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(收稿日期:2012 － 10 － 06)
中图分类号:R994. 4 文献标识码:A 文章编号:1002 － 3127(2013)02 － 0103 － 04 ·论著·
茶藨子叶孔菌大鼠90 d喂养试验研究
卢连华1，姚文环1，谢玮1，颜燕1，郭婕1，杨非1，徐凌川2，张良宏3
(1. 山东省疾病预防控制中心毒理所，山东 济南 250014;2. 山东中医药大学;
3. 舟山惠和堂生物科技有限公司)
【摘要】 目的 通过 90 d 喂养试验观察茶藨子叶孔菌的亚慢性毒性，以进一步开发利用茶藨子叶孔菌提供科学依
据。方法 取断乳 SD 大鼠 100 只，随机分为 5 组，分别为对照组和 4 个茶藨子叶孔菌剂量组(1. 00、2. 00、4. 00 和
8. 00 g / kg·bw) ，每组 20 只，雌雄各半。按 1. 25%、2. 50%、5. 00%和 10. 00% 比例将茶藨子叶孔菌粉末掺入饲料中喂饲
动物，对照组喂饲基础饲料，连续喂养 90 d。试验期间每周称量进食量和体重，计算食物利用率;检测试验中期和末期的
血常规和血生化指标;试验结束时处死动物，称量脏器重量，计算脏器指数，并对主要脏器进行病理组织学观察。结果 试
验周期内各实验组动物总体生长状况良好，体重逐周增长，未见明显中毒体征，动物无死亡。试验中期、末期各血生化和血
常规指标与对照组比较差异均无统计学意义(P ＞ 0. 05)。各实验组动物的主要脏器重和组织病理学未见明显异常。
结论 茶藨子叶孔菌对大鼠各项观察指标未见亚慢性毒性作用，对大鼠亚慢性毒性 NOAEL 为 8. 7 g / kg·bw(实际摄入量)。
【关键词】 茶藨子叶孔菌;亚慢性毒性;大鼠
基金项目:山东省中医药科技发展计划项目(2011-196)
作者简介:卢连华，硕士，副主任技师，研究方向:毒理和药理学。
The subchronic toxicity study of phylloporia ribits in SD rats
LU Lian-hua，YAO Wen-huan，XIE Wei，YAN Yan，GUO Jie，YANG Fei，XU Ling-chuan，ZHANG Liang-hong
(Shandong Center for Disease Control and Prevention，Jinan Shandong 250014，China)
【Abstract】 Objective To investigate the sub-chronic toxicity of phylloporia ribits in SD rats． Methods 100 SD rats weighing 60 ～
81 g were randomly divided into five groups，10 male rats and 10 female rats in each group． Rats were feeded the diet containing 10. 0%，
5. 0%，2. 5%，1. 25% and 0% phylloporia ribits respectively for 90 days． Body weight， food intakes were measured per week． the
haematological and biochemical parameters were measured at the mid-term and final term． At the end of the experiment，the important organ
·301·毒理学杂志 2013 年 4 月第 27 卷第 2 期 J Toxicol April 2013 Vol. 27 No. 2
DOI:10.16421/j.cnki.1002-3127.2013.02.005
