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黄椒草的组织培养



全 文 :地址:100125北京市朝阳区麦子店街20号楼农业部北办公区中国农学会 http://www.caaj.org 中国农村小康科技 2010年第6期
1 材料与培养条件
1.1 植物名称
黄椒草(Cryptocoryne affinis),取幼胚。
1.2 培养条件
(1)启动培养基:MS+椰子水 40 g/L+蔗糖 l0 g/L+活
性碳1 g/L+琼脂粉5 g/L。
(2)生长培养基:MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+
椰子水40 g/L+蔗糖30 g/L+活性碳1 g/L+琼脂粉5 g/L。
(3)壮苗生根培养基:MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.2
mg/L+椰子水 40 g/L+蔗糖 20 g/L+活性碳 2 g/L+琼脂粉
4 g/L。
(4)旱培移栽炼苗营养液:l/2MS+NAA 0.2 mg/L+
IBA 0.5 mg/L蔗糖 10 g/L。以上培养基 pH为 5.8~6.0,培
养温度为(25±2)℃,启动暗培养时间为 30~40天;生长培
养光照强度为3000~6000 lx,12 h/天;壮苗生根培养光照
强度为 1000~3000 lx,8 h/天;旱培移栽炼苗光照强度为
7000~10000 lx,14 h/天。
2 生长与分化情况
2.1 材料的无菌处理
取 6~8月的椒草,实验室去除根叶仅保留嫩芽经自
项目基金:昆明市科技计划项目“名贵观赏水草组织培养及工厂化栽培技术研究”(昆科计字07N050201)
第一作者简介:黄茂,男,1962年出生,云南墨江人,工程师,本科,研究方向:淡水养殖技术研究、推广应用;水生植物组培、栽培技术研究。通信地址:
650021云南省昆明市正义路北段四通巷5号附1号昆明市水产科学研究所,Tel:0871-3625032,E-mail:huangmao6212@sina.com。
通讯作者:胡锦荣,女,1962年出生,云南昆明人,副研究员,本科,研究方向:科技情报研究。通信地址:650021云南省昆明市青年路371号昆明市科学技术
情报研究所,Tel:0871-3109115,E-mail:377570972@qq.com。
黄椒草的组织培养
黄 茂 1,杨家荔 2,安 莉 1,胡景荣 3
(1昆明市水产科学研究所,昆明 650021;
2贵州省黔西南州畜牧兽医局,贵州兴义 562400;3昆明市科学技术情报研究所,昆明650021)
摘 要:采用不同的消毒方法与不同的培养基配方对黄椒草进行组培快繁试验,结果表明,取幼胚作外植体,
用75%的酒精浸30 s+0.05%升汞浸15 min+无菌水冲洗5次进行消毒;消毒后外植体导入MS+椰子水40 g/L+
蔗糖10 g/L+活性炭1 g/L+琼脂粉5 g/L诱导丛生芽,用MS+NAA0.1 mg/L+IBA0.2 mg/L+椰子水40 g/L+蔗糖
20 g/L+活性炭2 g/L+琼脂粉4 g/L培养壮苗、诱导生根效果较好。组培快繁的黄椒草苗顺利通过旱培移栽、
转水等驯化,批量投入生产。
关键词:黄椒草;组织培养;快繁
Tissue Culture of Cryptocoryne Affinis
Huang Mao1, Yang JiaLi2, An Li1, Hu Jingrong3
(1Kunming Aquatic Products Research Institute, Kunming 650021;
2Livestock and Veterinary Bureau of Southwestern refecture, Guizhou Province, Xingyi Guizhou562400;
3Institute of Science and Technology Information of Kunming, Kunming 650021)
Abstract: Different ways of sterilization and medium formula were used for tissue culture and rapid propagation of
Crytocoryne Affinis. The results showed that good effect obtained by using young germ as explant soaking in 75%
ethanol and 0.05% mercuric chloride for 30s and 15mins respectively, and washed with aseptic water for 5 times.
