全 文 ：·生物技术· 北方园艺 2008(4):232～ 233
大岩桐组织培养及其练苗移栽技术
王海 洪
(西宁市城南苗圃 ,青海西宁 810001)
　　摘　要:通过对大岩桐组织培养研究得出:不定芽诱导的最佳培养基为 MS+BA 1.0 mg/L;
不定芽增殖的最佳培养基为 MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/ L;不定根诱导的最佳培养基为
1/2 MS+NAA 0.5 mg/ L。并对大岩桐瓶苗练苗移栽基质进行了研究 ,筛选出进口的德国
Klasmann-Deilmann泥炭土422是瓶苗练苗移栽的最佳基质 ,移栽成活率高达98.47%。
关键词:大岩桐;组织培养;培养基;练苗移栽
中图分类号:S 682.2+9;S 603.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2008)04-0232-02
　　大岩桐(Sinningia speciosa)别名落雪尼 ,为苦苣苔
科苦苣苔属球根花卉。株形矮小 ,高不盈尺 ,叶茂翠绿 ,
叶片肥厚而大 ,密被绒毛 ,钟形花冠 ,花大而艳美 ,花色
丰富 ,花期持久 ,是著名的室内优良盆栽观赏花卉。大
岩桐主要以播种 、扦插、分球进行繁殖。大岩桐种子极
小 ,约 2.8万粒/g ,播种对土壤要求高 ,播种产生的后代
易发生性状分离;扦插繁殖系数低 ,不能满足大批量生
产的要求;分球繁殖有株形不整齐的缺点。要保持其优
良性状 ,进行工厂化生产 ,组织培养成了最有效的繁殖
途径。现对紫花 、紫花白边 、红花 、红花白边 4个大花品
种进行了组织培养和练苗移栽研究 ,获得了成功 ,可为
工厂化生产大岩桐提供参考。
1　组织培养
作者简介:王海洪(1969-), 男,园林工程师, 主要从事温室花卉组
培快繁技术研究及瓶苗练苗移栽技术研究工作。 E-mail:puhaip-
ing001@163.com。
收稿日期:2008-01-22
1.1　试验材料
　　大岩桐的幼嫩叶片为外植体材料。
1.2　试验材料的消毒处理
切取盆栽大岩桐的幼嫩叶片(带叶柄切下),用 100
倍的洗衣粉溶液浸泡10min后 ,在流水下将泡沫冲洗干
净 ,再用纯净水冲洗 3 ～ 4次 ,放入超净工作台备用。将
洗净的叶片先用75%酒精浸泡 30 s ,倾出酒精 ,用无菌水
冲洗2次 ,再用0.1%氯化汞溶液处理 5 ～ 6 min ,取出 ,用
无菌水冲洗5～ 6次 ,最后用无菌滤纸吸干表面水分。
1.3　接种及培养条件
在超净工作台中 ,将大岩桐叶片在切割盘中切成
0.5 cm×0.6 cm的方形小块 ,叶面朝上接种到预备好的
培养基上。置于温度为 18 ～ 25℃左右 ,光照强度为
1 500 lx的环境中 ,每日保持光照12 h。
1.4　试验方法
不定芽的诱导培养:试验以 MS 为基本培养基 ,培
养基中均加入蔗糖 30 g/L 、琼脂 6.4 g/L ,pH 均为 5.8。
在愈伤组织诱导阶段采用6-BA4个浓度处理 ,分别为
Preliminary Study on Factors Affecting in Multiplication and Differentiation
of Protocorm Like-body of Cymbidiumgrandi f lorum
SHI Long-wen ,MENG Xiang-yun , ZHUANG Ying-qiang , FEI Wei-ying ,MAO Jun-wei
(Jiaxing Vocational Technical College , Jiaxing , Zhejiang 314036 , China)
Abstract:The protocorm like-body(PLB)of Cymbidium grandi f lorum af ter multiplying 5 generations was put in MS
medium , and factorial experiment with dif ferent level(concentration or content)of IBA ,6-BA and active carbon was car-
ried out , then results of average multiplicative times ,different rate , average grow th quantity of sprout and root of PLB
were observed.After analysis , IBA affecting in average multiplicative times , different rate , average grow th quantity of
sprout of PLB w as very significant ,6-BA af fecting in average grow th quantity of sprout of PLB w as signiticant and active
carbon affecting in average grow th quantity of sprout was very significant.The dominant prescription for PLB s multipli-
cation w as as follows:MS+IBA 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+active carbon 0.5 g/L.