tissues were weighted and histopathological examination was performed． Results No adverse effects were observed，including body weight，
food intake，food consumption，hematology，serum biochemistry，as well as histopathology． Conclusion There were no toxic signs and
subchronic NOAEL is 8. 7 g / kg·bw in oral sub-chronic toxicity study for phylloporia ribits in SD rats．
【Key words】 Phylloporia ribits;Sub-chronic toxity;Rat
茶藨子叶孔菌(茶藨子叶状层菌)Phylloporia ribis
(Schumach:Fr．)Ryvarden又名金芝、忍冬蛾子，为寄生于
忍冬科植物忍冬的茎基部的锈革孔菌科褐孔菌属真菌，
可清热解毒、消肿利咽，具有抗炎、抗病毒、抑制肿瘤的作
用。目前，关于该菌的报道国内文献多为化学成分研究，
而国外文献尚未见任何相关报道［1-2］。本课题组在研究
了该菌的急性毒性和遗传毒性的基础上，根据 GB15193-
2003，又进一步对该菌进行亚慢性毒性研究，以期为该菌
的安全性评价和开发利用提供参考数据［3-4］。
1 材料与方法
1. 1 样品 为灰白色粉末。先采集野生菌种，再经过人
工发酵培养、过滤、真空冷冻干燥、粉碎过 80目筛而得。
1. 2 试验动物及饲养环境 SD 大鼠由北京华阜康生
物科技股份有限公司提供，生产许可证号:SCXK(京)
2009-0004;饲养环境为屏障级，实验动物使用许可证
号:SYXK(鲁)2008-0005。实验动物饲料为山东省实
验动物中心康大实验动物标准饲料，许可证号:SCXK
(鲁)2009-0014。
1. 3 饲养与管理
1. 3. 1 大鼠 90 d 喂养试验方法:选用离乳大鼠 100
只，体重 60 ～ 81 g 随机分为 5 组，每组 20 只，雌雄各
半。受试物设立 4 个实验组，最大灌胃体积法实验茶
藨子叶孔菌的 LD50大于 10 g / kg·bw，所以将茶藨子叶
孔菌按照饲料最大掺入量即 10%(质量分数)掺入饲
料中，动物饲料摄入量按 1000 g 动物体重进食 80 g 饲
料计，则最高染毒剂量为 8. 00 g / kg·bw。向下设 3 个染
毒剂量，分别为 4. 00、2. 00 和 1. 00 g / kg·bw，作为高、
中和低剂量组染毒剂量。将受试物按照 10. 0%、
5. 0%、2. 5%和 1. 25%(质量分数)掺入饲料中喂饲实
验动物，对照组给予基础饲料。样品的蛋白质含量约
为 35%，对照组所用基础饲料蛋白质含量约为 20%，
各组都未调整蛋白质含量，各剂量组蛋白质含量分别
为 21. 5%、20. 8%、20. 4%和 20. 2%。单笼喂养，自由
饮食，连续观察 90 d。
1. 3. 2 观察指标:①动物的一般表现、行为、中毒体征
等，试验期间观察 1 次 / d。②每周称量动物体重和 2
次食物摄入量，计算每周食物摄入量，每周及总食物利
用率;计算各剂量组受试物实际摄入量(g / kg·bw)［5］。
③血液学测定:试验中期和末期分别取尾血进行血液
学测定，包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其
分类等，所用仪器为 ABBOTT CD3700 血细胞分析仪。
④血液生化测定:试验中期和末期时，禁食 16 h 后取
尾血进行血生化测定，包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、
尿素氮、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白和白
