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大岩桐的组织培养及快速繁殖



全 文 :大岩桐的组织培养及快速繁殖
李爱华 熊春玲
(湖北省林业科学研究院 武汉 4 3 0 0 7 9)
摘 要:用大岩桐的茎尖 、叶片 、腋芽作外植体进行组织培养 ,获得其增殖 、生根培养的最佳培养
基配方 ,建立大岩桐组织培养及快速繁殖模式 ,可在短期内提供大量优质健康种苗。
关键词:大岩桐;组织培养;培养基
TissueCulture and Rapid Propagation of Sinningia Speciosa
Li Aihua Xiong Chunling
(Hubei Academy of Forestry Wuhan 430079))
Abstract:Optimum culture medium formulation on multiplication and rooted cultivation was obtained through tissue
culture car ried on by use of stem tip , leaves and auxiliary bud of Sinningia Speciosa as explants.Pattern of tissue cul-
ture and rapid propagation for Sinningia Speciosa has established and a large quantity of high quality healthy seed-
ling can be provided in shor t period.
Key words:Sinningia Speciosa;tissue cultur e;medium
  大岩桐(Sinningia speciosa)又名落雪泥 ,源产南
美巴西 ,属苦苣苔科苦苣苔属多年生肉质草本 ,为著
名的观赏花卉 。该植物为地下块茎 ,叶片椭圆形 ,密
被绒毛 ,花顶生或腋生 ,花大色艳 ,有红 、紫 、蓝单瓣 ,
还有红 、紫镶白边等复色重瓣品种。正常花期从春
末一直持续到初秋 ,观赏价值极高。
大岩桐单瓣品种花柱与花药不等高 ,不能自花
授粉 ,需靠人工授粉结实 ,而种子繁殖的后代不能保
持原有的优良特性[ 1] 。重瓣品种因雌雄蕊退化丧失
结实能力 ,因此该植物靠播种繁殖是不易得到生长
整齐 、健壮优良种苗的。此文即是关于应用组织培
养技术进行大岩桐的快速繁殖 ,在较短时间内获得
大量的大岩桐优质种苗。
1 材料与方法
1.1  材料
取盆栽大岩桐的茎尖 、叶片 、腋芽作外植体培养。
1 .2  方法
1 .2 .1  消毒
将所取的外植体用自来水洗净 ,在超净工作台
上用 7 5 %乙醇处理 3 0 s ,再用 1 ‰升汞消毒 3 ~ 5
min ,最后用无菌水清洗 4 ~ 5 次 ,洗去消毒残液。
1 .2 .2  接种
将消毒好的外植体接种在已配置好的各种培
养基上进行培养。
1 .2 .3  培养基配方
以 MS 为基本培养基[ 2 ] 。
诱导分化培养基 MS+BA0.5 ~ 2.0 mg L +
NAA0.1 ~ 0.2 mg L (1)
壮苗培养基   MS (2)
生根培养基   1 2 MS+糖 1 5 g L (3)
以上所有培养基中均加入 7 ‰琼脂和 3 %白糖
(生根培养基减半),pH 值为 5.5 ~ 6.0 。
5
收稿日期:2002-12-13
2 0 0 3 .2 湖 北 林 业 科 技
1 .2 .4  培养条件
培养室温度冬季为 1 8 ~ 2 0 ℃,夏季为 2 2 ~ 2 4
℃,春秋季为常温。光强为 1 2 0 0 ~ 1 5 0 0 lx ,光照
时间 1 1 ~ 1 2 h d。
2 结果与分析
2 .1  增殖培养
2 .1 .1  诱导分化芽
按 1 .2 所述方法接种的大岩桐外植体 , 8 ~ 1 0
d后均有不同的变化。其中:茎尖开始出现一些小