Keywords:Cymbidium grandi f lorum;Protocorm like-body;Multiplication and dif ferentiation;Influential factors
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北方园艺 2008(4):232 ～ 233 ·生物技术 ·
0、1.0 、2.0 、3.0 mg/L(单位后同)。不定芽的增殖培养:
将愈伤组织块上分化出的幼芽切下 ,转入继代培养基
上 ,继代培养基配方采用 BA 4个浓度处理 ,分别为 0.5 、
1.0 、1.5、2.0 mg/L ,分别加入 NAA 0.1 mg/ L。不定根
的诱导:将高 2 cm以上、带有4 ～ 6片叶的小芽切下 ,接
在生根培养基中进行培养。生根培养基配方以 1/2 MS
为基本培养基 ,采用 NAA 3个浓度处理 ,分别为 0.2 、
0.5 、0.7mg/L。
1.5　分析与讨论
1.5.1　不定芽诱导培养筛选　接入培养基的叶片15 d
后 ,表面开始弯曲 、膨大增厚。30 d后 ,切口处产生少量
颗粒状愈伤组织 ,在外植体的不定部位产生瘤状 、浅黄
绿色愈伤组织。45 d后 ,愈伤组织分化出小芽眼 ,继续
培养 ,70 d后 ,叶片几乎长满了芽眼 ,同时芽逐渐抽长。
由试验数据可以看出:在同一培养条件下 ,在 MS+6-BA
3.0mg/L叶片变为透明的玻璃化组织 ,无不定芽生成;
在MS+6-BA 2.0mg/ L上丛生芽诱导速度最快 ,分化率
最大 ,但不定芽玻璃化现象严重 ,不利于扩大繁殖;在
MS+6-BA 1.0 mg/ L上不定芽诱导相对较快 ,且生长健
壮 ,因此MS+6-BA 1.0mg/L 培养基为大岩桐不定芽诱
导的最佳培养基(见表 1)。
1.5.2　不定芽增殖培养基的筛选　将健壮的不定芽转
移到增殖培养基上 ,转接 15 d后 ,各继代培养基上不定
芽均出现了不同程度的增值 , 30 d后出现了明显的差
异 ,比较不同培养基上不定芽增殖情况:与其它培养基
相比 MS+6-BA 1.5mg/ L+NAA 0.1mg/ L中不定芽增
殖倍数最多 ,但叶片颜色为黄绿色 ,丛生芽细弱且 1/5
的不定芽玻璃化 ,MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.1mg/ L
中丛生芽增殖相对较多 ,颜色黄绿偏绿 ,无玻璃化现象 ,
不定芽生长健壮(见表 2)。
1.5.3　不定根诱导培养基的筛选　不定芽在生根培养
基上10 d后根开始萌动 ,15 d后生成1 cm长的白色小根
4～ 5条 ,20 d后根长至3 ～ 4 cm。分别调察各培养基上
的生根情况 ,其中在1/2 MS+NAA 0.5mg/L培养基上
大岩桐生根速度最快 ,数量最多 ,平均根长最长 ,且根系
粗壮(见表3)。
　　表 1　　　　不定芽诱导培养基的筛选
培养基 接种数量 增殖数量 增殖倍数
MS+6-BA 3 50 0 0
MS+6-BA 2 50 15 1
MS+6-BA 1 50 32 3
MS+6-BA 0 50 25 2.5
　　表 2　　　　不定芽增殖培养基的筛选
培养基号 接种数 增殖系数 玻璃化 不定芽颜色
MS+6-BA 0.5+NAA 0.1 100 2.5 无玻璃化现象 黄绿偏黄