蛋白等，所用仪器为 HITACHI7180 全自动生化分析
仪。⑤病理检查:大体观察，试验结束时行安死术对所
有动物进行大体解剖，并取肝、脾、肾、睾丸等脏器称重
和计算脏器系数(脏器系数 = 脏器重量 /空腹体重 ×
100%)。组织病理学检查，肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵
巢)等脏器进行组织病理学检查。
1. 4 统计学方法 数据以均数 ± 标准差(珋x ± s)形式
表示，使用 Excel 和 SPSS 软件进行统计分析，检验水
准 α = 0. 05。
2 结果
2. 1 动物的一般表现 试验周期内各实验组动物总
体生长状况良好，未见明显中毒体征，动物无死亡。
2. 2 体重、食物利用率测定结果 由图 1和 2 可见，雄
性动物 8. 00 g / kg·bw 剂量组第5周和第 6 周体重稍低于
对照组(P ＜ 0. 05) ，差别低于对照组体重的 10%，并且之
后体重恢复，不具有生物学意义和毒理学意义［6］。其余
各实验组动物每周体重、进食量、食物利用率和总进食
量、总食物利用率与对照组比较差异均无统计学意义
(P ＞0. 05，表 1)。数值均在本实验室参考值范围内。
2. 3 血液学测定结果 试验中期和试验末期雌、雄性
动物各剂量组各血液学指标与对照组比较差异均无统
计学意义(P ＞ 0. 05) ，且其值均在本实验室参考值范围
内。末期血液学检查结果见表 2。
2. 4 血液生化学测定结果 试验中期和试验末期雌、
雄性动物各剂量组各血生化指标与对照组比较差异均
无统计学意义(P ＞ 0. 05) ，且其值均在本实验室参考值
范围内。末期血液生化结果见表 3。
2. 5 大体及组织学检查结果
2. 5. 1 大体解剖:实验结束时对所有动物进行大体检
查，肝、肾、胃、肠、脾和卵巢 /睾丸组织，均未见明显异常，
·401· 毒理学杂志 2013 年 4 月第 27 卷第 2 期 J Toxicol April 2013 Vol. 27 No. 2
图 1 茶藨子叶孔菌对雌性 SD 大鼠生长曲线的影响
湿重和重量和脏器系数结果见表 4，与对照组比较差
异均无统计学意义(P ＞ 0. 05) (脏器系数 =脏器重量 /
空腹体重 × 100%)。
注:与对照组比较，* P ＜ 0. 05。
图 2 茶藨子叶孔菌对雄性 SD 大鼠生长曲线的影响
表 1 茶藨子叶孔菌 90 d 喂养试验大鼠食物利用率和实际摄取剂量
性别 设计剂量(g / kg·bw) 总增重(g) 总进食量(g) 总食物利用率(%) 实际摄取剂量(g / kg·bw)
雄
－ 369. 8 ± 25. 2 2198. 5 ± 74. 0 16. 84 ± 1. 27 －
1. 00 391. 8 ± 25. 8 2243. 4 ± 89. 1 17. 46 ± 0. 74 1. 08 ± 0. 32
2. 00 376. 9 ± 26. 1 2201. 8 ± 99. 7 17. 12 ± 0. 96 2. 14 ± 0. 61
4. 00 368. 3 ± 23. 8 2193. 2 ± 100. 0 16. 79 ± 0. 80 4. 31 ± 1. 19
8. 00 356. 8 ± 25. 5 2160. 6 ± 97. 3 16. 50 ± 0. 64 8. 73 ± 2. 47
雌
－ 198. 5 ± 17. 9 1561. 6 ± 104. 8 12. 73 ± 1. 04 －
1. 00 209. 2 ± 20. 0 1582. 4 ± 81. 9 13. 22 ± 1. 00 1. 10 ± 0. 23
2. 00 207. 1 ± 16. 0 1551. 5 ± 71. 9 13. 34 ± 0. 75 2. 20 ± 0. 51
4. 00 197. 9 ± 21. 2 1549. 2 ± 83. 4 12. 75 ± 0. 84 4. 43 ± 0. 92