The appropriate medium for bud growth is MS+coconut juice 40 g/L+sucrose 10 g/L+ activated charcoal.1 g/L+agar
powder 5 g/L. Medium with MS + NAA0.1 mg/L + IBA0.2 mg/L + coconut juice 40 g/L + sucrose 20 g/L + activated
charcoal2 g/L+agar powder 4 g/L is good for healthy seedling and roots development. Crytocoryne Affinis seedling by
tissue culture and rapid propagation were transplanted, water growth acclimated and quantity produced smoothly.
Key words: crytocoryne Affinis; tissue culture; papid propagation
园艺园林
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中国农村小康科技 2010年第6期 http://www.caaj.org 地 址:100125北京市朝阳区麦子店街20号楼农业部北办公区中国农学会
来水洗净后,用75%的酒精表面消毒30 s,再以0.05%的
升汞溶液消毒 15 min,最后用无菌水冲洗 5次。将洗净
的胚芽置无菌滤纸上吸干水分,用解剖刀取出嫩芽胚平
放在启动培养基上。
2.2 生长培养
嫩芽胚接种到启动培养基(1)上,暗培养30~40天后,
均可见白色吸器膨大,芽点处冒出白色嫩芽和根;然后将
其转入生长培养基(2),继续生长 15~20天,芽长 2~3 mm
时,即转入光照下继续培养(图1)。
2.3 壮苗和生根培养
将转绿后的植株,切除吸器后转入培养基(3)。约30
天后嫩芽逐渐增高,植株生长旺盛,生根率达 100%,形
成小苗,8周后,待小苗长至3~6 cm,生根数3~5条,根长
1 cm左右时,可进行继代扩繁和炼苗移栽。
2.4 继代扩繁
将壮苗培养长至3~6 cm的小苗去除根和尖后,在超
净工作环境下切为 10~12段,置入新培养基(2)(图 2)。
经过 30~40天培养,转入培养基(3)继续培养,完成继代
扩繁。
2.5 小苗移栽与养护
移栽前2周,在超净工作台上将瓶盖打开,上封 l层
灭过菌的聚乙烯袋袋子,保持撑开状态,光照培养。移栽
时轻轻取出苗,注意不要伤及根部。用水洗去根部附着
的培养基,将根部放入 l︰500稀释的70%甲基托布津药
液中消毒2 h,然后将植株晾干,置于背阴处定植。定植
材料以消毒后的珍珠岩、河沙、肥土体积比 l︰1︰1的混
合基质(图3)。定植初期每天浇灌稀释10倍的营养液
(4),直至根生长稳定。温度为18~25℃,空气湿度为70%
~90%,光照强度7000~10000 lx,14 h/天。随后逐渐降低
湿度至与外界自然湿度相近。2个月后统计移栽成活率
达75%以上。
3 意义与进展
黄椒草分布于马来西亚。数片椭圆或长卵圆形的叶
片从根部长出,叶质稍硬,叶面呈淡绿色偏褐色,背面微
带红褐色,一般植株体高为 10~30 cm,是水草箱栽培的
主要水生观赏植物之一。20世纪末,随着中国人民生活
的不断提高,观赏水生植物的需求越来越大,而对观赏水
生植物的组织培养扩繁技术研究很少。沿海地区虽然已
有了市场开发和种植开发,但仅限于种子繁殖和扦插繁
殖的初级阶段,大量高档观赏植物依赖进口。针对这一
现状,笔者试图通过黄椒草幼胚培养的研究探索黄椒草
的组培快繁技术,不仅可以规模化生产种苗,而且可以提
升观赏水生植物的品质。该研究进展顺利,组织培养和
快繁技术不断成熟。通过组织培养获得的黄椒草苗已经
顺利通过旱培、转水的驯化阶段,批量投入市场,为产业
化生产奠定了基础,具有良好的市场前景。迄今未见该
植物组培和快繁报道。
园艺园林
图1 黄椒草的诱导芽萌发
图2 黄椒草的继代扩繁
图3 黄椒草的旱培移栽
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