MS+6-BA 1.0+NAA 0.1 100 2.8 无玻璃化现象 黄绿偏绿
MS+6-BA1.5+NAA 0.1 100 3.0 1/5的玻璃化 黄绿
MS+6-BA 2.0+NAA0.1 100 1.5 玻璃化现象严重 黄绿偏黄
　　表 3　　　　不定根诱导培养基的筛选
培养基号 接种数 萌动时间/d 平均根数 平均根长/cm
1/2 MS+NAA 0.2 100 12 3.5 2.35
1/2 MS+NAA 0.5 100 10 4.8 2.55
1/2 MS+NAA 0.7 100 12 3.1 2.30
2　练苗移栽
2.1　瓶苗练苗
将瓶苗放到15 ～ 25℃的条件下 ,用50%的遮阳网覆
盖 ,培养3 d ,打开瓶盖 ,70%的遮阳网下 ,培养2 ～ 3 d ,取
出瓶苗进行移栽。
2.2　基质的选择
大岩桐喜疏松 、肥沃 、排水良好且富含腐殖质的微
酸性的土壤 ,为了确保大岩桐瓶苗有更好的移栽成活
率 ,分别进行了珍珠岩 、进口草炭(德国 Klasmann-Deil-
mann泥炭土 422)、国产草炭 、国产草炭∶珍珠岩=3∶1
4种基质的对比试验 ,试验选择了株高为 4 ～ 5 cm ,叶片
数为 6片 ,生根良好的瓶苗进行移栽 ,1个月后的生长情
况见表 4。从表 4可以看出 ,在进口草炭中练苗 ,成活率
最高 ,生长量最大 ,叶片数也有了明显的增加 ,得出进口
的德国 Klasmann-Deilmann泥炭土422为大岩桐瓶苗练
苗移栽的最佳基质。
　　表 4　　不同基质对大岩桐瓶苗练苗的影响
基质 成活率/ % 株高/ cm 叶片数/片
珍珠岩 95.35 8～ 9 8～ 10
进口草炭 98.47 10～ 11 10～ 12
国产草炭 88.66 6～ 8 6～ 8
国产草炭∶珍珠岩=3∶1 94.33 8～ 9 8～ 10
2.3　瓶苗的移栽
取出瓶中小苗 ,用清水将根部的培养基冲洗干净 ,
用 800 ～ 1 000倍的代森锌和2 000～ 2 500倍的农用链霉
素混合溶液浸泡小苗根部 2 ～ 3 min ,晾至半干 ,栽到 50
目的穴盘中 ,浇足水。
2.4　瓶苗移栽后的养护管理
移栽后的生长温度控制在 18 ～ 25℃左右 ,空气湿度
保持在 60%～ 75%之间 ,光照强度为15 000 ～ 20 000 lx。
练苗 15 d后即可施肥 ,每隔 15 d喷施1次 ,主要以 N肥
和 K肥为主。
3　结论
大岩桐不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0
mg/L;大岩桐不定芽增殖的最佳培养基为 MS +6-BA
1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;大岩桐不定根诱导的最佳培
养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L;大岩桐瓶苗练苗移栽的
最佳基质为进口的德国Klasmann-Deilmann泥炭土 422。
参考文献
[ 1] 　曹孜义.实用植物组织培养技术教程[M] .甘肃:甘肃科学技术出版
社 ,2003:60-67.
[ 2] 　程家胜.植物组织培养与工厂化育苗技术[ M] .北京.金盾出版社,
2003:142.
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