8. 00 196. 4 ± 19. 0 1508. 4 ± 78. 8 13. 00 ± 0. 86 8. 79 ± 1. 93
表 2 茶藨子叶孔菌 90 d 喂养试验末期血液学检查结果(珋x ± s)
性别
剂量
(g / kg·bw)
血红蛋白
(g /L)
红细胞计数
(× 1012 / L)
白细胞计数
(× 109 / L)
中性
(%)
淋巴
(%)
单核
(%)
嗜碱
(%)
嗜酸
(%)
雄
－ 149. 7 ± 15. 6 7. 08 ± 1. 57 14. 6 ± 4. 1 16. 8 ± 4. 4 74. 6 ± 4. 3 6. 40 ± 1. 46 0. 56 ± 0. 46 1. 61 ± 0. 38
1. 00 153. 7 ± 15. 8 7. 77 ± 1. 10 15. 1 ± 3. 6 17. 4 ± 6. 1 73. 3 ± 7. 2 7. 32 ± 3. 40 0. 55 ± 0. 51 1. 50 ± 0. 60
2. 00 152. 8 ± 5. 8 7. 69 ± 0. 23 15. 7 ± 4. 2 18. 2 ± 5. 1 72. 9 ± 3. 4 6. 57 ± 3. 25 0. 59 ± 0. 24 1. 71 ± 0. 47
4. 00 153. 7 ± 12. 1 7. 72 ± 0. 73 14. 8 ± 3. 4 19. 0 ± 2. 6 73. 0 ± 2. 9 5. 77 ± 2. 54 0. 63 ± 0. 36 1. 58 ± 0. 29
8. 00 156. 1 ± 11. 9 7. 92 ± 0. 71 12. 8 ± 3. 1 18. 1 ± 3. 5 73. 1 ± 3. 9 6. 64 ± 2. 65 0. 61 ± 0. 16 1. 54 ± 0. 35
雌
－ 146. 6 ± 7. 2 7. 04 ± 0. 34 12. 9 ± 3. 0 15. 4 ± 4. 5 76. 5 ± 5. 4 6. 08 ± 2. 13 0. 56 ± 0. 32 1. 55 ± 0. 56
1. 00 151. 6 ± 7. 2 7. 25 ± 0. 51 10. 9 ± 4. 0 15. 7 ± 4. 7 75. 9 ± 4. 5 6. 28 ± 2. 12 0. 62 ± 0. 39 1. 52 ± 0. 60
2. 00 152. 2 ± 7. 4 7. 44 ± 0. 72 10. 5 ± 2. 9 16. 9 ± 5. 1 75. 1 ± 5. 1 5. 79 ± 1. 72 0. 61 ± 0. 42 1. 56 ± 0. 45
4. 00 152. 0 ± 6. 2 7. 42 ± 0. 39 12. 0 ± 4. 6 17. 6 ± 5. 6 73. 4 ± 7. 6 6. 83 ± 3. 02 0. 23 ± 0. 36 1. 66 ± 0. 66
8. 00 149. 4 ± 2. 6 7. 22 ± 0. 30 10. 9 ± 4. 2 16. 1 ± 5. 8 75. 1 ± 6. 0 6. 51 ± 1. 13 0. 61 ± 0. 42 1. 63 ± 0. 70
表 3 茶藨子叶孔菌 90 d 喂养试验末期血液生化结果(珋x ± s)
性别
剂量
(g / kg·bw)
谷丙转氨酶
(U /L)
谷草转氨酶
(U /L)
尿素氮
(mmol / L)
肌酐
(umol / L)
总胆固醇
(mmol / L)
甘油三酯
(mmol / L)
血糖
(mmol / L)
总蛋白
(g /L)
白蛋白
(g /L)
雄
－ 88. 2 ± 13. 9 173. 8 ± 27. 3 5. 54 ± 0. 75 44. 4 ± 4. 8 1. 03 ± 0. 18 0. 63 ± 0. 15 7. 09 ± 1. 14 64. 1 ± 2. 7 30. 6 ± 1. 0
1. 00 82. 9 ± 12. 0 175. 3 ± 29. 5 5. 98 ± 0. 52 45. 2 ± 4. 9 1. 10 ± 0. 16 0. 69 ± 0. 18 6. 72 ± 0. 90 64. 1 ± 3. 0 30. 2 ± 1. 0
