , Wa n g Y u 一 x 三a n
( J i l t’ n I n s t i t u t e o f B i o l o 夕夕 , C h a 件夕 e h ” ” )
植物名称 : 日本绣线菊 ( S 户`r a e a j a p o “ i c a )
材料类别 : 带有叶腋的茎切段 。
培养条件 : 基本培养基为 M S 培养基 , 诱导腋
穿时 , 附加 6 B A Z , 0一4 . Om g / L (单位下同 ) , I A A
心 . 5一 1 . 。 , ’ 用于增殖时附加 6 B A O . 1一 4 . 0 , I A A或
N A A O
.
1一 1 . 0 , 以 6B A Z 、 N A A 。 , 5为最好 , 有时
一附加 G A Z , 用于生根时附加 I B A O . 5 , 蔗塘由 3%降
到 2 % ,有时附加 G A Z 。 各种培养基均加琼脂 0 . 7% ,
调节 p H为 5 . 8 。 在 25 一 2 8 ℃下 , 用 40 W 日光灯每天
光照 8一 1叼、时进行培养 。
生长与分化情况 : 茎经常规消毒后 , 切成 5一 10
也 m长带有叶腋的切段 , 平植于诱导腋芽的墙 养 基
上 , 经一个月培养 , 腋芽萌发形成 1一 3个微枝条 , 经
二个月培养形成数十个微枝条 , 高度 2一 c3 m , 个别
可达 s c 二 , 整个过程未见有愈伤组织形成 。
剪取微枝条接种 于生根培养基中 , 20 一 30 天即
可生根 , 再生成完整的小植侏。 留下部分微枝条转
入增殖培养基中继代培养 , 一个月左右每个微枝条
可形成数十个 2一 3 c m高的微枝条。 一般每个三角瓶
接种 10 个微枝条 ,经一个月的培养就可以收获15 0一
25 0个微枝条 , 即每瓶可转接 20 瓶左右 , 增殖率为
2 0倍 , 我们已经继代五次 , 仍然保持正 常分 化能
力 , 估算每年可继代 8一 12 次 。
另外 , 在培养过程中 ,无论是增殖还是诱根 , 在
培养基中附加 G 人 Z m g / L , 均可使植株生长健壮 ,
根系发达 , 提高成活率。
将经诱根得到完整植株的三角瓶 , 去掉瓶塞 ,
在漫射光下锻炼 l一2天后 , 选取根系发育完全的植
株 , 直接移植到未经消毒人工调配的土壤中 , 罩上
薄膜 , 每天进行通风 , 并且逐渐增加通风时间 , 10
天后去掉薄膜 , 即可正常生长 。 移植成活率最高可
达70 % 。 待苗高 5一 10 c m 时即可移植到田间 。 现部
本文1 0 36年 s 月 i 一日收到
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1987. 02. 014
分已移到田间 , 生长发育正常 。
断进展 : 国内外未见日本绣线菊组织培养再生
植株并移植到田间的报道。
宜义和用途 : 日本绣线菊为园林中重要观花灌
木 , 可傲绿篱 , 也可以植于庭院 、 公园 、 水边 、 路
旁 、 花坛 、 假山及斜坡上供观赏 , 或于绿地成片惫
植 。 需要盈大 , 但在东北三省靠种子和扦插繁殖 ,
缺少种苗来源 , 繁殖系数低 , 采用组织培养无性快
速繁殖法既可以得到大最苗木 , 又可以保持苗木的
一致性 。
野乖体细胞胚胎发生和植株再生
程井辰 周吉源 (华中师范大学生物系 , 武汉 )
S O M AT IC E MB R YO G E N E S IS A ND P L AN T L E T S R EG EN E R AT !O N
OF E r i o c h l o a o i l l o s a
C h e n g J呈n 一 e五e n , Z il o u Ji 一 y a n
( D e P a r t价 e n t o f B i o l o g 夕 , H . o z h e . 夕 N o r 用 a l U n i v e r s犷t夕 )
往物名称 : 野黍五 r o` c h lo a 。 `王不。 : a o
材料类别 : 雌雄蕊分化期的幼穗 。
培养条件 : 从校园中采集雌雄蕊分化期的野黍
幼穗 , 接种在 N 6培养基中 , 附加成 份有 2 , 4一D
mZ g / L (单位下同 ) , C H SOO, 蔗糖浓度为 3% , 分
化培养基为无激素的N 6培养基 , 附加 A d e 4。 , C H
5 0 0
, 并加适 t 活性炭 。 常规高压灭菌 ,培养室温度
为 2 5一 2 7℃ ,光照度为 5 0 0一 2 0 0 0 l x , 每日光照 1 0一
1 2小时。
生长与分化情况 : 幼穗接种后三夭开始启动 ,
首先是颖花部分膨大 , 一周后膨大部分愈伤化 , 愈
伤组织松散白色 ,幼穗顶部多形成颗粒状愈伤组织 ,
枝梗愈伤化较迟。
接种 1 5天后 , 将愈伤组织转移至无激素的N 6分
化培养基中 , 10 一 16 天后 , 从松散型愈伤组织中分
化出各期胚状体 , 一般每管十多个 , 多至几十个 ,
密集成丛 , 用解剖针轻轻拨动 , 即可单个分开 , 胚
状体具有两极性 , 在解剖镜下可区分根 、 芽端 。 胚
状体萌发时 , 首先根端伸长 , 接着幼叶突破胚芽鞘
展开 , 嫩绿色 , 肉眼易于识别 , 继续培养 15 一 20 天 ,
体细胞胚状体即长成再生植株 。
新进展和惫义 : 近年来 , 国内外许 多研 究报
道.l[ 21 , 阐明体细胞胚胎发生是禾谷类植物体外形
态发生的重要途径 , 如水稻川 、 玉米 [’1 、 稗草川等
已有详细报道 , 但有关野生禾本科植物的报道不多 。
本试验成功地从野黍幼穗诱导出了体细胞胚状体 。
胚状体的诱导 , 不仅在现代育种技术如细胞育苗 、
人造种子等方面有应用前景 , 而且在研究植物形态
发生理论上也具重要意义 , 如为什么胚状体具有与
合子胚相同的发育模式和程序? 胚性细胞与合子在
细胞生物学方面有哪些相似之处 , 等等 。 野黍胚状
体的诱导成功 , 为研究上述理论问题提供了实验系.
统。
[ 1 1
[ 2 ]
参 考 文 献
王大元 , 1 9 8 4 , 细胞生物学杂志 , 6 ( 1 ) , 1 6~ 2Q
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r a e g e r P r e s s N
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程井辰 . 丈。 55 , 华中师范大学学报 , 1 98 5 ( 4 ) : 12 0一 z盆
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本文1 , 86 年 8月 2 9日收到
一一一一一 . . . . . . . . . 口 . . . . . .广~ .~ ~ ~ ~ ~ 飞{ ,J、 启 {` ~ ~ ~ ~ ~ ~ J 中国植物生理学会 第四次全国会议代表合影照片 , 因印刷不 及 , 未能随本刊 1 9 8 7年第 1 期 发 出 , 现插入本期 补 发 , 谨向读者致歉 。编解部 1 9 8 7牟 4 月