突起或小芽;腋芽外植体又分化了新的小芽;叶片
外植体有的开始肿大或边缘翻卷 。1 2 ~ 1 4 d有的
外植体形成了一团团的愈伤组织 。
2 .1 .2  愈伤组织形成
大岩桐外植体在培养基中激素作用下 ,逐渐形
成了大量的芽或嫩绿色的细胞团即愈伤组织 ,开始
了明显的增殖过程。不同的培养基配方对外植体
增殖具有不同的效果(见下表)。
不同的培养基配方对外植体增殖的影响
培养基 接种数 瓶 增殖芽数 个 增殖数 瓶 芽增殖率 % 愈伤组织增殖率 %
BA0.5 +NAA0.1 5 2 3 2 3 4 6 0 4 6 0
BA0.5 +NAA0.2 1 7 4 9 3 6 2 9 0 2 1 0
BA1.0 +NAA0.1 1 0 3 1 2 6 3 1 0 2 6 0
BA1.0 +NAA0.2 7 1 9 1 7 2 7 0 2 4 0
BA2.0 +NAA0.1 9 2 1 1 2 2 3 0 1 3 0
BA2.0 +NAA0.2 1 7 5 4 2 8 3 2 0 1 6 0
  注:接种是在每瓶培养基中放一块约 1 cm 大小外植体 ,上表中数据是在接种外植体 1 2 d统计的芽增殖数 ,愈伤组织增殖
瓶数是在接种 5 0 d 统计的 ,其间用同种培养基转接了 1 次 ,转接时将有芽的愈伤组织切成 1 cm 大小, 每瓶培养基中放一块。
  由表中数据可见 ,BA0.5 mg L +NAA0.1 mg
L 的培养基对茎尖外植体无论是在诱导分化芽或
是在愈伤组织大量形成期 ,增殖效果均优于其它培
养基配方 ,而 BA 2.0 mg L +NAA0.2 mg L 培养
基仅仅是在诱导芽分化 ,对茎尖外植体效果明显 ,
但在诱导分化愈伤组织 ,效果则不如其它培养基 。
据对不同外植体增殖情况调查显示 ,这种现象在叶
片外植体上则不明显 ,在叶片作外植体的培养中 ,
BA的浓度为 2.0 mg L 时 ,诱导分化率最高 。
2 .2  壮苗生根
丛生芽和愈伤组织经多次继代培养后 ,形成无
根小植株 ,按常规过程需先转入培养基(2)经壮苗 ,
再转入培养基(3)中进行生根培养 。经对大岩桐瓶
苗多次的继代培养发现 ,该种植物完全可以将壮
苗 、生根培养结合起来 ,即将无根瓶苗直接转入培
养基(3)中 ,经约 1 5 d的培养 ,均能发出长 1 ~ 3 cm
不等的 3 ~ 8 条根 。如果在瓶苗继代培养中 ,BA含
量一直未减 ,由于植物体内对激素的积累 ,无根苗
转入生根基中也很难生根 。
对大岩桐瓶苗的生根培养也作了不同激素及
浓度的比较试验。在培养基(3)中分别加入 0.1
mg L 、0.5 mg LNAA或 IBA ,经培养观察 ,生根效
果及生根时间均不及培养基(3),故认为 1 2 MS+
1 5 g L 糖培养基为大岩桐瓶苗生根培养的最佳培
养基配方 。
3 讨论
通过组织培养技术完全能解决大岩桐自花不
育 、重瓣品种不结种 ,难获得大量健康种苗的问题 。
以 MS为基本培养基 , BA0.5 mg L+NAA0.1
mg L 的激素配比 5∶1 时为大岩桐外植体增殖阶段
的最佳培养基配方。 1 2 MS+1 5 g L 糖为最佳生
根培养基配方 。瓶苗可不经过壮苗期直接进行生
根培养。
在制作培养基时 ,以自来水代替蒸馏水 ,以白
糖代替蔗糖效果一样 ,由此可降低成本 。
在大岩桐瓶苗的组培过程中未发现明显的休
眠现象[ 3 ] 。
参考文献
[ 1 ]  王鸿鹤 , 葛欣 ,徐启江等.秋水仙碱诱导重瓣大岩桐多
倍体的研究.热带亚热带植物学报 , 1 9 9 9 , 7(3):2 3 7 ~
2 4 2 .
[ 2]  谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术.北京:中国
林业出版社 , 1 9 9 1 .
[ 3 ]  祝清俊 , 周钟信 ,张宗江等.莱阳农学院学报 , 1 9 9 5 , 1 2
(1):4 7 ~ 4 9 .
6 大岩桐的组织培养及快速繁殖 总第 1 2 4 期