2. 00 81. 2 ± 11. 5 180. 1 ± 29. 8 6. 16 ± 0. 63 46. 4 ± 4. 5 1. 01 ± 0. 12 0. 61 ± 0. 18 6. 38 ± 0. 77 64. 1 ± 2. 6 30. 8 ± 1. 2
4. 00 86. 8 ± 12. 5 188. 0 ± 27. 6 5. 00 ± 0. 80 42. 2 ± 2. 5 1. 05 ± 0. 19 0. 57 ± 0. 20 6. 98 ± 0. 96 63. 0 ± 2. 7 29. 9 ± 1. 0
8. 00 81. 6 ± 12. 9 174. 0 ± 27. 1 5. 76 ± 0. 75 42. 3 ± 2. 9 0. 99 ± 0. 17 0. 52 ± 0. 12 6. 20 ± 0. 89 62. 7 ± 2. 9 29. 7 ± 1. 1
雌
－ 71. 4 ± 5. 1 154. 6 ± 31. 2 4. 88 ± 0. 54 47. 5 ± 2. 9 1. 29 ± 0. 26 0. 57 ± 0. 12 6. 48 ± 0. 75 64. 6 ± 2. 2 30. 8 ± 1. 2
1. 00 68. 4 ± 9. 1 176. 3 ± 26. 2 5. 30 ± 0. 64 49. 2 ± 5. 0 1. 27 ± 0. 24 0. 49 ± 0. 05 5. 58 ± 0. 57 65. 6 ± 1. 8 31. 1 ± 1. 0
2. 00 64. 7 ± 3. 0 147. 3 ± 15. 2 5. 32 ± 0. 62 50. 3 ± 4. 2 1. 18 ± 0. 26 0. 53 ± 0. 11 5. 80 ± 0. 69 65. 3 ± 2. 4 31. 0 ± 1. 0
4. 00 75. 1 ± 11. 3 167. 0 ± 25. 5 5. 22 ± 0. 68 47. 2 ± 4. 3 1. 27 ± 0. 22 0. 49 ± 0. 10 5. 75 ± 0. 86 64. 6 ± 2. 8 30. 4 ± 1. 0
8. 00 76. 1 ± 8. 9 170. 8 ± 22. 3 5. 07 ± 0. 87 46. 3 ± 3. 7 1. 13 ± 0. 13 0. 47 ± 0. 10 6. 01 ± 0. 92 63. 9 ± 2. 3 30. 2 ± 1. 1
·501·毒理学杂志 2013 年 4 月第 27 卷第 2 期 J Toxicol April 2013 Vol. 27 No. 2
表 4 茶藨子叶孔菌 90 d 喂养试验主要脏器重量和脏器系数结果(珋x ± s)
性别
剂量
(g / kg·bw)
空腹体重
(%)
肝脏
(g)
脾脏
(g)
肾脏
(g)
睾丸
(g)
肝 /体
(%)
脾 /体
(%)
肾 /体
(%)
睾 /体
(%)
雄
－ 421. 9 ± 24. 4 12. 54 ± 1. 41 0. 75 ± 0. 15 2. 98 ± 0. 29 3. 15 ± 0. 19 2. 98 ± 0. 33 0. 18 ± 0. 04 0. 71 ± 0. 07 0. 75 ± 0. 07
1. 00 442. 8 ± 25. 7 12. 86 ± 1. 43 0. 84 ± 0. 16 2. 82 ± 0. 29 3. 33 ± 0. 18 2. 90 ± 0. 29 0. 19 ± 0. 04 0. 64 ± 0. 07 0. 74 ± 0. 07
2. 00 429. 2 ± 19. 8 12. 38 ± 1. 14 0. 78 ± 0. 11 2. 82 ± 0. 26 3. 17 ± 0. 14 2. 90 ± 0. 36 0. 18 ± 0. 02 0. 66 ± 0. 07 0. 74 ± 0. 06
4. 00 421. 0 ± 23. 0 12. 10 ± 1. 22 0. 77 ± 0. 11 2. 82 ± 0. 28 3. 21 ± 0. 15 2. 88 ± 0. 28 0. 18 ± 0. 02 0. 67 ± 0. 07 0. 76 ± 0. 05
8. 00 409. 7 ± 24. 2 11. 55 ± 1. 03 0. 73 ± 0. 11 2. 79 ± 0. 25 3. 07 ± 0. 16 2. 82 ± 0. 22 0. 18 ± 0. 03 0. 68 ± 0. 06 0. 75 ± 0. 07
雌
－ 251. 8 ± 14. 3 7. 43 ± 0. 56 0. 54 ± 0. 08 1. 88 ± 0. 18 － 2. 96 ± 0. 25 0. 21 ± 0. 03 0. 75 ± 0. 09 －
1. 00 262. 8 ± 15. 2 7. 27 ± 0. 57 0. 52 ± 0. 10 1. 74 ± 0. 14 － 2. 77 ± 0. 23 0. 20 ± 0. 03 0. 67 ± 0. 08 －
2. 00 261. 6 ± 11. 8 7. 17 ± 0. 38 0. 51 ± 0. 07 1. 79 ± 0. 11 － 2. 75 ± 0. 21 0. 20 ± 0. 03 0. 68 ± 0. 05 －
4. 00 251. 6 ± 15. 8 7. 24 ± 0. 66 0. 48 ± 0. 05 1. 79 ± 0. 19 － 2. 88 ± 0. 23 0. 19 ± 0. 02 0. 71 ± 0. 06 －
8. 00 249. 8 ± 15. 8 7. 13 ± 0. 56 0. 49 ± 0. 09 1. 70 ± 0. 22 － 2. 86 ± 0. 21 0. 20 ± 0. 04 0. 68 ± 0. 09 －
2. 5. 2 组织病理学检查结果:发现对照组雄 1 /10 例
和最高剂量组雄 1 /10 例标本内可见点状的肝细胞坏
死灶;对照组雌 1 /10 例和最高剂量组雌 1 /10、雌 1 /10
例标本内可见点状的炎细胞浸润灶。对照组雄 1 /10
例、雌 1 /10 和最高剂量组雌 1 /10 例标本内可见个别
肾小管变性 . 对照组雄 1 /10 例和最高剂量组雄 1 /10
例肾间质内可见点状的炎细胞。但这些病理改变程度
较轻且无组间差别，考虑与动物质量有关，与受物物处
理无关。未对其他剂量组进行组织病理学检查。
3 讨论
茶藨子叶孔菌在民间药用历史悠久，常用于治疗
咽炎、喉炎、扁桃体炎等口腔炎症。化学性成分研究表
明，茶藨子叶孔菌强酸性部位脂溶性成分可分离出大
量的高级脂肪酸可能为本药材的活性成分，其中棕榈
酸含量最高(24. 49%) ，亚油酸次之(22. 02%) ，此外
该菌还含有(22E，24S)-啤酒甾醇、麦角甾醇、麦角甾
醇 25，82 过氧化物、22 羟基二十四酸等化合物［1-2］。
急性毒性和遗传毒性研究表明，茶藨子叶孔菌属于实
际无毒级，未见其对原核细胞、体细胞、生殖细胞具有
遗传毒性作用［3］。在此基础上进行了 90 d 喂养试验，
进一步研究茶藨子叶孔菌对大鼠的亚慢性毒性。试验
期内，雄性动物 8. 00 g / kg·bw 剂量组第5周和第 6 周
体重与对照组比较差异存在统计学意义(P ＜ 0. 05) ，
此后该组体重与对照组体重逐渐接近，与受试物摄取
无相关性。各试验组动物生长发育良好，体重增长、食
物利用率、脏器重量和脏器系数、血液学和血生化等各
项指标均未见异常且在本实验室正常值范围内，未发
现有意义的病理改变，初步认为茶藨子叶孔菌对大鼠
各项观察指标未见亚慢性毒性作用，对大鼠经口亚慢
性毒性 NOAEL 为8. 7 g / kg·bw(实际摄入量) ，并未发现
亚慢性毒性靶器官。
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(收稿日期:2013 － 01 － 05)
·601· 毒理学杂志 2013 年 4 月第 27 卷第 2 期 J Toxicol April 2013 Vol. 27 No. 2